检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医科技 2005年第3期35卷 239-243页

作者：李雪梅程安春汪铭书四川农业大学动物科技学院动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川雅安625014

　　针对已有资料中对于以DNA为靶基因序列的原位 pcr介绍较多,而对于原位反转录pcr的介绍很少,但在实际研究工作中有很多检测的靶基因是 RNA(病毒的或基因组的 RNA)的实际情况,就原位反转录pcr技术的基本原理、影响试验结果的关键因... 详细信息

　　针对已有资料中对于以DNA为靶基因序列的原位 pcr介绍较多,而对于原位反转录pcr的介绍很少,但在实际研究工作中有很多检测的靶基因是 RNA(病毒的或基因组的 RNA)的实际情况,就原位反转录pcr技术的基本原理、影响试验结果的关键因素和步骤,如组织细胞的固定、引物和探针的选择、蛋白酶及DNA酶消化、假阳性及假阴性的产生等进行了概述,旨在通过探讨上述问题,对该技术的实际应用有所指导。

关键词：原位反转录pcr 原位检测应用

来源：评论

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应用原位反转录pcr技术对BPH组织中ARmRNA的研究

应用原位反转录PCR技术对BPH组织中ARmRNA的研究

引用

作者：钟伟西安医科大学

学位级别：硕士

良性前列腺增生(Benign prostatic hyperplasia BPH)及前列腺癌(Prostatic carcinoma PC)是老年男性常见病.前列腺是雄激素作用的主要靶器官,雄激素依赖性紊乱会引起前列腺结构和功能的异常.而雄激素正常生理作用的发挥,必须通过靶细胞... 详细信息

良性前列腺增生(Benign prostatic hyperplasia BPH)及前列腺癌(Prostatic carcinoma PC)是老年男性常见病.前列腺是雄激素作用的主要靶器官,雄激素依赖性紊乱会引起前列腺结构和功能的异常.而雄激素正常生理作用的发挥,必须通过靶细胞内的雄激素受体(Androgen receptor AR)的介导.因此,关于AR的表达的定性和定量的研究,对于了解BPH及PC的发生、发展以及临床指导意义愈来愈显得重要.为了从AR的分子表达水平探讨ARmRNA与BPH的关系,该课题成功地建立了直接法原位反转录pcr(In situ RT-pcr)检测石蜡片中ARmRNA的方法.该方法兼有普通pcr和原位杂交(ISH)的优点,不仅敏感、特异、还能对特异性靶序列进行组织定位.该课题运动此方法对4例正常前列腺(Normal adult prostate NAP)和10例BPH的前列腺标本中的ARmRNA进行了检测,并利用自动图像分析仪对ARmRNA的阳性表达作了比较分析.为AR在转录水平的表达变化与BPH病理改变的相互关系作了初步的探索性研究.

关键词：雄激素受体mRNA 良性前列腺增生原位反转录pcr

来源：评论

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正常和放射复合伤口血管再生中VEGF基因的表达及其意义

引用

细胞与分子免疫学杂志 2001年第5期17卷 410-412页

作者：彭瑞云高亚兵熊呈琦秦全红王德文军事医学科学院放射医学研究所八室北京100850

目的研究ＶＥＧＦ基因在正常和放射复合伤口愈合中的表达及意义，探讨其在血管再生中的作用。方法将４８只Ｗｉｓｔａｒ二级大鼠背部皮肤造成圆形伤口后，以２５Ｇｙ６０Ｃｏ γ射线局部照射，于伤后２、５、１０、１５、２ ... 详细信息

目的研究ＶＥＧＦ基因在正常和放射复合伤口愈合中的表达及意义，探讨其在血管再生中的作用。方法将４８只Ｗｉｓｔａｒ二级大鼠背部皮肤造成圆形伤口后，以２５Ｇｙ６０Ｃｏ γ射线局部照射，于伤后２、５、１０、１５、２１和２８ｄ活杀取材，采用免疫组织化学、原位杂交和原位ＰＣＲ等方法，研究ＶＥＧＦ基因的表达及意义。结果单纯创伤组于伤后２ｄ，新生血管内皮细胞浆内ＶＥＧＦ的表达呈强阳性；５ｄ时毛细血管数明显增多，其内皮细胞胞浆内ＶＥＧＦ表达呈阳性；而于１０ｄ后，ＶＥＧＦ的表达逐渐减少。创伤＋照射组则于伤后５ｄ，ＶＥＧＦ的表达在血管内皮细胞胞浆内呈弱阳性，１０ｄ时阳性，１５ｄ后则呈弱阳性。原位杂交显示，ＶＥＧＦｍＲＮＡ于单纯创伤组伤后２～５ｄ及创伤＋照射组伤后５～１０ｄ，血管内皮细胞浆内阳性。原位反转录ＰＣＲ则显示，ＶＥＧＦｍＲＮＡ于单纯创伤组伤后２～１５ｄ及创伤＋照射组伤后５～２８ｄ，呈阳性反应。结论内源性ＶＥＧＦ基因的表达参与创伤愈合中血管再生过程。辐射使血管内皮细胞中ＶＥＧＦ的表达减少。原位反转录ＰＣＲ方法较原位杂交能客观地反映内源性ＶＥＧＦ基因的表达情况。

关键词：伤口愈合血管再生 VEGF 免疫组织化学原位反转录pcr

来源：评论

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ST13基因在大肠癌及癌正常大肠组织中的表达定位研究

ST13基因在大肠癌及癌正常大肠组织中的表达定位研究

引用

作者：王林波浙江大学

学位级别：博士

该研究首先建立ST13基因mRNA原位杂交、原位反转录pcr(In situ RT-pcr)及ST13蛋白单克隆抗体的免疫组织化学三种不同的方法,然后对ST13基因在大肠癌及癌旁正常组织中进行表达定位研究.该研究分成三部分完成.第一部分:ST13基因mRNA原位... 详细信息

该研究首先建立ST13基因mRNA原位杂交、原位反转录pcr(In situ RT-pcr)及ST13蛋白单克隆抗体的免疫组织化学三种不同的方法,然后对ST13基因在大肠癌及癌旁正常组织中进行表达定位研究.该研究分成三部分完成.第一部分:ST13基因mRNA原位杂交方法建立及基在大肠癌及癌旁正常组织中的表达定位研究.第二部分:ST13基因mRNA的In situ RT-pcr方法建立及其在大肠癌及癌旁正常组织的表达定位研究.第三部分:ST13蛋白单克隆抗体在大肠癌及癌旁正常组织中的免疫组织化学表达定位研究.结论如下:[1]ST13基因在大肠癌及癌旁正常大肠组织的定位于上皮细胞中.[2]ST13基因在同一组织细胞群之间的表达存在不均一性,即从形态学上证实基因表达的异质性.在大肠癌组织中ST13基因有低表达倾向.[3]ST13蛋白在大肠粘膜上皮、大肠癌细胞中的表达多见于细胞浆中.[4]ST13基因的In Situ RT-pcr检测技术体系及原位杂交技术具有较好的敏感性与特异性,在一定应用价值.[5] 改良预处理PE载玻片法,是保存冰冻切片中RNA的关键.

关键词： ST13基因基因表达原位杂交原位反转录pcr ST13蛋白大肠癌

来源：评论

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