检索结果-内蒙古大学图书馆

医学综述 2015年第17期21卷 3145-3147页

作者：周大伟张晨师小娟刘轶宁王晓波解放军第二一〇医院干三科辽宁大连116011 大连市儿童医院肾内科辽宁大连116011 解放军第二一〇医院临床药理基地辽宁大连116011

间质纤维化是肾脏疾病进展的主要因素之一。一些动物模型可作为研究肾纤维化的对象。单侧输尿管梗阻(UUO)的出现成为一个研究肾纤维化机制的重要模型,对肾纤维化进展的分子和细胞水平机制提供有价值的观点。然而,无论是对肾脏功能的测定... 详细信息

间质纤维化是肾脏疾病进展的主要因素之一。一些动物模型可作为研究肾纤维化的对象。单侧输尿管梗阻(UUO)的出现成为一个研究肾纤维化机制的重要模型,对肾纤维化进展的分子和细胞水平机制提供有价值的观点。然而,无论是对肾脏功能的测定,还是对干细胞在肾脏的影响和药物的治疗评价均存在不足。UUO再通(RUUO)模型是建立在UUO模型的基础之上,弥补了上述的不足。

关键词：单侧输尿管梗阻单侧输尿管梗阻再通肾脏纤维化

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输尿管梗阻再通模型进展

引用

国际医药卫生导报 2020年第19期26卷 2834-2837页

作者：陈东江赖彩永苏泽轩(审校) 暨南大学第一附属医院泌尿外科广州510000

梗阻性肾病是临床上常见疾病,病因主要是输尿管梗阻,肾脏终末期病理主要表现为肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)病变,其发病机制仍未完全阐明。单侧输尿管梗阻再通(reversible unilateral ureteral obstruction,RUUO)模... 详细信息

梗阻性肾病是临床上常见疾病,病因主要是输尿管梗阻,肾脏终末期病理主要表现为肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)病变,其发病机制仍未完全阐明。单侧输尿管梗阻再通(reversible unilateral ureteral obstruction,RUUO)模型是研究梗阻性肾病致纤维化的常用模型,制作RUUO模型的方式各异,尚无统一标准模式。本文将对当今常用的RUUO模型造模方法和其优缺点进行综合阐述,从而能更深入地了解梗阻性肾病动物模型的研究方法,为梗阻性肾病动物模型研究提供重要的实验参考。

关键词：梗阻性肾病肾间质纤维化单侧输尿管梗阻再通

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应用改良的RUUO模型探索Treg与梗阻性肾病的关系

应用改良的RUUO模型探索Treg与梗阻性肾病的关系

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作者：罗甲南京大学

学位级别：硕士

目的:用小鼠作为模型动物,探索改良现有的单侧输尿管梗阻再通(RUUO)模型的方法;在此基础上,研究氯沙坦对解除梗阻后的肾脏的纤维化的影响,以及调节性T细胞在这一过程中的变化。方法:将18只C57BL/6小鼠随机分为RUUO+氯沙坦组(n=6)、RUUO... 详细信息

目的:用小鼠作为模型动物,探索改良现有的单侧输尿管梗阻再通(RUUO)模型的方法;在此基础上,研究氯沙坦对解除梗阻后的肾脏的纤维化的影响,以及调节性T细胞在这一过程中的变化。方法:将18只C57BL/6小鼠随机分为RUUO+氯沙坦组(n=6)、RUUO组(n=6)和假手术组(n=6)。在左侧输尿管梗阻(UUO)7天后采用套入+置管法实施再通手术(RUUO)。再通术后RUUO+氯沙坦组水饲法给予氯沙坦。UUO第5天、RUUO第4、7天行外周血流式细胞术检测调节性T细胞(Treg);RUUO术后7天,取术侧肾组织行HE、Masson染色,同时免疫组化检测肾脏α-SMA表达,用Western blot检测肾脏Foxp3蛋白的表达。结果:RUUO+氯沙坦组和RUUO组肾脏均无明显积水,体积较对侧缩小,色泽较浅,肾盂无明显积水,提示梗阻解除,尿路再通成功。HE染色结果示RUUO组肾小管上皮紊乱,刷状缘脱落,管腔扩张,管型形成;假手术组肾小管结构清晰,上皮完整;RUUO+氯沙坦组病理改变较手术组为轻。RUUO组肾小管损伤评分(3.9±0.74)较RUUO+氯沙坦组(2.4±0.48)为重(p<0.05),假手术组肾小管损伤评分(0.5±0.45)较两者轻(p<0.05)。Masson染色结果示假手术组未见明显蓝染区域,RUUO组可见明显蓝染区域,主要分布在肾小管间质中,而RUUO+氯沙坦组较RUUO组蓝染面积减少。RUUO+氯沙坦组、RUUO组和假手术组胶原面积所占比例分别是5.33±0.64%、9.60± 1.49%和1.17±0.41%,各组之间存在统计学区别(p<0.05)。肾脏α-SMA免疫组化染色示假手术组α-SMA主要表达于小血管管壁,亦散见于肾小球周围和肾小管间质中,表达量较少。RUUO组α-SMA表达量明显增多,主要见于肾小管间质中。RUUO+氯沙坦组的表达量较RUUO组减少。RUUO+氯沙坦组α-SMA免疫组化的平均积分光密度为0.0138±0.0011,较RUUO组(0.0203±0.0012)小(P<0.05),假手术组α-SMA的平均积分光密度为0.0038±0.0003,与其余两组相比有统计学差异(P<0.05)。单侧输尿管结扎术(UUO)后第5天、再通手术(RUUO)后第4天以及第7天外周血Foxp3+Treg/CD4+T cell比例示RUUO+氯沙坦组、RUUO组和假手术组之间无统计学区别。Western blot结果示肾脏Foxp3蛋白在RUUO组表达量降低,其积分光密度与内参积分光密度之比为 0.0664±0.0080,分别低于 RUUO+氯沙坦组的 0.5987±0.2543(P<0.05)和假手术组的0.9910±0.1484(P<0.05);RUUO+氯沙坦组Foxp3蛋白的表达量低于假手术组(P<0.05)。结论:套入+置管法可以建立起较为可靠的小鼠单侧输尿管梗阻再通模型;单侧输尿管梗阻再通后肾脏仍然处于损伤和纤维化状态;调节性T细胞的标志物Foxp3在RUUO肾脏中的表达量下调;氯沙坦可以提高RUUO肾脏Foxp3蛋白的表达量并且改善单侧输尿管梗阻再通后肾脏的纤维化指标。

关键词：置管单侧输尿管梗阻再通调节性T细胞肾脏纤维化

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EGFR核心岩藻糖基化对肾间质纤维化的作用

EGFR核心岩藻糖基化对肾间质纤维化的作用

引用

作者：皮婷婷大连医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨EGFR核心岩藻糖基化在肾间质纤维化(renal interstitial fibr osis RIF)中的作用方法:选取2015年在大连医科大学附属第一医院肾内科住院并接受肾脏活检的原发性肾小球疾病患者24例,排除各种继发性肾小球疾病,根据RIF评分分为4... 详细信息

目的:探讨EGFR核心岩藻糖基化在肾间质纤维化(renal interstitial fibr osis RIF)中的作用方法:选取2015年在大连医科大学附属第一医院肾内科住院并接受肾脏活检的原发性肾小球疾病患者24例,排除各种继发性肾小球疾病,根据RIF评分分为4组,分别为无病变组、轻度组、中度组、重度组。对照组患者共6例,取自泌尿外科因外伤、肿瘤等原因行手术治疗所留取的肾组织标本,为正常组。对5组患者肾组织标本行免疫组化技术检测α-1,6核心岩藻糖基转移酶(α1,6-fucosyltra nsferase 8,FUT-8)的表达变化,分析RIF和FUT-8表达的相关性。为验证临床患者RIF和FUT8表达的相关性,探讨其作用机制,通过给予Wis tar大鼠尾静脉注射FUT8ShRNA重组腺病毒抑制FUT8基因的表达,建立RUUO模型。50只SD大鼠随机分为10组。(1)N组,正常组;(2)SHAM组,假手术组;(3)SHAM+GFP组,假手术加空载体组;(4)UUO3d组,UUO术后3d处死;(5)RU UO7d组,UUO术后3d解除梗阻,梗阻解除后7d处死;(6)RUUO7d+Fut8ShRNA组,UUO术后3d解除梗阻,经大鼠尾静脉注入适量重组腺病毒,梗阻解除后7d处死;(7)RUUO14d组;(8)RUUO14d+Fut8ShRNA组;(9)RUUO28d组;(10)RUUO28d+F ut8ShRNA。评价指标:1)肾组织行PAS染色,观察肾小管及间质的变化;2)免疫组化观察α-SMA、E-cadherin的表达变化;3)免疫荧光检测FUT8的表达变化;4)RT-PCR检测FUT8、α-SMA、E-cadherin的mRNA表达变化;5)western blot检测EGFR糖链及EGFR/ERK/JNK各通路蛋白的表达变化。结果:5组患者在一般情况年龄、性别、甘油三酯、胆固醇、血钙、血磷、血尿素氮差异无统计学意义(P>0.05);血肌酐水平重度组较其它组增高(P<0.05),24h尿蛋白水平无病变组、轻度组、中度组、重度组均高于正常组(P<0.05)。Sp earman相关性分析显示FUT8的表达与肾间质纤维化呈正相关(r=0.696,P<0.05);免疫组化显示FUT8在UUO3d组表达升高,FUT8ShRNA(+)组较FUT8ShRNA(-)组FUT8表达降低,RT-PCR及western blot分别从mRNA及蛋白质水平验证了FUT8ShRNA(+)组较FUT8ShRNA(-)组FUT8表达降低。PAS染色结果显示UUO3d组肾小管扩张,出现空泡样变,肾间质炎细胞浸润,随着梗阻的解除,肾小管逐渐恢复至接近正常,炎细胞浸润减轻,其中FUT8ShRNA(+)组较FUT8ShRNA(-)组减轻。免疫组化结果显示UUO3d组α-SMA表达升高,随着梗阻的解除,逐渐恢复至接近正常水平,其中FUT8ShRNA(+)组较FUT8ShRNA(-)组表达降低,RT-PCR及wes tern blot与此结果一致;UUO3d组E-cadherin表达降低,随着梗阻的解除,逐渐恢复,其中FUT8ShRNA(+)组较FUT8ShRNA(-)组表达升高,RT-PCR及weste rn blot与此结果一致;Western Blot检测EGFR通路总蛋白EGFR、ERK、JNK在U UO3d组表达增高,梗阻缓解7d、14d、28d表达逐渐降低,其中FUT8ShRNA(+)组与FUT8ShRNA(-)无差异;p-EGFR、p-ERK、p-JNK在UUO3d组表达增高,梗阻缓解7d、14d、28d表达逐渐降低,其中FUT8ShRNA(+)组较FUT8ShRNA(-)表达降低。结论:Fut8的表达随着RIF的加重而增加,抑制FUT8表达可以抑制EGFR/E RK/JNK通路蛋白磷酸化所致的RIF。

关键词： α-1,6,核心岩藻糖基转移酶表皮生长因子受体单侧输尿管梗阻再通肾脏纤维化

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