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去卵巢骨质疏松大鼠骨组织和骨髓细胞FoxO1蛋白在全身垂直振动条件下的变化

中国组织工程研究 2014年第42期18卷 6737-6741页

作者：文思敏卜淑敏高梦锦首都体育学院北京市100191 山西大学商务学院山西省太原市030031

背景:FoxO1蛋白参与多种多样的细胞和生理过程,包括细胞增殖与凋亡、活性氧的反应、长寿、癌症、细胞周期和代谢的调节等。研究认为振动负荷能促进新陈代谢,延缓肌肉疲劳,加速骨适应性重建。目的:进一步验证全身垂直振动对去卵巢骨质疏... 详细信息

背景:FoxO1蛋白参与多种多样的细胞和生理过程,包括细胞增殖与凋亡、活性氧的反应、长寿、癌症、细胞周期和代谢的调节等。研究认为振动负荷能促进新陈代谢,延缓肌肉疲劳,加速骨适应性重建。目的:进一步验证全身垂直振动对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织和骨髓细胞叉头框转录因子O亚族1(FoxO1)蛋白表达的影响。方法:将36只健康3月龄雌性SD大鼠,按体质量分层后随机分为假手术组、去卵巢静止组和去卵巢振动组。在手术后第11周,对去卵巢振动组大鼠实施7周每天不间断的全身垂直振动治疗,2次/d,每次振动训练15 min,间隔10 min,振动频率为90 Hz,振动幅度为0.5 mm。于末次处理结束24-48 h内,游离各组大鼠第5腰椎、右侧股骨和胫骨,用双能X射线骨密度仪检测右股骨和第5腰椎的离体骨密度,用Western blot检测右胫骨近端和骨髓细胞FoxO1蛋白的表达。结果与结论:骨密度检测结果显示,与去卵巢静止组比较,去卵巢振动组大鼠股骨远端和近端以及第5腰椎骨密度显著增加,而股骨中段无显著变化。Western blot检测结果显示:FoxO1蛋白在胫骨组织中不表达,但在骨髓细胞中表达。与假手术组比较,去卵巢静止组大鼠骨髓细胞FoxO1蛋白表达水平无显著变化;与去卵巢静止组比较,去卵巢振动组大鼠骨髓细胞FoxO1蛋白表达水平显著下降。结果表明,全身垂直振动能抑制FoxO1蛋白在去卵巢大鼠骨髓细胞中的表达。

关键词：组织构建骨组织工程全身垂直振动去卵巢骨质疏松大鼠绝经后骨质疏松叉头框转录因子O亚族1(FoxO1)

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氯化锂对去卵巢骨质疏松大鼠骨微结构和骨髓基质细胞分化的影响

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中国组织工程研究 2015年第41期19卷 6584-6589页

作者：郭盖卜淑敏陈冠洁首都体育学院北京市100191

背景:骨质疏松是一种好发于绝经后妇女的慢性骨代谢疾病,随着世界人口老龄化的增加,如何预防和治疗绝经后骨质疏松是目前困扰医疗界的一大难题。目的:探讨氯化锂对去卵巢骨质疏松大鼠骨微结构和骨髓基质细胞分化的影响。方法:将30只3月... 详细信息

背景:骨质疏松是一种好发于绝经后妇女的慢性骨代谢疾病,随着世界人口老龄化的增加,如何预防和治疗绝经后骨质疏松是目前困扰医疗界的一大难题。目的:探讨氯化锂对去卵巢骨质疏松大鼠骨微结构和骨髓基质细胞分化的影响。方法:将30只3月龄雌性健康未孕SD大鼠去卵巢,因2只大鼠由于感染死亡,将剩下28只大鼠随机分为去卵巢体内组(9只)、去卵巢体外组(10只)和氯化锂组(9只)。手术后第11周,氯化锂组按照体质量每周腹腔注射3次氯化锂,剂量为15 mg/kg,干预8周后,用micro-CT检测9只去卵巢体内组和9只氯化锂组大鼠左侧股骨的骨微结构。10只去卵巢体外组大鼠的双侧股骨和胫骨用于骨髓基质细胞的培养,接种24 h后加入氯化锂,分为0 mmol/L(对照组)、1 mmol/L组和5 mmol/L组,培养至第6天和第8天更换培养基并加入相应浓度氯化锂,培养第10天处理细胞,用Western blot检测其SP7、Runx2和PPARγ2蛋白的表达水平。结果与结论:1体内结果表明,氯化锂组体积骨密度、骨体积分数和骨小梁数目显著高于去卵巢体内组,骨小梁间隙显著低于去卵巢体内组,而骨小梁厚度和结构模型指数无显著变化。2体外结果表明,1 mmol/L和5 mmol/L氯化锂组骨髓基质细胞Sp7和Runx2蛋白表达水平显著高于对照组,而PPARγ2蛋白表达水平显著低于对照组。3以上实验结果表明,氯化锂可能是通过促进去卵巢骨质疏松大鼠骨髓基质细胞向成骨分化而改善去卵巢骨质疏松大鼠的骨微结构。

关键词：骨质疏松,绝经后氯化锂糖原合成酶激酶3 组织工程干细胞骨髓干细胞去卵巢骨质疏松大鼠骨髓基质细胞 Micro-CT 成骨分化成脂分化 SP7

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促胰液素对去卵巢骨质疏松大鼠血清骨转换指标和骨密度的影响

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中国骨质疏松杂志 2019年第5期25卷 696-699,708页

作者：张佳锋陈文亮毛一凡刘钟梁博程史晓林浙江中医药大学浙江杭州310053 浙江中医药大学附属第二医院浙江杭州310005

目的观察促胰液素(secretin,SCT)对去卵巢骨质疏松大鼠骨转换指标和骨密度的影响。方法采用双侧卵巢去除法制备绝经后骨质疏松大鼠模型,将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型对照组、雌激素治疗组和促胰液素治疗组,每组各15只。干预3个月... 详细信息

目的观察促胰液素(secretin,SCT)对去卵巢骨质疏松大鼠骨转换指标和骨密度的影响。方法采用双侧卵巢去除法制备绝经后骨质疏松大鼠模型,将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型对照组、雌激素治疗组和促胰液素治疗组,每组各15只。干预3个月后,测定腰椎骨密度(bone mineral density,BMD),采取ELISA法测定血清I型胶原N前端肽(procollagen I N-Terminal propeptide,PINP)和I型胶原C末端肽(collagen type I C-terminal cross-linked telopeptide,CTX),另使用STRING10.0蛋白相互作用网络分析工具分析骨质疏松相关差异蛋白。结果与假手术组比较,模型对照组、雌激素治疗组、促胰液素治疗组的PINP含量升高(P<0.05),模型对照组的CTX含量升高(P<0.05),模型对照组的BMD下降(P<0.05),雌激素治疗组和促胰液素治疗组的CTX、BMD含量无显著差异(P>0.05);与模型对照组比较,雌激素治疗组、促胰液素治疗组PINP、CTX含量有所下降,而BMD含量升高(P<0.05);雌激素组与促胰液素组之间PINP、CTX、BMD含量无显著差异(P>0.05)。结论促胰液素能改善去卵巢骨质疏松大鼠的PINP和CTX含量,增加骨密度,抑制骨质丢失,具有较好的抗骨质疏松效果。

关键词：促胰液素去卵巢骨质疏松大鼠骨转换指标骨密度动物实验

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去卵巢骨质疏松大鼠骨髓基质细胞培养前后ERα、ERβ和ERRα蛋白表达的观察

去卵巢骨质疏松大鼠骨髓基质细胞培养前后ERα、ERβ和ERRα蛋白...

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中国生理学会第24届全国会员代表大会暨生理学学术大会

作者：郅强卜淑敏首都体育学院细胞分子生物学实验室

目的:观察去卵巢骨质疏松大鼠全骨髓细胞培养前后雌激素受体ERα和ERβ以及雌激素受体相关受体α(ERRα)蛋白表达的变化。方法:将18只健康3月龄未经产雌性SD大鼠随机平分为去卵巢和假手术两个组。术后14周,取左侧股骨,新鲜分离骨髓细胞... 详细信息

目的:观察去卵巢骨质疏松大鼠全骨髓细胞培养前后雌激素受体ERα和ERβ以及雌激素受体相关受体α(ERRα)蛋白表达的变化。方法:将18只健康3月龄未经产雌性SD大鼠随机平分为去卵巢和假手术两个组。术后14周,取左侧股骨,新鲜分离骨髓细胞,一部分直接提取蛋白;另一部分采用静置贴壁法体外培养9天后,收集细胞提取蛋白。然后用western blot方法检测全骨髓细胞培养前后ERα、ERβ和ERRα蛋白表达的变化。取右侧股骨,用双能χ射线骨密度仪检测骨密度的变化。结果:大鼠去卵巢14周后,股骨近端和远端的骨密度显著下降(P<0.05),而股骨干的骨密度没有变化(P﹥0.05)。培养前,去卵巢组大鼠ERα、ERβ和ERRα蛋白表达水平均高于假手术组大鼠(p<0.05)。培养后,去卵巢组ERRα的蛋白表达水平显著低于假手术组大鼠(p<0.01),而ERβ和ERα蛋白表达水平均无显著性变化(p>0.05)。结论:体外培养后,卵巢切除大鼠骨髓基质细胞ERα、ERβ和ERRα蛋白表达水平均显著降低。

关键词：骨髓基质细胞 ERα和ERβ ERRα 绝经后骨质疏松去卵巢骨质疏松大鼠

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去卵巢骨质疏松大鼠骨髓基质细胞GSK-3β/β-catenin信号通路变化观察

去卵巢骨质疏松大鼠骨髓基质细胞GSK-3β/β-catenin信号通路变化...

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中国生理学会第24届全国会员代表大会暨生理学学术大会

作者：郭盖程洋子卜淑敏首都体育学院细胞分子生物学实验室

目的:观察去卵巢骨质疏松大鼠全骨髓细胞培养前后GSK-3β/β-catenin信号通路的变化。方法:将18只健康3月龄未经产雌性SD大鼠随机平分为去卵巢和假手术两个组。术后14周,取左侧股骨,新鲜分离骨髓细胞,一部分直接提取蛋白;另一部分采用... 详细信息

目的:观察去卵巢骨质疏松大鼠全骨髓细胞培养前后GSK-3β/β-catenin信号通路的变化。方法:将18只健康3月龄未经产雌性SD大鼠随机平分为去卵巢和假手术两个组。术后14周,取左侧股骨,新鲜分离骨髓细胞,一部分直接提取蛋白;另一部分采用静置贴壁法体外培养9天后,收集细胞提取蛋白。然后用western blot方法检测全骨髓细胞培养前后GSK-3β和β-catenin蛋白表达的变化。取右侧股骨,用双能直线χ射线骨密度仪检测骨密度的变化。结果:大鼠去卵巢14周后,股骨近端和远端的骨密度显著下降(P<0.05),而股骨干的骨密度没有变化(P﹥0.05)。培养前,无论是假手术组大鼠还是去卵巢骨质疏松大鼠的全骨髓细胞中均检测不到β-catenin蛋白的表达。培养后,去卵巢大鼠骨髓基质细胞中β-catenin蛋白的表达水平显著低于假手术组大鼠(P<0.01);培养前,去卵巢大鼠全骨髓细胞P-GSK-3β/GSK-3β蛋白表达水平的比值显著低于假手术组大鼠(P<0.01),而培养后却显著高于假手术组大鼠(P<0.05)。结论:体外培养后,卵巢切除大鼠骨髓基质细胞P-GSK-3β/GSK-3β蛋白表达水平的比值显著升高,而β-catenin蛋白表达水平却显著下降。

关键词：骨髓基质细胞 GSK-3β/β-catenin 绝经后骨质疏松骨密度去卵巢骨质疏松大鼠

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不同干预疗法对去卵巢骨质疏松大鼠骨微结构影响的对比研究

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中国运动医学杂志 2016年第3期35卷 257-261页

作者：卜淑敏杨涵韩天雨首都体育学院北京100191

目的:对比观察跑台运动、全身垂直振动、金雀异黄酮和雌激素对去卵巢骨质疏松大鼠股骨和腰椎骨微结构的影响,为绝经后骨质疏松的防治提供理论参考依据。方法:将60只3月龄雌性SD大鼠按体重分层后随机分为假手术组(10只)和去卵巢组(50只)... 详细信息

目的:对比观察跑台运动、全身垂直振动、金雀异黄酮和雌激素对去卵巢骨质疏松大鼠股骨和腰椎骨微结构的影响,为绝经后骨质疏松的防治提供理论参考依据。方法:将60只3月龄雌性SD大鼠按体重分层后随机分为假手术组(10只)和去卵巢组(50只)。去卵巢10周时,将去卵巢组大鼠按体重分层后又随机分为去卵巢组、跑台运动组、振动训练组、金雀异黄酮组和雌激素组,并开始进行不同的干预处理。干预处理8周时,腹主动脉取血处死各组大鼠,游离左股骨和第5腰椎,从每组随机取6只大鼠的左股骨和第5腰椎行micro-CT扫描及三维结构重建,选取股骨远端和第5腰椎椎体距生长板1 mm处,2.0mm×3.5 mm、厚0.9 mm的骨组织区域为感兴趣区域,进行骨形态计量学分析。结果:与去卵巢组比较,去卵巢大鼠经全身垂直振动和雌激素干预后,股骨体积骨密度(v BMD)、骨体积分数(BV/TV)和骨小梁数目(Tb.N)显著增加,骨小梁间隙(***)显著下降,骨小梁厚度(***)和结构模型指数(SMI)无显著变化。经跑台运动和金雀异黄酮干预后,***显著下降,其他指标无显著变化;去卵巢大鼠经跑台运动、全身振动、金雀异黄酮和雌激素干预后,第5腰椎所有检测指标均无显著变化。结论:全身垂直振动和雌激素对去卵巢骨质疏松大鼠股骨骨微结构的改善效应大于跑台运动和金雀异黄酮,且对股骨的改善效应大于腰椎。

关键词：去卵巢骨质疏松大鼠骨微结构 micro-CT

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全身振动对去卵巢骨质疏松大鼠治疗作用的机制研究

全身振动对去卵巢骨质疏松大鼠治疗作用的机制研究

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作者：张洋首都体育学院

学位级别：硕士

实验目的：通过研究全身振动训练对去卵巢骨质疏松大鼠血清性激素水平、骨密度以及骨组织PPARγ和GSK-3β蛋白表达的影响，探讨全身振动治疗绝经后骨质疏松的作用机制，为临床治疗绝经后骨质疏松提供理论参考依据。实验方法：3月龄雌性S... 详细信息

实验目的：通过研究全身振动训练对去卵巢骨质疏松大鼠血清性激素水平、骨密度以及骨组织PPARγ和GSK-3β蛋白表达的影响，探讨全身振动治疗绝经后骨质疏松的作用机制，为临床治疗绝经后骨质疏松提供理论参考依据。实验方法：3月龄雌性SD大鼠36只，按体重分层后随机分为假手术（12）与去卵巢手术（24）两组。腹腔注射10％水合氯醛（3ml/kg）麻醉大鼠后，去卵巢组从背部切除两侧卵巢，假手术组未去除卵巢，但切除卵巢周边和卵巢相等大小的脂肪组织。1周后将去卵巢手术组大鼠按体重又随机分成去卵巢静止组（12只）和去卵巢振动组（12只）。去卵巢手术10周后，去卵巢振动组每天进行2次全身垂直振动治疗，每次振动时间15min，间隔10分钟，振动频率90HZ，每周7天，共训练7周。所有振动治疗均在上午进行，各组大鼠同等条件饲养。振动治疗7周后，首先采用双能χ线骨密度仪检测在体全身骨密度、骨矿含量和体成分，然后于末次振动的24-36小时内处死动物。处死前，大鼠禁食12h，腹腔注射10％水合氯醛（3ml/kg）麻醉，腹主动脉取血后，分离血清、腰椎、股骨和胫骨，采用双能χ线骨密度仪检测离体腰椎、股骨和胫骨的骨密度；采用721分光光度计，检测血清雌激素(E2)、孕酮(P)、睾酮(T4)和甘油三脂(TG)水平；采用Western blotting检测股骨和胫骨GSK-3β、P-GSK-3β和PPARγ蛋白表达的变化。实验结果：（1）去卵巢静止组大鼠体重显著高于假手术组，去卵巢振动组大鼠振动前后增加的重量显著低于去卵巢静止组。（2）去卵巢振动组大鼠血清TC和TG水平显著低于去卵巢静止组，但二组血清E2、P和T4水平差异无显著性。（3）去卵巢振动组大鼠骨组织碱性磷酸酶水平显著高于去卵巢静止组，而二组血清碱性磷酸酶水平差异无显著性。（4）去卵巢振动组股骨远端和近端的离体骨密度显著高于去卵巢静止组，而中段差异无显著性。（5）去卵巢振动组大鼠后肢骨组织PPARγ蛋白表达水平显著低于去卵巢静止组，而P-GSK-3β蛋白表达水平显著高于去卵巢静止组。结论：（1）全身垂直振动可以抑制去卵巢骨质疏松大鼠体重的增加，减少脂肪含量，增加瘦体含量；（2）全身垂直振动对去卵巢骨质疏松大鼠血清性激素E2、P、T4没有影响，但却可以降低血清TC和TG水平；（3）全身垂直振动能增加去卵巢骨质疏松大鼠骨组织ALP水平；（4）全身垂直振动能减缓去卵巢骨质疏松大鼠大鼠腰椎、股骨远端、股骨近端、胫骨近端骨量的丢失；（5）全身垂直振动能够降低去卵巢骨质疏松大鼠后肢骨组织PPARγ蛋白表达水平；（6）全身垂直振动能够增加去卵巢骨质疏松大鼠后肢骨组织P-GSK-3β蛋白的表达水平。

关键词：全身振动去卵巢骨质疏松大鼠骨密度体成分 PPARγ GSK-3β

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流体剪应力对去卵巢骨质疏松大鼠破骨细胞骨吸收功能的影响

流体剪应力对去卵巢骨质疏松大鼠破骨细胞骨吸收功能的影响

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作者：刘应芬四川大学

学位级别：硕士

研究背景骨质疏松症（Osteoporosis，OP）是中老年人的一种常见病，是以骨量减少、骨组织微观结构退化为特征，致使骨的脆性增高而骨折危险性增加的一种全身性疾病。一般情况下，3位女性有1人易患骨质疏松症，而男性一般是12人中有1人... 详细信息

研究背景骨质疏松症（Osteoporosis，OP）是中老年人的一种常见病，是以骨量减少、骨组织微观结构退化为特征，致使骨的脆性增高而骨折危险性增加的一种全身性疾病。一般情况下，3位女性有1人易患骨质疏松症，而男性一般是12人中有1人患骨质疏松症。可见，骨质疏松症是发病率、死亡率和医疗保健消耗较大的疾病。因此，骨质疏松症的预防和治疗是很重要的。影响骨质疏松症发生发展的因素有很多，力学负荷是其重要因素之一。体外研究已证实，力学负荷在正常骨组织的发育过程中具有重要的作用。骨组织中的腔隙结构构成纵横交错的三维网络，这些腔隙中充满了组织液。正常活动对骨组织施加的机械负荷，将引起这些腔隙体积的变化，从而形成液压促进流动，因此认为在骨组织内，这种液体的流动产生的剪应力可能在骨的生长发育过程中发挥了重要作用。然而，破骨细胞对剪应力是否敏感，破骨细胞是如何将力学刺激信号转换成生物化学信号，在骨质疏松中破骨细胞对力学刺激的敏感性是否有变化，目前仍不清楚。因此，我们假设，破骨细胞和前提破骨细胞是剪应力敏感细胞，破骨细胞表面integrinαvβ3参与破骨细胞中力学信号转导。本研究的目的就是：1)探讨剪应力对正常和去卵巢骨质疏松大鼠破骨细胞骨吸收功能活性的影响；2)探讨破骨细胞integrinαvβ3在力学信号传导中可能的分子机理。研究方法 1．骨质疏松动物模型的建立选用健康6月龄雌性未生育Sprague-Dawley（SD）大鼠，采用双侧卵巢切除术，建立模拟人绝经后骨质疏松动物模型。动物实验分为2组：对照组（control），不切除卵巢、卵巢切除组（ovx），切除双侧卵巢。手术后3个月处死动物，检测动物体重、子宫重量；做骨组织病理学切片，观察骨组织形态学和骨细胞功能活性的变化，以确定模型建立成功。 2．破骨细胞体外培养无菌分离大鼠腰椎(L1-5)，采用机械分离法和1，25-（OH）2VitD3全骨髓诱导法相结合，从大鼠椎骨骨髓细胞中获取破骨细胞，以细胞形态、TRAP染色阳性、骨吸收陷窝的形成、细胞骨架等指标观察、鉴定破骨细胞。 3．羟基磷灰石涂层盖玻片的制备由于对骨片的加力装置设计较难，考虑人体内骨组织无机成分主要是羟基磷灰石。因此，我们采用羟基磷灰石涂层血盖片的方法来模拟体内骨基质吸收情况。以Ca（NO3）2·4H2O和P2O5为原材料，采用溶胶-凝胶法制备羟基磷灰石涂层盖玻片，模拟破骨细胞在骨片上的骨吸收情况。 4．剪应力对破骨细胞功能活性影响的检测 1)采用本室自制的流体剪应力加载系统对所选用的破骨细胞分别施加0、5.97、11.36、16.08、20.54dyne/cm2的剪应力，作用30min；每次剪应力作用结束后，收集灌流液10ml冻存，备用。用紫外分光光度仪检测TRAP活性；采用羟基磷灰石涂层盖玻片模拟体内骨基质吸收情况，以扫描电子显微镜和图像分析软件检测骨吸收陷窝数量和面积，观察不同剪应力强度对正常和骨质疏松大鼠破骨细胞功能活性的影响； 2)再根据以上实验结果，选取对破骨细胞功能活性影响最大的剪应力强度，观察剪应力作用不同时间，正常和骨质疏松大鼠破骨细胞骨吸收功能活性的变化； 5．剪应力对破骨细胞表面用integrinαvβ3表达影响的检测采用细胞免疫组织化学技术检测剪应力作用对破骨细胞表面integrinαvβ3表达的影响 6．破骨细胞表面integrinαvβ3表达量与破骨细胞骨吸收功能关系分析用integrinβvβ3单克隆抗体（sc-7312）孵育破骨细胞30min，阻断破骨细胞表面integrinαvβ3的表达，对破骨细胞作用相同的剪应力，同样用扫描电子显微镜技术和图像分析软件分析破骨细胞骨吸收功能的变化。结果 1．去卵巢手术后3个月，OVX组大鼠体重明显增加（p＜0.01）；子宫明显萎缩，重量降低（p＜0.01）；骨组织病理学切片显示骨小梁分离、断裂，数量减少，骨髓腔内含有大量脂肪细胞，骨胶原中有大量新生胶原纤维形成，破骨细胞骨吸收残迹明显增加，符合骨质疏松的特点。 2．以机械分离法和1，25-（OH）2VitD3全骨髓诱导法相结合从大鼠椎骨骨髓细胞中获取破骨细胞，在诱导培养第7天，所获破骨细胞数量最多，TRAP活性最佳。且在培养第1天骨质疏松组大鼠破骨细胞数和TRAP活性高于正常大鼠组。 3．羟基磷灰石（HA）涂层盖玻片可模拟骨基质吸收情况，破骨细胞在HA盖玻片上培养可以形成骨吸收陷窝。 4．在我们所选用的剪应力范围内，作用破

关键词：流体剪应力羟基磷灰石 integrinαvβ3 破骨细胞去卵巢骨质疏松大鼠

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全身垂直振动对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织微结构和强度的影响

全身垂直振动对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织微结构和强度的影响

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作者：文思敏首都体育学院

学位级别：硕士

研究目的：通过研究全身垂直振动对去卵巢骨质疏松大鼠体重、子宫重量、腹腔内脂肪重量、骨密度、血清E2水平、骨组织微结构、骨生物力学性能指标以及骨组织和骨髓细胞中FoxO1蛋白表达的影响，试图探讨全身垂直振动防治绝经后骨质疏松... 详细信息

研究目的：通过研究全身垂直振动对去卵巢骨质疏松大鼠体重、子宫重量、腹腔内脂肪重量、骨密度、血清E2水平、骨组织微结构、骨生物力学性能指标以及骨组织和骨髓细胞中FoxO1蛋白表达的影响，试图探讨全身垂直振动防治绝经后骨质疏松症的机制，为绝经后骨质疏松症的临床治疗和预防提供参考依据。研究方法：将36只健康3月龄雌性SD大鼠，按体重分层后随机分为假手术组（Sham）、去卵巢静止组（OVX）和去卵巢振动组（OVX+Vit）。在手术后第11周，对去卵巢振动组实施7周每天不间断的全身垂直振动治疗，每天2次，每次振动训练15min，间隔10分钟，振动频率为90Hz，振动幅度为0.5mm。实验结束后，取各组大鼠腹主动脉血液后分离血清，游离各组大鼠子宫、腹腔内脂肪、双侧下肢和第5腰椎。用电子天平秤量子宫重量和腹腔内脂肪重量，用放射免疫法测定血清E2水平，用双能X线骨密度仪测定第5腰椎和左股骨近端、中段和远端三个部位的骨密度，用micro-CT检测骨组织微结构和骨形态计量学指标，用三点弯曲和椎体压缩试验检测骨生物力学性能指标，用免疫印迹法（Western blot）检测骨组织和骨髓细胞中叉头框转录因子1（FoxO1）蛋白的表达。研究结果：（1）大鼠去卵巢后，体重极显著增加，子宫重量极显著降低，腹腔内脂肪重量较假手术组有所升高，但差异无显著性；去卵巢骨质疏松大鼠经全身垂直振动治疗后，振动前后增加的体重量显著低于去卵巢静止组，子宫重量和腹腔内脂肪重量差异无显著性。（2）游离骨密度检测结果显示：去卵巢静止组大鼠股骨和椎骨骨密度均显著低于假手术组，而去卵巢振动组大鼠股骨和椎骨骨密度均显著高于去卵巢静止组。（3）血清E2水平检测结果显示：去卵巢静止组大鼠血清E2水平显著低于假手术组大鼠，而去卵巢振动组大鼠血清E2水平与去卵巢静止组差异无显著性。（4）股骨及腰椎骨微结构及骨形态计量学结果显示：去卵巢静止组股骨远端和第5腰椎体积骨密度、骨体积分数、骨小梁数目、骨小梁厚度均显著低于假手术组，而骨小梁分离度和结构模拟指数均显著高于假手术组；与去卵巢静止组比较，去卵巢振动组股骨体积骨密度、骨体积分数和骨小梁数目显著增加，骨小梁分离度显著下降，骨小梁厚度和结构模拟指数差异无显著性，而去卵巢振动组大鼠第5腰椎所有检测指标与去卵巢静止组比较差异均无显著性。（5）骨生物力学性能结果显示：结构力学性能指标中，去卵巢静止组大鼠股骨最大载荷、弹性载荷、最大挠度和破坏载荷均显著低于假手术组；与去卵巢静止组比较，去卵巢振动组大鼠股骨最大载荷、最大挠度和破坏载荷显著增加。去卵巢静止组大鼠椎骨破坏载荷和最大挠度显著低于假手术组；与去卵巢静止组比较，去卵巢振动组大鼠椎骨破坏载荷显著增加。材料力学性能指标中，去卵巢静止组大鼠股骨最大应力、弹性应力和弹性模量显著低于假手术组；与去卵巢静止组比较，去卵巢振动组大鼠股骨材料力学性能所有指标差异均无显著性。去卵巢静止组大鼠椎骨最大应力和弹性模量均显著低于假手术组；与去卵巢静止组比较，去卵巢振动组大鼠椎骨破坏应变显著增加。（6）Western blot检测结果显示：FoxO1蛋白在胫骨组织中不表达，但在骨髓细胞中有表达。与假手术组比较，去卵巢静止组大鼠骨髓细胞中FoxO1蛋白表达量差异无显著性；与去卵巢静止组比较，去卵巢振动组大鼠骨髓细胞中FoxO1蛋白表达量显著降低。研究结论：全身垂直振动能抑制去卵巢骨质疏松大鼠体重的增加，能增加去卵巢骨质疏松大鼠股骨及腰椎骨密度，能够改善去卵巢骨质疏松大鼠股骨松质骨的微结构，但不能改善其腰椎松质骨的微结构，能够提高股骨和椎骨的骨生物力学性能，能够抑制FoxO1蛋白在骨髓细胞中的表达。

关键词：全身垂直振动去卵巢骨质疏松大鼠绝经后骨质疏松症松质骨骨微结构骨生物力学叉头框转录因子O亚族1

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全身振动对去卵巢骨质疏松大鼠三种组织ER蛋白表达的影响

全身振动对去卵巢骨质疏松大鼠三种组织ER蛋白表达的影响

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作者：高颖晖首都体育学院

学位级别：硕士

研究目的：通过研究全身振动训练对去卵巢骨质疏松大鼠体成分指标、血清指标、骨密度以及三种组织中ER基因表达的影响,探讨全身振动治疗绝经后骨质疏松作用机制。研究方法：3月龄雌性SD大鼠36只,分为假手术(12只)与去卵巢手术(24只)两组... 详细信息

研究目的：通过研究全身振动训练对去卵巢骨质疏松大鼠体成分指标、血清指标、骨密度以及三种组织中ER基因表达的影响,探讨全身振动治疗绝经后骨质疏松作用机制。研究方法：3月龄雌性SD大鼠36只,分为假手术(12只)与去卵巢手术(24只)两组。1周后将去卵巢手术组大鼠再随机平均分成去卵巢静止组和去卵巢振动组。去卵巢手术10周后,去卵巢振动组每天进行2次全身垂直振动训练,每次振动时间15mmin,间隔10分钟,振动频率90HZ,每周7天,共训练7周。振动训练7周后,采用双能χ线骨密度仪检测在体全身骨密度、骨矿含量和体成分,然后于末次振动的24-36小时内处死动物。处死前腹主动脉取血后,分离血清、腰椎、股骨和胫骨,检测离体腰椎、股骨和胫骨的骨密度；检测血清雌激素(E2)、孕酮(P)、睾酮(T4)水平；采用RT-PCR检测大鼠肝脏、骨骼肌和脂肪组织中ER基因表达水平。研究结果： (1)去卵巢振动组振动训练结束后,增加的重量显著低于去卵巢静止组。(2)去卵巢振动组股骨远端和近端的离体骨密度显著高于去卵巢静止组。(3)去卵巢振动组三种不同组织中ER基因表达水平均有不同程度增加,显著高于去卵巢静止组。研究结论： (1)全身振动训练能够显著降低去卵巢骨质疏松大鼠的体重、减少脂肪含量,改善实验大鼠因卵巢摘除造成的肥胖症状。 (2)全身振动训练对去卵巢骨质疏松大鼠的血清性激素E2、P、T4水平没有产生明显作用。 (3)全身振动训练有效减缓了去卵巢骨质疏松大鼠腰椎、股骨远端、股骨近端、胫骨近端骨量的丢失。 (4)全身振动训练显著提高了去卵巢骨质疏松大鼠ER基因的表达水平,在肝脏、骨骼肌、脂肪组织等测试组织中,ER-α,ER-β,ER-γ三个基因表达水平在振动训练干预下均有不同程度的上调,说明全身振动训练改善因性激素缺乏造成的骨密度下降和体重增加的机理之一,是其促进了大鼠ER基因的表达。

关键词：全身振动去卵巢骨质疏松大鼠骨密度体成分 ER基因

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