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甘肃医药 2013年第12期32卷 898-900页

作者：李香钟席维岳镇原县中医医院检验科甘肃庆阳744500 庆阳市人民医院科室检验科甘肃庆阳745000

目的：了解庆阳市儿童EB病毒（Epstein-Barr virus,EBV）的感染率、流行情况和相关重症疾病的发生率.方法：对2011年1月1日至2011年12月31日在庆阳市人民医院儿科住院的患儿3009例,采用病毒核酸扩增（PCR）荧光定量检测方法检测全血EBV-... 详细信息

目的：了解庆阳市儿童EB病毒（Epstein-Barr virus,EBV）的感染率、流行情况和相关重症疾病的发生率.方法：对2011年1月1日至2011年12月31日在庆阳市人民医院儿科住院的患儿3009例,采用病毒核酸扩增（PCR）荧光定量检测方法检测全血EBV-DNA载量,分别从性别、年龄及季节、相关重症疾病的发生率等相关因素进行统计分析.结果：3009例住院患儿EBV总体感染率为37.19％,其中3～7岁组最高（57.36％）,EBV感染率随年龄增长而逐渐增高,提示感染率在各年龄组间差异有统计学意义.7～9月（15.31％、15.19％、15.36％）感染率较高,差异有统计学意义（P＜0.05）,提示感染率存在季节性.各年龄组EBV感染率无性别差异.EBV感染后相关重症疾病的发生率达0.53％.结论：庆阳市儿童住院患儿EBV的感染率较国内的既往报道明显降低,但EBV感染后相关重症疾病的发生率较资料报道偏高,3～7岁为感染的高峰年龄段,7～9月感染率较高,EBV的感染无性别差异.

关键词：儿童 EB病毒感染噬血淋巴组织细胞增生症

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儿童EB病毒感染相关IM和HLH的临床分析和病毒感染特征

儿童EB病毒感染相关IM和HLH的临床分析和病毒感染特征

引用

作者：陶佳广州医学院

学位级别：硕士

研究背景：EB病毒（Epstein-Barr，EBV）为双链DNA病毒，是一种嗜人B淋巴细胞病毒，属于疱疹病毒γ亚科家族中的一员。该病毒在人群中普遍易感，国外报道，成人血清EBV抗体阳性率达95%以上[1]，我国3～5岁儿童EBV抗体阳性率达80.7～100%... 详细信息

研究背景： EB病毒（Epstein-Barr，EBV）为双链DNA病毒，是一种嗜人B淋巴细胞病毒，属于疱疹病毒γ亚科家族中的一员。该病毒在人群中普遍易感，国外报道，成人血清EBV抗体阳性率达95%以上[1]，我国3～5岁儿童EBV抗体阳性率达80.7～100%，10岁时100%的儿童血清EBV抗体阳性转化[2]。EBV是儿童感染性疾病常见的病原体，感染时症状轻重不一，部分仅表现无症状的血清学转换，其中50%发展为传染性单核细胞增多症（Infection mononucleosis，IM）[2]。IM被认为是一种免疫病理性疾病（Immunopathological disease）[13]，EBV原发感染后引起大量CD8+T淋巴细胞增殖，一方面杀伤EBV感染的B细胞，一方面侵犯淋巴组织器官、释放炎症因子，主要是Th1型细胞因子，引起一系列的临床症状。婴幼儿免疫发育尚不成熟，因此大部分感染EBV后表现为血清学转化或仅表现为轻症或不典型病变。IM是自限性疾病，一般预后良好，病死率仅为1～2%[14]。在少数患儿可发生多个系统并发症，发展为重症IM。在极少数个体可发生EBV相关性噬血细胞淋巴组织细胞增生症（Epstein-Barr virus-associatedhemophagocytic lymphphistiocytosis，EBV-AHS）本病在临床上呈暴发性，如不及时诊断和治疗，患者迅速死亡，病死率可达30～40%[15]。噬血细胞性淋巴组织细胞增生症（Hemophagocytic lymphohistiocytosis，HLH）是多种原因造成自然杀伤细胞（natural killer cell，NK）和T细胞功能缺陷，引起大量炎症细胞因子释放，造成机体巨噬细胞活化，机体脏器、组织损伤的一组临床综合征。其临床表现具有特征性但缺乏特异性。主要临床表现为持续发热，肝、脾大，全血细胞减少，骨髓、淋巴结等组织可见吞噬血细胞现象。多种原因可引起HLH：遗传因素、感染、肿瘤、自身免疫系统疾病。EBV-AHS是感染所致HLH中的常见类型。无论是先天性还是后天性HLH，EBV都是最常见的触发因素。不同病因所致HLH预后不同，非EBV感染所致HLH，60-70%随原发病的治愈而缓解，而未经治疗的EBV-AHS常常是致命的[46]，特别是EBV-DNA定量分析持续增高者。目前对于极少数EBV感染后发展为EBV-AHS的患儿特别是无明确基因缺陷者，其体内病毒与机体免疫力相互作用的研究尚不十分清楚。 EBV原发感染后产生病毒特异的体液免疫反应和细胞免疫反应，通过检测血清中EBV特异性抗体滴度可以反映病毒感染后机体的体液免疫反应情况。间接免疫荧光法（Indirect immunofluorescence assay，IFA）是检测EBV特异性抗体的经典方法，但该方法耗时耗力且敏感性低于酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA），ELISA具有高效、快速、敏感性高等特点，现已广泛用于EBV感染血清学检查。实时荧光定量PCR技术（Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction，Real-time PCR）是在定性PCR技术基础上发展起来的核酸定量检测技术，是目前确定样本中DNA拷贝数最敏感、最准确的方法，现已替代了其它定量PCR的方法广泛用于测定EBV负载量。通过FQ-PCR检测患者外周血中EBV-DNA拷贝数，能够很好的反映体内病毒的负荷量。因此我们采用ELISA和FQ-PCR的方法检测EBV感染患儿外周血抗体谱表现和EBV-DNA负载量，分析普通EBV感染和EBV-AHS患儿机体免疫反应和机体内病毒活动的特点。目的：了解EB病毒感染所致IM和EBV-AHS的临床特点以及血清学EBV抗体谱和外周血病毒负载量的特点。方法： 1EBV感染患儿临床特点和实验室检查分析将EBV感染患儿分为IM组和EBV-AHS组，分析两组病例的临床特点和实验室检查特点。 2EBV特异性抗体检测 2.1标本收集：所有患儿标本在入院时采集，用促凝管收集外周静脉血2ml。 2.2分离血清：收集的血标本离心，2500rpm/min×15min，吸取上层血清，将血清等分装于ep管中，放于-80℃冰箱保存。 2.3检测血清中EBV抗体：待收集一定数量标本后用ELISA法检测患儿血清中EBV四项抗体，包括：抗EBV衣壳抗原（capsid antigen，CA）IgM（EBV-CA-IgM）/IgG（EBV-CA-IgG）抗体、抗EBV早期抗原（early antigen，EA）IgG（EBV-EA-Ig

关键词：儿童 EB病毒传染性单核细胞增多症噬血淋巴组织细胞增生症荧光定量PCR 抗体

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儿童EB病毒感染后特异性T淋巴细胞及外周血病毒载量的研究

儿童EB病毒感染后特异性T淋巴细胞及外周血病毒载量的研究

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作者：段红梅首都医科大学

学位级别：博士

Epstein-Barr病毒，简称EB病毒(EBV)，属于疱疹病毒，γ亚科。一旦感染，终生潜伏。随着我国经济的发展和城市工业化进程的加速，临床实践表明儿童EBV原发感染年龄后推，相关疾病传染性单核细胞增多症及重症疾病如EB病毒相关噬血淋巴组... 详细信息

Epstein-Barr病毒，简称EB病毒(EBV)，属于疱疹病毒，γ亚科。一旦感染，终生潜伏。随着我国经济的发展和城市工业化进程的加速，临床实践表明儿童EBV原发感染年龄后推，相关疾病传染性单核细胞增多症及重症疾病如EB病毒相关噬血淋巴组织细胞增生症(Epstein-Barr virus-associatedhemophagocytic lymphohistiocytosis,EBV-HLH)、慢性活动性EBV感染(chronicactive Epstein-Barr virus infection，CAEBV)及淋巴瘤发病率有上升趋势。因此，有必要研究EBV相关疾病的发病机制及干预措施。原发感染后，EBV建立潜伏感染，潜伏在B淋巴细胞，主要表达潜伏感染相关抗原，随细胞周期的复制进行单拷贝复制，机体建立针对EBV各种抗原肽的特异性细胞免疫功能，对EBV的过度复制及恶性转化细胞起到免疫监视作用，与EBV相关疾病的发病机制息息相关。因此，研究针对EBV各种抗原肽的特异性细胞免疫功能不仅对研究EBV相关疾病的发病机制有重要意义，而且，还可为进一步。EBV相关疫苗的开发及以EBV为靶点的生物治疗提供理论依据。本研究的第一部分根据T细胞的记忆功能，即再次接触同一抗原肽后可释放细胞因子的特点，应用酶联免疫斑点法测定EBV相关疾病时外周血中的单个核细胞对EBV特定抗原肽的识别能力，目的是找出能反映机体现行状况下对EBV免疫能力的指标。该研究根据中国人HLA表位的特点及EBV各种抗原肽的意义，合成若干条EBV裂解及潜伏抗原的T细胞表位肽，通过对以EBV原发感染为主的儿童样本及健康成人样本的研究，初步建立了酶联免疫斑点法测定EBV特异性T细胞功能的研究方法。研究结果通过各指标的相关性分析即关联分析及聚类的统计学方法，目的是筛选出对临床及进一步的研究有意义的抗原肽。该研究发现现有的研究对象具有A2、A11表位者较多，且来源于EBV裂解抗原肽BMLF1的针对A2表位的GLC肽段在具有相应表位的原发感染患者中阳性反应率较高。研究还发现，虽然LMP2并不是优势表位肽，但如果将针对中国人常见HLA表位的不同的6条T细胞表位肽混合，明显可提高阳性反应率。研究结果表明：在EBV原发感染后针对裂解抗原肽(BZLF1、BMLF1)的特异性T细胞随病程进展呈现缓慢下降趋势，而针对潜伏抗原肽(EBNA1、EBNA3A、EBNA3B)的特异性T细胞随病程进展呈现缓慢上升趋势。该研究的结论是，应用EBV的T细胞表位肽为刺激物建立的ELISPOT方法测定EBV特异性T细胞，可从某种程度上反映机体在现行状况下对EBV的免疫功能，尤其是动态观察上述指标对免疫缺陷儿童有较大的临床意义。该研究的重要意义还在于发现儿童EBV原发感染后对LMP2有识别能力，如进一步研究EBV相关重症疾病对LMP2的识别情况，有望借助病毒所LMP2疫苗的研究，开发出儿童EBV相关重症疾病的以EBV为靶点的生物治疗，LMP2特异性细胞免疫功能的研究可为EBV相关重症疾病过继免疫治疗的病例筛选及治疗后疗效监测及疗程确定提供特异性的观察指标。本研究的第二部分是针对目前临床现有EBV相关疾病实验室诊断的不足，建立荧光定量PCR检测外周血EBV病毒载量的方法，目的是明确现行状况下外周血中EBV的复制水平，研究发现，血浆中EBV游离DNA与单个核细胞中的EBV-DNA存在很强的线性相关;同时发现，EBV载量在EBV重症疾病时明显升高，阳性率明显高于普通原发EBV感染者;并且发现在免疫功能正常时，EBV原发感染不存在持续的高水平病毒复制期。该研究对EBV相关疾病的病因学诊断及临床干预提供理论依据，尤其是外周血病毒载量可作为CAEBV及EBV-HI，H最有用的诊断指标之一。

关键词： EB病毒传染性单核细胞增多症儿童疾病噬血淋巴组织细胞增生症外周血病毒载量

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伴有多脏器功能损害的传染性单核细胞增多症51例临床分析

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中国实用儿科杂志 2007年第12期22卷 919-922页

作者：蒋娟于洁王晓莉宪莹戴碧涛刘筱梅徐酉华重庆医科大学附属儿童医院重庆400014

目的探讨伴有多脏器功能损害的传染性单核细胞增多症(传单)的临床特征,总结重症传单的诊断要点。方法回顾性分析重庆医科大学附属儿童医院2003-01—2006-08间51例伴多脏器功能损害传单病例的临床资料,并与602例无多脏器功能损害传单的... 详细信息

目的探讨伴有多脏器功能损害的传染性单核细胞增多症(传单)的临床特征,总结重症传单的诊断要点。方法回顾性分析重庆医科大学附属儿童医院2003-01—2006-08间51例伴多脏器功能损害传单病例的临床资料,并与602例无多脏器功能损害传单的临床资料比较。结果与无多脏器功能损害传单患儿比较,51例伴多脏器功能损害传单患儿的发热持续时间长,肝脾肿大程度重,而咽峡炎和淋巴结肿大发生率低;伴多脏器功能损害传单患儿外周血2系或3系减少者明显高于无多脏器功能损害传单患儿(92.2%对9.1%,P<0.001),其外周血异形淋巴细胞比例≥10%者占47.1%;伴多脏器功能损害传单患儿的肝功能损害显著重于无多脏器功能损害传单患儿,转氨酶、直接胆红素和乳酸脱氢酶(LDH)显著增高,并有54%的患儿LDH超过16.7μmol/(s.L);低蛋白血症(58%)、黄疸(54%)、浆膜腔积液(54.9%)和消化道出血(35.3%)更常见于伴多脏器功能损害传单。51例伴多脏器功能损害传单患儿预后不同,其中29.4%的患儿死亡或放弃治疗,49%的患儿好转。结论伴多脏器功能损害传单即重症传单的诊断要点:持续发热,肝脾明显肿大;外周血象呈2系或3系减少;肝脏转氨酶异常明显,LDH显著增高;同时合并黄疸、低蛋白血症和浆膜腔积液甚至消化道出血等。重症传单和噬血淋巴组织细胞增生症可能本质相似。

关键词：传染性单核细胞增多症多脏器功能损害诊断临床特征噬血淋巴组织细胞增生症

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