检索结果-内蒙古大学图书馆

反向遗传操作技术在瘟病毒属研究中的应用

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中国兽药杂志 2017年第7期51卷 57-63页

作者：洪焜刁乃超李建明时坤杜锐吉林农业大学动物科技技术学院长春130118 吉林农业大学中药材学院长春130118 教育部动物生产及产品质量安全重点实验室吉林省梅花鹿生产与产品应用研究室长春130118

反向遗传操作技术已经成为研究瘟病毒属的一条有效的途径。针对反向遗传技术在瘟病毒属基因结构和功能研究、致病机制研究和新型疫苗研制中的应用以及瘟病毒属的感染性克隆策略的选择进行了综述,以期为预防、控制和消灭瘟病毒属病毒提... 详细信息

反向遗传操作技术已经成为研究瘟病毒属的一条有效的途径。针对反向遗传技术在瘟病毒属基因结构和功能研究、致病机制研究和新型疫苗研制中的应用以及瘟病毒属的感染性克隆策略的选择进行了综述,以期为预防、控制和消灭瘟病毒属病毒提供参考。

关键词：反向遗传操作技术瘟病毒属致病机制应用

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反向遗传操作技术产生全禽源致弱的H5N1亚型禽流感病毒的免疫保护性试验

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中国家禽 2005年第17期27卷 11-13页

作者：石火英张小荣孙学辉刘慧谋刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

利用反向遗传操作技术产生致弱的8基因全禽源的H5N1亚型禽流感病毒rgF-H5△N1,经甲醛灭活制成油苗免疫SPF鸡和有母源抗体的商品鸡。比较拯救的重配病毒rgF-H5△N1和野毒H5N1亚型禽流感病毒油苗免疫后的抗体应答水平、攻毒后发病率和死... 详细信息

利用反向遗传操作技术产生致弱的8基因全禽源的H5N1亚型禽流感病毒rgF-H5△N1,经甲醛灭活制成油苗免疫SPF鸡和有母源抗体的商品鸡。比较拯救的重配病毒rgF-H5△N1和野毒H5N1亚型禽流感病毒油苗免疫后的抗体应答水平、攻毒后发病率和死亡率等指标,评价其免疫和交叉免疫保护作用。结果表明:反向遗传操作技术为构建新型的流感疫苗株提供了更好的方法。

关键词：反向遗传操作技术禽流感病毒疫苗免疫保护作用 H5N1亚型操作技术反向遗传保护性试验致弱禽源

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反向遗传操作技术在猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗研发中的应用

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中国兽医杂志 2011年第10期47卷 54-56页

作者：郭泗虎曹宗喜李海琴闫明菲亓文宝焦培荣张桂红华南农业大学兽医学院农业部兽用疫苗创制重点实验室广东广州510642 海南省农业科学院畜牧兽医研究所海南海口571100

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起猪的一种高度传染性疾病。该病自1987年首次发现以来，已遍及世界各个养猪国家，它所引发的母猪流产和仔猪的呼吸障碍给养猪业造成了灾难性的打击。特别是2006年以... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起猪的一种高度传染性疾病。该病自1987年首次发现以来，已遍及世界各个养猪国家，它所引发的母猪流产和仔猪的呼吸障碍给养猪业造成了灾难性的打击。特别是2006年以来，变异株PRRSV的出现则对我国养猪业的发展产生了巨大的影响。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒反向遗传操作技术病毒疫苗应用研发传染性疾病 PRRSV 养猪业

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用反向遗传操作技术产生致弱的H5亚型重组流感病毒

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微生物学报 2005年第1期45卷 53-57页

作者：卢建红龙进学邵卫星韦栋平刘秀梵张艳梅扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

选择一株鹅源H5N1亚型禽流感病毒 (AIV) ,缺失其HA基因裂解序列的 4个碱性氨基酸、使HA裂解模式由高致病性的PQRERRRKKR↓GL突变为低致病性的PQRESR↓GL ,将修饰的HA基因克隆入转录表达载体pHW2 0 0 0、构建质粒pHW5 2 4_HA ,将该毒株... 详细信息

选择一株鹅源H5N1亚型禽流感病毒 (AIV) ,缺失其HA基因裂解序列的 4个碱性氨基酸、使HA裂解模式由高致病性的PQRERRRKKR↓GL突变为低致病性的PQRESR↓GL ,将修饰的HA基因克隆入转录表达载体pHW2 0 0 0、构建质粒pHW5 2 4_HA ,将该毒株和H9N2亚型毒株的NA全基因分别克隆入pHW2 0 0 0 ,构建质粒pHW5 0 6_NA和pHW2 0 6_NA。将pHW5 2 4_HA与pHW5 0 6_NA或pHW2 0 6_NA组合、均用A WSN 33(H1N1)提供 6个内部基因 ,两个组合的 8个质粒分别共转染COS_1细胞 ,产生了H5N1和H5N2两个亚型的基因重排病毒。通过在鸡胚中的连续传代和适应 ,2个重组病毒血凝价上升到 1∶2 9、表面基因稳定、对 6周龄SPF鸡不表现致病性 ,H5N2重组病毒对鸡胚的毒力低于H5N1病毒。

关键词：禽流感病毒 H5亚型反向遗传操作技术基因重排致弱

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利用反向遗传操作技术产生ZJI株鹅源新城疫病毒

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微生物学报 2005年第5期45卷 780-783页

作者：刘玉良张艳梅胡顺林吴艳涛刘秀梵龙进学石火英张小荣张如宽扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009

利用反向遗传操作技术,将ZJI株鹅源新城疫病毒全基因组cNDA克隆(NDV3GM122)和含该毒株NP、P及L基因的3个表达载体(pCI-NP、pCI-P与pCI-L)共转染BSR-T7/5细胞;同时,将NDV3GM122与含新城疫病毒La Sota毒株NP、P及L基因的3个表达载体(pCIne... 详细信息

利用反向遗传操作技术,将ZJI株鹅源新城疫病毒全基因组cNDA克隆(NDV3GM122)和含该毒株NP、P及L基因的3个表达载体(pCI-NP、pCI-P与pCI-L)共转染BSR-T7/5细胞;同时,将NDV3GM122与含新城疫病毒La Sota毒株NP、P及L基因的3个表达载体(pCIneoNP、pCIneoP与pCIneoL)进行共转染。通过间接免疫荧光实验(Indiectimmunofluorescence assay,IFA)以及接种鸡胚后进行血凝(Hemagglutinin,HA)与血凝抑制(Hemagglutinininhibition,HI)试验、RT-PCR扩增和电镜观察,结果均证实全基因组cDNA克隆NDV3GM122与La Sota毒株表达载体共转染组产生了有血凝性的鹅源新城疫病毒,而NDV3GM122与ZJI株表达载体共转染组暂未检测到有血凝性的病毒。ZJI株鹅源新城疫病毒的拯救成功为对该病毒进行功能基因组研究和疫苗的研制等后续工作打下了基础。

关键词：反向遗传操作技术鹅源新城疫病毒鹅病毒拯救

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H3N2亚型猪流感病毒反向遗传操作技术平台的建立

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中国兽医科学 2015年第8期45卷 781-786页

作者：宫晓倩汪秀会阮宝阳刘晓敏周艳君郑浩童武李泽君童光志于海中国农业科学院上海兽医研究所上海200241

为了构建猪流感病毒A/swine/Heilongjiang/1/2005(H3N2)的反向遗传操作技术平台,利用RT-PCR扩增了H3N2亚型猪流感病毒的8个基因片段,分别连接到pBD双向转录表达载体上。将8个重组质粒纯化后,共转染293T细胞,48h后收集上清,接种MDCK细胞... 详细信息

为了构建猪流感病毒A/swine/Heilongjiang/1/2005(H3N2)的反向遗传操作技术平台,利用RT-PCR扩增了H3N2亚型猪流感病毒的8个基因片段,分别连接到pBD双向转录表达载体上。将8个重组质粒纯化后,共转染293T细胞,48h后收集上清,接种MDCK细胞。当MDCK细胞呈现明显病变时,收集上清,做血凝试验,检测出有血凝现象。通过MDCK细胞病变情况、生长曲线、空斑形态等验证拯救病毒的可靠性,结果发现:野生毒株和拯救毒株在MDCK细胞上引起的病变情况基本一致,生长曲线的测定结果没有明显差异,空斑形态也极其相似。H3N2亚型猪流感病毒的成功拯救为猪流感病毒的致病机理、传播机制、基因功能研究以及疫苗研发奠定了基础。

关键词：猪流感 H3N2亚型反向遗传操作技术生长曲线空斑形态

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人源H3N2亚型猪流感病毒反向遗传操作技术平台的建立

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中国动物传染病学报 2022年第6期30卷 13-18页

作者：姚云张毅峰王帅勇虞凌雪朱世强王娟单同领周艳君童武郑浩李国新童光志于海中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009

为了构建人源H3N2亚型猪流感病毒的反向遗传操作技术平台,利用RT-PCR扩增出流感病毒的8个基因片段,酶切后连接到双向转录表达载体p BD上,将8个重组质粒纯化后转染至293T细胞于54 h后收取上清液并接种MDCK细胞直至出现细胞病变,取上清液... 详细信息

为了构建人源H3N2亚型猪流感病毒的反向遗传操作技术平台,利用RT-PCR扩增出流感病毒的8个基因片段,酶切后连接到双向转录表达载体p BD上,将8个重组质粒纯化后转染至293T细胞于54 h后收取上清液并接种MDCK细胞直至出现细胞病变,取上清液检测出有血凝活性。全基因序列测定结果表明,拯救毒株与野生毒株核苷酸序列比对结果一致,病毒拯救成功。人源H3N2亚型猪流感病毒的成功拯救为猪流感病毒的生物学特性、分子致病机制及疫苗研发奠定了基础。

关键词： RT-PCR 猪流感 H3N2亚型反向遗传操作技术

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反向遗传操作技术在流感病毒研究中的应用进展

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畜牧兽医科技信息 2007年第12期23卷 8-10页

作者：彭永刚耿庆华李梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 辽宁省出入境检验检疫局技术中心沈阳110161

流感病毒属于正粘病毒科,流感病毒属,为单股、负链、分段的RNA病毒.按照病毒核蛋白和基质蛋白的不同可分为A、B和C三个型.A型流感病毒又可根据病毒粒子血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）的不同分为不同的亚型.尽管历史上对流感病毒进行了... 详细信息

流感病毒属于正粘病毒科,流感病毒属,为单股、负链、分段的RNA病毒.按照病毒核蛋白和基质蛋白的不同可分为A、B和C三个型.A型流感病毒又可根据病毒粒子血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）的不同分为不同的亚型.尽管历史上对流感病毒进行了大量的研究工作,但是关于流感病毒决定致病机理和宿主限制性的分子基础却知之甚少;另外流感病毒为什么能够跨越种间的障碍进行传播的机理也无从知晓.

关键词： A型流感病毒反向遗传操作技术应用致病机理正粘病毒科 RNA病毒神经氨酸酶基质蛋白

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反向遗传操作技术在流感病毒研究中的应用

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畜牧与饲料科学 2008年第2期29卷 69-72页

作者：张鹏飞杜山李云章内蒙古农业大学动物科学与医学学院内蒙古呼和浩特010018

笔者从流感病毒及其基因组特征方面介绍病毒反向遗传操作技术体系的建立;从克隆的cDNA产生负义RNA病毒的概况方面,重点叙述流感病毒反向遗传操作技术的发展与应用前景。

关键词：反向遗传操作技术流感病毒病毒拯救

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反向遗传操作技术的发展及趋势

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畜牧兽医科技信息 2014年第3期30卷 16-17页

作者：唐雷葛俊伟韩雪刘志鹏东北农业大学动物医学学院哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所哈尔滨150001 哈尔滨维科开发公司哈尔滨150069

反向遗传学是相对于经典遗传学而言的。经典遗传学是从生物的性状、表型到遗传物质来研究生命的发生与发展规律。反向遗传学则是在获得生物体基因组全部序列的基础上,通过对靶基因进行必要的加工和修饰,如定点突变、基因插入\缺失、基... 详细信息

反向遗传学是相对于经典遗传学而言的。经典遗传学是从生物的性状、表型到遗传物质来研究生命的发生与发展规律。反向遗传学则是在获得生物体基因组全部序列的基础上,通过对靶基因进行必要的加工和修饰,如定点突变、基因插入\缺失、基因置换等,再按组成顺序构建含生物体必需元件的修饰基因组,让其装配出具有生命活性的个体,研究生物体基因组的结构与功能,以及这些修饰可能对生物体的表型、性状有何种影响等方面的内容。与之相关的研究技术称为反向遗传学技术。

关键词：反向遗传操作技术经典遗传学反向遗传学生物体遗传学技术基因组遗传物质定点突变

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