检索结果-内蒙古大学图书馆

抑制南方水稻黑条矮缩病毒非结构蛋白P5-1的表达阻碍病毒在昆虫体内的增殖

植物保护学报 2015年第3期42卷 418-424页

作者：曹金强王针针陈红燕毛倩卓贾东升魏太云福建农林大学植物病毒研究所福建省植物病毒学重点实验室福州350002

为明确南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)编码的非结构蛋白P5-1参于SRBSDV在介体白背飞虱体内侵染过程中的作用机制,通过原核表达蛋白制备SRBSDV编码的非结构蛋白P5-1的多克隆抗体,并应用Western ... 详细信息

为明确南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)编码的非结构蛋白P5-1参于SRBSDV在介体白背飞虱体内侵染过程中的作用机制,通过原核表达蛋白制备SRBSDV编码的非结构蛋白P5-1的多克隆抗体,并应用Western blot和免疫荧光标记法检测抗体的特异性,以注射法将来源于P5-1基因的dsRNA(ds P5-1)注入获毒1 d的白背飞虱体内,5 d后通过免疫荧光标记法检测ds P5-1对SRBSDV在白背飞虱体内增殖的影响,同时以注射来源于GFP基因的dsRNA(ds GFP)为对照。结果显示,Western blot和免疫荧光标记分别检测到SRBSDV侵染水稻和白背飞虱表达的P5-1蛋白,表明所制备的P5-1抗体具有特异性。ds GFP处理的对照组白背飞虱带毒率高达81%,而ds P5-1处理的白背飞虱带毒率仅为21%,且P5-1蛋白的表达和SRBSDV在昆虫体内的增殖均受到抑制。表明P5-1蛋白是病毒在昆虫体内增殖的关键因子,可作为阻断病毒在昆虫体内增殖的理想靶标。

关键词：南方水稻黑条矮缩病毒 P5-1蛋白抗体制备 RNA干扰增殖

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白背飞虱体内南方水稻黑条矮缩病毒定量检测体系的建立

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基因组学与应用生物学 2016年第2期35卷 366-372页

作者：简熠周倩王锡锋李有志植物病虫害生物学与防控湖南省重点实验室长沙410128 湖南农业大学植物保护学院长沙410128 中国农业科学院植物保护研究所北京100093

白背飞虱Sogatella furcifera Horváth(WBPH)是南方水稻黑条矮缩病毒(southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)的主要传播介体。本实验以白背飞虱的三龄若虫、五龄若虫、雄虫和雌虫为材料,以18S为内参基因,SRBSDV的CP基... 详细信息

白背飞虱Sogatella furcifera Horváth(WBPH)是南方水稻黑条矮缩病毒(southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)的主要传播介体。本实验以白背飞虱的三龄若虫、五龄若虫、雄虫和雌虫为材料,以18S为内参基因,SRBSDV的CP基因为目的基因,建立了基于MIQE指南的实时荧光定量PCR体系。使用该体系结合相对定量法,检测了不同虫态白背飞虱体内携带南方水稻黑条矮缩病毒的相对含量。结果表明,相同饲毒条件下,白背飞虱不同虫态体内SRBSDV的相对含量为雌虫>雄性>五龄若虫>三龄若虫。该法能准确定量白背飞虱体内南方水稻黑条矮缩病毒的相对含量。

关键词：南方水稻黑条矮缩病毒白背飞虱实时荧光定量PCR SRBSDV-CP基因条件优化

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检测南方水稻黑条矮缩病毒胶体金免疫试纸条的建立

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植物保护学报 2017年第6期44卷 1024-1032页

作者：吴建祥饶黎霞陈浙傅帅周雪平浙江大学水稻生物学国家重点实验室/生物技术研究所杭州310058

由白背飞虱Sogatella furcifera(Horváth)传播的南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice blackstreaked dwarf virus,SRBSDV)是目前我国南方水稻上危害最严重的病毒,为开发简便、快速、准确的SRBSDV病毒检测技术和检测试剂,以感染SRB... 详细信息

由白背飞虱Sogatella furcifera(Horváth)传播的南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice blackstreaked dwarf virus,SRBSDV)是目前我国南方水稻上危害最严重的病毒,为开发简便、快速、准确的SRBSDV病毒检测技术和检测试剂,以感染SRBSDV的植物粗提液为免疫原,利用杂交瘤技术制备了2株抗SRBSDV的单抗(14A8和15G6),并利用制备的单抗建立了可快速、特异、灵敏地检测SRBSDV的胶体金免疫试纸条。结果表明,2株制备单抗的抗体类型及亚类均为Ig G1、kappa链,单抗腹水的间接ELISA效价均达到10^(-7);Western blot分析表明,2株单抗均与SRBSDV的外壳蛋白亚基有特异反应,而不与水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)反应。以制备14A8和15G6单抗分别为捕获抗体和胶体金标记抗体,开发成能在5 min内准确、特异地检测水稻植物和白背飞虱传毒介体体内SRBSDV的胶体金免疫试纸条;灵敏度分析表明,该检测试纸条的检测水稻病叶的灵敏度达到1∶6 400倍(g/m L),检测单头携毒白背飞虱的灵敏度达到1∶51 200倍(单头/μL)。田间样品检测结果表明,该试纸条的检测结果与RT-PCR的符合率达到100%。建立的SRBSDV胶体金免疫试纸条可对南方水稻黑条矮缩病毒进行快速、特异、灵敏的诊断和检测。

关键词：南方水稻黑条矮缩病毒单克隆抗体胶体金免疫试纸条白背飞虱

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南方水稻黑条矮缩病毒S9片段基因编码产物的生物信息学分析

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中国农学通报 2013年第6期29卷 12-19页

作者：胡秀弟朱静吴文斗任国敏李凡云南农业大学农业生物多样性与病虫害控制教育部重点实验室昆明650201 云南农业大学农学与生物技术学院昆明650201 云南农业大学基础与信息工程学院昆明650201 云南省德宏州芒市农业局植保站云南芒市678400

预测南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV)S9片段编码蛋白的功能,为进一步深入分析相关基因编码产物的功能提供理论依据。应用RT-PCR克隆了SRBSDV云南芒市分离物(SRBSDV-YNMShi)的S9片段,测定其全序列,并对S9及其编码蛋白进行生物信息学分析。... 详细信息

预测南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV)S9片段编码蛋白的功能,为进一步深入分析相关基因编码产物的功能提供理论依据。应用RT-PCR克隆了SRBSDV云南芒市分离物(SRBSDV-YNMShi)的S9片段,测定其全序列,并对S9及其编码蛋白进行生物信息学分析。结果表明,S9片段全长1900nt,编码P9-1和P9-22个蛋白。S9核苷酸序列与广东、海南、湖北分离物的同源性分别为99.5%、99.1%和98.7%。系统进化分析再次印证了SRBSDV是斐济病毒属的成员,SRBSDV-YNMShi与广东、越南分离物聚成一枝,与海南分离物有一定的进化分离趋势。P9-1为一个不稳定疏水蛋白,亚细胞定位于细胞核内,无规则卷曲是该蛋白质的主要结构元件,与其亲缘关系最近的水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)有着类似结构。P9-2是有2个跨膜结构域的亲水性稳定蛋白,亚细胞定位于质膜,α-螺旋是其主要结构元件,有1个保守的G蛋白偶联受体。P9-1可能为SRBSDV复制的关键因子,P9-2可能为膜蛋白,具有转运的功能。

关键词：南方水稻黑条矮缩病毒 S9片段生物信息学分析功能预测

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南方水稻黑条矮缩病毒的分子生物学研究进展

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农业灾害研究 2015年第10期5卷 18-21页

作者：陈永涛金吉林张兴无李兴忠罗会贵州省果树科学研究所贵州贵阳550006

论述了南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)的分类地位,其隶属于斐济病毒属的第2组成员,病毒基因组由10条双链dsRNA组成,编码13个蛋白。同时,详细介绍了3个非结构蛋白的功能,如SRBSDV-S6编码基因沉... 详细信息

论述了南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)的分类地位,其隶属于斐济病毒属的第2组成员,病毒基因组由10条双链dsRNA组成,编码13个蛋白。同时,详细介绍了3个非结构蛋白的功能,如SRBSDV-S6编码基因沉默抑制子,SRBSDV-P7-1蛋白形成管状结构,SRBSDV-P9-1与病毒基质的形成密切相关。最后阐述了SRBSDV与寄主之间的相互作用研究进展。

关键词：南方水稻黑条矮缩病毒分类地位基因组结构功能

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南方水稻黑条矮缩病毒P6抗体的制备及应用

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中国农学通报 2014年第28期30卷 270-274页

作者：郑胜兰贾东升魏太云福建省植物病毒学重点实验室/福建农林大学植物病毒研究所福州350002

为了建立快速准确检测田间介体白背飞虱带毒率的方法,利用Gateway重组技术将与病毒早期复制有关的P6基因的N端993 bp构建原核表达载体pDEST17-P6,并将诱导表达的目的蛋白免疫注射新西兰大白兔制备多克隆抗体。结果表明:Western blot检... 详细信息

为了建立快速准确检测田间介体白背飞虱带毒率的方法,利用Gateway重组技术将与病毒早期复制有关的P6基因的N端993 bp构建原核表达载体pDEST17-P6,并将诱导表达的目的蛋白免疫注射新西兰大白兔制备多克隆抗体。结果表明:Western blot检测制备的P6抗体可特异性检测SRBSDV侵染水稻的P6蛋白,免疫荧光标记技术可检测南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black streaked dwarf virus,SRBSDV)侵染白背飞虱体内的P6蛋白,且P6抗体可直观高效准确地用于免疫荧光标记检测昆虫带毒率。以上研究表明,所制备的P6抗体可用于SRBSDV的田间介体昆虫带毒率快速检测,有助于病毒病害的监测和预报。

关键词：南方水稻黑条矮缩病毒 P6蛋白抗体制备免疫荧光标记

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南方水稻黑条矮缩病毒P8蛋白的定位和致病性分析

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长江大学学报（自然科学版） 2017年第6期14卷 49-53页

作者：陶亚群彭小琴李佩王浩然李聪鲁红学章松柏吴祖建长江大学农学院湖北荆州434025 福建农林大学植物病毒研究所福建福州350002

P8是南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)编码的一种外壳蛋白,该蛋白的其他功能未知。利用马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)异源病毒载体和pEarleyGate101在本氏烟(Nicotiana benthamiana)中表达了P8,通过荧光共聚焦显微镜观察这些蛋白的亚细胞定位情况,分析该蛋白的表达对本氏烟的影响。结果显示:P8主要定位于细胞质,在细胞质中形成颗粒状聚集体;与PVX空载体侵染的本氏烟相比,P8蛋白的表达能够促使本氏烟表现出一定程度的花叶和新叶皱缩症状,推测可能参与病毒的致病性过程。

关键词：南方水稻黑条矮缩病毒结构蛋白致病性亚细胞定位

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呼肠孤病毒科斐济病毒属一新种：南方水稻黑条矮缩病毒

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科学通报 2008年第20期53卷 2500-2508页

作者：周国辉温锦君蔡德江李鹏许东林张曙光华南农业大学植物病毒研究室广州510642 海南省农业厅植保站海口570003

近年在广东省和海南省部分地区新发生一种水稻病毒病,其症状表现为植株矮缩、叶色深绿、叶背及茎秆出现条状乳白色或深褐色小突起、高位分蘖及茎节部倒生气生须根.病株韧皮部细胞内可观察到具斐济病毒特征性晶格状排列直径为70～75nm的... 详细信息

近年在广东省和海南省部分地区新发生一种水稻病毒病,其症状表现为植株矮缩、叶色深绿、叶背及茎秆出现条状乳白色或深褐色小突起、高位分蘖及茎节部倒生气生须根.病株韧皮部细胞内可观察到具斐济病毒特征性晶格状排列直径为70～75nm的球状病毒粒体以及病毒基质和管状结构.从发病田块及其附近的玉米(Zea mays)、稗草(Echinochloa crusgalli)、水莎草(Juncellus serotinus)和白草(Pennisetum flaccidum)植株体内检测到病原病毒的存在.田间调查及室内传毒实验表明,白背飞虱(Sogatella furcifera)是该病毒的主要传毒介体.该病毒的基因组由10条dsRNA组成,其电泳图谱与水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf virus)基本相同.采用接头单引物扩增法获得了该病毒基因组两个片段(S9和S10)全长核苷酸序列,两者在核苷酸组成、末端序列及基因排列上均具斐济病毒特征,但与斐济病毒属已知种核苷酸同一率小于75%(S9)和80%(S10),基于核苷酸及其推导编码产物氨基酸序列构建的系统进化树表明,该病毒在斐济病毒属中处于相对独立的进化位置.结果表明,该病毒应为呼肠孤病毒科(Reoviridae)斐济病毒属(Fijivirus)第2组的一个新种,建议将其命名为南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus).

关键词：南方水稻黑条矮缩病毒水稻斐济病毒呼肠孤病毒

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一种快速同步检测水稻黑条矮缩病毒和南方水稻黑条矮缩病毒的方法

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中国水稻科学 2011年第1期25卷 91-94页

作者：季英华高瑞珍张野程兆榜周彤范永坚周益军江苏省农业科学院植物保护研究所江苏南京210014 扬州大学园艺与植物保护学院江苏扬州225009

水稻黑条矮缩病毒和南方水稻黑条矮缩病毒是近年来在水稻上危害日益严重的两种病毒,由于两者同属于呼肠孤病毒科斐济病毒属,在症状、粒体形状、传播介体及寄主等方面非常相似,由此也给诊断及鉴定造成了困难。针对这一问题,通过设计简并... 详细信息

水稻黑条矮缩病毒和南方水稻黑条矮缩病毒是近年来在水稻上危害日益严重的两种病毒,由于两者同属于呼肠孤病毒科斐济病毒属,在症状、粒体形状、传播介体及寄主等方面非常相似,由此也给诊断及鉴定造成了困难。针对这一问题,通过设计简并引物,并优化体系,建立了一种快速、简便、灵敏、特异的方法,为这两种病毒的检测及鉴别提供了方便。

关键词：水稻黑条矮缩病毒南方水稻黑条矮缩病毒检测方法

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湖北发生的水稻矮缩病是南方水稻黑条矮缩病毒引起的

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中国水稻科学 2011年第2期25卷 223-226页

作者：章松柏罗汉刚张求东张长青吴祖建谢联辉福建农林大学植物病毒研究所福建福州350002 长江大学农学院湖北荆州434025 湖北省植物保护总站湖北武汉430070

近年来由水稻黑条矮缩病毒和南方水稻黑条矮缩病毒引起的水稻黑条矮缩病在华南、华东等地区暴发流行,给水稻生产带来严重损失,而湖北一直未有水稻黑条矮缩病流行的报道。然而,2009年和2010年在湖北省长江沿线的荆州、孝感、咸宁、黄石... 详细信息

近年来由水稻黑条矮缩病毒和南方水稻黑条矮缩病毒引起的水稻黑条矮缩病在华南、华东等地区暴发流行,给水稻生产带来严重损失,而湖北一直未有水稻黑条矮缩病流行的报道。然而,2009年和2010年在湖北省长江沿线的荆州、孝感、咸宁、黄石、鄂州、黄冈等水稻种植区普遍发生水稻矮缩减产的现象。经过症状观察、dsRNA电泳图谱分析、RT-PCR等方法,诊断该病是由南方水稻黑条矮缩病毒引起,说明该病毒已经随介体昆虫白背飞虱从我国南方传播至中部水稻种植区。

关键词：水稻黑条矮缩病毒南方水稻黑条矮缩病毒基因组电泳反转录聚合酶链式反应病毒鉴定

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