检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：尚国辉中国科学院大学

学位级别：博士

促黄体生成素(LH)被报道在卵泡的成熟和排卵过程中发挥着非常重要的作用，但是促黄体生成素在调控鱼类卵泡成熟过程中的机制尚未被很好的研究。在本研究中，我们通过TALENs技术敲除斑马鱼的促黄体生成素的β亚基(lhb)，发现突变鱼的卵... 详细信息

促黄体生成素(LH)被报道在卵泡的成熟和排卵过程中发挥着非常重要的作用，但是促黄体生成素在调控鱼类卵泡成熟过程中的机制尚未被很好的研究。在本研究中，我们通过TALENs技术敲除斑马鱼的促黄体生成素的β亚基(lhb)，发现突变鱼的卵巢停滞于Ⅳ期卵泡。一般情况下，在排卵期前，卵泡存在昼夜动态变化。我们发现在lhb突变鱼的Ⅳ期卵泡中合成成熟诱导激素(MIH)的基因steroidogenic acute regulatory protein（StAR）的转录表达水平显著下降。我们通过腹腔注射孕烯醇酮、孕酮或MIH可以使成熟受阻的卵泡得到挽救，但尚难以对LH缺失所导致的排卵缺陷实现有效的挽救。为了进一步研究LH对卵泡成熟过程的调控信号通路，我们在斑马鱼中敲除了StAR基因，StAR突变体表现出和lhb突变体类似的卵泡成熟受阻的表型，在StAR缺失斑马鱼中的卵泡成熟受阻的表型则只能由MIH合成通路中StAR下游的产物孕酮或MIH挽救。我们的结果证明了在斑马鱼卵巢组织中的StAR是作为LH的下游调控靶点，参与MIH的合成，并对卵泡的成熟过程起着重要作用。　　脂肪是机体中一种主要的能量物质，脂肪组织是作为能量的来源的脂肪贮存的主要组织。作为鱼类的生长内分泌调控轴的核心，GH信号通路被证明对脂肪利用的促进是其行使其促生长功能的主要生理功能之一。通过前期敲除维生素D3的25位羟化酶，我们获得了与GH突变斑马鱼类似的表型，即腹部脂肪组织的过度积累和生长延滞。本部分的实验聚焦潜在的VD/VDR信号通路对脂代谢的促进作用及其与GH信号通路的关联作用。25(OH)D3可以有效地挽救cyp2r1敲除所导致的腹部脂肪积累和生长迟滞的表型，表明我们的cyp2r1敲除是基因特异性的。接着，我们发现GH蛋白在cyp2r1敲除的斑马鱼垂体中高表达，但肝组织中GH信号下游的STAT磷酸化水平却未见增高，该现象属于典型的GH信号抵抗症状。我们也发现在cyp2r1敲除的斑马鱼肝脏中GH信号通路的负反馈调控因子socs1a，cisha等家族成员均出现了增强的转录表达，但我们通过杂交获得的cyp2r1-/-;soca1a-/-和cyp2r1-/-;cish1-/-双突变纯合品系，均不能回补出现在cyp2r1敲除所导致的腹部脂肪积累和生长迟滞的表型。最后，本实验证明了在cyp2r1敲除的腹部脂肪组织中，出现了显著的脂肪酸氧化作用下降的现象。　　本实验表明，VD/VDR信号下降后，可以同时导致类似GH抵抗症状的出现，并出现类似GH信号缺失的腹部脂肪积累和生长迟滞的表型，但该表型的出现似乎与其负反馈调控因子socs1a和cisha在肝脏中的高表达无关。表明VD/VDR与GH信号通路在脂肪代谢调控中存在着一定的互作，但机制尚并不明晰。

关键词：斑马鱼促黄体生成素卵母细胞卵泡成熟脂肪代谢分子机制基因敲除模型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

ANXA2基因敲除小鼠模型的建立及其在肺癌转移研究中的应用

引用

中华肿瘤杂志 2025年第3期47卷 254-261页

作者：宋伟杰张璠王兆松田建飞牛瑞芳国家恶心肿瘤临床医学研究中心、天津市肿瘤防治重点实验室、天津医科大学肿瘤医院实验动物中心天津300060 国家恶心肿瘤临床医学研究中心、天津市肿瘤防治重点实验室、天津医科大学肿瘤医院公共实验室天津300060

目的建立膜联蛋白A2(ANXA2)基因敲除小鼠模型,为后续ANXA2相关机制研究提供有效工具。方法采用CRISPR/Cas9技术构建基因敲除小鼠模型,获得的模型经过组织DNA提取后进行PCR测序和Western blot检测,鉴定ANXA2基因型和蛋白的表达。成功构... 详细信息

目的建立膜联蛋白A2(ANXA2)基因敲除小鼠模型,为后续ANXA2相关机制研究提供有效工具。方法采用CRISPR/Cas9技术构建基因敲除小鼠模型,获得的模型经过组织DNA提取后进行PCR测序和Western blot检测,鉴定ANXA2基因型和蛋白的表达。成功构建的模型分为ANXA2敲除组与野生型组(WT组),通过小鼠尾静脉注射小鼠肺癌细胞(LLC)制作转移模型,使用活体成像技术对转移灶形成进行监测,并最终统计两组小鼠的生存率。结果设计针对ANXA2第1外显子的小向导RNA序列,利用显微注射技术获得16只首建鼠小鼠。通过同种小鼠杂交技术,最终获得30只纯合后代。品系建成后,小鼠分为ANXA2敲除组与WT组,每组各8只小鼠,分别建立LLC肺转移模型。WT组与ANXA2敲除组相比,转移灶数量显著增多(分别为7和1个),荧光强度强于敲除组(P=0.002)。GEPIA2数据库搜索肺癌患者肿瘤组织与正常组织中ANXA2基因的表达,肺癌肿瘤组织中ANXA2基因的表达水平高于正常组织(P<0.05)。ANXA2高表达与患者的无病生存时间、总生存时间缩短有关(均P<0.05)。ANXA2敲除组小鼠中位生存时间(43 d)相比于WT组小鼠(26 d)长(P=0.017),ANXA2表达与肺癌患者预后有关。结论ANXA2与恶性肿瘤转移密切相关,有望成为恶性肿瘤转移治疗新靶点。

关键词：肺肿瘤 CRISPR/Cas9 基因敲除模型转移模型膜联蛋白A2

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

应用TALEN技术构建HSF1缺陷的斑马鱼模型

应用TALEN技术构建HSF1缺陷的斑马鱼模型

引用

作者：魏亚庆华中科技大学

学位级别：硕士

热休克转录因子（Heat shock transcription factors,HSFs）或称为热休克因子,广泛存在于真核生物细胞中,是在功能和结构上同源性很高的一种转录因子。当细胞遭受热休克或其他环境压力时,HSFs激活热休克蛋白（Heat shock proteins,HSPs... 详细信息

热休克转录因子（Heat shock transcription factors,HSFs）或称为热休克因子,广泛存在于真核生物细胞中,是在功能和结构上同源性很高的一种转录因子。当细胞遭受热休克或其他环境压力时,HSFs激活热休克蛋白（Heat shock proteins,HSPs）的表达,从而维持细胞内稳态,帮助细胞存活。HSFs家族有四个成员,其中HSF1在哺乳动物中非常保守,是调控热休克蛋白表达的主要因子。HSF1直接参与了许多生理过程的调节,例如:生长发育、细胞凋亡、细胞分化、炎症以及肿瘤发生等。研究表明,在HSF1敲除的小鼠的晶状体上皮细胞中,HSF1与HSF4可竞争性地结合于靶基因的启动子,共同调控晶状体的发育,提示HSF1在晶状体发育过程中扮演着极其重要的作用。另外HSF1敲低的斑马鱼模型表明HSF1可能通过激活HSP70而调控晶状体的发育。斑马鱼胚胎透明,在眼睛发育初期即可对其进行观察,相对于小鼠更适合研究眼睛早期的发育。目前尚无HSF1敲除的斑马鱼模型的报道,因此有必要构建HSF1敲除的斑马鱼模型。TALEN（Transcription activator-like effector nuclease）技术是一种新的基因敲除技术。它利用TALE（Transcription activator-like effector）家族的蛋白结构单元特异性识别DNA靶序列之间的能力和非特异性的FokⅠ核酸内切酶切割靶序列,造成DNA双链断裂,诱发DNA修复机制,从而有很高几率诱导靶序列产生突变。本论文中,我们首先应用半定量RT-PCR技术检测了HSF1在斑马鱼中体内的时空表达。我们发现在斑马鱼胚胎发育过程中,HSF1在6hr时达到最高峰,48hr降至低谷,72hr后HSF1的表达量有所上升,但仍低于胚胎发育早期,表明该基因存在母源性表达。HSF1在成年斑马鱼各组织中普遍表达,在眼、卵巢、精巢中高表达,而在心脏、脾等组织中的表达比较低,这提示HSF1可能在多种组织器官中具有生理功能,在眼、卵巢和精巢等组织中发挥重要作用。应用TALEN技术我们进一步构建了HSF1缺陷的斑马鱼模型。通过TALEN在线软件设计选择HSF1外显子一的TALEN靶位点后,采用Golden Gate的方法成功构建出了TALEN表达质粒。应用RNA体外转录的方法合成TALEN的mRNA,将其注射到一细胞期的斑马鱼受精卵中。应用PCR-RFLP的方法检测TALEN效果,表明我们获得了F0嵌合突变体。通过F0和野生型斑马鱼杂交,我们成功获得了三种类型的F1代斑马鱼,分别是:c.9098delGGATCCGGA（***30Pro32del）,c.7881delGACG（***26Cysfs*10）和c.91delG（***31Ilefs*6）。本论文应用TALEN技术,首次在斑马鱼中敲除hsf1基因,得到三种HSF1缺陷的斑马鱼模型,为以后研究HSF1的功能,特别是在斑马鱼眼睛发育过程中的作用,及其具体的分子机制奠定了坚实的基础。

关键词：热休克转录因子1 晶状体发育 TALEN 基因敲除模型斑马鱼模型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

皮质发育障碍动物模型制作研究进展

皮质发育障碍动物模型制作研究进展

引用

第三届中国西南神经介入高峰论坛暨第十二届贵州省神经外科年会

作者：侯小飞贵州省人民医院神经外科

皮质发育障碍,又称皮质发育不良、皮质发育畸形,主要临床表现为癫痫,且以难治性癫痫为主.大脑皮质的发育主要经历神经细胞增殖分化、神经元迁移及皮质结构形成3个阶段,每个阶段发育异常都会导致皮质发育障碍.目前皮质发育障碍的致痫机... 详细信息

皮质发育障碍,又称皮质发育不良、皮质发育畸形,主要临床表现为癫痫,且以难治性癫痫为主.大脑皮质的发育主要经历神经细胞增殖分化、神经元迁移及皮质结构形成3个阶段,每个阶段发育异常都会导致皮质发育障碍.目前皮质发育障碍的致痫机制尚未完全清楚,皮质发育障碍动物模型的制作为研究其致痫机制、观察行为变化以及筛选抗癫痫药物提供了新的平台，文章分别介绍了目前的模型研究进展，包括基因敲除模型和孕鼠子宫模型、液氮皮层冰冻模型等。

关键词：皮质发育障碍动物模型基因敲除模型孕鼠子宫模型液氮皮层冰冻模型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

肝脏缺血再灌注损伤的分子机制研究进展:转基因模型新视角(摘译)

引用

中华损伤与修复杂志（电子版） 2013年第5期8卷 34-34页

作者：杨阳解放军第二炮兵总医院肝胆外科B区

Datta G, Fuller B J, Davidson BR. Molecular mechanisms of liver ischemia reperfusion injury： insights from transgenic knockout models [ J ]. World J Gastroenterol, 2013, 19 （ 11 ）： 1683-1698. 肝脏缺血再灌注损伤（ischemiareperfusioninjury，IRI）是一个临床相关现象，可发生在创伤外科、肝脏切除手术及肝移植手术等多个领域，对其临床疗效也有着深刻的影响。了解肝脏IRI的发生机制并获得对抗该损伤的相应措施，除可以扩大捐赠者移植物的利用潜力以外，还可以减少其引发的严重并发症。实验室研究利用基因敲除模型和大型动物实验为肝脏IRI机制的阐明提供了新的视角。

关键词：肝脏缺血再灌注损伤转基因模型分子机制 ischemia 摘译肝脏切除手术基因敲除模型临床疗效

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Brn3族转录因子对视网膜神经节细胞发育分化调控作用的研究进展

引用

眼科新进展 2011年第5期31卷 488-489,496页

作者：黄倞胡芳曾祥云江西省人民医院眼科江西省南昌市330006 南昌大学第一附属医院眼科江西省南昌市330006 赣南医学院第一附属医院眼科江西省赣州市341000

Brn3转录因子家族成员Brn3a、Brn3b和Brn3c广泛作用于中枢神经系统的发育分化过程,在胚胎期和成体视网膜神经节细胞中均有大量的表达。通过基因敲除技术研究发现,Brn3族转录因子成员的缺失将造成视网膜神经节细胞明显的发育缺陷,说明Brn... 详细信息

Brn3转录因子家族成员Brn3a、Brn3b和Brn3c广泛作用于中枢神经系统的发育分化过程,在胚胎期和成体视网膜神经节细胞中均有大量的表达。通过基因敲除技术研究发现,Brn3族转录因子成员的缺失将造成视网膜神经节细胞明显的发育缺陷,说明Brn3族成员是视网膜神经节细胞正常发育分化的重要调控因素。本文将对Brn3族转录因子在视网膜神经节细胞发育分化中的调控作用及其研究进展进行综述。

关键词： Brn3 视网膜神经节细胞基因敲除模型基因调控

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

炎症性肠病基因工程动物模型概述

引用

国际消化病杂志 2008年第2期28卷 136-138,144页

作者：杨英陈隆典常州市第一人民医院消化科 213003 南京市鼓楼医院消化科 210008

炎症性肠病(IBD)具有遗传异质性,许多免疫调制分子基因的突变可导致炎症发生。转基因和基因敲除动物模型带动了自发性结肠炎动物模型的发展。基因工程动物模型的研究有利于建立新的假说并可能为IBD患者提供新的治疗方法。

关键词：炎症性肠病动物模型转基因模型基因敲除模型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

2006年第10届国际帕金森病和运动障碍大会简讯

引用

中国临床神经科学 2007年第2期15卷 F0003-F0003页

作者：苏雅茹蒋雨平

·Gerd等报道：沙立佐坦目前用于治疗帕金森病（PD）异动症的临床试验，该研究小组发现在小鼠（RGS9基因敲除模型）和大鼠（偏侧PD模型）异动症模型中，给予沙立佐坦能够减轻左旋多巴和（或）喹洛雷导致的局灶性异动症（ID504．5mg&... 详细信息

·Gerd等报道：沙立佐坦目前用于治疗帕金森病（PD）异动症的临床试验，该研究小组发现在小鼠（RGS9基因敲除模型）和大鼠（偏侧PD模型）异动症模型中，给予沙立佐坦能够减轻左旋多巴和（或）喹洛雷导致的局灶性异动症（ID504．5mg·kg^-1）、前肢异动、轴性异动及口舌异动，且呈剂量依赖性。这些结果证明沙立佐坦能减轻PD的左旋多巴所致异动症，而且第一次证明沙立佐坦在基因突变的小鼠模型中同样有效。

关键词：帕金森病运动障碍简讯国际 PD模型基因敲除模型左旋多巴小鼠模型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

ATP敏感性钾通道

ATP敏感性钾通道

引用

全国细胞电生理及心律失常专题研讨会

作者：浦介麟阜外心血管病医院心律失常诊治中心北京100037

自1983年Noma首次报道心脏ATP敏感性钾通道(KATP)以来,先后在胰腺、骨骼肌、平滑肌、神经元、肾脏、线粒体均发现有KATP的存在.由于该通道的活性被ATP抑制,它的功能自然就与能量代谢联系了起来.以后的进一步研究发现KATP在胰腺β细胞调... 详细信息

自1983年Noma首次报道心脏ATP敏感性钾通道(KATP)以来,先后在胰腺、骨骼肌、平滑肌、神经元、肾脏、线粒体均发现有KATP的存在.由于该通道的活性被ATP抑制,它的功能自然就与能量代谢联系了起来.以后的进一步研究发现KATP在胰腺β细胞调节胰岛素的分泌,在肌纤维和神经元调节其兴奋性,在肾上腺皮质参于钾重吸收,在平滑肌调节血管张力,在心脏和脑子对缺氧起保护作用,近年发现位于线粒体内膜的KATP参于缺血预适应(ischemicpreconditioning,IPC)保护机制,等等.KATP基因及分子结构模式己比较清楚,电生理学、药理学研究己比较深入.近年来通过基因敲除模型对KATP的功能进行了比较深入地研究.本文研究:1KATP的基本分子学结构,2KATP通道的电生理及药理特性,3线粒体KATP(mitochondrialKATP,mKATP),4心脏KATP的临床意义。

关键词： ATP敏感性钾通道缺血预适应 KATP基因电生理学基因敲除模型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

细胞粘附分子NCAM、L1和细胞外基质分子tenascin-C片段对海马突触可塑性的影响

细胞粘附分子NCAM、L1和细胞外基质分子tenascin-C片段对海马突触...

引用

作者：孙木吉林大学

学位级别：博士

为了进一步探讨细胞粘附分子(CAMs)和细胞外基质(ECM)分子对于突触可塑性的影响,该研究借助了不同的基因敲除模型,结合了行为学观察和细胞培养基质排斥实验,采用海马CA1区长时程增强(LTP)模型对神经细胞粘附分子(NCAM)、神经细胞认知分... 详细信息

为了进一步探讨细胞粘附分子(CAMs)和细胞外基质(ECM)分子对于突触可塑性的影响,该研究借助了不同的基因敲除模型,结合了行为学观察和细胞培养基质排斥实验,采用海马CA1区长时程增强(LTP)模型对神经细胞粘附分子(NCAM)、神经细胞认知分子L1(L1)和tenascin-C(TN-C)不同片段对突触可塑性的作用进行了系统的分析.实验结论如下:1.该实验建立了有效可靠的鉴定不同分子对LTP影响的记录装置.2.该研究充分肯定了PSA-NCAM是NCAM的活性形式,在LTP形成过程中NCAM充当了PSA的载体,NCAM表面的糖基化修饰PSA对于LTP的形成至关重要,发现了PSA对于NCAM敲除动物的拯救作用.3.进一步肯定了在神经系统发育过程中起重要作用的L1认知分子不是LTP形成的必要分子.4.发现了TN-C分子的FN6-8片段是TN-C介导LTP调控的关键之一.

关键词：基因敲除模型海马CA1区神经细胞粘附分子神经细胞认知分子 tenascin-C 突触可塑性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：