检索结果-内蒙古大学图书馆

广西医学 2019年第6期41卷 734-739页

作者：陈娜周中银武汉大学人民医院消化内科消化系统疾病湖北省重点实验室湖北省武汉市430060

目的分析咪喹莫特治疗后溃疡性结肠炎(UC)小鼠结肠组织的差异表达蛋白及其功能。方法将30只C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、咪喹莫特组,各10只。正常组常规饲养,模型组和咪喹莫特组建立UC小鼠模型。咪喹莫特组给予咪喹莫特灌胃,模... 详细信息

目的分析咪喹莫特治疗后溃疡性结肠炎(UC)小鼠结肠组织的差异表达蛋白及其功能。方法将30只C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、咪喹莫特组,各10只。正常组常规饲养,模型组和咪喹莫特组建立UC小鼠模型。咪喹莫特组给予咪喹莫特灌胃,模型组与正常组给予等体积磷酸缓冲盐溶液灌胃。干预7 d后,提取小鼠结肠组织蛋白,采用同位素标记相对和绝对定量技术结合质谱定量蛋白质组学方法分析和鉴定3组差异表达蛋白,运用生物信息学分析差异表达蛋白的功能。结果模型组/正常组、咪喹莫特组/正常组、咪喹莫特组/模型组分别存在317个、253个和209个差异表达蛋白。模型组和正常组相比上调而咪喹莫特组与模型组相比下调的蛋白有62个,模型组与正常组相比下调而咪喹莫特组与模型组相比上调的蛋白有48个。这些差异表达蛋白主要分布在细胞器、细胞及胞外区,分子功能以结合功能、催化功能及酶调节活性为主,主要参与细胞进程、生物调节及代谢过程。结论 S100钙结合蛋白A8、黏蛋白2、角蛋白等有可能成为咪喹莫特治疗UC的重要分子靶点。

关键词：溃疡性结肠炎咪喹莫特同位素标记相对和绝对定量技术差异表达蛋白生物信息学小鼠

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基于iTRAQ联合2D LC-MS/MS分析PM2.5对人类胎盘滋养细胞的影响

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国际妇产科学杂志 2017年第2期44卷 202-207,F0003页

作者：秦喆符锋徐忠伟侯海燕陈亚琼中国人民武装警察部队后勤学院附属医院妇产科天津300162 中国人民武装警察部队后勤学院中心实验室中国人民武装警察部队后勤学院中国医学科学院北京协和医学院

目的:利用蛋白组学方法初步筛选PM2.5通过影响人类胎盘滋养细胞造成不良妊娠率增加可能涉及的蛋白分子和生物进程。方法:用0、30、60、120和200μg/mL的PM2.5分别染毒HTR-8/SVneo细胞24 h与48 h后观察细胞增殖情况,最终确定以120μg/mL ... 详细信息

目的:利用蛋白组学方法初步筛选PM2.5通过影响人类胎盘滋养细胞造成不良妊娠率增加可能涉及的蛋白分子和生物进程。方法:用0、30、60、120和200μg/mL的PM2.5分别染毒HTR-8/SVneo细胞24 h与48 h后观察细胞增殖情况,最终确定以120μg/mL PM2.5染毒细胞24 h和48 h进行后续实验。提取胞内蛋白,酶解消化后,同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)标记联合二维液相色谱串联质谱(2D LC-MS/MS)技术分析肽段,鉴定HTR-8/SVneo细胞内的差异表达蛋白,并进行生物信息学分析。结果:120μg/mL PM2.5染毒24 h和48 h后的存活率分别为86.09%和52.36%,与对照组(0μg/mL PM2.5染毒组)相比,细胞存活率显著下降(P<0.05)。120μg/mL PM2.5 24 h染毒组和48 h染毒组细胞中分别鉴定出182个和486个差异蛋白,涉及细胞生物进程22条和217条。结论:PM2.5对HTR-8/SVneo细胞的影响涉及大量细胞生物进程的改变;iTRAQ联合2D LC-MS/MS技术是一种对染毒后细胞内差异表达蛋白高敏感度、高通量筛选的有效途径,为今后对PM2.5增加不良妊娠结局风险的深入机制研究奠定基础。

关键词：蛋白质组空气污染物串联质谱法人绒毛膜外滋养层细胞同位素标记相对和绝对定量技术

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男女性系统性红斑狼疮患者的差异表达蛋白及其生物学功能-基于iTRAQ的蛋白质组学研究

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广西医学 2021年第18期43卷 2214-2221页

作者：黄子宸郑乐婷李晞刘秀华雷玲文静徐涓涓赵铖广西医科大学第一附属医院风湿免疫科南宁市530021 南京医科大学附属逸夫医院风湿免疫科江苏省南京市210000 广西医科大学第一附属医院临床检验中心南宁市530021 广西柳州市工人医院风湿免疫科柳州市545000

目的分析男性和女性系统性红斑狼疮(SLE)患者中血浆的差异表达蛋白及其生物学功能。方法纳入SLE男性、SLE女性、健康男性、健康女性各8例,收集其外周血标本并分离血浆。利用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术筛选SLE男性与SLE女性之... 详细信息

目的分析男性和女性系统性红斑狼疮(SLE)患者中血浆的差异表达蛋白及其生物学功能。方法纳入SLE男性、SLE女性、健康男性、健康女性各8例,收集其外周血标本并分离血浆。利用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术筛选SLE男性与SLE女性之间、SLE女性与健康女性之间、SLE男性与健康男性之间的差异表达蛋白谱,并对所有的差异表达蛋白进行基因本体论(GO)分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析。结果 (1)SLE女性与SLE男性之间的差异表达蛋白共277个(表达上调193个,表达下调84个),涉及的生物过程主要包括生物调节、免疫系统过程、生物过程调节等,涉及的信号通路包括类风湿关节炎、原发性免疫缺陷及生产IgA的肠道免疫网络等。(2)SLE女性与健康女性之间的差异表达蛋白共242个(表达上调181个,表达下调61个),涉及的生物过程主要包括细胞过程、免疫系统过程、生物过程调节等,涉及的信号通路包括类风湿关节炎、FcεRI信号通路及麻疹等。(3)SLE男性与健康男性之间的差异表达蛋白共214个(表达上调114个,表达下调100个),涉及的生物过程主要包括免疫系统过程、刺激反应、细胞过程等,涉及的信号通路主要包括心肌收缩、钙离子信号通路及过氧化物酶体增殖物激活受体信号通路等。结论 SLE患者的血浆蛋白表达存在性别差异,并且差异表达蛋白所参与的生物学过程及涉及的信号通路也存在差异。

关键词：系统性红斑狼疮性别差异表达蛋白同位素标记相对和绝对定量技术蛋白质组学生物信息学

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柴胡疏肝散对SH–SY5Y细胞内miR–124表达及其相关蛋白调控作用的研究

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深圳中西医结合杂志 2021年第20期31卷 1-5,I0005-I0008页

作者：冯毅菲孙宁宁范大华丁峰曹美群深圳大学第一附属医院深圳市第二人民医院广东深圳518035

目的:探索中药柴胡疏肝散对人神经母细胞瘤细胞(SH–SY5Y)内微小RNA124(miR–124)的调控作用以及相关蛋白表达的影响,进一步阐明柴胡疏肝散调控神经细胞的具体作用机制和途径。方法:培养SH–SY5Y细胞,转染pCDNA3.1–miR–124质粒,并予... 详细信息

目的:探索中药柴胡疏肝散对人神经母细胞瘤细胞(SH–SY5Y)内微小RNA124(miR–124)的调控作用以及相关蛋白表达的影响,进一步阐明柴胡疏肝散调控神经细胞的具体作用机制和途径。方法:培养SH–SY5Y细胞,转染pCDNA3.1–miR–124质粒,并予柴胡疏肝散干预,提取细胞蛋白并酶解,同位素标记相对和绝对定量技术(iTRAQ)标记,采用高效液相色谱串联质谱法(LC–MS/MS)鉴定蛋白,软件Proteome Discoverer1.3处理数据,并进一步进行生物信息学分析,Western blot验证差异表达蛋白。结果:SH–SY5Y细胞经转染miR–124质粒后miR–124表达显著上升,而转染miR–124质粒细胞在柴胡疏肝散处理后,miR–124表达显著下降。表明对于SH–SY5Y细胞柴胡疏肝散可以下调miR–124表达。蛋白质组分析共鉴定出肽段15487个,蛋白3707个。免疫印迹检测差异蛋白NudE神经发育蛋白1(NDE1),在miR–124过量表达时NDE1蛋白表达量显著上升,而在柴胡疏肝散与miR–124共同作用时该蛋白表达量显著下调,说明柴胡疏肝散可通过下调miR–124表达,进而恢复NDE1的正常表达。结论:本研究表明柴胡疏肝散可能经miR–124调控下游相关蛋白表达以及信号通路,从而影响神经细胞的发育、增殖和分化等功能。

关键词：柴胡疏肝散 SH–SY5Y细胞 miR–124 同位素标记相对和绝对定量技术 NudE神经发育蛋白1

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基于iTRAQ技术对低级别胶质瘤与正常脑组织差异性表达蛋白的初步筛选研究

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临床医学研究与实践 2024年第8期9卷 5-10页

作者：彭大云吴晓莉韩丽芳庄洁娜廖月媛廖秋林广东祈福医院病理科广东广州511495

目的应用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术筛选低级别胶质瘤与正常脑组织的差异表达蛋白质。方法将6例低级别胶质瘤实体组织标本与2例正常脑组织标本各自混合后提取总蛋白,进行定量分析和酶解。iTRAQ标记后进行液相色谱-串联质谱(LC... 详细信息

目的应用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术筛选低级别胶质瘤与正常脑组织的差异表达蛋白质。方法将6例低级别胶质瘤实体组织标本与2例正常脑组织标本各自混合后提取总蛋白,进行定量分析和酶解。iTRAQ标记后进行液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析。通过Mascot2.9软件进行相关图谱分析。结果有效鉴定出低级别胶质瘤与正常脑组织差异表达蛋白质162个,其中34个上调蛋白质,128个下调蛋白质,这些差异表达蛋白质具有多种生物学活性,参与不同的代谢以及信号通路。结论通过iTRAQ技术可有效鉴定出众多低级别胶质瘤与正常脑组织的差异表达蛋白质,为后续寻找低级别胶质瘤的生物标记物奠定基础。

关键词：低级别胶质瘤蛋白质组学同位素标记相对和绝对定量技术生物标记物定量分析酶解液相色谱-串联质谱

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基于iTRAQ技术筛选早期和进展期胃癌患者血清差异蛋白

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宁夏医科大学学报 2017年第9期39卷 1016-1021页

作者：吴婧王会峰赵志军王宁菊宁夏医科大学总医院银川750004

目的筛查早期、进展期胃癌和健康人群血清中差异表达的蛋白,以期发现与胃癌有关的蛋白标志物。方法用同位素标记相对和绝对定量技术(iTRAQ)联合串联液相色谱/质谱联用(LC-MS/MS)检测早期与进展期胃癌患者血清,筛选关键性差异表达腺苷酸... 详细信息

目的筛查早期、进展期胃癌和健康人群血清中差异表达的蛋白,以期发现与胃癌有关的蛋白标志物。方法用同位素标记相对和绝对定量技术(iTRAQ)联合串联液相色谱/质谱联用(LC-MS/MS)检测早期与进展期胃癌患者血清,筛选关键性差异表达腺苷酸核糖基化因子(ARF-1)蛋白,利用免疫组化进行胃癌组织蛋白差异验证。结果共发现119个差异蛋白质(53个上调,66个下调)。免疫组化结果显示进展期胃癌组织中ARF-1蛋白表达量高于早期胃癌组与癌旁正常组,早期胃癌组ARF-1蛋白表达量高于癌旁正常组(P<0.05)。结论初步筛选了胃癌血清中蛋白表达谱,经免疫组化验证ARF-1表达水平与血清一致。

关键词：胃癌同位素标记相对和绝对定量技术蛋白组学

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基于iTRAQ技术的TGF-β1诱导肺原代成纤维细胞差异蛋白筛选

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东南大学学报（医学版） 2019年第5期38卷 780-785页

作者：毛娜张惠李丹张桂珍徐洪杨方华北理工大学基础医学院河北唐山063210 华北理工大学医学实验研究中心河北唐山063210

目的:采用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术筛选转化生长因子(TGF)-β1诱导的大鼠肺原代成纤维细胞的差异蛋白,并在矽肺大鼠模型中进行验证。方法:5 ng·ml^-1 TGF-β1诱导成纤维细胞24 h,采用iTRAQ联合液相色谱-串联质谱(LC-MS... 详细信息

目的:采用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术筛选转化生长因子(TGF)-β1诱导的大鼠肺原代成纤维细胞的差异蛋白,并在矽肺大鼠模型中进行验证。方法:5 ng·ml^-1 TGF-β1诱导成纤维细胞24 h,采用iTRAQ联合液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术筛选出与对照组比较的差异蛋白,用Scaffold软件对蛋白质进行验证,采用PANTHER在线工具进行生物信息学分析。10只雄性Wistar大鼠,体重(160±10)g,分为对照组、矽肺模型组,每组5只。动式染尘[SiO2浓度(50±10)μg·m^-3]24周构建矽肺大鼠模型。VG染色观察肺组织形态,免疫组织化学染色法和蛋白质印迹法检测胶原(COL)Ⅴ、血管细胞黏附因子(VCAM)、极低密度脂蛋白受体(VLDLR)、多配体蛋白聚糖2(SDC2)的表达。结果:共鉴定出1 648个蛋白,TGF-β1诱导组有196个蛋白较对照组表达变化≥1.20倍。矽肺模型组大鼠肺组织可见胶原沉积,与对照组相比,COLⅤ、VLDLR、SDC2、VCAM蛋白表达增强,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:基于iTRAQ技术筛选出与TGF-β1诱导的大鼠肺原代成纤维细胞有关的差异蛋白,其中COLⅤ、VCAM、VLDLR、SDC2可能参与了对矽肺纤维化的调控。

关键词：同位素标记相对和绝对定量技术蛋白质组学转化生长因子成纤维细胞矽肺

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大鼠感觉、运动神经瓦勒氏变性前后蛋白分析

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解放军医学院学报 2017年第1期38卷 55-58页

作者：苌彪郭志远全琦孙逊刘若西鲁长风王玉汪爱媛郭全义卢世璧彭江解放军总医院骨科研究所北京市再生医学重点实验室全军战创伤重点实验室北京100853

目的通过同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)技术联合二维液相色谱-串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,2D LC-MS/MS)技术研究感觉、运动神经损伤7 d后蛋白表达差异。方法成年雄性Wistar大鼠40只,体质量220~250 g,随机分为对照组和实验组,各20只。实验组大鼠脊髓横断,对照组不作处理。7 d后对两组大鼠脊神经前后根神经取材,运用iTRAQ技术标记(114标记正常运动神经;115标记损伤的运动神经;116标记正常的感觉神经;117标记代表损伤的感觉神经)并结合2D LC-MS/MS技术进行差异蛋白分析,并利用基因本体论和京都基因与基因组百科全书信号通路分析差异蛋白所在信号通路。结果共鉴定出4 312个蛋白:1)其中运动神经损伤后差异蛋白数量为637个,表达升高的有265个,表达降低的有372个;2)感觉神经损伤后差异蛋白数量为626个,表达升高的有258个,表达降低的有368个。结论成功筛选出大鼠运动神经与感觉神经损伤前后的差异蛋白,可为周围神经再生研究提供支持。

关键词：周围神经损伤瓦勒氏变性同位素标记相对和绝对定量技术二维液相色谱-串联质谱技术

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蛋白质组学在中药研究中的应用

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药学实践杂志 2013年第4期31卷 241-245页

作者：李敏姜鹏王淑萍韩琳黄慧梅畅婉琳柳润辉福建中医药大学药学院福建福州350108 第二军医大学药学院上海200433

系统生物学着眼于系统组成成分的构成、动态与发生,与中药对机体的整体而又动态的调节相符合,它的出现给中药研究带来了曙光。作为系统生物学的重要组成部分,蛋白质组学在中药研究中的应用已经越来越多。本文综述了蛋白质组学的常用技... 详细信息

系统生物学着眼于系统组成成分的构成、动态与发生,与中药对机体的整体而又动态的调节相符合,它的出现给中药研究带来了曙光。作为系统生物学的重要组成部分,蛋白质组学在中药研究中的应用已经越来越多。本文综述了蛋白质组学的常用技术以及近三年来这些技术在中药复方、中药有效部位和中药活性成分等方面的应用。

关键词：蛋白质组学中药二维凝胶电泳差异凝胶电泳同位素标记亲和标签同位素标记相对和绝对定量技术

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肌层浸润性膀胱癌转移潜能异质性蛋白质组学研究

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实用医药杂志 2015年第5期32卷 446-448页

作者：徐婷王翼刘鹏飞牛海涛解放军401医院干部病房1科山东青岛266003 青岛大学附属医院泌尿外科

目的研究肌层浸润性膀胱癌转移潜能异质性,并探讨生物通路在肌层浸润性膀胱癌异质性中的关键性作用。方法同位素标记相对和绝对定量(i TRAQ)技术和二维液相色谱串联质谱(2D-LC–MS/MS)量化和鉴定纯化不同转移风险组膀胱癌差异表达蛋白质... 详细信息

目的研究肌层浸润性膀胱癌转移潜能异质性,并探讨生物通路在肌层浸润性膀胱癌异质性中的关键性作用。方法同位素标记相对和绝对定量(i TRAQ)技术和二维液相色谱串联质谱(2D-LC–MS/MS)量化和鉴定纯化不同转移风险组膀胱癌差异表达蛋白质,生物信息学方法进一步分析鉴定显著差异表达蛋白质并与既往相关文献的结果进行比较。结果生物通路的改变与浸润性膀胱癌异质性的调节密切相关。代谢相关通路参与了肿瘤的恶性生物学行为。显著改变的代谢通路包括糖酵解/糖异生通路、戊糖磷酸化通路、丙酮酸代谢通路、谷胱甘肽代谢通路等。结论遗传信息处理KEGG通路在决定浸润性膀胱癌恶性表型中起到重要作用。蛋白质量化分析结合KEGG通路分析有利于揭示膀胱癌发病机制并指导膀胱癌分子治疗方法。

关键词：肌层浸润性膀胱癌同位素标记相对和绝对定量技术生物标记生物通路异质性蛋白质组学

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