检索结果-内蒙古大学图书馆

单链构象多态性(SSCP)及其在昆虫学中的应用

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遗传 2002年第4期24卷 483-485页

作者：王少丽乔传令盛承发中国科学院动物研究所农业虫鼠害综合治理研究国家重点实验室北京100080

单链构象多态性（SSCP）能够快速、灵敏地检测基因的点突变,其应用范围日益扩大。本文重点综述了其在昆虫学研究中的作用。

关键词：单链构象多态性 SSCP 昆虫学应用分子分类点突变

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单链构象多态性-毛细管电泳分析中样品纯化研究

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分析科学学报 2004年第4期20卷 361-363页

作者：石先哲许国旺赵春霞杨青中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心辽宁大连116011

聚合酶链反应(PCR)样品中的Cl^-、引物等小分子对单链构象多态性-毛细管电泳分析有重要影响。本文用毛细管电泳-间接紫外法测定了PCR样品中的Cl^-浓度,并对乙醇沉淀法和试剂盒纯化法用于PCR样品的纯化效果进行比较,在此基础上研究了Cl^... 详细信息

聚合酶链反应(PCR)样品中的Cl^-、引物等小分子对单链构象多态性-毛细管电泳分析有重要影响。本文用毛细管电泳-间接紫外法测定了PCR样品中的Cl^-浓度,并对乙醇沉淀法和试剂盒纯化法用于PCR样品的纯化效果进行比较,在此基础上研究了Cl^-浓度、引物及其二聚体在SSCP-CE分析中的影响。结果表明,它们主要影响DNA进样量而对分离效率影响不大。

关键词：单链构象多态性毛细管电泳 PCR样品纯化

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单链构象多态性技术在胰岛素受体基因突变检测中的应用

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临床检验杂志 1998年第5期16卷 259-261页

作者：牛文彦刘德敏石建党王家驰汤新之天津医科大学

建立聚合酶链反应－单链构象多态性和银染技术筛查胰岛素受体基因突变方法。选择８９例非胰岛素依赖性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者，扩增胰岛素受体基因的外显子１７－２１，ＳＳＣＰ电泳，银染色后，对突变样品进行序列分析。结果发现８... 详细信息

建立聚合酶链反应－单链构象多态性和银染技术筛查胰岛素受体基因突变方法。选择８９例非胰岛素依赖性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者，扩增胰岛素受体基因的外显子１７－２１，ＳＳＣＰ电泳，银染色后，对突变样品进行序列分析。结果发现８例外显子１７和１例外显子２０的异常电泳条带，外显子１７的突变经顺序分析为ｃｏｄｏｎ１０５８（ＣＡＣ→ＣＡＴ）的纯合和杂合无意义突变。

关键词：单链构象多态性糖尿病胰岛素受体突变 PCR

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毛细管电泳-单链构象多态性分析检测K-ras基因突变

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分析化学 2005年第2期33卷 177-180页

作者：石先哲李建华赵春霞吕申杨青许国旺中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心大连116011 大连116027 大连医科大学附属第二医院病理教研室

K ras癌基因的点突变在结直肠癌的发生起重要作用。以异丙醇为聚合反应链转移剂,水相法合成特性粘度为0.70×10-3m3/kg,分子量为6.5×104的低粘度短链线性聚丙烯酰胺。以6%线性聚丙烯酰胺为筛分介质,分离温度27℃,分离电... 详细信息

K ras癌基因的点突变在结直肠癌的发生起重要作用。以异丙醇为聚合反应链转移剂,水相法合成特性粘度为0.70×10-3m3/kg,分子量为6.5×104的低粘度短链线性聚丙烯酰胺。以6%线性聚丙烯酰胺为筛分介质,分离温度27℃,分离电压9kV为电泳条件,建立了检测K ras基因突变的毛细管电泳单链构象多态性方法。利用该方法检测36例结直肠癌患者肿瘤组织,发现12例K ras基因突变。结果表明:该方法具有快速、高灵敏的优点,为大规模进行结直肠肿瘤的早期诊断提供了可靠方法。

关键词：短链线性聚丙烯酰胺毛细管电泳单链构象多态性 K-ras基因

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26S rDNA单链构象多态性分析在临床酵母菌菌种鉴定中的应用

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微生物学报 2009年第8期49卷 1011-1017页

作者：李娟白逢彦中国疾病控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室北京102206 中国科学院微生物研究所真菌地衣系统学重点实验室北京100101

【目的】探讨酵母菌临床分离株26S rDNA D1/D2区序列种内相似性和种间差异性的快速检测方法,为临床酵母菌菌种鉴定方法的改进奠定基础。调查北京地区临床酵母菌的种群多样性,为国内酵母菌感染的流行病学研究提供新的基础数据。【方法】... 详细信息

【目的】探讨酵母菌临床分离株26S rDNA D1/D2区序列种内相似性和种间差异性的快速检测方法,为临床酵母菌菌种鉴定方法的改进奠定基础。调查北京地区临床酵母菌的种群多样性,为国内酵母菌感染的流行病学研究提供新的基础数据。【方法】用5种常见临床酵母菌种的模式和权威菌株作为标准参考菌株,从北京四家综合性医院收集临床酵母菌260余株,PCR扩增其26SrDNAD1/D2区,对扩增产物进行单链构象多态性(Single-Strand Conformation Polymorphism,SSCP)分析和序列测定分析。【结果】常见病原酵母菌26SrDNAD1/D2区的SSCP图谱具有明显的种间差异性和种内相似性,可以通过该方法对菌株进行初步的菌种鉴定。D1/D2-SSCP和序列分析相结合,对260余株临床酵母菌进行了菌种鉴定,共鉴定有10个属20个种,优势属为念珠菌属(Candida),优势种及其所占比例分别是:***(57.7%),***(10.0%),***(9.2%),***(6.7%)和***(5.8%),并发现过去从未或很少报道致病的酵母菌种,愈来愈多地出现在临床分离菌株中。【结论】26S rDNA D1/D2区的SSCP图谱分析为临床酵母菌株的快速鉴定提供了新的方法;北京地区酵母菌临床分离株呈种群多样性分布,***虽然仍占优势,但其它念珠菌种的比例已达42%。

关键词：病原酵母菌菌种鉴定单链构象多态性 26SrDNAD1/D2

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利用单链构象多态性检测牛白细胞黏附缺陷症方法的建立

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遗传 2007年第12期29卷 1471-1474页

作者：李艳华张胜利韩广文薛建华赵鹏北京奶牛中心北京100085

牛白细胞黏附缺陷症(BLAD)是由常染色体上CD18基因单碱基突变(A→G)引起的隐性遗传疾病,隐性基因纯合时导致白细胞表面的β2整合素表达明显减少或缺乏而引起临床发病,患病牛的主要特征是机体免疫力降低、易患病从而影响其生产性能的表现... 详细信息

牛白细胞黏附缺陷症(BLAD)是由常染色体上CD18基因单碱基突变(A→G)引起的隐性遗传疾病,隐性基因纯合时导致白细胞表面的β2整合素表达明显减少或缺乏而引起临床发病,患病牛的主要特征是机体免疫力降低、易患病从而影响其生产性能的表现,严重影响了奶牛场的经济效益。该工作利用自行设计的特异性PCR引物,通过对PCR、PCR-SSCP条件的筛选和优化,并结合DNA序列测定,建立了PCR-SSCP检测BLAD有害基因的新方法,该方法简便快捷、准确率高,使用样品宽泛,适合大样本筛选,为奶牛BLAD有害基因的分型和筛选提供了新的方法和思路,为我国奶牛的分子选育提供了可靠的理论依据。

关键词：奶牛牛白细胞黏附缺陷症单链构象多态性

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聚合酶链反应-单链构象多态性结合银染技术检测低密度脂蛋白受体基因点突变

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中华检验医学杂志 2003年第7期26卷 442-443页

作者：曹守春王绿娅蔺洁潘晓冬杜兰平秦彦文刘舒南华大学生化与分子生物学教研室北京市心肺血管疾病研究所-首都医科大学附属安贞医院动脉粥样硬化研究室 100029

家族性高胆固醇血症(Familial hypercholesterolemia, FH)是一种常染色体显性遗传病，是导致动脉粥样硬化(Atherosclerosis, As)和早发冠心病的重要危险因素，其发病机理主要为低密度脂蛋白受体(Low density lipoprotein receptor, LDL... 详细信息

家族性高胆固醇血症(Familial hypercholesterolemia, FH)是一种常染色体显性遗传病，是导致动脉粥样硬化(Atherosclerosis, As)和早发冠心病的重要危险因素，其发病机理主要为低密度脂蛋白受体(Low density lipoprotein receptor, LDL-R)基因突变引起LDL-R功能异常。本研究应用聚合酶链反应-单链构象多态性（PCR-SSCP）结合银染技术对一例临床诊断为FH的先证者的LDL-R基因进行研究，以探讨其分子病理机制。

关键词：家族性高胆固醇血症动脉粥样硬化冠心病低密度脂蛋白受体基因点突变聚合酶链反应单链构象多态性银染技术

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应用单链构象多态性和异源双链分析研究拉米夫定耐药变异

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中华检验医学杂志 2004年第8期27卷 490-492页

作者：黄燕萍王宇明兰林范燚赵文利第三军医大学西南医院感染病研究所重庆400038 第三军医大学西南医院儿科重庆400038

目的应用单链构象多态性/异源双链分析技术研究慢性乙型肝炎患者拉米夫定治疗前后乙肝病毒准种组成的改变。方法聚合酶链反应扩增6例患者治疗前后共12份血清标本中目的片段并逐一分析。结果拉米夫定治疗前患者体内乙肝病毒聚合酶基... 详细信息

目的应用单链构象多态性/异源双链分析技术研究慢性乙型肝炎患者拉米夫定治疗前后乙肝病毒准种组成的改变。方法聚合酶链反应扩增6例患者治疗前后共12份血清标本中目的片段并逐一分析。结果拉米夫定治疗前患者体内乙肝病毒聚合酶基因序列准种组成较复杂,准种数在7-14(平均9.8),均高于治疗后准种数4-8(平均5.7),t=3.98,P<0.05。6例患者治疗前的准种分布中有一种或两种优势准种,但比例较低(33.3％-81.80％);治疗后显著升高(78.80％-90.9％),t=3.24,P<0.05。选择优势克隆测序,6例患者经拉米夫定治疗后2例在酪氨酸-蛋氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸(YMDD)序列出现M550V/L528M,3例为M5501变异,1例无变异。结论采用单链构象多态性/异源双链分析技术对人体内病毒作整体性的研究,可避免其他研究方法的片面性,为发现新的变异点提供机会,进一步解释拉米夫定的耐药机制。

关键词：拉米夫定患者单链构象多态性准种治疗后治疗前后乙肝病毒双链种数克隆测序

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银染多聚酶链反应－单链构象多态性方法的探讨

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中华血液学杂志 1995年第6期16卷 323-324页

作者：王丽辉武淑兰陈勖琦薛海鹏朱平北京医科大学第一医院血液内科

银染多聚酶链反应－单链构象多态性方法的探讨王丽辉，武淑兰，陈勖琦，薛海鹏，朱平近年发展起来的多聚酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法［ｏｎｃｏｇｅｍ，１９９０，５：１０３７］，虽然在研究基因点突变中具有快... 详细信息

银染多聚酶链反应－单链构象多态性方法的探讨王丽辉，武淑兰，陈勖琦，薛海鹏，朱平近年发展起来的多聚酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法［ｏｎｃｏｇｅｍ，１９９０，５：１０３７］，虽然在研究基因点突变中具有快速、敏感、无假阳性等特点，适合大样...

关键词：聚合酶链反应单链构象多态性

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联合应用PCR-单链构象多态性和短串联重复序列连锁分析方法进行20例苯丙酮尿症产前基因诊断

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中华医学遗传学杂志 2008年第1期25卷 110-111页

作者：金煜炜李莎莎王红宋昉首都儿科研究所医学遗传室北京100020 北京市妇产医院

目的建立技术简便、准确性高的苯丙酮尿症产前基因诊断方法，探索遗传性疾病的产前基因诊断的临床应用价值。方法应用聚合酶链反应．单链构象多态性和短串联重复序列连锁分析的方法，对20例经典型苯丙酮尿症再怀孕家系进行了产前基因诊... 详细信息

目的建立技术简便、准确性高的苯丙酮尿症产前基因诊断方法，探索遗传性疾病的产前基因诊断的临床应用价值。方法应用聚合酶链反应．单链构象多态性和短串联重复序列连锁分析的方法，对20例经典型苯丙酮尿症再怀孕家系进行了产前基因诊断。结果经过产后基因诊断和新生儿血苯丙氨酸浓度筛查的验证，取得令人满意的产前诊断结果。结论联合应用聚合酶链反应．单链构象多态性和短串联重复序列方法是技术简便、准确性高的产前基因诊断方法，具有较高的临床应用价值。

关键词：产前基因诊断单链构象多态性短串联重复序列连锁分析

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