检索结果-内蒙古大学图书馆

本研究通过系列分子重组技术的优化研究，从人类基因组中成功克隆了人甲胎蛋白基因启动子(pAFP)、人甲胎蛋白基因增强子(eAFP)序列全长，并构建了由甲胎蛋白基因启动子(pAFP)、增强子(eAFP)启动的真核基因表达载体，调控治疗基因的表达效率及肝癌细胞的靶向特异性;采用了强效杀伤肿瘤细胞的免疫基因IL-12与自杀基因HSV-TK组合，通过分子重组程序首先将人IL-12基因的两个亚基通过LINKER连接在一起，保证了两个亚基因的同比例表达及三维结构的正确折叠;进而将人IL-12基因与HSV-TK通过内部IRES连接在一起，通过同一启动子的驱动又实现了两个基因应用一个表达载体的同步表达，并构建的了四环素调控基因表达系统调控。HSV-TK-IRES-IL-12联合基因在肝癌细胞内的表达，从优化的分子设计策略与分子重组技术使治疗基因表达同步获得靶向特异性与体外可控性。进一步用于实施肝癌基因治疗过程中基因表达的精确调控建立了分子调控装置。

关键词：肝癌联合基因靶向治疗分子重组技术人甲胎蛋白基因启动子人甲胎蛋白基因增强子四环素基因调控系统

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在HepG2细胞系上建立四环素(Tet-On)基因调控系统表达P4502E1(英文)

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皖南医学院学报 2004年第2期23卷 102-105页

作者：刘晓平皖南医学院药理学教研室安徽芜湖241001

目的　在HepG2细胞系上建立四环素 (Tet On)基因调控系统 ,调控表达P4 5 0 2E1(CYP2E1)。方法　先后转导调控蛋白基因及CYP2E1cDNA(已与四环素反应启动子整合 )入HepG2细胞。用多西环素调控CYP2E1的表达 ,用RT PCR和Westernblot检测其... 详细信息

目的　在HepG2细胞系上建立四环素 (Tet On)基因调控系统 ,调控表达P4 5 0 2E1(CYP2E1)。方法　先后转导调控蛋白基因及CYP2E1cDNA(已与四环素反应启动子整合 )入HepG2细胞。用多西环素调控CYP2E1的表达 ,用RT PCR和Westernblot检测其表达高低。结果　RT PCR和Westernblot均检测出CYP2E1被多西环素调控表达。结论　四环素 (Tet On)基因调控系统 (表达CYP2E1)已在HepG2细胞系上成功建立。

关键词： HepG2细胞系四环素基因调控系统表达 P450 2E1

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肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TRAIL）对人喉癌鳞状上皮细胞...

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作者：李付英北京大学

学位级别：硕士

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)是肿瘤坏死因子家族的新成员.大量研究报道,它能选择性诱导多种组织来源的肿瘤凋亡,而对正常组织细胞无明显毒性.喉癌的发病率在中国有日益增多的趋势,目... 详细信息

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)是肿瘤坏死因子家族的新成员.大量研究报道,它能选择性诱导多种组织来源的肿瘤凋亡,而对正常组织细胞无明显毒性.喉癌的发病率在中国有日益增多的趋势,目前临床上各种治疗手段疗效均不理想.基因治疗作为肿瘤治疗的新方法,为喉癌的治疗亦提供一种新的思路和手段.目前尚没有TRAIL作用于喉癌细胞的报道.原发喉癌中95%为鳞癌,故该实验选择了体外培养的人喉鳞癌细胞系Hep-2作为研究对象,探讨TRAIL分子对Hep-2细胞系的作用及作用机制,为临床上应用TRAIL进行喉癌治疗奠定基础.实验结明表明TRAIL在体外可有效的抑制人喉鳞癌细胞Hep-2的生长,但是该生长抑制作用主要不是通过诱导其凋亡来实现的,使该细胞系发生细胞周期的阻滞是机制之一.肿瘤细胞表面TRAIL受体的表达参与决定了该细胞对TRAIL诱导的凋亡的敏感性.临床上可考虑将TRAIL与放疗和化疗联合应用以期更彻底的治疗喉癌.该实验为TRAIL应用于临床治疗喉癌提供了有意义的实验依据.

关键词： TRAIL Hep-2 四环素基因调控系统细胞凋亡 G-M阻滞基因治疗喉鳞癌

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TRAIL基因对人白血病Jurkat细胞生物力学特性的影响

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中国生物医学工程学报 2002年第3期21卷 268-274页

作者：李丹周淑佩陈凯姚伟娟谢利德顾黎王新娟文宗曜北京大学医学部物理教研室北京100083

本实验研究将人类肿瘤坏死因子相关凋亡配体 (TNF relatedapoptosisinducingligand)的cDNA序列作为目的基因导入RevTet On后 ,利用在Jurkat中所建立起的四环素调控TRAIL基因表达系统 ,作为研究肿瘤细胞凋亡前后生物流变学特性变化的细... 详细信息

本实验研究将人类肿瘤坏死因子相关凋亡配体 (TNF relatedapoptosisinducingligand)的cDNA序列作为目的基因导入RevTet On后 ,利用在Jurkat中所建立起的四环素调控TRAIL基因表达系统 ,作为研究肿瘤细胞凋亡前后生物流变学特性变化的细胞模型。我们通过测量用强力霉素诱导TRAIL基因表达前后细胞生物力学特性的变化 ,研究TRAIL基因对Jurkat细胞生物力学特性的影响。结果显示TRAIL基因的表达对Jurkat细胞有明显的促凋亡作用。TRAIL基因表达后 ,细胞表面电荷密度减少 ,流动性下降。而且 ,本实验表明。

关键词：肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体四环素基因调控系统 Jurkat 凋亡生物流变学人白血病Jurkat细胞

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四环素基因表达系统调控TRGIL基因在人白血病细胞系Jurkat中的表达及其相关的生物流变学研究

四环素基因表达系统调控TRGIL基因在人白血病细胞系Jurkat中的表...

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作者：陈凯北京大学

学位级别：博士

目的:该实验将人的肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TNF-relatedapoptosisinducingligand,TRAIL)基因导入四环素基因调控系统RevTet-On,在人白血病细胞系Jurkat中建立了四环素调控TRAIL基因表达系统,通过加入四环素衍生物强力霉素进行诱... 详细信息

目的:该实验将人的肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TNF-relatedapoptosisinducingligand,TRAIL)基因导入四环素基因调控系统RevTet-On,在人白血病细胞系Jurkat中建立了四环素调控TRAIL基因表达系统,通过加入四环素衍生物强力霉素进行诱导,研究TRAIL基因的受控表达,以及TRAIL基因促进肿瘤细胞凋亡的生物学作用;同时利用在Jurkat中所建立起的四环素调控TRAIL基因表达系统,作为研究肿瘤细胞凋亡前后生物流变学特性变化的细胞模型,研究肿瘤细胞在凋亡前后的细胞表面电荷、渗透脆性、细胞膜的流动性、细胞膜的蛋白二级结构以及细胞的粘弹性的改变.结论:应用四环素基因调控系统RevTet-On系统,在人白血病细胞系中建立了TRAIL受四环素调控的表达系统,在四环素衍生物强力霉素中建立了TRAIL受四环素调控的表达系统,在四环素衍生物强力霉素存在时,有TRAIL的mRNA和蛋白表达并表现出生物学活性能够明显促进肿瘤细胞Jurkat的凋亡,Jurkat的生物流变学特性在TRAIL作用前后有很大的改变,从流变学角度证实了TRAIL的抑癌作用.该实验为探索将来利用TRAIL进行肿瘤的基因治疗进行了有益的尝试,首次将分子生物学与生物流变学结合起来,研究了TRAIL基因对肿瘤细胞生物流变学特性的影响,利用调控基因表达的方法,研究肿瘤细胞在凋亡前后的生物流变学变化.作者的工作为生物流变学与肿瘤基因治疗的关系进行了有益的探索.

关键词：肿瘤坏死因子凋亡诱导配体人白血病细胞系肿瘤细胞凋亡四环素基因调控系统 Jurkat 生物流变学

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四环素调控TRAIL表达系统在人胃癌细胞中的建立及作用

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中国学术期刊文摘 2000年第10期6卷 1282-1284页

作者：魏晓超王新娟张蕾陈凯梁玉蔺新力北京大学医学部生化与分子生物学系北京100083

研究肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)在四环素调控下的表达对人胃癌细胞NCI-N87的作用.将TRAIL的cDNA导入四环素调控系统RevTet-On,用逆转录病毒感染的方法在胃癌细胞系NCI-N87中建立四... 详细信息

研究肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)在四环素调控下的表达对人胃癌细胞NCI-N87的作用.将TRAIL的cDNA导入四环素调控系统RevTet-On,用逆转录病毒感染的方法在胃癌细胞系NCI-N87中建立四环素调控TRAIL基因表达系统及对照系统.用四环素衍生物强力霉素诱导基因表达,检测其对胃癌细胞的杀伤作用.获得了在人胃癌细胞系NCI-N87中建立的四环素调控TRAIL基因表达系统,在强力霉素诱导后观察到了细胞的死亡.证实四环素调控TRAIL表达系统对胃癌细胞具有杀伤作用.

关键词：肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体四环素基因调控系统人胃癌细胞

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