检索结果-内蒙古大学图书馆

原生质体融合

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生物学通报 2009年第8期44卷 7-9页

作者：王幼平张莉莉吴晓霞扬州大学生物科学与技术学院江苏扬州225009

对原生质体融合的方法、融合种类以及应用情况进行较为详细的介绍。

关键词：原生质体融合方法种类应用

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原生质体融合获得羊肚菌黑色栽培种与黄色非栽培种间杂交高产菌株

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江西农业大学学报 2025年第2期47卷 349-359页

作者：廖武俊钟啟萍李荣光霍达霍光华江西农业大学生物科学与工程学院江西南昌330045 江西农业大学南昌商学院江西九江330300

【目的】目前限制江西地区羊肚菌产业发展的主要问题为产量低、高产难重复及优质菌种少,而解决这些问题的关键在于菌种。本研究旨在选育适合江西本土栽培的高产羊肚菌新菌株。【方法】根据遗传与环境互作理论,有针对性的选择江西本土采... 详细信息

【目的】目前限制江西地区羊肚菌产业发展的主要问题为产量低、高产难重复及优质菌种少,而解决这些问题的关键在于菌种。本研究旨在选育适合江西本土栽培的高产羊肚菌新菌株。【方法】根据遗传与环境互作理论,有针对性的选择江西本土采集到的野生黄色羊肚菌JFRL01-161和在江西鹰潭地区商业栽培的梯棱羊肚菌JFRL01-107、六妹羊肚菌JFRL01-217作为原始菌种,通过20 g/L溶壁酶+10 g/L蜗牛酶组成的复合酶溶解细胞壁制取原生质体,再通过高温和紫外双灭活获得2种灭活原生质体,将不同灭活的原生质体进行两两融合获得融合子。对得到的融合子进行拮抗试验,栽培品比以及区间简单重复序列标记(ISSR)鉴定确定种源关系。【结果】经原生质体融合共获得融合菌株16株,即A11、A37、A39、B7、B12、B17、B18、B25、B26、B29、C1、C2、C5、C6、C11和C12;其中菌株A11、A37、A39和B18出菇并形成产量,特别是融合菌株A11产量达到351.90g/m^(2),显著高于亲本JFRL01-107产量264.51g/m^(2),年度重复栽培验证试验确认A11产量可达527.8g/m^(2),亲本JFRL01-107产量为262.4 g/m^(2)。非加权算数平均聚类系统发生树(UPGMA)显示A11分别与亲本JFRL01-161(相似水平系数0.24)和JFRL01-107(相似系数水平0.696)处于不同分支,证明融合菌株A11是不同于两亲本的新菌株。【结论】融合菌株A11产量显著高于亲本,经过重复栽培试验确认其种质稳定,经ISSR确定是不同于亲本的菌株,因此融合菌株A11可作为适应江西本土栽培的高产羊肚菌新菌株。

关键词：羊肚菌高产羊肚菌新菌株A11 紫外和热双灭活原生质体融合区间简单重复序列标记分析

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原生质体融合制备三效工程菌HL及其溶藻机理

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化工进展 2022年第8期41卷 4464-4472页

作者：黄金杰毛林强张文艺常州大学环境与安全工程学院江苏常州213164

为从源头上治理蓝藻问题,对本文作者课题组筛选出的高效溶藻菌R1和脱氮聚磷菌B8进行原生质体融合后得到5株融合菌。以蓝藻优势藻种——铜绿微囊藻为受试对象,以溶藻率、脱氮率、除磷率作为评判标准,优选出其中1株兼备溶藻、脱氮、除磷菌... 详细信息

为从源头上治理蓝藻问题,对本文作者课题组筛选出的高效溶藻菌R1和脱氮聚磷菌B8进行原生质体融合后得到5株融合菌。以蓝藻优势藻种——铜绿微囊藻为受试对象,以溶藻率、脱氮率、除磷率作为评判标准,优选出其中1株兼备溶藻、脱氮、除磷菌株(命名为HL),运用底物抑制Haldane模型构建菌株降解铜绿微囊藻动力学模型。不同方式处理菌液来判定菌株的溶藻作用组分,并用扫描电镜观察其溶藻效果,辅以三维荧光、傅里叶红外初步探寻其溶藻机理。试验结果表明:菌株HL具有高效溶藻、稳定脱氮除磷能力;在菌藻共生环境中,对不同浓度铜绿微囊藻的降解过程符合Haldane方程,其最大比生长速率μ_(m)为1.046d^(-1),半饱和常数Ks为896.92mg/m^(3),抑制常数K为1568.95mg/m^(3),这表明菌株HL对铜绿微囊藻具有较好的耐受与降解能力;菌株HL通过分泌芳香族氨基酸等活性物质,对藻细胞壁破坏,从而导致藻细胞破碎死亡。

关键词：原生质体融合溶藻菌铜绿微囊藻动力学模型

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原生质体融合选育高产脂肽LI-F多粘类芽胞杆菌及融合菌株表达差异分析

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生物工程学报 2015年第9期31卷 1401-1407页

作者：闫冬韩金志别小妹陆兆新吕凤霞赵海珍张充南京农业大学食品科学与技术学院南京210095

本研究以多粘类芽胞杆菌JSa-9前期诱变获得的两株带有营养缺陷型标记的菌株N1-37(Phe–)和N2-27(His–)作为亲本菌株,采用聚乙二醇作为促融剂,进行原生质体融合,筛选出高产LI-F类抗菌脂肽的融合菌株。通过HPLC对融合菌株和原始菌株产LI-... 详细信息

本研究以多粘类芽胞杆菌JSa-9前期诱变获得的两株带有营养缺陷型标记的菌株N1-37(Phe–)和N2-27(His–)作为亲本菌株,采用聚乙二醇作为促融剂,进行原生质体融合,筛选出高产LI-F类抗菌脂肽的融合菌株。通过HPLC对融合菌株和原始菌株产LI-F类抗菌脂肽进行定量检测,并利用实时荧光定量PCR对菌株JSa-9和融合菌株中LI-F类抗菌脂肽合成酶的关键基因fus A1、fus A2、fus C1和fus C2的差异性表达进行分析。结果表明,经过原生质融合获得一株LI-F类抗菌脂肽高产菌株F5-15。菌株F5-15的LI-F类抗菌脂肽产量为原始菌株产量的3.1倍,LI-F类抗菌脂肽合成酶的4个关键基因在融合菌株F5-15中的表达量分别是其在原始菌株JSa-9中的10.48、2.48、2.1和11.8倍。

关键词：原生质体制备原生质体融合实时荧光定量PCR

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原生质体融合结合基因编辑技术显著提高酿酒酵母2-苯乙醇产量

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食品与发酵工业 2023年第5期49卷 18-24页

作者：林路成徐志伟张建泽单玉栋肖峰徐浩李芩萍易蒲红汪琨朱廷恒浙江工业大学生物工程学院浙江杭州310014 中国农业大学有机循环研究院(苏州) 江苏苏州215000

酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)已用于生产天然2-苯乙醇(2-phenylethanol,2-PE),但其产量低,耐受性差。该研究筛选出3株具有不同优良性状的酿酒酵母菌株,其中菌株LSC-1的2-PE产量为3.41 g/L,菌株NGER对2-PE的耐受性达3.60 g/L,菌株S.C-1耐热性好并能在41℃下生长。以这3株菌为亲本,通过2轮原生质体融合获得融合子菌株RH2-16,对2-PE的耐受性提高了20%。以L-苯丙氨酸为底物,发酵转化36 h,2-PE产量达到4.31 g/L,与亲本菌株LSC-1和2-PE工业生产菌株CWY132相比,分别提高26.4%和38.1%。利用CRISPR/Cas9系统,在RH2-16中构建了含突变的Ras特异性鸟嘌呤核苷酸交换因子CDC25(W1416C)菌株,2-PE的产量提高了8%。在RH2-16中过表达艾氏途径合成2-PE关键基因ARO8,ARO10和ADH2未能提高2-PE产量。研究为筛选合成2-PE等天然产物的新型酿酒酵母菌株及其育种提供了一种有效策略。

关键词：酿酒酵母 2-苯乙醇耐受性原生质体融合 CRISPR/Cas9

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产细菌素乳酸菌原生质体融合

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中国食品学报 2017年第7期17卷 214-220页

作者：姜雄韬顾青浙江工商大学食品与生物工程学院浙江省食品微生物技术研究重点实验室杭州310018

原生质体融合是一种直接有效的生物技术手段,可以快速改变微生物性状。作为一种20世纪70年代发展起来的基因重组技术,它有着其它技术无可比拟的优势,可以克服种间的不育性,使融合子同时具有双亲的优良性状。植物乳杆菌ZJ316具有良好的... 详细信息

原生质体融合是一种直接有效的生物技术手段,可以快速改变微生物性状。作为一种20世纪70年代发展起来的基因重组技术,它有着其它技术无可比拟的优势,可以克服种间的不育性,使融合子同时具有双亲的优良性状。植物乳杆菌ZJ316具有良好的抑菌性,本试验中通过原生质体融合技术进一步提高其抑菌活性。群体感应系统(QS系统)在细菌素调控合成过程中起着重要的作用。本实验室对植物乳杆菌ZJ316全基因组进行测序,发现其QS系统中缺少两个重要的调控基因:plnC和plnD。然而,通过PCR验证,发现另一株具有良好抑菌活性的植物乳杆菌ZJQ基因组中含有plnC和plnD基因,说明成功获得植物乳杆菌ZJ316与植物乳杆菌ZJQ原生质体融合子,增加了细菌素产量,提高了抑菌活性。

关键词：原生质体融合细菌素抑菌活性

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利用原生质体融合技术构建葡萄糖、木糖共发酵酵母菌株

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太阳能学报 2013年第2期34卷 343-348页

作者：张明婷朱顺妮庄新姝袁振宏杨秀山首都师范大学生命科学学院北京100048 中国科学院广州能源研究所可再生能源与天然气水合物重点实验室广州510640

为了构建能同时发酵葡萄糖和木糖的酵母重组菌株,采用双灭活原生质体技术,通过聚乙二醇将树干毕赤酵母(Pichia stipitis)NRRL Y-7124与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)NRRL Y-2034进行融合,选育出一株遗传性能稳定且发酵木糖产乙醇... 详细信息

为了构建能同时发酵葡萄糖和木糖的酵母重组菌株,采用双灭活原生质体技术,通过聚乙二醇将树干毕赤酵母(Pichia stipitis)NRRL Y-7124与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)NRRL Y-2034进行融合,选育出一株遗传性能稳定且发酵木糖产乙醇性能显著提高的优良融合菌株F11。融合子F11在60g/L木糖中发酵,乙醇产量较亲本提高30.27%,达到20.09g/L;在60g/L混合糖(葡萄糖:木糖=1:3)发酵中,融合子F11的乙醇最高产量为22.52g/L,比亲本提高29.7%,同时融合子的耐乙醇能力也明显增强。

关键词：树干毕赤酵母酿酒酵母原生质体融合发酵

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生产纤维素乙醇的原生质体融合菌株的构建

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太阳能学报 2011年第7期32卷 1046-1051页

作者：曹萌宫彦婷张宜门珣杨非杨秀山田沈首都师范大学生命科学学院北京100048 北京军区总医院信息科北京100700

为了获得耐发酵抑制剂、耐乙醇并利用木糖的纤维素乙醇生产菌种,以实验室保藏菌种Saccharomyces cerevisiaeY5和Pichia stipitis CBS6054为亲本,采用双亲灭活原生质体融合技术,选育出了共代谢葡萄糖和木糖,且耐受发酵抑制剂的酵母菌株Y1... 详细信息

为了获得耐发酵抑制剂、耐乙醇并利用木糖的纤维素乙醇生产菌种,以实验室保藏菌种Saccharomyces cerevisiaeY5和Pichia stipitis CBS6054为亲本,采用双亲灭活原生质体融合技术,选育出了共代谢葡萄糖和木糖,且耐受发酵抑制剂的酵母菌株Y10-F。该菌在以木糖为唯一碳源的培养基中培养96h,木糖的利用率达到58.8%,乙醇浓度为5.2g/L。在外加6.0、8.0g/L乙醇的培养液中,Y10-F的生长优于亲株。外加3.0g/L的糠醛时,Y10-F的延滞期较亲本Y5和CBS6054分别缩短了6h和18h。对融合菌株Y10-F进行了汽爆法预处理玉米秸秆的酶解液发酵实验,具有较好的耐毒和产乙醇能力。

关键词：原生质体融合酿酒酵母树干毕赤酵母乙醇发酵

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原生质体融合技术改良植病生防木霉菌株

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中国生物防治 2005年第4期21卷 247-253页

作者：杨合同 Maarten H.Ryder 唐文华李纪顺郭勇周红姿山东省科学院生物研究所 CSIRO Land and Water PMB2 Glen Osmond SA 5064 Australia 中国农业大学植物病理系北京100094

以产孢量大,对苯菌灵有抗性,对潮霉素B敏感的哈茨木霉菌株T9和产孢量少,对潮霉素B有抗性,对苯菌灵敏感的康宁木霉菌株Tk7a为亲本,进行原生质体融合,筛选获得抗最高浓度杀菌剂的融合子。所有融合子的产孢量均比亲本菌株Tk7a大。融合子按... 详细信息

以产孢量大,对苯菌灵有抗性,对潮霉素B敏感的哈茨木霉菌株T9和产孢量少,对潮霉素B有抗性,对苯菌灵敏感的康宁木霉菌株Tk7a为亲本,进行原生质体融合,筛选获得抗最高浓度杀菌剂的融合子。所有融合子的产孢量均比亲本菌株Tk7a大。融合子按照菌落形态的不同分成4组,大部分融合子的几丁质酶、葡聚糖酶和内切葡聚糖酶的活性比亲本菌株高。融合子对棉花猝倒病菌和小麦全蚀病菌的寄生能力基本等同于亲本菌株;融合子对小麦全蚀病的防效比亲本菌株稍好,其刺激麦苗根部生长的能力与亲本菌株相差不大。两个融合子根际竞争能力比亲本菌株T9强,和亲本菌株Tk7a相当。

关键词：木霉杀菌剂抗性原生质体融合生物防治小麦全蚀病

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原生质体融合提高农抗武夷菌素的效价

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微生物学报 1995年第5期35卷 375-380页

作者：曾洪梅张震霖石义萍林德炘中国农业科学院植物保护研究所北京100094

从农抗武夷菌素产生菌不吸水链霉菌武夷变种菌株Co-N-31诱变获得两个突变株M35(Leu^-,孢子颜色灰色)和M46(ser^-.孢子颜色灰白色),并以此两突变株为直接亲本在25％ PEG1000诱导下进行种内原生质体融合。M35和M46原生质体再生率分别为3.7... 详细信息

从农抗武夷菌素产生菌不吸水链霉菌武夷变种菌株Co-N-31诱变获得两个突变株M35(Leu^-,孢子颜色灰色)和M46(ser^-.孢子颜色灰白色),并以此两突变株为直接亲本在25％ PEG1000诱导下进行种内原生质体融合。M35和M46原生质体再生率分别为3.72％和0.248％,重组频率为55.20％。采用间接法选择营养标记互补的稳定的原养型重组子,并从中获得一株高产菌株F31-24;其效价比原始亲本Co-N-31提高了82％。薄层层析结果表明,菌株F31-24和Co-N-31的发效产物在Rf值为0.50和0.26处均有斑点,但含量有异。测定斑点生物活性证明其均有抑菌活性。温室试验表明,菌株F31-24发酵产物对小麦白粉病的防治效果优于菌株Co-N-31。

关键词：原生质体融合武夷菌素农用抗生素发酵

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