检索结果-内蒙古大学图书馆

安徽医科大学学报 2024年第10期59卷 1785-1793页

作者：田甜张星娟杨明夏南京医科大学第三附属医院(常州市第二人民医院)呼吸科常州213003

目的了解人类核糖体蛋白L22(RPL22)基因的生物信息学,原核表达与纯化人类RPL22重组蛋白,在体外合成人类RPL22(标记为试剂M),研究试剂M对NSCLC A549细胞增殖、周期、凋亡的影响,分析试剂M和顺铂(DDP)联合进行化疗的效果。方法分析RPL22... 详细信息

目的了解人类核糖体蛋白L22(RPL22)基因的生物信息学,原核表达与纯化人类RPL22重组蛋白,在体外合成人类RPL22(标记为试剂M),研究试剂M对NSCLC A549细胞增殖、周期、凋亡的影响,分析试剂M和顺铂(DDP)联合进行化疗的效果。方法分析RPL22生物信息学。PCR克隆RPL22基因,进行单链寡核苷酸的设计及合成,获得目的基因后连接pET-28α载体,构建pET-28α-RPL22重组质粒,转化大肠埃希菌感受态细胞DH 5α,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、Western blot分析重组蛋白RPL22的表达情况。CCK-8检测试剂M和DDP在A549细胞中的半抑制率(IC_(50))以及试剂M对A549细胞增殖的影响;流式细胞术检测试剂M对A549细胞凋亡、周期的影响;qPCR、Western blot检测试剂M和DDP分别对磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)、腺苷5′-单磷酸激活蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(AMPK/mTOR)信号通路的影响。结果RPL22蛋白为不稳定亲水性蛋白质。诱导表达的重组蛋白经溶解纯化后获得了高浓度重组蛋白。在A549细胞中,试剂M的IC_(50)为400μg/L,DDP的IC_(50)为10μmol/L,试剂M抑制细胞增殖,其浓度与细胞活性成反比;试剂M(200μg/L)与DDP(2.5μmol/L)联合运用时,效果与单独使用10μmol/L DDP抑制增殖比相似;试剂M能诱导G 2细胞周期停止、促进细胞凋亡,且可能参与PI3K/AKT、AMPK/mTOR通路的调节。结论该研究首次克隆得到人类RPL22重组蛋白,使其成功纯化表达。

关键词：核糖体蛋白L22 非小细胞肺癌生物信息学分析原核表达与纯化功能分析

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猪肺炎支原体Mhp107蛋白的分段原核表达与纯化

猪肺炎支原体Mhp107蛋白的分段原核表达与纯化

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中国猪业科技大会暨中国畜牧兽医学会2015年学术年会

作者：付启欢游凤丁红雷西南大学动物科技学院

引言猪支原体肺炎（Mycoplasmal pneumonia of swine,MPS）是由猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp）引起的常见疾病,在我国和发达国家广泛分布。目前主要由疫苗防控该病,但市面上的疫苗普遍价格昂贵而且往往不能引起较好的免... 详细信息

引言猪支原体肺炎（Mycoplasmal pneumonia of swine,MPS）是由猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp）引起的常见疾病,在我国和发达国家广泛分布。目前主要由疫苗防控该病,但市面上的疫苗普遍价格昂贵而且往往不能引起较好的免疫保护效果或免疫操作困难。本研究选取了

关键词：猪肺炎支原体原核表达与纯化 Mhp107

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猪SSTR5胞外区Ⅱ环基因片段的原核表达与纯化

猪SSTR5胞外区Ⅱ环基因片段的原核表达与纯化

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全国动物生理生化第十一次学术交流会

作者：赵增阳习欠云张志岐王瑞晓江青艳张永亮华南农业大学动物科学学院

猪生长抑素SS的生理功能的复杂性是通过其受体的复杂性来实现的,而SSTR5对GH的分泌起着关键的调控作用。本实验根据GenBank中猪的SSTR5氨基酸序列,利用在线软件预测SSTR5胞外区Ⅱ肽片段,采用大肠杆菌偏爱密码子设计该基因序列,在末端分... 详细信息

猪生长抑素SS的生理功能的复杂性是通过其受体的复杂性来实现的,而SSTR5对GH的分泌起着关键的调控作用。本实验根据GenBank中猪的SSTR5氨基酸序列,利用在线软件预测SSTR5胞外区Ⅱ肽片段,采用大肠杆菌偏爱密码子设计该基因序列,在末端分别加入BamHI、HindⅢ两个酶切位点和保护碱基,人工合成SSTR5-ECLⅡ基因片段,并且将该片段与pET-32a(+)质粒进行连接重组,经过双酶切鉴定和PCR鉴定后送去测序,测序结果表明成功构建了原核表达载体pET-32a(+)-SSTR5-ECLⅡ;将该载体转化大肠杆菌BL 21菌株中进行表达,经过条件优化确定表达条件为:IPTG诱导浓度为0.5 mM/L、诱导温度为30℃、诱导时间为

关键词：基因片段原核表达与纯化 SSTR5 胞外区

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猪肺炎支原体疫苗候选抗原蛋白Mhp144、Mhp228、Mhp265和Mhp274的原核表达与纯化

猪肺炎支原体疫苗候选抗原蛋白Mhp144、Mhp228、Mhp265和Mhp274的...

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第七届中国畜牧科技论坛

作者：付雅慧游凤丁红雷西南大学动物科技学院动物传染病学实验室

(目的)临床应用的猪支原体肺炎疫苗免疫保护效果较差。本研究目的是为猪支原体肺炎基因工程亚单位疫苗的研发提供候选抗原蛋白。(方法)通过生物信息学方法预测Mhp144、Mhp228、Mhp265、Mhp274蛋白的亚细胞定位。合成mhp144、mhp228、mhp... 详细信息

(目的)临床应用的猪支原体肺炎疫苗免疫保护效果较差。本研究目的是为猪支原体肺炎基因工程亚单位疫苗的研发提供候选抗原蛋白。(方法)通过生物信息学方法预测Mhp144、Mhp228、Mhp265、Mhp274蛋白的亚细胞定位。合成mhp144、mhp228、mhp265、mhp274基因,在合成过程中将编码色氨酸的密码子TGA突变为TGG,合成的基因连接pGEX 6P-1载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态,IPTG诱导目的蛋白表达。利用谷胱甘肽磁珠和PsP酶纯化目的蛋白。(结果)生物信息学预测表明Mhp144、Mhp228、Mhp265、Mhp274蛋白存在于细胞外膜。这些蛋白均能以具有良好天然构象的可溶形式在大肠杆菌BL21(DE3)与GST蛋白融合表达,且能被PsP酶酶切,表达的蛋白分子量分别为40 kμ、21 kμ、42 kμ和51 kμ。(结论)为猪肺炎支原体基因工程疫苗的研发提供了研究材料。

关键词：猪肺炎支原体 Mhp144 Mhp228 Mhp265 Mhp274 原核表达与纯化候选抗原

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CQW1株坦布苏病毒截段Cap基因的克隆、原核表达与纯化

CQW1株坦布苏病毒截段Cap基因的克隆、原核表达与纯化

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第三届水禽疫病防控研讨会

作者：张兴翠贾仁勇程安春汪铭书朱德康刘马峰孙昆峰杨乔陈舜刘菲吴英陈孝跃四川农业大学预防兽医研究所四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心动物疫病与人类健康四川省重点实验室

引言2010年在南方出现产蛋种鸭产蛋量急剧下降,产畸形蛋,患病鸭精神萎靡,食欲下降,剖检见卵巢充血等,据报道,该病毒引起的发病率较高。经序列分析,该病毒全基因组由一个开放阅读框和两侧的5'和3'非编码区组成,开放阅读框编码一... 详细信息

引言2010年在南方出现产蛋种鸭产蛋量急剧下降,产畸形蛋,患病鸭精神萎靡,食欲下降,剖检见卵巢充血等,据报道,该病毒引起的发病率较高。经序列分析,该病毒全基因组由一个开放阅读框和两侧的5'和3'非编码区组成,开放阅读框编码一多聚蛋白。该多聚蛋白被病毒和宿主的蛋白酶切割成三个结构蛋白（Capsid,C;PrM,M;Envelope,E）和七种非结构蛋白（NS1、NS2A、NS2B、NS3、NS4A、NS4B、NS5）。该毒株被命名为鸭坦布苏

关键词：坦布苏病毒 Cap 原核表达与纯化

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水稻Catalase重组蛋白的原核表达与纯化研究

水稻Catalase重组蛋白的原核表达与纯化研究

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东北三省生物化学与分子生物学学会2008年学术交流会

作者：鲁振强陈连江朱延明黑龙江大学生命科学学院黑龙江大学农作物研究院东北农业大学生命科学学院

为了阐明水稻 Catalase(CAT)的酶学功能,首先需要制备出大量的该酶蛋白。在本研究中, 我们将水稻 CAT 基因(GenBank No.D26484)构建于原核表达载体 pGEX-6p-3中,继而转入原核生

关键词：重组蛋白原核表达与纯化 Catalase

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猪肺炎支原体部分疫苗候选抗原蛋白的原核表达与纯化

猪肺炎支原体部分疫苗候选抗原蛋白的原核表达与纯化

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中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会

作者：周瑶琴刘芮覃立旬丁红雷西南大学动物科技学院动物传染病学实验室

猪支原体肺炎是由猪肺炎支原休引起的一种重要的猪的呼吸道疾病,我国每年由此病造成的直接经济损失超过100亿元。现有的疫苗免疫保护效果不完全,且不能清除病原。因此,研发新型更加有效的疫苗是防制猪支原体肺炎的重要研究方向。本研究... 详细信息

猪支原体肺炎是由猪肺炎支原休引起的一种重要的猪的呼吸道疾病,我国每年由此病造成的直接经济损失超过100亿元。现有的疫苗免疫保护效果不完全,且不能清除病原。因此,研发新型更加有效的疫苗是防制猪支原体肺炎的重要研究方向。本研究目的是表达并纯化猪肺炎支原体候选抗原蛋白,为后续的抗原筛选提供研究工具。

关键词：猪肺炎支原体猪支原体肺炎原核表达与纯化候选抗原

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鸡源SAMHD1蛋白的原核表达与纯化

鸡源SAMHD1蛋白的原核表达与纯化

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中国畜牧兽医学会2018年学术年会禽病学分会第十九次学术研讨会

作者：俞燕姜逸徐步高明燕程旭赵秀美江苏省家禽科学研究所

引言SAMHD1蛋白是一种主要在髓系细胞表达的宿主限制因子,具有dNTP酶和核酸外切酶活性,同时也是连接病毒复制、天然免疫和细胞周期化进程的独特元件。在哺乳动物中被证实具有抗病毒、调节天然免疫反应的能力。近期研究发现,鸡源SAMHD1... 详细信息

引言SAMHD1蛋白是一种主要在髓系细胞表达的宿主限制因子,具有dNTP酶和核酸外切酶活性,同时也是连接病毒复制、天然免疫和细胞周期化进程的独特元件。在哺乳动物中被证实具有抗病毒、调节天然免疫反应的能力。近期研究发现,鸡源SAMHD1同样具有dNTP水解酶和核酸酶活性,推测其可能具有抗病毒功能。本研究构建了鸡源SAMHD1(chSAMHD1)原核表达载体,并对其诱导表达和纯

关键词：原核表达与纯化重组蛋白原核表达载体 SAMHD1

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可溶性重组人内抑素的原核表达与纯化:体外生物学活性观察

可溶性重组人内抑素的原核表达与纯化:体外生物学活性观察

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中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议

作者：任斌朱年春俞快蒋雪娟智强阮迪云王玉珍中国科学技术大学生命科学学院中国科学技术大学生命科学学院中国科学技术大学生命科学学院中国科学技术大学生命科学学院中国科学技术大学生命科学学院中国科学技术大学生命科学学院中国科学技术大学生命科学学院

内抑素是一种活性很强的特异性抗血管生成抑制剂,能抑制实验动物肿瘤的生长,其抗癌作用正在进行Ⅱ期临床试验.至今报道表明:利用大肠杆菌制备的重组人内抑素纯化后成为不溶性蛋白,因此不适合临床应用;而利用酵母系统获得的可溶性内抑素... 详细信息

内抑素是一种活性很强的特异性抗血管生成抑制剂,能抑制实验动物肿瘤的生长,其抗癌作用正在进行Ⅱ期临床试验.至今报道表明:利用大肠杆菌制备的重组人内抑素纯化后成为不溶性蛋白,因此不适合临床应用;而利用酵母系统获得的可溶性内抑素产量较低且成本较高,难以满足大规模的临床试验需要.

关键词：重组人内抑素生物学活性原核表达与纯化

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梅花鹿鹿茸顶端IGF-1基因的克隆、原核表达与纯化

梅花鹿鹿茸顶端IGF-1基因的克隆、原核表达与纯化

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全国动物生理生化第十二次学术交流会

作者：孟星宇李婷李沐刘宁田玉华胡薇吉林农业大学生命科学学院生化教研室

鹿茸是梅花鹿(Cervus nippon)的第二性征,是在雄鹿额骨部长出的骨质性组织。鹿茸每年周期性地生长,这在哺乳动物中绝无仅有;鹿茸每天可长1～2 cm,速度之快也为其他任何哺乳动物组织所不及,人们推测其中存在特殊的促骨组织生长的活性物... 详细信息

鹿茸是梅花鹿(Cervus nippon)的第二性征,是在雄鹿额骨部长出的骨质性组织。鹿茸每年周期性地生长,这在哺乳动物中绝无仅有;鹿茸每天可长1～2 cm,速度之快也为其他任何哺乳动物组织所不及,人们推测其中存在特殊的促骨组织生长的活性物质。因此鹿茸成为研究组织

关键词：梅花鹿鹿茸 IGF-1 原核表达与纯化

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