检索结果-内蒙古大学图书馆

中华病理学杂志 2010年第10期39卷 705-706页

作者：任兴昌刘卫艳徐如君陈丽荣倪型灏孙文勇薛德彬陈洪勋周大为杭州市中医院病理科 310007 杭州市疾病预防控制中心杭州市第一人民医院病理科浙江大学附属第二医院病理科浙江省肿瘤医院病理科

免疫组织化学在病理工作中应用十分普遍,然而其结果影响因素较多,合理设置适当的对照是质量控制的关键.原有对照方法较繁琐且不经济,因而部分单位在实际工作中不设立阳性对照,对很多缺乏有自身阳性对照的病变,使得免疫组织化学结果的判... 详细信息

免疫组织化学在病理工作中应用十分普遍,然而其结果影响因素较多,合理设置适当的对照是质量控制的关键.原有对照方法较繁琐且不经济,因而部分单位在实际工作中不设立阳性对照,对很多缺乏有自身阳性对照的病变,使得免疫组织化学结果的判断缺乏可靠性.国外有人试用过蛋白质多肽作为阳性对照,但因其没有特定的细胞结构也就难以发挥作用.国内有人介绍因阑尾含有多种组织和细胞,可作为多种抗原的对照;或根据需要收集各种的组织切成细丝包埋在一起,然后连续切片备用;或类似于多组织切片用芯片仪将不同组织排列在一起进行连续切片备用[1-2].但这些介绍的方法操作繁琐、备用片难以运送保存、工作量增加较大、对照物体积大、试剂耗费要增加一倍.由于存在以上多种缺陷,使得这些方法在实际工作中无法推广应用.为解决以上问题,我们设计了一种利用已知阳性、阴性标本单细胞组合的悬液,用斑点式或点涂式方法建立一一对照的方法.

关键词：免疫组织化学单细胞悬液质量控制组合式阳性对照连续切片蛋白质多肽病理工作

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剪碎法及匀浆法制备兔肌肉VX2肿瘤单细胞悬液的方法比较

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第41期11卷 8315-8317页

作者：高斌贺克武李嘉嘉合肥市第一人民医院影像中心安徽省合肥市230061 安徽医科大学第一附属医院中心实验室安徽省合肥市230032

目的:比较剪碎法和匀浆法制备兔肌肉VX2肿瘤单细胞悬液的效果。方法:实验于2006-10-25/2007-04-01在安徽医科大学第一附属医院中心实验室进行。切取兔肌肉VX2肿瘤组织块,分别采用剪碎法和匀浆法制备兔肌肉VX2肿瘤单细胞悬液。经苏木精-... 详细信息

目的:比较剪碎法和匀浆法制备兔肌肉VX2肿瘤单细胞悬液的效果。方法:实验于2006-10-25/2007-04-01在安徽医科大学第一附属医院中心实验室进行。切取兔肌肉VX2肿瘤组织块,分别采用剪碎法和匀浆法制备兔肌肉VX2肿瘤单细胞悬液。经苏木精-伊红染色,光学显微镜观察细胞形态学差异,并行AnnexinV/PI双染法,流式细胞仪分析细胞凋亡率和细胞坏死率的差异。结果:①细胞形态:匀浆法细胞产率高,细胞形态完整,细胞分布均匀,细胞碎片及细胞团较少;而剪碎法所得细胞悬液在光镜视野中有较多的杂质和细胞团,完整的细胞相对较少。②流式细胞仪分析结果:匀浆法制备的单细胞悬液左下象限正常细胞分布较集中,右下象限凋亡细胞较少,左上象限坏死细胞及细胞碎片较少;所得细胞凋亡率和细胞坏死率值明显低于剪碎法[细胞凋亡率:(8.90±1.24)%,(15.75±1.53)%;细胞坏死率(35.22±1.56)%,(40.16±1.68)%,P均<0.01]。结论:用匀浆法制备兔肌肉VX2肿瘤单细胞悬液优于剪碎法。

关键词：单细胞悬液流式细胞术 Annexin V/PI双染法 VX2肿瘤

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机械法与机械-酶消化法制备大鼠膈肌组织单细胞悬液的比较

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中国组织工程研究 2020年第8期24卷 1213-1217页

作者：张远圆张杉杉常旭赵朋伟余孝先吴学东大理大学第一附属医院暨临床医学研究中心小儿外科云南省大理市671000 大理大学基础医学院云南省大理市671000

背景:流式细胞术作为目前先进的细胞分析技术,其研究基础是单细胞悬液,但目前尚无有关膈肌组织单细胞悬液制备方法的相关报道。目的:探索应用机械法与机械-酶消化法分别制备大鼠膈肌单细胞悬液的可行性并比较2种方法获得单细胞的数量和... 详细信息

背景:流式细胞术作为目前先进的细胞分析技术,其研究基础是单细胞悬液,但目前尚无有关膈肌组织单细胞悬液制备方法的相关报道。目的:探索应用机械法与机械-酶消化法分别制备大鼠膈肌单细胞悬液的可行性并比较2种方法获得单细胞的数量和活性。方法:以SD大鼠的新鲜膈肌组织为标本,在机械法的基础上,选用胰蛋白酶、胶原酶Ⅰ、胶原酶Ⅱ、胶原酶Ⅳ及其不同组合进行消化制备膈肌单细胞悬液,观察细胞形态并经锥虫蓝染色后测定细胞活性,对活细胞、失活细胞和细胞团块进行计数并计算出细胞存活率和单细胞悬液浓度,结果进行统计学比较分析。结果与结论:①机械-酶消化法所制得的单细胞悬液较机械研磨法细胞分散度好、形态完整、边界清楚、杂质及细胞碎片较少、背景较干净;②单纯机械研磨法制备的单细胞悬液活细胞数较低,失活细胞数较高,细胞存活率最低,团块较多;③在机械法的基础上,加入胰蛋白酶、胶原酶Ⅰ和胶原酶Ⅳ3种等体积混合酶所得单细胞悬液的活细胞数及悬液浓度最高,每0.1 g膈肌组织可获得(1.0-2.0)×106个细胞,细胞存活率较高,与单纯机械法获得单细胞悬液比较,在活细胞、失活细胞、细胞团块、细胞存活率及悬液浓度方面差异均有显著性意义(P<0.05);其次是加入胰蛋白酶和胶原酶Ⅳ这2种等体积混合酶消化法,所得单细胞悬液浓度、细胞成活率及细胞团块方面也均较为理想;④结果表明,机械法和机械-酶消化法均能成功制备出大鼠膈肌单细胞悬液,机械-酶消化法优于单纯机械法,其中加入胰蛋白酶、胶原酶Ⅰ和胶原酶Ⅳ3种等体积混合酶的机械-酶消化法所得单细胞悬液效果最佳,是较优选的膈肌单细胞悬液制作方法。

关键词：单细胞悬液膈肌组织机械法机械-酶消化法流式细胞术大鼠

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对70%冷乙醇固定单细胞悬液保存时间的观察

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第三军医大学学报 1999年第10期21卷 762-762,767页

作者：陈兆珍第三军医大学基础医学部中心实验室重庆400038

在用流式细胞仪对细胞进行周期分析时,为了防止细胞的自溶和破坏,通常要对样品进行固定.而使用最多也是最方便的固定液便是70%冷乙醇.但人们一般认为用此固定液固定的样品保存时间不宜过长,一般为1～2周[1].我们对70%冷乙醇固定的样品... 详细信息

在用流式细胞仪对细胞进行周期分析时,为了防止细胞的自溶和破坏,通常要对样品进行固定.而使用最多也是最方便的固定液便是70%冷乙醇.但人们一般认为用此固定液固定的样品保存时间不宜过长,一般为1～2周[1].我们对70%冷乙醇固定的样品进行了为期5个月的观察测定,固定5个月后和固定2 d的样品相比较,CV值及周期分布都无明显的变化,说明70%冷乙醇固定的样品至少可以保存5个月以上.

关键词：细胞诊断冷乙醇单细胞悬液保存时间

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小鼠肠道固有层单细胞悬液制备的酶消化法比较研究

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中国比较医学杂志 2024年第4期34卷 92-99页

作者：曾勤梁莹王新慧闫蕾王湘鹏杨嘉仪余仁欢中国中医科学院西苑医院肾病科北京100091

目的探究小鼠小肠固有层单细胞悬液制备的最佳酶消化法。方法采集10根长度一致的小鼠小肠,随机分为两组,每组分别采用以胶原酶A或胶原酶VIII为主的酶消化法制备固有层单细胞悬液,比较这两种酶消化法对单细胞悬液细胞获得率、细胞活性和... 详细信息

目的探究小鼠小肠固有层单细胞悬液制备的最佳酶消化法。方法采集10根长度一致的小鼠小肠,随机分为两组,每组分别采用以胶原酶A或胶原酶VIII为主的酶消化法制备固有层单细胞悬液,比较这两种酶消化法对单细胞悬液细胞获得率、细胞活性和细胞表面抗原的影响,然后对较优酶消化法制备的单细胞悬液进行流式检测。结果与以胶原酶VIII为主的酶消化法相比,以胶原酶A为主的酶消化法可以获得更高的细胞产量(9.48±1.10)×10^(9) vs(4.18±1.02)×10^(9)、活细胞比例(86.36±3.32)%vs(61.62±10.93)%以及活性CD45^(+)细胞比例(57.19±5.11)%vs(26.01±11.44)%、活性CD3^(+)细胞比例(8.73±2.89)%vs(4.52±2.49)%、活性CD4^(+)细胞比例(6.19±2.09)%vs(3.22±1.91)%和活性B220^(+)细胞比例(15.06±4.27)%vs(5.07±2.20)%,为后续流式检测提供了高质量细胞。结论以胶原酶A为主的酶消化法更适合于小鼠小肠固有层单细胞悬液的制备。

关键词：肠道固有层单细胞悬液酶消化法流式细胞术

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实体组织单细胞悬液制备方法

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临床与实验病理学杂志 2007年第4期23卷 490-491页

作者：任兴昌方黎陈洪勋杭州市中医院病理科杭州310007

在实际工作中由于机器操作和手工操作均不能保证每张玻片的条件一致,因此到目前为止还没有有效可靠的对照方法,故其标准化问题日益受到大家的重视.我们以新鲜组织和固定组织为标本,探讨实体组织单细胞悬液制作的具体过程,为实现一一对... 详细信息

在实际工作中由于机器操作和手工操作均不能保证每张玻片的条件一致,因此到目前为止还没有有效可靠的对照方法,故其标准化问题日益受到大家的重视.我们以新鲜组织和固定组织为标本,探讨实体组织单细胞悬液制作的具体过程,为实现一一对照式原位玻片检测技术寻求一套全面、可靠的技术方法.

关键词：实体组织单细胞悬液 HE染色

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大鼠肺组织单细胞悬液制备方法的研究

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临床与实验病理学杂志 2012年第9期28卷 1060-1061页

作者：高丽孙德俊杨敬平李姝楠贾宇辰内蒙古自治区人民医院呼吸内科呼和浩特010017 内蒙古医科大学第三附属医院呼吸与危重症医学科包头014000 呼和浩特市第一医院呼和浩特010010 内蒙古医科大学分子生物学研究中心呼和浩特010010

流式细胞术（flow cytometry, FCM）中细胞的分析检测均以单个细胞为基础,而各种单细胞悬液的制备是其中的关键环节,若细胞数量不足、细胞粘连成块、样品中杂质碎片过多均可造成分析失败[1-5].本实验采用胰酶消化法和研磨法制备新鲜大... 详细信息

流式细胞术（flow cytometry, FCM）中细胞的分析检测均以单个细胞为基础,而各种单细胞悬液的制备是其中的关键环节,若细胞数量不足、细胞粘连成块、样品中杂质碎片过多均可造成分析失败[1-5].本实验采用胰酶消化法和研磨法制备新鲜大鼠肺实体组织单细胞悬液,通过细胞活力测定、FCM检测分析比较两种方法优劣.

关键词：单细胞悬液大鼠肺组织流式细胞术

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胃黏膜单细胞悬液的制备及其周期蛋白的表达

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中华胃肠外科杂志 2008年第3期11卷 253-255页

作者：曹金鹏胡丽娟李小兰肖徽陶德定胡俊波龚建平华中科技大学同济医学院附属同济医院胃肠外科中心肿瘤研究所武汉430030

目的寻找一种方法能够有效去除胃黏液，把胃黏膜制备成单细胞悬液以进行胃黏膜流式细胞术等单细胞的蛋白分析研究，为即将在胃组织开展细胞组学做好准备。方法应用酶反应去除胃黏液和分离黏膜层后．再使用机械法制备成单细胞悬液，并应... 详细信息

目的寻找一种方法能够有效去除胃黏液，把胃黏膜制备成单细胞悬液以进行胃黏膜流式细胞术等单细胞的蛋白分析研究，为即将在胃组织开展细胞组学做好准备。方法应用酶反应去除胃黏液和分离黏膜层后．再使用机械法制备成单细胞悬液，并应用细胞免疫组织化学流式细胞术和激光共聚焦显微镜技术初步检测胃黏膜细胞主要周期蛋白cyclin D、E、A、B1的表达。结果0．1％的胃蛋白酶和1．2-2．4U／L的中性蛋白酶分别能够较好地去除胃黏液，获得黏膜层，从而制备成胃黏膜单细胞悬液，从流式中首次系统地显示出其细胞主要周期蛋白的时相性表达规律：cyclin D3、B1明显表达，cyclin D2较弱，cyclin D1、A、E表达不明显，并得到激光扫描共聚焦显微镜的验证。结论利用胃蛋白酶，中性蛋白酶作用后能够去除胃黏液．较容易获得胃黏膜单细胞悬液；并提示体内的细胞周期蛋白的表达规律与体外培养的细胞系的表达规律不同。

关键词：胃黏液单细胞悬液细胞周期蛋白类流式细胞术细胞组学

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骨肉瘤石蜡包埋组织标本FCM单细胞悬液样品的制备

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上海第二医科大学学报 1995年第2期15卷 141-143页

作者：蒋雷生蔡体栋上海第二医科大学附属新华医院骨科上海第二医科大学附属瑞金医院骨科

采用１０例骨肉瘤石蜡包埋组织标本，以Ｈｅｄｌｅｙ报道的方法为基础，进行单细胞悬液样品的制备和流式细胞术检测。每例组织块经切片、脱蜡、水化、漂洗等过程，并用０．５％ｐｅｐｓｉｎ（ｐＨ１．５）作为组织片的消化液，放入３７... 详细信息

采用１０例骨肉瘤石蜡包埋组织标本，以Ｈｅｄｌｅｙ报道的方法为基础，进行单细胞悬液样品的制备和流式细胞术检测。每例组织块经切片、脱蜡、水化、漂洗等过程，并用０．５％ｐｅｐｓｉｎ（ｐＨ１．５）作为组织片的消化液，放入３７℃恒温磁力搅拌装置中进行孵育消化６０ｍｉｎ，经高速和低速短时离心去除未消化完的组织块和细胞碎片，加７０％冷乙醇固定。上机前用碘化丙啶作一步插入ＤＮＡ荧光染色。结果显示消化良好，镜检细胞间解聚，分散成一个个单细胞，且细胞碎片少，细胞数多。１０例骨肉瘤上机测定全部成功，ＤＮＡ组方图峰形锐利，ＣＶ值小。

关键词：骨肉瘤石蜡包埋单细胞悬液流式细胞术

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肝病患者的肝组织单细胞悬液与外周血中淋巴细胞亚群的分析比较

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检验医学 2005年第5期20卷 448-451页

作者：韩亚萍刘源李军陈念董莉蔡洁黄祖瑚南京医科大学第一附属医院感染病科江苏南京210029

目的探讨肝脏组织单细胞悬液的制备方法,了解慢性肝病患者的肝组织和外周血的淋巴细胞亚群差异。方法分别选择慢性乙型肝炎(CHB)14例、自身免疫性肝炎(AIH)4例和原发性肝细胞癌(HCC)3例,在超声引导下经皮作肝脏穿刺活检,用单细胞制备仪... 详细信息

目的探讨肝脏组织单细胞悬液的制备方法,了解慢性肝病患者的肝组织和外周血的淋巴细胞亚群差异。方法分别选择慢性乙型肝炎(CHB)14例、自身免疫性肝炎(AIH)4例和原发性肝细胞癌(HCC)3例,在超声引导下经皮作肝脏穿刺活检,用单细胞制备仪或物理研磨方法将肝组织制备成单细胞悬液,肝组织中淋巴细胞经4种特异性荧光抗体标记,在流式细胞仪(FCM)上作四色荧光分析,并与外周血测定结果比较。结果单细胞制备仪和物理研磨方法制备的肝组织单细胞悬液,细胞成活率分别为92.4%和91.5%;检测肝组织单细胞悬液中淋巴细胞亚群,正常对照组和慢性肝病各组间差异均有显著性(P<0.05),AIH组和CHB组间差异有显著性(P<0.05)。而外周血中淋巴细胞亚群检测,HCC组和CHB组间差异有显著性(P<0.05)。肝组织和外周血相应项目比较差异均有显著性(P<0.05)。结论用2种方法制备单细胞悬液能满足FCM检测的特殊需要;肝脏组织中淋巴细胞与外周血的淋巴细胞亚群比例差异有显著性。

关键词：淋巴细胞亚群单细胞悬液肝脏穿刺

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