检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：夏德宁南京师范大学

学位级别：硕士

草酸盐-碳酸盐途径(The Oxalate Carbonate Pathway,OCP途径)是指土壤草酸盐的降解耦联碳酸盐形成的生物转化过程，探究这一复杂的生物转化过程对改善土壤根际适生环境和促进土壤碳循环有重要意义。目前对OCP的研究主要涉及不同土壤环... 详细信息

草酸盐-碳酸盐途径(The Oxalate Carbonate Pathway,OCP途径)是指土壤草酸盐的降解耦联碳酸盐形成的生物转化过程，探究这一复杂的生物转化过程对改善土壤根际适生环境和促进土壤碳循环有重要意义。目前对OCP的研究主要涉及不同土壤环境的改良及碳汇作用，而草酸盐降解菌作为OCP途径的主要驱动因素，在降解草酸盐的过程中形成的次生产物及降解草酸盐的机理等方面还存在很多疑问，亟待探索解决。本文从土壤中分离筛选一株高效的草酸盐降解菌(命名为OX-1),以此作为实验菌株，探究该菌在以草酸盐为主要碳源的培养基中对草酸盐降解转化的作用机理及次生产物的形成特征。借助蛋白质组学和矿物学等相关学科的研究手段，对菌株OX-1降解草酸盐耦联碳酸盐形成过程中培养液的pH值、Ca2+浓度、Mg2+浓度、C2O42-浓度以及形成的碳酸盐矿物的形貌结构进行检测和分析，采用气相色谱法测定了培养体系内的CH4含量。采用4D-Label-free蛋白质组学技术研究了OX-1菌株在有和无草酸盐的环境中生长的相关代谢途径和差异表达蛋白，并对差异表达蛋白进行平行反应监测(PRM)验证。主要研究结果如下:　　(1)菌株OX-1在LB平板上菌落呈圆形、直径约10 mm,表面有放射状褶皱，呈橙黄色，细胞短杆状，有鞭毛，在LB液体培养基内32 h细菌生长至高峰。经16S rRNA基因序列的测序比对分析，显示与菌株OX-1匹配度最高的细菌种为巴西固氮螺菌(Azospirillum brasilense)。　　(2)菌株OX-1在以草酸钙或草酸镁为主要碳源的培养基中均能生长良好，细菌的生长使得培养液的pH值逐渐升高，培养至第7d时pH值分别升高了1.3和2.2。且培养液内的pH值均大于7,这为碳酸盐的形成提供了有利的碱性环境。同时培养液内C2O42-浓度随着培养时间的增加不断下降，最后趋于0;培养液内Ca2+浓度或Mg2+浓度在第1d时最高，此后不断下降，至第5 d时趋于平衡。利用X射线衍射仪对前7d培养液中的沉淀物进行物相分析，发现随着培养时间的增加，培养液内草酸盐的特征峰会逐渐降低,而碳酸盐的特征峰不断升高，表明细菌在生长过程中需要不断将草酸盐降解供其生长使用，导致C2O42-浓度不断下降。该降解过程同时还伴随碳酸盐的形成，结果使得培养液内的Ca2+浓度或Mg2+浓度随着培养时间的增加不断下降。采用气相色谱法测定草酸钙和草酸镁培养体系中的CH4含量，发现与对照组相比CH4峰面积分别增加了80.7％和37.33％,说明该菌株在降解草酸盐的过程中还形成了甲烷。　　(3)采用4D-Label-free蛋白质组学技术对菌株OX-1在有和无草酸钙环境中生长的相关代谢途径和差异表达蛋白进行研究，GO分析结果显示，36h时上调的差异蛋白主要参与的生物过程（BP）有:草酸盐代谢过程、焦磷酸硫胺素生物合成过程、氧化应激反应等;所在的细胞组分（CC）主要为膜的组成部分;分子功能（MF）的差异主要集中在甲酰CoA转移酶活性及草酸盐跨膜转运体的活性。对菌株OX-1在有和无草酸镁的环境中生长的相关代谢途径和差异表达蛋白进行研究,GO分析结果显示,36h时上调的差异蛋白主要参与的生物过程（BP）有:草酸盐代谢过程、甲醛代谢过程等;所在的细胞组分（CC）主要为膜的组成部分及甲酸脱氢酶复合物;分子功能（MF）的差异主要集中在铁硫簇绑定、氧化还原酶的活性。两者的KEGG富集分析结果都显示上调蛋白主要富集在新陈代谢途径，如甲烷代谢途径等。PRM的验证分析结果也证明在草酸盐降解过程中，与草酸盐代谢、甲烷合成相关蛋白都上调表达，这与其高通量测序的分析结果基本一致。该研究结果表明，当该细菌处在以草酸盐（草酸钙或草酸镁）为主要碳源的培养环境中，它既能上调表达甲酰CoA转移酶和草酰CoA脱羧酶降解草酸盐以获得有机碳，也能上调表达甲烷合成相关酶合成甲烷。　　综上，菌株OX-1不仅能将草酸盐降解生成碳酸盐，还首次发现该过程伴随甲烷的生物合成。此外，该菌株具有降解草酸盐的双酶系统，可采用甲酰CoA转移酶（formyl-CoA transferase,FRC）和硫胺素焦磷酸（ThDP）依赖型的草酰CoA脱羧酶（oxalyl-CoA decarboxylase,OXC）降解草酸盐耦联形成碳酸盐。本研究有助于进一步理解草酸盐降解菌驱动的OCP过程的分子调控机制，对深度理解土壤OCP途径和促进土壤碳循环的研究提供了新思路。

关键词：土壤根际固氮螺菌 OX-1菌株草酸盐降解特性蛋白质组学

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基于硅胶负载高氯酸(HClO4-SiO2)的固氮螺菌四糖重复单元的高效合成

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有机化学 2020年第6期40卷 1716-1724页

作者：陈自力李培霞刘伟童庄喆武源源赵汗青张建军北京农学院农业农村部华北都市农业重点实验室北京102206 中国农业大学理学院北京100193

以2,3,4-三-O-苯甲酰基-α-L-鼠李糖三氯乙酰亚胺酯、2,4-二-O-苯甲酰基-α-L-鼠李糖对甲氧基苯基苷、2,3,4,6-四-O-苯甲酰基-β-D-葡萄糖三氯乙酰亚胺酯和2,3-O-异丙叉基-α-L-鼠李糖对甲氧基苯基苷为原料,采用[2+2]偶联策略,对巴西固... 详细信息

以2,3,4-三-O-苯甲酰基-α-L-鼠李糖三氯乙酰亚胺酯、2,4-二-O-苯甲酰基-α-L-鼠李糖对甲氧基苯基苷、2,3,4,6-四-O-苯甲酰基-β-D-葡萄糖三氯乙酰亚胺酯和2,3-O-异丙叉基-α-L-鼠李糖对甲氧基苯基苷为原料,采用[2+2]偶联策略,对巴西固氮螺菌(Azospirillum brasilense type strain Sp246)表面脂多糖的四糖重复单元α-L-鼠李糖-(1→3)-α-L-鼠李糖-(1→3)-[β-D-葡萄糖-(1→4)]-α-L-鼠李糖结构进行全合成.在合成单元子的反应中,采用硅胶负载高氯酸(HClO4-SiO2)作为酸性催化剂,三乙基硅基作为选择性保护基,简单高效地构建全保护的四糖.该合成路线步骤短,试剂种类少,反应后处理简单,以L-鼠李糖为原料计算,目标化合物四糖总收率达到23%,化合物结构经~1H NMR和^(13)C NMR、HRMS和IR确证.

关键词：鼠李糖硅胶负载高氯酸(HClO4-SiO2) 固氮螺菌寡糖合成

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一种固氮螺菌、其分离方法和应用

一种固氮螺菌、其分离方法和应用

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作者：段焰青周兴奎高莉李源栋杜刚刘志华顾健龙 650231 云南省昆明市五华区红锦路367号

本发明公开了一种固氮螺菌，其特征在于，其微生物学分类命名为固氮螺菌W712，拉丁文学名为Azospirillum sp.；其16S rDNA部分序列如序列表所示；其保藏编号为CGMCC No.1.18567。本发明还公开了所述固氮螺菌培养分离方法和其含氨基酸发... 详细信息

标准号: CN114634890B

本发明公开了一种固氮螺菌，其特征在于，其微生物学分类命名为固氮螺菌W712，拉丁文学名为Azospirillum sp.；其16S rDNA部分序列如序列表所示；其保藏编号为CGMCC No.1.18567。本发明还公开了所述固氮螺菌培养分离方法和其含氨基酸发酵提取物的制备方法和用途。本发明的固氮螺菌为新的菌株，用其制备得到的含氨基酸发酵提取物用于卷烟加香中，能增加烟气清甜感，丰富协调烟香的同时保持较好舒适性。

关键词：固氮螺菌发酵提取物氨基酸制备保藏卷烟加香舒适性菌株烟气烟香分类协调

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一种降解重油的固氮螺菌新物种及其微生物制剂

一种降解重油的固氮螺菌新物种及其微生物制剂

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作者：蔡曼孟俞辰张笑鹃周宇光 100101 北京市朝阳区北辰西路1号院3号

本发明公开了一种降解重油的固氮螺菌新物种及其微生物制剂。本发明所提供的固氮螺菌新物种为解油固氮螺菌(Azospirillum oleiclasticum)，其代表菌株为RWY‑5‑1‑1T，该菌株在中国普通微生物菌种保藏管理中心的保藏编号为CGMCC No.17324... 详细信息

标准号: CN111705007B

本发明公开了一种降解重油的固氮螺菌新物种及其微生物制剂。本发明所提供的固氮螺菌新物种为解油固氮螺菌(Azospirillum oleiclasticum)，其代表菌株为RWY‑5‑1‑1^T，该菌株在中国普通微生物菌种保藏管理中心的保藏编号为CGMCC No.17324。本发明所提供的解油固氮螺菌(Azospirillum oleiclasticum)RWY‑5‑1‑1^T CGMCC No.17324属于固氮螺菌属(Azospirillum)的一个新菌种。解油固氮螺菌(Azospirillum oleiclasticum)RWY‑5‑1‑1^T CGMCC No.17324不仅具有固氮功能，还具有重质原油的降解功能，在微生物采油、土壤生物修复、土质改良和促进作物生长等方面具有广泛的综合应用前景。

关键词：固氮螺菌新物种降解菌株微生物菌种保藏土壤生物修复微生物采油微生物制剂固氮功能管理中心土质改良重质原油作物生长保藏新菌种重油应用

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一种固氮螺菌、其分离方法和应用

一种固氮螺菌、其分离方法和应用

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作者：段焰青周兴奎高莉李源栋杜刚刘志华顾健龙 650231 云南省昆明市五华区红锦路367号

标准号: CN114634890A

关键词：固氮螺菌发酵提取物氨基酸制备保藏卷烟加香舒适性菌株烟气烟香分类协调

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一种降解重油的固氮螺菌新物种及其微生物制剂

一种降解重油的固氮螺菌新物种及其微生物制剂

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作者：蔡曼孟俞辰张笑鹃周宇光 100101 北京市朝阳区北辰西路1号院3号

标准号: CN111705007A

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固氮螺菌重复三糖片段的化学合成及其对植物生长的影响

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有机化学 2017年第11期37卷 2929-2939页

作者：许一仁张建军董燕红谭伟明中国农业大学理学院北京100193 中国农业大学农学院北京100193

以D-木糖、L-岩藻糖和D-甘露糖为起始原料,分别合成4-羟基木糖受体、岩藻糖乙基硫苷供体以及D-鼠李糖三氯乙酰亚胺酯供体,而后通过[2+1]偶联策略,得到结构为α-D-鼠李糖-(1→3)-α-L-岩藻糖-(1→4)-β-D-木糖的三糖对甲氧基苯基糖苷,该... 详细信息

以D-木糖、L-岩藻糖和D-甘露糖为起始原料,分别合成4-羟基木糖受体、岩藻糖乙基硫苷供体以及D-鼠李糖三氯乙酰亚胺酯供体,而后通过[2+1]偶联策略,得到结构为α-D-鼠李糖-(1→3)-α-L-岩藻糖-(1→4)-β-D-木糖的三糖对甲氧基苯基糖苷,该三糖为固氮螺菌(Azospirillum brasilense type strain Sp7)表面脂多糖的重复单元结构.在关键的α-D-鼠李糖供体与双糖受体糖苷化反应中,通过低温条件下双糖受体中岩藻糖3、4位两个羟基的选择性糖苷化反应,实现区域、立体选择性构建全保护的三糖.该合成路线步骤简洁,以L-岩藻糖为原料计算,目标三糖总收率达到10%,适宜于目标产物的大量制备.初步植物生长调节活性研究表明,采用砂培发芽床的生物测定试验表明在100 mg/L浓度下,所合成的目标三糖浸种处理能促进10℃低温条件下玉米种子的出苗和幼苗生长,对出苗率、株高和叶面积分别提高11.0%、13.1%和87.8%,初步判断该三糖具有一定的植物生长调节活性.

关键词： α-D-鼠李糖 β-L-岩藻糖 β-D-木糖选择性糖苷化反应固氮螺菌

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一株产脂固氮螺菌及其应用

一株产脂固氮螺菌及其应用

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作者：叶文雨鲁国东林占熺刘朋虎余文英 350002 福建省福州市仓山区上下店路15号

本发明提供了一株产脂固氮螺菌及其应用，所述的菌为产脂固氮螺菌(Azospirillum lipoferum)FZJG415，该菌株已于2016年1月20日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为CGMCC No.12060。通过菌株将空气中游离的氮转... 详细信息

标准号: CN105624073B

本发明提供了一株产脂固氮螺菌及其应用，所述的菌为产脂固氮螺菌(Azospirillum lipoferum)FZJG415，该菌株已于2016年1月20日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为CGMCC No.12060。通过菌株将空气中游离的氮转为氨，供作物吸收利用，从而能够显著促进水稻等作物生长的菌株。

关键词：保藏菌株固氮螺菌中国微生物菌种微生物中心作物生长作物吸收游离水稻应用管理

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一株产脂固氮螺菌及其应用

一株产脂固氮螺菌及其应用

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作者：叶文雨鲁国东林占熺刘朋虎余文英 350002 福建省福州市仓山区上下店路15号

本发明提供了一株产脂固氮螺菌及其应用，所述的菌为产脂固氮螺菌(Azospirillum？lipoferum)FZJG415，该菌株已于2016年1月20日在中国微生物菌种保藏管理委员... 详细信息

标准号: CN105624073A

本发明提供了一株产脂固氮螺菌及其应用，所述的菌为产脂固氮螺菌(Azospirillum？lipoferum)FZJG415，该菌株已于2016年1月20日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为CGMCC？No.12060。通过菌株将空气中游离的氮转为氨，供作物吸收利用，从而能够显著促进水稻等作物生长的菌株。

关键词：菌株保藏固氮螺菌微生物菌种微生物中心作物生长作物吸收保藏号游离水稻应用管理

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好氧反硝化细菌的筛选鉴定及水质调控效果研究

好氧反硝化细菌的筛选鉴定及水质调控效果研究

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作者：宣元元山东农业大学

学位级别：硕士

近年来,我国水产养殖业迅猛发展,随着高密度养殖模式日益扩大,对养殖水体的污染也在逐渐加剧。硝态氮、亚硝态氮和氨态氮等是引起养殖水体富营养化的主要污染物之一,不但会对养殖动物产生毒害作用,也会引起水体的富营养化,导致严重的环... 详细信息

近年来,我国水产养殖业迅猛发展,随着高密度养殖模式日益扩大,对养殖水体的污染也在逐渐加剧。硝态氮、亚硝态氮和氨态氮等是引起养殖水体富营养化的主要污染物之一,不但会对养殖动物产生毒害作用,也会引起水体的富营养化,导致严重的环境问题。生物法脱氮处理养殖水体是目前最经济、高效的方法之一,传统生物脱氮技术中硝化和反硝化过程需要在严格的好氧和厌氧的条件下进行,需要较高的运行成本。好氧反硝化细菌的脱氮作用不要求严格的厌氧条件,可以极大降低养殖废水处理的成本、提高脱氮的效果。更重要的是,好氧反硝化细菌可以在传统的池塘养殖水体、工厂化养殖水体等氧气含量较高的环境下实现高效脱氮,净化了水体、实现了养殖水体的循环利用。目前大部分有关好氧反硝化细菌的研究多集中在污水处理领域,在水产养殖过程中应用的好氧反硝化细菌的相关研究仍然较少。为了筛选到能在水产养殖过程中高效脱氮的好氧反硝化细菌,从养殖池塘的底泥等多处采样,筛选到了一株安全且具有高效脱氮能力的好氧反硝化细菌,并对其进行反硝化功能鉴定和脱氮性能研究。主要内容如下:1、将采集的样品经过富集、分离和纯化共得到165株好氧菌。将纯化的菌株进行溶血性检测共得到82株不溶血菌株;又将不溶血菌株经反硝化功能检测、高效降解亚硝酸盐功能检测、菌株类型检测、既能降解亚硝酸盐又能降解氨氮菌株检测和亚硝酸盐耐受性检测,最终筛选到一株好氧、不溶血、具有反硝化功能且能够高效脱氮的好氧反硝化菌JZ-70。经16S r DNA测序和NCBI数据库比对后,初步鉴定菌株JZ-70为固氮螺菌（Azospirillum picis）。2、将菌株JZ-70分别置于以亚硝酸钠、氯化铵、硝酸钾为唯一氮源的DM培养基中培养,观察其在各种单一氮源中的脱氮特性和生长状况。结果发现:24 h内以亚硝酸盐为唯一氮源时的氮素降解速度和生长速度最快,亚硝酸盐降解率和OD600分别达到67.38%和0.604。此外,以氨氮或硝酸盐为唯一氮源时氮素降解速度和生长速度都较为缓慢。培养至96 h时以亚硝酸盐或氨氮为唯一氮源的氮素降解率均达到99%以上,以硝酸盐为唯一氮源时氮素的降解率稍差,菌株JZ-70在三种单一氮源中的生长状况都较好。3、将菌株JZ-70置于亚硝酸钠、氯化铵、硝酸钾为氮源的DM培养基中,观察其脱氮特性。结果发现,在混合氮源的情况下,氨氮首先被降解,24 h时氨氮几乎被降解完全,降解率达89.20%;氨氮降解完后亚硝酸盐和硝酸盐的降解开始加速,至96 h时降解率分别为97.88%和82.05%;培养至96 h时培养基中的总氮从330 mg/L降解至190 mg/L（含胞内氮）,培养基中菌株的胞内氮增长至140 mg/L,水体中的p H值由初始的7增长到8.4,培养基由中性转变为碱性。4、本试验研究了温度、p H值、碳氮比和盐度等环境因子对JZ-70脱氮特性和生长状况的影响。结果发现,在1～30 g/L Na Cl范围内菌株JZ-70降解亚硝酸盐的能力和生长状况基本不受盐度影响;达到较好好氧反硝化性能的环境因子为温度22°C、28°C,p H值为7,碳氮比为20。综上所述:本试验筛选出的菌株JZ-70是一株能够有效降解养殖水体中氮素的好氧反硝化菌,菌株对氮素耐受性范围较大,在高浓度和低浓度氮素中都有较好的降解效果,能够作为后备菌株用于养殖水体富营养化的治理。

关键词：好氧反硝化生物脱氮固氮螺菌水质调控

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