检索结果-内蒙古大学图书馆

食品科学 2019年第10期40卷 193-198页

作者：关博元张正翰石佳鑫时旭岳喜庆杨梅沈阳农业大学食品学院辽宁沈阳110866

以产后30～40 d的人常乳和牛常乳为原料,采用同位素标记相对和绝对定量结合高效液相色谱-串联质谱技术对人常乳和牛常乳中全谱游离氨基酸和水解氨基酸的种类及含量进行对比分析。结果表明,人常乳和牛常乳中游离氨基酸质量浓度分别为0.37... 详细信息

以产后30～40 d的人常乳和牛常乳为原料,采用同位素标记相对和绝对定量结合高效液相色谱-串联质谱技术对人常乳和牛常乳中全谱游离氨基酸和水解氨基酸的种类及含量进行对比分析。结果表明,人常乳和牛常乳中游离氨基酸质量浓度分别为0.37 g/L和0.16 g/L,水解氨基酸质量浓度分别为2.5 g/L和3.3 g/L。在全谱游离氨基酸中,人常乳和牛常乳均检测到9种必需氨基酸以及15种非蛋白质编码氨基酸,分别检测到11种和7种非必需氨基酸,其中人常乳9种必需氨基酸、10种非必需氨基酸以及7种非蛋白质编码氨基酸质量浓度显著高于牛常乳(P<0.05);在全谱水解氨基酸中,人常乳和牛常乳均检测到8种必需氨基酸、10种非必需氨基酸以及12种非蛋白质编码氨基酸,其中人常乳γ-氨基丁酸、牛磺酸、α-氨基正丁酸和β-丙氨酸质量浓度显著高于牛常乳(P<0.05)。本研究对比分析人常乳与牛常乳中全谱游离氨基酸和水解氨基酸的种类和含量差异,为配方乳制品以及功能性食品的发展提供一定的参考。

关键词：人常乳牛常乳同位素标记相对和绝对定量技术高效液相色谱-串联质谱全谱游离氨基酸全谱水解氨基酸

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定量蛋白质组学分析链霉素耐药和敏感结核分枝杆菌临床分离株

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微生物学报 2013年第2期53卷 154-163页

作者：朱传智赵雁林黄香玉逄宇赵雅贞庄玉辉何秀云解放军第三0九医院器官移植与免疫调节北京市重点实验室北京100091 中国疾病预防控制中心结核病预防控制中心国家结核病参比实验室北京102206

【目的】发现结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)链霉素耐药相关的潜在菌体蛋白。【方法】以结核分枝杆菌临床分离链霉素敏感株01105和结核分枝杆菌H37Rv为对照,采用iTRAQ技术和生物信息学鉴定并相对定量结核分枝杆菌临床分离链... 详细信息

【目的】发现结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)链霉素耐药相关的潜在菌体蛋白。【方法】以结核分枝杆菌临床分离链霉素敏感株01105和结核分枝杆菌H37Rv为对照,采用iTRAQ技术和生物信息学鉴定并相对定量结核分枝杆菌临床分离链霉素耐药株01108菌体蛋白,并通过WEGO功能注释聚类分析01108菌株差异表达蛋白的细胞组分、分子功能和生物进程。【结果】01108菌株分别与01105菌株和H37Rv菌株比较差异表达蛋白为194个和146个,01108菌株与01105菌株和H37Rv比较均差异表达蛋白121个(共同差异表达蛋白)。差异表达蛋白理论相对分子量和等电点分布广泛,其生物进程主要参与中间代谢、呼吸作用和脂质代谢,分子功能主要为催化活性功能和结合功能。共同差异表达蛋白:7个核糖体蛋白(Rv2785c,Rv0056,Rv0641,Rv0652,Rv0701,Rv1630和Rv2442c)在01108菌株中表达下调;7个蛋白在01108菌株中显著差异表达(上调大于1.20倍或下调小于0.55倍),分别为巯基过氧化物酶(Rv1932)、酰基载体蛋白脱氢酶(Rv0824c)、30S核糖体蛋白S15(Rv2785c)、丙酮酸脱氢酶E2部分(Rv2215)、双组份转录调控蛋白(Rv3133c)以及假定未知蛋白(Rv2466c和Rv2626c)。【结论】iTRAQ发现了链霉素耐药结核分枝杆菌相对于链霉素敏感结核分枝杆菌和H37Rv共同差异表达蛋白,为进一步探讨结核分枝杆菌链霉素耐药机制奠定了基础。

关键词：结核分枝杆菌链霉素定量蛋白质组学同位素标记相对和绝对定量技术

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基于iTRAQ技术的猪精子释放蛋白Transwell小室分离及差异性分析

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华南农业大学学报 2019年第6期40卷 29-37页

作者：葛晨玲李珣王晓晔梁莹莹陈志英杜倩唐胤晟胡传活广西大学动物科学技术学院广西南宁530004 广西畜禽品种改良站广西南宁530001 广西科达畜禽改良有限责任公司广西南宁530001

【目的】探索分离猪附睾头部精子释放蛋白的新方法,确定释放蛋白的功能特点及信号通路。【方法】利用Transwell小室独特的共培养系统,充分利用0.4μm聚碳酸酯膜分离精子释放的蛋白。使用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术分析释放的... 详细信息

【目的】探索分离猪附睾头部精子释放蛋白的新方法,确定释放蛋白的功能特点及信号通路。【方法】利用Transwell小室独特的共培养系统,充分利用0.4μm聚碳酸酯膜分离精子释放的蛋白。使用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术分析释放的蛋白,对鉴定到的差异蛋白,使用GO数据库描述蛋白功能,运用KEGG数据库Pathway分析,确定差异蛋白最主要的生化代谢途径和信号转导途径,同时用IPR数据库对差异蛋白的结构域进行非冗余分析。【结果】Transwell小室上、下室共鉴定到542种蛋白,其中,464种蛋白表达量显著上调,78种蛋白表达量显著下调。差异蛋白主要参与跨膜转运、离子运输、ATP合成等生物过程。差异蛋白主要参与的信号通路为醛固酮调节的钠盐吸收、囊泡转运、EGFR酪氨酸激酶抑制等。硫氧还蛋白、半乳糖、糖苷水解酶等构成差异蛋白的主要结构域,为蛋白发挥作用提供结构基础。【结论】Transwell小室分离蛋白的方法切实有效,iTRAQ技术在附睾头部精子释放蛋白中成功鉴定出差异蛋白,差异性分析及功能注释为探究差异蛋白参与的生命活动及功能奠定了基础。

关键词：附睾 Transwell小室同位素标记相对和绝对定量技术差异蛋白

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不同泌乳期人乳与牛乳中游离氨基酸的对比

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食品科学 2018年第8期39卷 129-134页

作者：吴尚仪吴尚韩宏娇孔繁华关博元张熙桐曹雪妍康世墨陶冬冰岳喜庆沈阳农业大学食品学院辽宁沈阳110866

利用同位素标记相对和绝对定量技术结合高效液相色谱-串联质谱技术对不同泌乳期人乳与牛乳中游离氨基酸的种类及含量进行检测及对比分析。结果表明,人乳中游离氨基酸种类较牛乳更为丰富,含量也高于牛乳,且随着泌乳时间的延长其总量呈下... 详细信息

利用同位素标记相对和绝对定量技术结合高效液相色谱-串联质谱技术对不同泌乳期人乳与牛乳中游离氨基酸的种类及含量进行检测及对比分析。结果表明,人乳中游离氨基酸种类较牛乳更为丰富,含量也高于牛乳,且随着泌乳时间的延长其总量呈下降趋势。牛初乳、牛常乳、人初乳和人常乳中游离氨基酸总量分别为0.32、0.16、0.63 g/L和0.37 g/L。实验测定的42种游离氨基酸中,人常乳中检出35种,牛常乳中测得31种,其中人常乳中有25种游离氨基酸的含量高于牛常乳,人乳中组氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸等含量显著高于牛乳(P<0.05),游离谷氨酸在人初乳、人常乳、牛常乳中含量均为最高,而牛初乳中游离牛磺酸含量最高。本研究分析了人乳、牛乳中游离氨基酸种类和含量的差异,可为详细的研究母乳氨基酸功能和氨基酸代谢组学提供了一定的理论依据,也可为生产婴幼儿奶粉和功能性乳制品提供参考。

关键词：牛乳人乳同位素标记相对和绝对定量技术游离氨基酸

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肾阳虚与肾阴虚模型小鼠睾丸生殖相关差异蛋白的比较研究

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中华男科学杂志 2019年第3期25卷 248-256页

作者：陈昌波马静贾瑊李颖祺刘阿庆董海军空军军医大学西京医院中医科暨全军中医内科中心陕西西安710032 陕西省中医医院外一科陕西西安710003

目的:比较氢化可的松诱导的肾阳虚和肾阴虚模型小鼠睾丸表达的差异蛋白,探讨两种肾虚导致雄性不育共同和特异的物质基础。方法:将30只昆明小鼠随机分为对照组、肾阳虚组和肾阴虚组,对照组:腹腔注射生理盐水0.2 ml,1次/d,连续7 d;肾阳虚... 详细信息

目的:比较氢化可的松诱导的肾阳虚和肾阴虚模型小鼠睾丸表达的差异蛋白,探讨两种肾虚导致雄性不育共同和特异的物质基础。方法:将30只昆明小鼠随机分为对照组、肾阳虚组和肾阴虚组,对照组:腹腔注射生理盐水0.2 ml,1次/d,连续7 d;肾阳虚组:腹腔注射氢化可的松25 mg/(kg·d),连续10 d;肾阴虚组:腹腔注射氢化可的松50 mg/(kg·d),连续7 d。HE染色分析睾丸组织病理变化,同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术及生物信息学方法比较两种肾虚小鼠睾丸表达的差异蛋白。结果:与对照组相比,Sod1为两种肾虚小鼠睾丸表达的生殖相关节点差异蛋白,且在肾阴虚组表达显著高于肾阳虚组(P<0.05);两种肾虚小鼠睾丸共同表达的生殖相关节点蛋白有5个,上调的为Rps28,下调的为Rpl11、Rplp2、Svs2和Svs3a(P<0.05)。结论:Sod1可能是区别两种肾虚不育小鼠的关键物质基础之一,Rps28、Rpl11、Rplp2、Svs2和Svs3a则可能是两种肾虚不育小鼠共同的重要的物质基础。

关键词：肾阳虚肾阴虚不育睾丸差异蛋白生物信息学同位素标记相对和绝对定量技术小鼠

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孕期慢性应激致大鼠子代学习记忆能力损伤的蛋白质组学研究

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中华劳动卫生职业病杂志 2021年第7期39卷 481-486页

作者：付有娟关素珍赵枫刘红娅陈小惠戚发秋刘志宏宁夏医科大学公共卫生与管理学院宁夏环境因素与慢性病控制重点实验室银川750004

目的研究大鼠孕期慢性应激致子代学习记忆能力损伤相关的差异蛋白及信号通路,探讨可能的作用机制。方法于2019年7至10月,选择80~90日龄SPF级未曾受孕的雌性SD大鼠16只,体重(200±20)g;90~100日龄SPF级雄性SD大鼠12只,体重(220±... 详细信息

目的研究大鼠孕期慢性应激致子代学习记忆能力损伤相关的差异蛋白及信号通路,探讨可能的作用机制。方法于2019年7至10月,选择80~90日龄SPF级未曾受孕的雌性SD大鼠16只,体重(200±20)g;90~100日龄SPF级雄性SD大鼠12只,体重(220±20)g。适应性饲养1周后随机分组,雌鼠分为对照组和模型组(各8只);雄鼠分为对照交配组(8只)和模型交配组(4只),正常饲养。建立慢性不可预知温和应激(CUMS)模型,连续刺激21 d。应激前1天,第1、7、14、21天对雌鼠进行内眦静脉取血,测定皮质酮含量。利用Morris水迷宫实验检测子鼠的空间学习记忆能力,通过苏木素-伊红和尼氏染色观察子鼠海马组织形态学变化,采用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术对子鼠海马组织进行蛋白质组学相关分析。结果与对照组比较,模型组雌鼠血浆皮质酮含量明显增高(F=7.717,P<0.05),模型建立成功。与对照子鼠组比较,模型子鼠组逃避潜伏期延长、游泳平均速度降低、跨越平台次数减少、目标象限游程缩短(P<0.05)。模型子鼠组海马组织结构中细胞形态不规则,神经元数量少,尼氏体分布不均匀、体积小、数量少。子鼠组共筛选出5065个蛋白,差异蛋白共26个(P<0.05),其中上调和下调分别为19、7个。差异蛋白主要参与23种生物学过程、14种细胞组分和9种分子功能。京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析显示,共富集到57条通路,其中8条信号通路明显富集(P<0.05),可能参与子代学习记忆能力损伤的信号通路有5条,包括神经活性配体-受体相互作用、cGMP-PKG信号通路、黏附连接、FoxO信号通路和Notch信号通路,主要有酪氨酸蛋白激酶受体、α2A肾上腺素能受体、cGMP依赖性蛋白激酶等差异蛋白可能参与损伤过程。结论孕期慢性应激可能导致子代学习记忆能力损伤,蛋白质组学方法所富集的信号通路和筛选的关键差异蛋白可能在损伤过程中起重要作用。

关键词：大鼠孕期慢性应激学习记忆能力子代同位素标记相对和绝对定量技术

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隐形微球表面吸附血浆蛋白的蛋白质组学分析

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中国科学：生命科学 2012年第3期42卷 185-195页

作者： Yevgeniya Le 李丽王敦成 Mark D.Scott Canadian Blood Services VancouverBCV6T 1Z3Canada Centre for Blood Research University of British ColumbiaVancouverBCV6T 1Z3Canada Department of Pathology and Laboratory Medicine University of British ColumbiaVancouverBCV6T 1Z3 Canada

细胞和生物材料表面的甲氧基聚乙二醇(mPEG)修饰是一项具有广阔应用前景的非药理性免疫调节技术,但由于细胞的不稳定性,目前对其表面与血浆间相互作用的认识还不够深入.本实验采用相对稳定的乳胶微球作为模型,来研究其表面对血浆蛋白的... 详细信息

细胞和生物材料表面的甲氧基聚乙二醇(mPEG)修饰是一项具有广阔应用前景的非药理性免疫调节技术,但由于细胞的不稳定性,目前对其表面与血浆间相互作用的认识还不够深入.本实验采用相对稳定的乳胶微球作为模型,来研究其表面对血浆蛋白的吸附.结果显示,血浆总蛋白的吸附水平随着mPEG修饰浓度和分子量的增加而降低,未修饰的乳胶微球表面蛋白吸附量为(159.9±6.4)ng/cm2,mPEG修饰后,蛋白吸附量分别下降至(18.4±0.8)ng/cm2(1mmol/L2kDSCmPEG)和(52.3±5.3)ng/cm2(1mmol/L20kDSCmPEG).聚炳烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和同位素标记相对和绝对定量的质谱技术(iTRAQ-MS)分析表明,在PEG修饰微球表面的蛋白质吸附层中,参与免疫系统活化的蛋白质丰度明显下降.因此,免疫修饰细胞和材料的生物学效应是通过降低抗原性及减弱表面与大分子间相互作用来实现的.

关键词：聚乙二醇修饰免疫修饰同位素标记相对和绝对定量技术质谱分析聚苯乙烯乳胶微球蛋白质组学

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应用iTRAQ-HPLC-MS技术筛选奶牛脂肪肝病尿液蛋白标志物

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畜牧兽医学报 2014年第5期45卷 844-852页

作者：孙雨航夏成舒适孙玲伟徐闯黑龙江八一农垦大学动物科技学院大庆163319

应用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术筛选并鉴定脂肪肝病奶牛尿液中的差异表达蛋白,为诊断奶牛脂肪肝病提供新的生物标志物。收集40头奶牛的尿液,分为脂肪肝病组A1、A2和健康对照组B1、B2,每组各10头奶牛。组内每10个样品等量混合... 详细信息

应用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术筛选并鉴定脂肪肝病奶牛尿液中的差异表达蛋白,为诊断奶牛脂肪肝病提供新的生物标志物。收集40头奶牛的尿液,分为脂肪肝病组A1、A2和健康对照组B1、B2,每组各10头奶牛。组内每10个样品等量混合后进行试验,将符合要求的样品进行iTRAQ标记后利用高效液相色谱法层析,经串联质谱鉴定。共筛选出110个差异表达蛋白,其中50个表达下调,60个表达上调;通过生物信息学分析得到了4个关键性蛋白:玻连蛋白(Vitronectin,VTN)、脂质运载蛋白(Lipocalin,LCN2)、凝血酶原(Prothrombin,F2)和丛集素(Clusterin,CLU)。本试验成功筛选出脂肪肝病奶牛尿液中的差异表达蛋白,并鉴定出其中4种与奶牛脂肪肝病存在密切关系的关键性调节因子,如能进一步证实为奶牛脂肪肝病的重要生物标志物,将会为奶牛脂肪肝病的早期检测和诊断提供新的方法。

关键词：同位素标记相对和绝对定量技术差异表达蛋白奶牛脂肪肝病蛋白标志物

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二至丸对SAMP8小鼠行为学及海马蛋白质组表达的影响

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中国中西医结合杂志 2019年第12期39卷 1469-1476页

作者：梁梅亭朱宏任丹肖岚李广诚李雅悦萨依腊西中南大学湘雅三医院中医科

目的观察二至丸对阿尔茨海默病(AD)模型SAMP8小鼠行为学和海马组织蛋白质表达的影响,探讨二至丸治疗AD可能的作用机制。方法6月龄雄性SAMP8小鼠40只随机分为二至丸低浓度组、中浓度组、高浓度组及模型组,每组10只,另选择10只6月龄雄性SA... 详细信息

目的观察二至丸对阿尔茨海默病(AD)模型SAMP8小鼠行为学和海马组织蛋白质表达的影响,探讨二至丸治疗AD可能的作用机制。方法6月龄雄性SAMP8小鼠40只随机分为二至丸低浓度组、中浓度组、高浓度组及模型组,每组10只,另选择10只6月龄雄性SAMR1小鼠作为正常组。二至丸低、中、高浓度组分别予0.15、0.3、0.6 g/mL二至丸灌胃;正常组、模型组予等体积生理盐水灌胃,每天干预1次,连续干预8周。干预结束后,采用水迷宫对各组小鼠进行行为学测试,同时筛选最佳有效剂量浓度组进行后续实验。水迷宫实验结束后,采用iTRAQ蛋白质组学筛选差异表达蛋白,对差异蛋白进行生物信息学分析,包括GO功能注释分析、KEGG通路分析以及STRING-DB网络构建。运用Western Blot方法验证部分差异蛋白的表达水平。结果与正常组比较,模型组逃避潜伏期延长(P<0.01),穿越平台象限次数和停留在原平台象限的时间缩短(P<0.01)。与模型组比较,二至丸中、高浓度组逃避潜伏期缩短(P<0.05),穿越平台象限次数和停留在原平台象限的时间延长(P<0.05)。根据水迷宫实验结果,选取最佳有效剂量即二至丸中浓度组进行后续实验。与模型组比较,二至丸中浓度组有46个差异蛋白,其中15个蛋白上调,31个蛋白下调;正常组有192个差异蛋白,其中25个蛋白上调,167个蛋白下调;二至丸中浓度组与正常组均有表达并且表达趋势相同的差异蛋白有20个,其中10个蛋白上调,10个蛋白下调。这些蛋白质参与多种生物学途径,包括代谢通路、糖酵解/糖异生通路、程序性坏死通路等,涉及二至丸中浓度组和正常组均重复的KEGG通路有69条,差异蛋白之间彼此相互联系构成网络。通过Western Blot验证Hp和Vdac2在中浓度组的表达比模型组减弱(P<0.05)。结论二至丸能改善SAMP8小鼠学习记忆能力,调节其海马组织中多种蛋白质的表达,主要涉及代谢、糖酵解/糖异生、程序性坏死等相关通路蛋白,这可能是二至丸治疗AD的作用机制。

关键词：二至丸阿尔茨海默病 SAMP8小鼠同位素标记相对和绝对定量技术蛋白质组学

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炭样小单孢菌JXNU-1产抗生素JX对嗜根考克氏菌肽聚糖合成的影响及其机理

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基因组学与应用生物学 2016年第3期35卷 603-609页

作者：陈鹏黄运红李非李素珍龙中儿江西师范大学生命科学学院南昌330022

为了揭示一株具有广谱抗菌活性炭样小单孢菌JXNU-1产的核苷类抗生素JX对嗜根考克氏菌肽聚糖合成的影响,本研究采用超声破壁、称重法研究抗生素对嗜根考克氏菌细胞壁含量变化,采用iTRAQ技术对抗生素处理前、后嗜根考克氏菌的蛋白质组进... 详细信息

为了揭示一株具有广谱抗菌活性炭样小单孢菌JXNU-1产的核苷类抗生素JX对嗜根考克氏菌肽聚糖合成的影响,本研究采用超声破壁、称重法研究抗生素对嗜根考克氏菌细胞壁含量变化,采用iTRAQ技术对抗生素处理前、后嗜根考克氏菌的蛋白质组进行比较分析。结果显示,在抗生素JX作用下,嗜根考克氏菌细胞分裂被抑制,细胞壁含量升高;iTRAQ技术鉴定了抗生素胁迫下的嗜根考克氏菌细胞中的1 780个蛋白,其中差异表达蛋白149个,包括表达上调蛋白106个,表达下调蛋白43个,上调表达蛋白中包括有一与肽聚糖合成的相关酶MurG。本研究为揭示炭样小单孢菌JXNU-1产抗生素JX的抗菌作用机制提供了基础数据。

关键词：炭样小单孢菌嗜根考克氏菌肽聚糖定量蛋白质组学同位素标记相对和绝对定量技术

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