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中国实验血液学杂志 2005年第4期13卷 589-595页

作者：郭健欣潘敬新朱元贵骆永河郭熙哲蔡俊峰李永加李秋兰福建医科大学附属第二医院血液内科泉州362000 福建医科大学附属协和医院老年病研究所福州350001 福建省泉州市中心血站成分输血科泉州362000

为了探讨新型反应性氧代谢物(reactiveoxygenmetabolites,ROM)清除剂在NK细胞抑制K562细胞时作为免疫佐剂的作用,采用IL-2及PHA活化单核(MO)细胞,使MO细胞的ROM产量增加,观察NK细胞活性和K562细胞抑制率(KIR)的相应变化,然后在不同比例... 详细信息

为了探讨新型反应性氧代谢物(reactiveoxygenmetabolites,ROM)清除剂在NK细胞抑制K562细胞时作为免疫佐剂的作用,采用IL-2及PHA活化单核(MO)细胞,使MO细胞的ROM产量增加,观察NK细胞活性和K562细胞抑制率(KIR)的相应变化,然后在不同比例的MO+NK+K562细胞培养体系中加入不同浓度的ROM清除剂(硫普罗宁),定期检测ROM产量及KIR(每种检测均做3个复孔),同时应用不同浓度的二氢氯组胺(DHT)作为阳性对照。结果表明:在K562细胞、NK细胞混合培养体系中,当E/T=10/1时,加入IL-2/PHA后ROM的产量从33.17±25.02U/ml增至223.59±59.41U/ml(P<0.05),KIR从65.56%升至85.89%(P<0.05);当按E/MO=10/2、10/5、10/10三种比例加入MO细胞后,ROM产量随着MO细胞数量的增加而增加(ROM产量分别为389.79±43.83U/ml,456.74±42.77U/ml,601.42±21.92U/ml),而KIR则相反(KIR分别为82.36%,81.36%,48.09%);而在K562+NK+MO+IL-2/PHA混合培养体系中加入硫普罗宁、DHT后,当E/MO=10/2时,ROM产量从389.79±43.83U/ml分别降至-1.20±60.70U/ml和50.21±22.4U/ml(P<0.05),KIR则从82.53%分别升至96.09%和94.64%(P<0.05)。随着硫普罗宁、DHT浓度的增加,ROM产量逐渐减少。ROM产量与KIR呈负相关(r=-0.518)。当E/MO为10/5或10/10时,各浓度硫普罗宁及高浓度的DHT可使ROM产量减少(P<0.05),但KIR提高不明显(P>0.05)。硫普罗宁在提高KIR的效应方面与DHT相似(P>0.05),而在清除ROM方面,硫普罗宁较DHT为优(P<0.05)。结论:①MO细胞是ROM产生的最主要来源,其产生的ROM可使NK细胞的抗瘤(抗K562)活性下降;②新型ROM清除剂(硫普罗宁)可有效清除ROM,在一定程度上逆转ROM对NK细胞抗K562细胞的抑制作用,且在逆转ROM方面优于DHT,在提高NK细胞对K562细胞的抑制率方面效应强度与DHT相似,但毒副作用较低,有望替代DHT作为免疫佐剂用于白血病的过继性免疫治疗中。

关键词：反应性氧代谢物硫普罗宁二氢氯组胺 NK细胞 K562细胞

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反应性氮代谢物及其清除剂影响NK细胞抗K562细胞效应的实验研究

反应性氮代谢物及其清除剂影响NK细胞抗K562细胞效应的实验研究

引用

作者：郑美珠福建医科大学

学位级别：硕士

[目的]:探讨反应性氮代谢物(RNM)对NK细胞抗K562细胞活性的影响及硫普罗宁和还原型谷胱苷肽逆转ROM、RNM抑制NK细胞抗K562细胞活性的免疫佐剂作用。[方法]:1.在NK细胞、K562细胞培养体系中,加入外源性ONOO-,观察RNM和ROM产量、NK细胞活... 详细信息

[目的]:探讨反应性氮代谢物(RNM)对NK细胞抗K562细胞活性的影响及硫普罗宁和还原型谷胱苷肽逆转ROM、RNM抑制NK细胞抗K562细胞活性的免疫佐剂作用。 [方法]:1.在NK细胞、K562细胞培养体系中,加入外源性ONOO-,观察RNM和ROM产量、NK细胞活性变化;2.采用IL-2及PHA为激活剂,使RNM、ROM产量增多,观察KIR和NK细胞活性的相应变化,然后在MO+NK+K562(E/T=10/1,E/MO=10/2)细胞培养体系中加入不同浓度的硫普罗宁、还原型谷胱苷肽和二氢氯组胺,定期检测RNM、ROM产量、KIR及IL-6、TNF-β、IFN-γ的产量。 [结果]:1.在NK细胞、K562细胞培养体系中,加入外源性ONOO-后,K562细胞数量和NK细胞活性显著降低,而RNM、ROM产量增加。2.①在MO细胞培养体系中,随着MO细胞数量的增加,RNM、ROM产量有所上升;而经IL-2/PHA激活后,在MO=10组, RNM从81.8898±0.7874umom/l升至91.0308±0.8956umom/l , ROM从193.1685±9.6505U/ml升至356.4275±5.9642U/ml (P<0.05)。②在NK+K562混合培养体系中,加入IL-2/PHA后,当E/T =10/1时,RNM略有增加,而ROM从58.6326±2.5141U/ml增加到141.915±8.2593U/ml(P<0.05),KIR从79.98%升至93.29%(P<0.05);当按E/MO=10/2、10/5、10/10三种比例加入MO细胞后,RNM、ROM产量随着MO细胞数量的增加而增加,而IL-6、TNF-β、IFN-γ的产量和KIR则相反。对K562细胞数量作偏相关分析,RNM与KIR的负相关系数大于ROM(分别为r= -0.8511,-0.7141)。③在IL-2/PHA+NK+MO+K562混合培养体系中,加入TIP、GSH、DHT后,RNM产量从73.7390±3.7908 umom/l分别降至64.5516±2.1570umom/l、63.0222±2.3090 umom/l、73.1052±1.4528 umom/l,ROM产量从321.5488±10.5030 U/ml分别降至55.1665±7.0950 U/ml、54.6136±5.9515 U/ml、108.6608±6.2110U/ml,而KIR则从65.78%分别上升至84.47%、84.77%、79.56%。随着各药物浓度的增加,RNM、ROM产量逐渐减少,而IL-6、TNF-β、IFN-γ产量和KIR则逐渐升高,KIR与RNM、ROM产量呈明显负相关(P<0.01)。在清除RNM、ROM,提高NK细胞抗K562细胞活性方面,硫普罗宁与还原型谷胱苷肽作用相似(P>0.05),但均优于二氢氯组胺(P<0.05)。 [结论]:1.外源性ONOO-对NK、K562细胞有毒性,并可转化及诱导细胞产生ROM。***细胞是ROM、RNM的最主要来源,而K562细胞、NK细胞也产生少量的ROM、RNM.。***、ROM均可使NK细胞的抗瘤(抗K562)活性下降。4.硫普罗宁、还原型谷胱苷肽均可通过清除ROM、RNM保护NK细胞,提高NK细胞抗瘤活性,且对ROM、RNM的清除表现出一定的量效关系,但二氢氯组胺不能清除RNM。5.在清除ROM、RNM及提高NK细胞对K562细胞的抑制率方面,硫普罗宁、还原型谷胱苷肽效应相当,但均优于二氢氯组胺,且毒副作用较低,有望成为新的免疫佐剂用于白血病的过继性免疫治疗中。

关键词：反应性氮代谢物反应性氧代谢物 NK细胞 K562细胞硫普罗宁还原型谷胱苷肽二氢氯组胺

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反应性氮代谢物在白血病中的多重作用

引用

医学综述 2008年第13期14卷 1921-1923页

作者：郑美珠(综述) 潘敬新陈志哲(审校) 福建医科大学附属第二医院血液内科福建泉州362000 福建省血液病研究所福建医科大学附属协和医院血液科福州350001

反应性氮代谢物(RNM)是机体代谢过程中,由细胞内存在的一氧化氮合酶(NOS)催化产生的一系列高活性氮中间体,具有比反应性氧代谢物(ROM)更强的氧化与硝化活性,通过多条途径参与多种疾病的发生发展。有证据表明,RNM可能不仅参与白血病的发... 详细信息

反应性氮代谢物(RNM)是机体代谢过程中,由细胞内存在的一氧化氮合酶(NOS)催化产生的一系列高活性氮中间体,具有比反应性氧代谢物(ROM)更强的氧化与硝化活性,通过多条途径参与多种疾病的发生发展。有证据表明,RNM可能不仅参与白血病的发生发展,在白血病的治疗中也发挥不同效应,本文就RNM在白血病中的作用予以综述。

关键词：反应性氪代谢物反应性氧代谢物自由基微量残留白血病

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单核细胞影响NK细胞抗K562细胞活性的实验研究

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免疫学杂志 2010年第1期26卷 29-33页

作者：郑美珠潘敬新潘宏达郭健欣福建医科大学附属第二医院血液内科泉州362000 四川大学华西临床医学院成都610000

目的探讨单核细胞(MO)呼吸爆发过程中产生的反应性氮代谢物(RNM)、反应性氧代谢物(ROM)的情况及其对NK细胞抗K562细胞活性的影响。方法在NK+K562混合细胞培养体系中,观察加入MO或/和IL-2/PHA前后RNM、ROM产量、KIR及TNF-β、IFN-γ产量... 详细信息

目的探讨单核细胞(MO)呼吸爆发过程中产生的反应性氮代谢物(RNM)、反应性氧代谢物(ROM)的情况及其对NK细胞抗K562细胞活性的影响。方法在NK+K562混合细胞培养体系中,观察加入MO或/和IL-2/PHA前后RNM、ROM产量、KIR及TNF-β、IFN-γ产量的相应变化。再观察加入二氢氯组胺、硫普罗宁后上述各指标的变化情况。结果①在NK+K562混合培养体系中,加入IL-2/PHA后,KIR逐渐升高;当按E/MO=10/2、10/5、10/10比例加入MO后,RNM、ROM产量随着MO数量的增加而增加,而TNF-β、IFN-γ的产量和KIR反而降低。对K562细胞数量作偏相关分析,RNM与KIR的负相关系数大于ROM。②加入药物后,ROM产量明显下降,KIR和TNF-β、IFN-γ产量明显升高,硫普罗宁还降低RNM的产量,但二氢氯组胺无效。结论①MO可通过产生ROM、RNM降低NK细胞的活性,抑制NK细胞抗K562细胞效应;②RNM对NK细胞的影响可能比ROM更强。③硫普罗宁通过清除ROM、RNM,可逆转MO对NK细胞的抑制作用。

关键词：单核细胞反应性氮代谢物反应性氧代谢物 NK细胞 K562细胞

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还原型谷胱甘肽抗白血病免疫佐剂作用实验研究

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中国实验血液学杂志 2006年第2期14卷 359-362页

作者：潘敬新林玲郭健欣朱元贵蔡俊峰郭熙哲陈志哲福建医科大学第二附属医院血液科泉州362000 福建医科大学附属协和医院血液科福州35000

本研究探讨还原型谷胱甘肽(GSH)逆转反应性氧代谢物(ROM)对NK细胞抗白血病效应的抑制作用。在K562细胞、NK细胞的混合培养体系中分别加入富含单核细胞的单个核细胞(Mo)和白细胞介素-2(IL-2),观察ROM产量和K562细胞抑制率,然后分别加入GS... 详细信息

本研究探讨还原型谷胱甘肽(GSH)逆转反应性氧代谢物(ROM)对NK细胞抗白血病效应的抑制作用。在K562细胞、NK细胞的混合培养体系中分别加入富含单核细胞的单个核细胞(Mo)和白细胞介素-2(IL-2),观察ROM产量和K562细胞抑制率,然后分别加入GSH或二氢氯化物组胺(组胺),观察ROM产量及K562细胞抑制率的变化。结果表明:加入IL-2后,ROM的产量从33.17±25.02U/L增至223.59±59.41U/L(P<0.01),K562细胞抑制率从65.56%升至85.89%(P<0.01);在加入E/Mo=10/1、10/5、10/103种浓度的Mo后,ROM产量分别为389.79±43.83U/L,456.74±42.77U/L,601.42±21.92U/L,K562细胞抑制率分别为82.36%,81.36%,48.09%,加入组胺或GSH后,E/Mo=10/2时,ROM产量从389.79±43.83U/L,分别减至50.21±22.4U/L和-3.58±9.49U/L(P<0.05),随着GSH或组胺浓度的增加ROM产量逐减少,K562细胞抑制率从82.53%分别升至94.64%和96·39(P<0·05),ROM产量与K562细胞抑制呈负相关(P<0.05);E/Mo=10/5或10/10时,高浓度的GSH或组胺可使ROM产量减少,但K562细胞抑制率提高不明显(P>0.05)。结论:当E/Mo=10/2时,GSH逆转ROM强于组胺,提高NK细胞对K562的抑制率与组胺相似,但毒副作用轻微,GSH可能成为更理想的抗白血病的免疫佐剂。

关键词：谷胱甘肽白血病免疫佐剂反应性氧代谢物 NK细胞

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硫普罗宁体外逆转ROM对NK细胞抗K562细胞系抑制作用的实验研究

硫普罗宁体外逆转ROM对NK细胞抗K562细胞系抑制作用的实验研究

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作者：郭健欣福建医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨反应性氧代谢物(ROM)对NK细胞抗瘤活性的影响及硫普罗宁逆转ROM抑制NK细胞抗K562细胞活性的免疫佐剂作用。方法:采用IL-2及PHA活化单核(MO)细胞,使MO细胞的ROM产量增加,观察NK细胞活性、K562细胞抑制率(KIR)的相应变化,然后在... 详细信息

目的:探讨反应性氧代谢物(ROM)对NK细胞抗瘤活性的影响及硫普罗宁逆转ROM抑制NK细胞抗K562细胞活性的免疫佐剂作用。方法:采用IL-2及PHA活化单核(MO)细胞,使MO细胞的ROM产量增加,观察NK细胞活性、K562细胞抑制率(KIR)的相应变化,然后在不同比例的MO+NK +K562细胞培养体系中加入不同浓度的硫普罗宁,定期检测ROM产量及KIR、IL-6、TNF-α产量(每种检测均做3个复孔),同时应用不同浓度的还原型谷胱甘肽(GSH)、二氢氯组胺(DHT)作为阳性对照。结果:在K562细胞、NK细胞混合培养体系中,加入IL-2/PHA后,当E/T=10/1时,ROM的产量从33.17±25.02U/ml增至223.59±59.41U/ml(P<0.05),KIR从65.56%升至85.89%(P<0.05);当按E/MO=10/2、10/5、10/10三种比例加入MO细胞后,ROM产量随着MO细胞数量的增加而增加(ROM产量分别为389.79±43.83U/ml,456.74±42.77U/ml,601.42±21.92U/ml),而KIR则相反(KIR分别为82.36%, 81.36%, 48.09%);而在K562+NK+MO+IL-2/PHA混合培养体系中加入硫普罗宁、DHT或GSH后,当E/MO=10/2时,ROM产量从389.79±43.83U/ml分别降至-1.20±60.70U/ml,50.21±22.4U/ml和-3.59±9.49U/ml(P<0.05),KIR则从82.53%分别升至96.09%,94.64%和96.40%(P<0.05)。随着硫普罗宁、GSH、DHT浓度的增加,ROM产量逐渐减少。ROM产量与KIR呈负相关(r=-0.598)。当E/MO为10/5或10/10时,各浓度硫普罗宁及高浓度的GSH、DHT可使ROM产量减少(P<0.05),但KIR提高不明显(P>0.05)。硫普罗宁在提高KIR的效应方面与DHT相似(P>0.05),而在清除ROM方面,硫普罗宁较二氢氯组胺为优(P<0.05)。结论:***细胞是ROM产生的最主要来源,而K562细胞、NK细胞也产生一定量的ROM;2. MO细胞产生ROM可使NK细胞的抗瘤(抗K562)活性下降;3. 硫普罗宁在MO细胞比例较低时,可通过清除ROM保护NK细胞,从而提高NK细胞的抑瘤活性,同时对ROM的清除表现出一定的量效关系。而在MO细胞比例较高时,这种保护作用下降;4. 硫普罗宁在逆转ROM方面优于二氢氯组胺,在提高NK细胞对K562细胞的抑制率方面效应强度与二氢氯组胺相似,但毒副作用较低,有望替代二氢氯组胺作为免疫佐剂用于白血病的过继性免疫治疗中。

关键词：硫普罗宁反应性氧代谢物 NK细胞单核细胞 K562细胞

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脑脊液d-ROM水平在流感病毒相关性脑病中的诊断和预测价值

引用

世界核心医学期刊文摘（神经病学分册） 2006年第9期2卷 59-60页

作者： Yamanaka G. Kawashima H. Suganami Y. 郭中孟(译) Department of Pediatrics Tokyo Medical University 6-7-1 Nishi-Shinjuku Shinjuku Tokyo 160-0023 Japan 不详

The aim of this study was to assess the validity of serum and CSF oxidative status of patients with IE in their initial stage through the d-ROM (Diacron-Reactive Oxygen Metabolites, Italy) test, compared to those with other neurological diseases. The study was conducted on the following four groups: (1) influenza virus-associated encephalopathy (IE, n = 8), including four patients showing neurological sequelae or mortal; (2) influenza virus-associated febrile seizures (IFS, n = 11); (3) febrile convulsion (FC, n = 10): (4) enterovirus-associated encephalopathy (EE, n = 4), including one patient with neurological sequelae. The CSF d-ROM levels in the IE group were significantly higher than those in the IFS and the FC groups but not in the EE group. In addition, general laboratory findings such as leukocytes, platelets, C-reactive protein, aspartate aminotransferase, creatinine, creatinine kinase and LDH, including interleukin-6 (IL-6), were analyzed in each group. As for the serum d-ROM levels and general laboratory findings, with the exception of CSF IL-6 levels in IE, no significant differences were detected compared with the other groups. In patients with IE,the CSF d-ROM levels could be a valid predictive biomarker of the severity, and oxidative stress may be related to the pathogenesis of IE.

关键词：病毒相关性脑脊液预测价值脑病流感神经系统后遗症神经系统疾病反应性氧代谢物

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