检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物工程杂志 2012年第6期32卷 84-92页

作者：刘雅莉刘芳韩舜愈刘箐孙志博夏俊芳朱小清甘肃农业大学食品科学与工程学院兰州730070 上海理工大学医疗器械与食品学院上海200093 甘肃出入境检验检疫局国际旅行卫生保健中心兰州730020 兰州大学基础医学院兰州730000 甘肃出入境检验检疫局兰州730020

采用传统生物学方法、显色培养基方法、自制三抗体夹心ELISA试剂盒(TAS-ELISA)、基因组直接PCR(DNA Direct-PCR)、菌裂解直接PCR(Bacterium Direct-PCR)、免疫捕捉PCR(IC-PCR)、生物PCR(Bio-PCR)、SYBR Green染料实时荧光PCR(SYBR Green Real time-PCR)、探针实时荧光PCR(TaqMan Real time-PCR)检测纯菌液及模拟带菌食品中的单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)。结果表明:传统生物学培养方法出现假阳性;TAS-ELISA、DNADirect-PCR、Bacterium Direct-PCR、IC-PCR最低检测限分别为106、102、105、104CFU/ml;显色培养基、SYBR Green Real time-PCR灵敏度达102CFU/ml;Bio-PCR、TaqMan Real time-PCR检测灵敏度最高,均为101CFU/ml。显色培养基、TAS-ELISA操作简单,适合大量样品的初检;IC-PCR具有灵敏、特异、快速、经济的优点,特别适合大体积样品中微量病原的检测;Bio-PCR、TaqMan Real time-PCR灵敏度高、特异性好,适合阳性样品的复检以及科研使用。

关键词：单核细胞增生性李斯特菌三抗体夹心ELISA 免疫捕捉PCR 生物PCR 实时荧光定量PCR

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免疫捕捉PCR和直接PCR技术检测单核细胞增生性李斯特菌比较研究

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食品科学 2012年第20期33卷 243-248页

作者：刘雅莉刘箐刘芳韩舜愈王婧夏俊芳汪小波樊学军田绿波兰州大学第二医院甘肃兰州730030 上海理工大学医疗器械与食品学院上海200093 甘肃出入境检验检疫局国际旅行卫生保健中心甘肃兰州730020 甘肃农业大学食品科学与工程学院甘肃兰州730070 昌吉州疾病控制预防中心新疆昌吉831100 四川出入境检验检疫局国际旅行卫生保健中心四川成都610041

将免疫学技术与分子生物学技术相结合,建立了免疫捕捉PCR(IC-PCR),并与传统的直接PCR(Direct-PCR)进行比较。结果显示:纯菌液中IC-PCR检测灵敏度(104CFU/mL)是Direct-PCR灵敏度(105CFU/mL)的10倍;模拟带菌实验结果表明:IC-PCR最低可检测... 详细信息

将免疫学技术与分子生物学技术相结合,建立了免疫捕捉PCR(IC-PCR),并与传统的直接PCR(Direct-PCR)进行比较。结果显示:纯菌液中IC-PCR检测灵敏度(104CFU/mL)是Direct-PCR灵敏度(105CFU/mL)的10倍;模拟带菌实验结果表明:IC-PCR最低可检测到5×101个细菌/PCR反应体系(即104CFU/mL),检测限比Direct-PCR(5×103个细菌/PCR反应体系即106CFU/mL)高100倍;特异性实验、干扰实验结果表明IC-PCR可特异检测单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monaytogenes,LM),而和18株其他常见食源性致病菌无交叉反应。IC-PCR具有快速、经济、灵敏、特异等优点,是一种适合食品安全监管部门、食品企业的LM快速检测方法。

关键词：单核细胞增生性李斯特菌免疫捕捉PCR 直接PCR

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LIPI-4EII对单核细胞增生性李斯特菌关键毒力因子转录调控的影响

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中国农业大学学报 2023年第8期28卷 191-202页

作者：史唯地马勋刘彩霞寇丽君吕双飞任慧杰曾东东王静孔翠莲高盛杰钱瑞宣石河子大学动物科技学院新疆石河子832000

为探究单核细胞增生性李斯特菌(LM)毒力岛4(LIPI-4)中膜透性酶(EII)对LM毒力基因表达的调控作用,本研究分别构建EII缺失株(LM928ΔEII)、强启动子回补株(CLM928ΔEII-P_(help))和天然启动子回补株(CLM928ΔEII-P_(native)),测定各菌株... 详细信息

为探究单核细胞增生性李斯特菌(LM)毒力岛4(LIPI-4)中膜透性酶(EII)对LM毒力基因表达的调控作用,本研究分别构建EII缺失株(LM928ΔEII)、强启动子回补株(CLM928ΔEII-P_(help))和天然启动子回补株(CLM928ΔEII-P_(native)),测定各菌株在体外培养中的生长曲线和在永生化人脑微血管内皮细胞(HCMEC/D3)内的增殖情况;RT-qPCR检测体外培养和HCMEC/D3细胞内各菌株9个关键毒力基因的转录水平。结果显示:(1)EII基因缺失株LM928ΔEII构建成功,重组回补质粒pIMK2-EII和pIMK2-EII-P_(native)及回补株CLM928ΔEII-P_(help)和CLM928ΔEII-P_(native)构建成功。(2)在体外培养下,EII对LM的生长曲线没有影响。但在侵染HCMEC/D3后,LM928ΔEII在8和12 h的胞内细菌量显著高于LM928(P<0.05),2和4 h的胞内细菌量极显著高于LM928(P<0.01),CLM928ΔEII-P_(native)在2、4和6 h恢复至野生株水平(P>0.05),而CLM928ΔEII-P_(help)在2、4、6、8、10和12 h均极显著低于野生株(P<0.01)。(3)体外培养条件下,相比于野生株,LM928ΔEII中66.7%(6/9)的毒力基因转录水平极显著上调(P<0.01);CLM928ΔEII-P_(help)中66.7%(6/9)的基因转录水平上升1~4倍,CLM928ΔEII-P_(native)中88.9%(8/9)的基因转录水平倍数变化在1倍以内。在HCMEC/D3细胞内,相比于野生株,LM928ΔEII中66.7%(6/9)的毒力基因转录水平极显著上调(P<0.01);CLM928ΔEII-P_(help)中33.3%(3/9)的基因转录水平上调1~3倍,CLM928ΔEII-P_(native)中基因转录水平倍数变化在1倍以内。综上,LIPI-4 EII对LM关键毒力因子的转录具有负调控作用。本研究为系统探究LIPI-4参与LM致病性机制奠定基础。

关键词：单核细胞增生性李斯特菌 LIPI-4 膜透性酶(EII) 缺失株毒力基因

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多重环介导等温扩增快速检测沙门菌、副溶血弧菌和单核细胞增生性李斯特菌方法的建立

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军事医学 2016年第9期40卷 767-772页

作者：刘宁伟邹大阳董德荣杨展黄思妺贺晓明敖大刘威黄留玉军事医学科学院疾病预防控制所北京100071

目的建立能够同时检测沙门菌、副溶血弧菌(VPH)和单核细胞增生性李斯特菌(LM)的多重环介导等温扩增(mL AMP)方法。方法分别针对沙门菌bcfD基因、VPH的tlh基因和LM的iap基因设计mL AMP引物,以LAMP进行单重LAMP检测。实时浊度监测扩增结果... 详细信息

目的建立能够同时检测沙门菌、副溶血弧菌(VPH)和单核细胞增生性李斯特菌(LM)的多重环介导等温扩增(mL AMP)方法。方法分别针对沙门菌bcfD基因、VPH的tlh基因和LM的iap基因设计mL AMP引物,以LAMP进行单重LAMP检测。实时浊度监测扩增结果,优化引物浓度配比,进而建立此3种食源性致病菌的mL AMP检测体系,以PCR检测灵敏性作为比较,进行特异性和灵敏性分析。结果实时浊度监测表明,该mL AMP体系具有良好特异性,可在45 min内一次性检测以上3种致病菌,且无非特异扩增产生。这3种菌的检测最低限分别为300 fg/μl、4.2 pg/μl和4.5 pg/μl,与PCR检测灵敏度相当。结论该多重LAMP可同时检测食品中的沙门菌、VPH和LM,可作为大规模样品的初筛或传统方法的辅助方法,用于快速判定样品中是否含有这3种致病菌。

关键词：多重LAMP 沙门菌副溶血弧菌单核细胞增生性李斯特菌

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基因分型技术在单核细胞增生性李斯特菌监测溯源上的应用

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浙江农林大学学报 2018年第4期35卷 771-777页

作者：蒋兵谢建华汪子淳梁望旺杨泽林蔺露张婷娟彭远义聂奎方仁东西南大学动物科技学院重庆400715 重庆市动物疫病预防控制中心重庆市猪主要传染病防治工程技术研究中心农业部动物产品质量安全生物性危害因子风险评估实验室重庆401120

单核细胞增生性李斯特菌Listeria monocytogenes是一种重要的食源性人畜共患病原菌,能引起人和多种动物流产、脑膜炎、肠胃炎、败血症、死胎等病症。与传统基于表型的分型方法相比,基因分型方法具有简单快速、分辨率高、敏感性强、重复... 详细信息

单核细胞增生性李斯特菌Listeria monocytogenes是一种重要的食源性人畜共患病原菌,能引起人和多种动物流产、脑膜炎、肠胃炎、败血症、死胎等病症。与传统基于表型的分型方法相比,基因分型方法具有简单快速、分辨率高、敏感性强、重复性好等特点,在李斯特菌病病原菌的监测和溯源中具有重要的应用价值。对单核细胞增生性李斯特菌的3类基因分型方法:酶切技术,DNA测序技术和聚合酶链式反应(PCR)扩增技术进行了概述,从分型成本、样本通量、分辨力、灵敏度、重复性、快捷性和普及性等方面比较了3类基因分型方法的主要特点,重点评述了这些方法在单核细胞增生性李斯特菌暴发监测和溯源上的应用案例,为研究不同基因分型方法在单核细胞增生性李斯特菌暴发诊断、分型检测及感染溯源等方面的应用提供参考。

关键词：动物细胞学单核细胞增生性李斯特菌基因分型监测溯源综述

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单核细胞增生性李斯特菌脑膜炎一例

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中华实验和临床感染病杂志（电子版） 2014年第1期8卷 87-88页

作者：杨申赵林秦丽晨泰安市中心医院神经内科泰安市271000

李斯特菌脑膜炎是由单核细胞增生性李斯特菌（Listeria monocytogenes）感染引起的细菌性脑膜炎，通常发生于免疫功能受损的患者，多通过食物传播，近几年发病率逐渐升高[1]。李斯特菌脑膜炎与其他细菌性脑膜炎比较在临床表现、治疗和... 详细信息

李斯特菌脑膜炎是由单核细胞增生性李斯特菌（Listeria monocytogenes）感染引起的细菌性脑膜炎，通常发生于免疫功能受损的患者，多通过食物传播，近几年发病率逐渐升高[1]。李斯特菌脑膜炎与其他细菌性脑膜炎比较在临床表现、治疗和预后方面有其独特的地方，现报道本院应用青霉素成功救治的1例单核细胞增生性李斯特菌脑膜炎病例。

关键词：单核细胞增生性李斯特菌李斯特菌脑膜炎细菌性脑膜炎免疫功能受损食物传播年发病率临床表现青霉素

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哈尔滨市鲜肉中单核细胞增生性李斯特菌的分离鉴定及耐药性分析

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中国预防兽医学报 2009年第12期31卷 929-932页

作者：尹录杜艳芬赫明雷司微刘慧芳王春来彭玮王聃李继昌邵美丽刘思国东北农业大学中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室延边大学

为了解哈尔滨市单核细胞增生性李斯特菌(Lm)的污染状况及耐药状况。在哈尔滨市市场随机采集158份鲜肉样品,采用显色培养基分离,API试剂条和PCR鉴定等方法对样品中的Lm进行分离鉴定,并通过Kirby-Barer法测定分离菌株对24种抗生素的耐药... 详细信息

为了解哈尔滨市单核细胞增生性李斯特菌(Lm)的污染状况及耐药状况。在哈尔滨市市场随机采集158份鲜肉样品,采用显色培养基分离,API试剂条和PCR鉴定等方法对样品中的Lm进行分离鉴定,并通过Kirby-Barer法测定分离菌株对24种抗生素的耐药性。结果从鲜肉中共分离到Lm23株,检出率为14.56%,其中鲜猪肉检出率最高,达20.00%(14/70);23株分离菌株中耐药菌株为22株,耐药率高达95.65%。这表明哈尔滨市鲜肉中存在一定程度的Lm污染,并且分离菌株存在较严重的耐药现象。应加强控制动物饲料亚治疗抗生素的使用并严格遵守休药期,防止耐药菌株产生进而控制食源性疾病的发生。

关键词：哈尔滨鲜肉单核细胞增生性李斯特菌分离鉴定耐药性

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妊娠期单核细胞增生性李斯特菌感染12例临床分析

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实用妇产科杂志 2022年第10期38卷 794-798页

作者：张淑慧杨鸿滋侯晓梅李美燕毛竹青汪珊珊王福玲青岛大学附属医院妇科山东青岛266000 青岛大学附属医院产科山东青岛266000

目的:分析妊娠期单核细胞增生性李斯特菌(LM)感染的临床表现、感染机制、诊断及鉴别诊断、耐药性、治疗和对妊娠结局的影响。方法:回顾性分析青岛大学附属医院2016年1月至2021年10月12例妊娠期LM感染患者病例资料,包括患者主诉、症状、... 详细信息

目的:分析妊娠期单核细胞增生性李斯特菌(LM)感染的临床表现、感染机制、诊断及鉴别诊断、耐药性、治疗和对妊娠结局的影响。方法:回顾性分析青岛大学附属医院2016年1月至2021年10月12例妊娠期LM感染患者病例资料,包括患者主诉、症状、体征、实验室检查、B超、诊疗措施及妊娠结局等。结果:12例孕妇发病年龄22~38岁,2例孕妇为双胎妊娠;12例孕妇发病孕周为27~40周,其中大部分入院孕周为28周以上,只有1例于孕27周入院;7例孕妇确定入院前有不洁饮食史,余病例饮食情况不详。临床表现为发热(8例)、胎动异常(2例)、下腹痛(5例)、阴道流血(1例)、阴道流液(1例)、恶心呕吐(1例);实验室检查提示白细胞计数或中性粒细胞比率增高(6例)、C反应蛋白(CRP)升高(11例)及降钙素原(PCT)增高(12例);天门冬氨酸氨基转移酶或丙氨酸氨基转移酶高于正常值(4例),白蛋白低于35 g/L(11例),白蛋白低于30 g/L(4例);7例孕妇病理结果提示绒毛膜羊膜炎;6例孕妇羊水Ⅲ度污染,6例孕妇羊水清;12例孕妇血培养均为阳性;9例孕妇行剖宫产终止妊娠,2例孕妇入院抗感染治疗好转出院待足月经阴道分娩;1例孕妇因产后出血行子宫动脉栓塞术;4例孕妇术后转入ICU,4例患者入院时予头孢类抗生素抗感染,疗效欠佳,后调整抗生素,所有孕妇均好转出院;12例LM感染孕妇的14例胎儿中,1例娩出时即死亡,2例抢救无效死亡;5例出生后转入新生儿科,好转出院;6例未转新生儿科,其中2例至足月经阴道分娩,出院时均良好;2例新生儿血培养LM阳性;行颅脑MRI检查的新生儿未见异常征象。结论:妊娠期LM感染是临床上少见的感染性疾病,一旦感染能造成严重的不良妊娠结局,病原学检测为诊断“金标准”,对有疑似并有未确诊前,经验性应用抗生素应考虑覆盖LM,从而改善围生儿结局。

关键词：单核细胞增生性李斯特菌妊娠期不良预后致病机制

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单核细胞增生性李斯特菌检测研究进展

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动物医学进展 2005年第4期26卷 44-46页

作者：梁锐萍胡慧强黄素珍山西农业大学动物科技学院山西太谷030801 北京华都肉鸡公司北京102211

单核细胞增生性李斯特菌是近年来又重新抬头出现的病原微生物,已在世界许多港口被检测到,并造成了一定的经济损失被认为是影响畜禽和人类健康的重要病原微生物之一。文章就单核细胞增生性李斯特菌检测方法的研究进行了系统的综述,为控... 详细信息

单核细胞增生性李斯特菌是近年来又重新抬头出现的病原微生物,已在世界许多港口被检测到,并造成了一定的经济损失被认为是影响畜禽和人类健康的重要病原微生物之一。文章就单核细胞增生性李斯特菌检测方法的研究进行了系统的综述,为控制该病原微生物的传播和蔓延提供参考。

关键词：单核细胞增生性李斯特菌感染检测

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用PCR技术快速检测食品中的单核细胞增生性李斯特菌

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食品科学 2001年第5期22卷 52-55页

作者：寇运同马洪明刘晨光青岛出入境检验检疫局 266002 青岛海洋大学 266002

建立了食品中单核细胞增生性李斯特菌快速、敏感、特异的聚合酶链反应PCR检测方法。选择的引物具有良好的单增李氏菌种的特异性。对人工污染在冷冻食品中单增李氏菌的检测低限是4－8CFU/10g，对其增菌液的检测低限是7.2－11×103/m... 详细信息

建立了食品中单核细胞增生性李斯特菌快速、敏感、特异的聚合酶链反应PCR检测方法。选择的引物具有良好的单增李氏菌种的特异性。对人工污染在冷冻食品中单增李氏菌的检测低限是4－8CFU/10g，对其增菌液的检测低限是7.2－11×103/ml，每PCR反应体系的检测低限为86－132CFU。对400份自然污染样品的检测结果显示，PCR方法的检测结果同常规培养法的结果完全相符。

关键词：食品单核细胞增生性李斯特菌 PCR 快速检测

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