检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：牛飞庆福建农林大学

学位级别：硕士

苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus, ACLSV)和李坏死环斑病毒(Prunusnecrotic ring spot virus, PNRSV)是危害桃及其他一些果树的重要病原，对果树的生长、产量、果品质量等造成严重的影响。樱桃绿环斑驳病毒(Cherry gr... 详细信息

苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus, ACLSV)和李坏死环斑病毒(Prunusnecrotic ring spot virus, PNRSV)是危害桃及其他一些果树的重要病原，对果树的生长、产量、果品质量等造成严重的影响。樱桃绿环斑驳病毒(Cherry green ring mottle virus, CGRMV)是我国最近报道的一种侵染核果类果树的病原物。本研究以这3种病毒为对象，采用反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)技术对我国桃树主产区的桃树进行检测，目的是摸清我国桃主产区这3种病毒的发生分布情况，并对来源不同的分离物进行系统发育分析。主要结论如下： 1.基本摸清了3种病毒在我国主产区的发生分布情况，从12个省17个地区共采集到417份桃树样品，其中83份样品带有ACLSV，带毒率为20%。从401份样品中检测到24份样品带有PNRSV，带毒率为6%。从112份样品中检测到12份样品带有CGRMV，带毒率为11%。 2.我国桃树上的ACLSV的分离物主要可以分为两大类。 3. PNRSV的CP序列分析表明：我国的分离物分布比较普遍。 4. CGRMV的CP序列分析表明：我国的分离物主要集中在分支Ⅰ和分支Ⅲ。 5.首次在青岛的日川白风样品中发现并报道了杏假褪绿叶斑病毒(Apricotpseudo-chlorotic leaf spot virus, APCLSV)。获得的APCLSV的分离物的核苷酸序列与GenBank上APCLSV的两条参考序列的一致性在86.3%-96.4%之间，氨基酸一致性在93.8%-96.4%之间。本研究共完成了2条ACLSV的全长序列(JN634760-JN634761)和40条ACLSV的CP序列(JN848971-JN849010)以及1条APCLSV的CP序列(JN873309)的GenBank登录。

关键词：苹果褪绿叶斑病毒李坏死环斑病毒樱桃绿环斑驳病毒杏假褪绿叶斑病毒反转录-多聚酶链式反应系统发育分析

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小菜蛾GluCl受体α亚基cDNA基因克隆和序列分析

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植物保护 2010年第4期36卷 49-54页

作者：梁延坡吴青君刘长仲张友军王少丽徐宝云甘肃农业大学草业学院兰州730070 中国农业科学院蔬菜花卉研究所北京100081

利用RT-PCR和RACE技术对小菜蛾[Plutella xylostella(L.)]4龄幼虫谷氨酸门控的氯离子通道(GluCl)受体cDNA全长进行了克隆和序列分析。通过设计简并性上、下游引物扩增出小菜蛾GluCl受体α亚基基因192bp的cDNA片段,根据得到的片段序列设... 详细信息

利用RT-PCR和RACE技术对小菜蛾[Plutella xylostella(L.)]4龄幼虫谷氨酸门控的氯离子通道(GluCl)受体cDNA全长进行了克隆和序列分析。通过设计简并性上、下游引物扩增出小菜蛾GluCl受体α亚基基因192bp的cDNA片段,根据得到的片段序列设计3′和5′特异性引物采用RACE技术进行3′和5′末端的克隆,获得了小菜蛾GluCl受体的cDNA的完整序列,GenBank登录号为GQ221939。该基因全长2144bp,其开放阅读框(ORF)1344bp,编码447个氨基酸。相似性分析表明:它与果蝇和赤拟谷盗的相似性均为73%,与埃及伊蚊的相似性为75%,与东亚飞蝗的相似性为79%;氨基酸分析后显示它具有GluClα亚基的典型特征,表明克隆的cDNA序列是小菜蛾GluClα亚基基因的序列。

关键词：小菜蛾谷氨酸门控的氯离子通道受体反转录-多聚酶链式反应 RACE 序列分析

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小胶质细胞α7-nAChR表达及意义

小胶质细胞α7-nAChR表达及意义

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广东省药学会2009学术年会

作者：雷露雯王勇南方医科大学珠江医院

目的观察巨噬细胞烟碱型乙酰胆碱受体(α7-nAChR)在体外培养小胶质细胞上的表达,为进一步研究其作用提供理论依据。方法采用RT-PCR及细胞免疫荧光双标法分析α7-nAChR在小胶质细胞上的表达。结果用针对α7-nAChR特异性的引物进行PCR,可... 详细信息

目的观察巨噬细胞烟碱型乙酰胆碱受体(α7-nAChR)在体外培养小胶质细胞上的表达,为进一步研究其作用提供理论依据。方法采用RT-PCR及细胞免疫荧光双标法分析α7-nAChR在小胶质细胞上的表达。结果用针对α7-nAChR特异性的引物进行PCR,可扩增出450bp目的条带;细胞免疫荧光双标分析显示,小胶质细胞抗CD11b/c和抗α7-nAChR染色均呈阳性。结论α7-nAChR在体外小胶质细胞均能正常表达,可能是小胶质细胞发挥作用的分子学基础。

关键词：小胶质细胞巨噬细胞烟碱型乙酰胆碱受体反转录-多聚酶链式反应荧光双染

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氯苄基四氢小檗碱对大鼠肥厚心肌中KATP通道表达的影响

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华侨大学学报（自然科学版） 2008年第3期29卷 395-398页

作者：刘青戴德哉华侨大学材料科学与工程学院福建泉州362021 中国药科大学药理研究室江苏南京210009

观察心梗诱导的大鼠肥厚心肌中三磷酸腺苷(ATP)敏感性钾离子通道(KATP)的表达,并探讨其影响因素.将雄性大鼠随机分为5组,分别是假手术组,手术组,普萘洛尔组,氯苄基四氢小檗碱组及内皮素受体拮抗剂组.手术组及药物组的大鼠结扎冠脉左前降... 详细信息

观察心梗诱导的大鼠肥厚心肌中三磷酸腺苷(ATP)敏感性钾离子通道(KATP)的表达,并探讨其影响因素.将雄性大鼠随机分为5组,分别是假手术组,手术组,普萘洛尔组,氯苄基四氢小檗碱组及内皮素受体拮抗剂组.手术组及药物组的大鼠结扎冠脉左前降支,术后饲养10 d,药物组于术后第6天开始给药,共给药5d,由反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)方法确定KATP通道的mRNA表达.实验结果表明,心梗诱导的大鼠肥大心肌中的KATP通道的mRNA表达明显上调,经药物干预后有不同程度的降低.心梗诱导的大鼠肥厚心肌中的KATP通道的mRNA的表达上调,其表达上调除与β受体有关外,Ca2+离子可能参与对KATP通道表达的影响.

关键词：心肌肥厚心梗 ATP敏感性钾离子通道反转录-多聚酶链式反应

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核果类果树上李坏死环斑病毒和李矮缩病毒的血清学及RT-PCR检测

核果类果树上李坏死环斑病毒和李矮缩病毒的血清学及RT-PCR检测

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作者：阙勇华中农业大学

学位级别：硕士

核果类果树是一类种植较为广泛的果树,在我国南方以桃、李、杏、油桃等为主。李坏死环斑病毒(Prunus necrotic ringspot virus,PNRSV)和李矮缩病毒(Prunedwarfvirus,PDV)是严重危害核果类果树的两种重要病毒,导致被感染果树生长衰退、... 详细信息

核果类果树是一类种植较为广泛的果树,在我国南方以桃、李、杏、油桃等为主。李坏死环斑病毒(Prunus necrotic ringspot virus,PNRSV)和李矮缩病毒(Prunedwarfvirus,PDV)是严重危害核果类果树的两种重要病毒,导致被感染果树生长衰退、产量锐减,对这两种病毒进行有效的检测是防止这两种病毒的传播从而减少其危害的重要环节。本研究采用生物学、血清学和分子生物学方法对桃、李、杏和油桃四种核果类果树上的PNRSV和PDV进行了检测研究,取得的结果如下: 1.从我国湖北省武汉、咸宁等地区搜集了127份的桃、李、杏及油桃样品,采用A蛋白夹心酶联免疫吸附法(Protein A Sandwich Enzyme-Linked ImmunoSorbentAssay,PAS-ELISA)对这些样品进行了PNRSV和PDV两种病毒的检测。结果显示,PNRSV和PDV总检出率分别为26.8%及16.5%,其中,在54份桃树样品中PNRSV的检出率为25.9%,PDV的检出率为16.7%;在17份李树样品中PNRSV的检出率为35.3%,PDV的检出率为29.4%;在20份杏树样品中PNRSV的检出率为25.0%,PDV的检出率为15.0%;在36份油桃树样品中PNRSV的检出率为25.0%,PDV的检出率为11.1%。两种病毒的复合侵染率为14.2%。 2.对PAS-ELISA检测呈阳性的样品,在温室中采用汁液摩擦接种法草本指示植物黄瓜(Cucumis sativus)和昆诺藜(Chenopodium quinoa)上进行了生物学鉴定,检测结果显示,在10份桃树样品和6份李树样品中各有5份样品在接种的黄瓜和昆诺藜上都诱导产生了明显的局部和系统性症状;所接种的杏树样品在这两种指示植物上都没引起症状表现,而9份油桃样品中有2个样品在黄瓜上引起轻微症状。 3.对PAS-ELISA及生物学检测PNRSV和PDV呈阳性的部分样品,提取总RNA,采用基于PNRSV和PDV的外壳蛋白(Coat Protein,CP)基因部分片段核苷酸序列设计的引物分别对这些样品进行了反转录-多聚酶链式反应(Reverse TranscriptionPolymerase Chain Reaction,RT-PCR)检测,所选取样品都分别扩增出了预期大小约为449bp和172bp的目标片段。

关键词：核果类果树病毒李坏死环斑病毒李矮缩病毒 A蛋白夹心酶联免疫吸附反转录-多聚酶链式反应

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食虫沟瘤蛛钠离子通道基因cDNA片段的克隆和序列分析

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植物保护学报 2007年第2期34卷 219-220页

作者：张丹丹杨之帆彭宇焦彦成王荫长湖北大学生命科学学院武汉430062 南京农业大学植物保护学院南京210095

昆虫对拟除虫菊酯类杀虫剂的敏感性下降主要与神经细胞膜上钠离子通道的敏感性降低有关。至今已在14种昆虫的para直向同源钠离子通道基因序列中发现了与击倒抗性有关的20个突变。作者利用反转录-多聚酶链式反应（RT-PCR）对食虫沟瘤蛛... 详细信息

昆虫对拟除虫菊酯类杀虫剂的敏感性下降主要与神经细胞膜上钠离子通道的敏感性降低有关。至今已在14种昆虫的para直向同源钠离子通道基因序列中发现了与击倒抗性有关的20个突变。作者利用反转录-多聚酶链式反应（RT-PCR）对食虫沟瘤蛛的钠离子通道基因ⅢS5-ⅣS6区域进行了克隆、序列分析及同源性比较分析。

关键词：钠离子通道基因序列序列分析 cDNA片段反转录-多聚酶链式反应克隆拟除虫菊酯类杀虫剂同源性比较

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干乳期高能饲喂围产期健康奶牛肝载脂蛋白B100 mRNA表达的研究

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吉林农业大学学报 2005年第5期27卷 538-542页

作者：孙玉成王哲张嘉保吉林大学农学部畜牧兽医学院长春130062

为阐明载脂蛋白B100在围产期奶牛脂肪肝及相关代谢性疾病发生过程中的作用,以-βactin作为内对照,用RT-PCR方法测定了干乳期高能饲喂围产期健康奶牛不同时期肝组织的apoB100 mRNA表达。结果表明:高能饲喂的围产期健康奶牛肝组织的apoB10... 详细信息

为阐明载脂蛋白B100在围产期奶牛脂肪肝及相关代谢性疾病发生过程中的作用,以-βactin作为内对照,用RT-PCR方法测定了干乳期高能饲喂围产期健康奶牛不同时期肝组织的apoB100 mRNA表达。结果表明:高能饲喂的围产期健康奶牛肝组织的apoB100 mRNA表达从产前至产后呈先升高后降低的趋势,其中产后14 d比产后1 d降低了61.45%(P<0.01),且产前apoB100 mRNA表达显著高于产后(产后1 d除外,P<0.01)。干乳期高能饲喂对围产期奶牛肝脏载脂蛋白B100 mRNA表达有显著影响。

关键词：奶牛载脂蛋白B100 基因表达反转录-多聚酶链式反应

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马冠状病毒检测试剂盒的研制

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动物医学进展 2005年第8期26卷 98-100页

作者：姜焱顾炳泉张常印李建江苏出入境检验检疫局江苏南京210001 南通出入境检验检疫局江苏南通226005

参考GenBank发表的马冠状病毒的基因序列,设计合成一对引物,对马冠状病毒进行RT-PCR扩增,产物经琼脂糖电泳分析,呈现一条约427bp的条带,并进行序列测定,与GenBank中发表的基因序列比较发现,与马冠状病毒核苷酸的同源性为98.7%,证实为马... 详细信息

参考GenBank发表的马冠状病毒的基因序列,设计合成一对引物,对马冠状病毒进行RT-PCR扩增,产物经琼脂糖电泳分析,呈现一条约427bp的条带,并进行序列测定,与GenBank中发表的基因序列比较发现,与马冠状病毒核苷酸的同源性为98.7%,证实为马冠状病毒基因。通过对RT-PCR反应条件进行优化,研制了用RT-PCR方法检测马冠状病毒的试剂盒,该试剂盒的敏感性和特异性都较好。

关键词：马冠状病毒反转录-多聚酶链式反应

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棉铃虫细胞色素P450 cDNA片段的克隆与序列分析

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昆虫知识 2004年第3期41卷 227-231页

作者：艾颖邱星辉张粼粼李梅何凤琴中国科学院动物研究所

以 5龄实验室敏感品系棉铃虫Helicoverpaarmigera的总RNA为模板 ,采用简并性引物 ,利用反转录 -多聚酶链式反应 (RT PCR)扩增出了 2个新的长度分别为 2 3 7bp和 2 40bp的cDNA片段。序列分析表明 ,2 3 7bp的cDNA片段与棉铃虫P45 0CYP4家... 详细信息

以 5龄实验室敏感品系棉铃虫Helicoverpaarmigera的总RNA为模板 ,采用简并性引物 ,利用反转录 -多聚酶链式反应 (RT PCR)扩增出了 2个新的长度分别为 2 3 7bp和 2 40bp的cDNA片段。序列分析表明 ,2 3 7bp的cDNA片段与棉铃虫P45 0CYP4家族有较高的相似性 ,最高达 73 %;而 2 40bp的cDNA片段与CYP6家族有较高的相似性 ,最高达 49%。

关键词：棉铃虫细胞色素P450 cDNA片段克隆序列分析反转录-多聚酶链式反应

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棉铃虫CYP4家族基因片段克隆及序列分析

引用

河北农业大学学报 2004年第6期27卷 60-64页

作者：艾颖邱星辉何凤琴中国科学院动物研究所农业虫鼠害综合治理研究国家重点实验室北京100080

以5龄实验室品系棉铃虫的总RNA为模板,采用一对昆虫细胞色素P450简并引物,利用反转录—多聚酶链式反应(RT-PCR)扩增并筛选出10个新的长度约450bp的cDNA片段,并对这些序列与GeneBank中已知序列进行相似性分析,初步推测这10个P450基因片... 详细信息

以5龄实验室品系棉铃虫的总RNA为模板,采用一对昆虫细胞色素P450简并引物,利用反转录—多聚酶链式反应(RT-PCR)扩增并筛选出10个新的长度约450bp的cDNA片段,并对这些序列与GeneBank中已知序列进行相似性分析,初步推测这10个P450基因片段属于CYP4家族的CYP4M和CYP4S2个亚家族。

关键词：棉铃虫细胞色素P450 反转录-多聚酶链式反应基因克隆

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