检索结果-内蒙古大学图书馆

中草药 2003年第3期34卷 274-277页

作者：李汉兵姜凤超华中科技大学同济医学院药学院湖北武汉430030

综述常用于中药质量研究的基因片段 ,介绍基因片段的序列分析在中药品种鉴定、资源评价、亲缘关系及中药材道地性研究中应用的进展 ,为中药在基因水平的更深入、更系统的研究及药用动植物的开发和可持续利用提供资料。常用于中药研究的 ... 详细信息

综述常用于中药质量研究的基因片段 ,介绍基因片段的序列分析在中药品种鉴定、资源评价、亲缘关系及中药材道地性研究中应用的进展 ,为中药在基因水平的更深入、更系统的研究及药用动植物的开发和可持续利用提供资料。常用于中药研究的 DNA基因片段 ,主要包括叶绿体 DNA、核 DNA、线粒体 DNA三大类。基因片段的序列分析在中药质量研究中初步显示了优越性 ,也向我们提出了许多新的课题。

关键词：中药质量基因片段叶绿体DNA 核DNA 线粒体DNA 质量

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HC-Pro基因片段介导的高抗TuMV

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作物学报 2014年第3期40卷 550-555页

作者：叶艳英曾钢曹鸣庆马荣才吴才君姚磊北京市农林科学院/农业生物技术研究中心北京100097 江西农业大学农学院江西南昌330045

芜菁花叶病毒(turnip mosaic viruses,TuMV)是侵染重要经济作物的主要病毒之一,寄主范围十分广泛,尤其是对十字花科作物的危害最为严重。为了获得对TuMV持久稳定的高度抗性,本研究以TuMV HC-Pro基因的453 bp保守序列为靶标,构建了植物表... 详细信息

芜菁花叶病毒(turnip mosaic viruses,TuMV)是侵染重要经济作物的主要病毒之一,寄主范围十分广泛,尤其是对十字花科作物的危害最为严重。为了获得对TuMV持久稳定的高度抗性,本研究以TuMV HC-Pro基因的453 bp保守序列为靶标,构建了植物表达RNAi载体pBBBTu-HC-Pro,并转化了TuMV的天然宿主拟南芥。对转基因拟南芥用北京地区流行的TuMV强致病株BJ-C4进行了抗病接种鉴定。鉴定的13个单拷贝转基因株系中有4个对TuMV的BJ-C4株表现出高度抗性,抗性比对照提高约80%以上,且抗性可以稳定遗传。经半定量和荧光定量PCR方法检测,在高抗转基因植株体内几乎检测不到病毒的累积,抗病效果明显。该载体在利用基因工程抗TuMV育种中具有广阔的应用前景。

关键词：芜菁花叶病毒 HC-Pro 基因片段 RNAi 抗性

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含庚型肝炎病毒E2基因片段质粒DNA能诱发相当强烈的体液免疫应答(英文)

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生物工程学报 2004年第5期20卷 683-688页

作者： Fethia Ben Yebdri Abderrahmane AAZAZ 叶凯马辉文童立恒武汉大学药学院武汉430072 武汉生物技术研究开发中心武汉430030

研究了庚型肝炎病毒E2 (HGVE2 )基因片段作为DNA疫苗的可行性。将来自于质粒pThioHis E2编码HGVE2的基因片段 (5 5 9bp)亚克隆到质粒pCMV S中 ,使之和HBsAg基因位于同一阅读框 ,形成重组质粒pCMV S E2。用纯化的质粒pCMV S E2DNA注射到... 详细信息

研究了庚型肝炎病毒E2 (HGVE2 )基因片段作为DNA疫苗的可行性。将来自于质粒pThioHis E2编码HGVE2的基因片段 (5 5 9bp)亚克隆到质粒pCMV S中 ,使之和HBsAg基因位于同一阅读框 ,形成重组质粒pCMV S E2。用纯化的质粒pCMV S E2DNA注射到昆明小鼠后腿四头肌中来免疫小鼠 ,同时用pCMV S作为对照。间隔 14天再加强一次免疫。在加强免疫后的第 8天眼眶取血。用E2 GST融合蛋白作为固定化抗原 ,通过ELISA检测受试小鼠的体液免疫应答。结果表明 ,用质粒pCMV S

关键词： DNA疫苗庚型肝炎病毒 E2 基因片段质粒DNA 体液免疫

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重组SARS冠状病毒棘突蛋白S1区基因片段的克隆、表达及免疫原性研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2005年第3期19卷 275-278页

作者：梅亚波廖志勇王压娣张丽娅徐华 Yuen Kwok Yung 车小燕第一军医大学珠江医院中心实验室广州510282 香港大学微生物学系

目的构建SARS冠状病毒(SARS-CoV)棘突(spike)蛋白(S蛋白)S1区基因(40～2001bp)分段表达载体,并研究其免疫原性。方法利用PCR技术扩增S1区基因,将其定向插入pQE30质粒,在pQE30质粒上将S1切成3段(40～751、746～1344、746～2001bp),均插入... 详细信息

目的构建SARS冠状病毒(SARS-CoV)棘突(spike)蛋白(S蛋白)S1区基因(40～2001bp)分段表达载体,并研究其免疫原性。方法利用PCR技术扩增S1区基因,将其定向插入pQE30质粒,在pQE30质粒上将S1切成3段(40～751、746～1344、746～2001bp),均插入pQE30质粒,构建质粒在大肠埃希菌M15中表达,表达产物经亲和层析纯化及WesternBlot和ELISA鉴定。结果构建的3种重组质粒(pQE30/S1a、pQE30/S1b、pQE30/S1c)均高效表达,重组蛋白相对分子质量分别为26700、22500和46000,表达量分别占菌体总蛋白质的35%、35%和30%。3种重组蛋白经Ni亲和层析树脂得到成功纯化。经Western-Blot及ELISA证实,重组蛋白片段S1c(746～2001bp)可以被SARS患者血清所识别。结论成功构建了SARS-CoVS蛋白S1区基因分段表达载体,重组蛋白S1c具有较强的免疫原性,它的获得为下一步疫苗的研制奠定了基础。

关键词：严重急性呼吸综合征冠状病毒属蛋白质S 免疫活性 SARS冠状病毒免疫原性研究重组质粒基因片段 S蛋白棘突

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重组酶介导的日本血吸虫特异性基因片段核酸等温扩增检测方法的建立

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中国血吸虫病防治杂志 2018年第3期30卷 273-277,306页

作者：赵松李婷杨坤李伟张键锋郭利川刘燕红戴洋应清界羊海涛国家卫生和计划生育委员会寄生虫病预防与控制技术重点实验室江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室江苏省血吸虫病防治研究所无锡214064 江苏省奇天生物科技有限公司

目的建立一种可用于日本血吸虫特异性基因片段检测的重组酶介导的核酸等温扩增方法(RAA)。方法以日本血吸虫SjG28基因片段作为靶序列,根据RAA反应原理设计合成引物,建立并优化RAA反应体系。应用此方法与聚合酶链式反应(PCR)同时扩增梯... 详细信息

目的建立一种可用于日本血吸虫特异性基因片段检测的重组酶介导的核酸等温扩增方法(RAA)。方法以日本血吸虫SjG28基因片段作为靶序列,根据RAA反应原理设计合成引物,建立并优化RAA反应体系。应用此方法与聚合酶链式反应(PCR)同时扩增梯度稀释的含不同拷贝数的SjG28基因片段TA克隆质粒及不同浓度的基因组DNA,以评价其敏感性;应用此方法检测曼氏血吸虫、似蚓蛔线虫、十二指肠钩口线虫基因组DNA及健康人血基因组DNA,以评价其特异性。结果建立的RAA法可特异性扩增日本血吸虫中国大陆株成虫及虫卵基因组DNA,反应可在30 min内完成。以重组质粒为模板,RAA法最低可检出的质粒拷贝数为20个/μL;以基因组DNA为模板,RAA法最低可检测浓度为0.01 ng/μL。建立的RAA法以健康人全血基因组DNA及曼氏血吸虫成虫、似蚓蛔线虫、十二指肠钩口线虫基因组DNA为模板的扩增结果均为阴性。结论本研究建立了一种反应快捷、敏感性和特异性均较高的RAA方法,其具有应用于日本血吸虫病基因诊断的价值。

关键词：日本血吸虫基因片段核酸等温扩增重组酶

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应用mRNA差异显示技术筛选子宫内膜癌相关基因片段

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中华妇产科杂志 2001年第6期36卷 364-367,W001页

作者：孟元光魏丽惠李春海孙丽亚王建六北京大学人民医院妇产科现在解放军总医院妇产科100044 军事医学科学院肿瘤分子生物学室

目的　应用mRNA差异显示技术 ,筛选子宫内膜癌的相关基因片段。方法　提取同一患者的正常子宫内膜和子宫内膜癌组织总RNA ,行差异显示聚合酶链反应 (DD PCR)技术 ,扩增产物在测序胶上电泳 ,经银染分离筛选差异条带并测序 ,用BLAST基... 详细信息

目的　应用mRNA差异显示技术 ,筛选子宫内膜癌的相关基因片段。方法　提取同一患者的正常子宫内膜和子宫内膜癌组织总RNA ,行差异显示聚合酶链反应 (DD PCR)技术 ,扩增产物在测序胶上电泳 ,经银染分离筛选差异条带并测序 ,用BLAST基因数据库进行分析。结果　有 2条基因片段与已知人类基因片段同源性低或无同源性 ,自定义为T1 7,T1 7基因片段登陆号为AF315 5 81;另 2条基因片段与已知基因片段同源性高达 97 3%和 85 0 %。T1 7基因片段在子宫内膜癌组织中呈高表达 ,在增生的子宫内膜组织中呈低表达 ,在正常子宫内膜组织中不表达。结论　T1 7基因片段可能为子宫内膜癌新的相关基因片段。

关键词：子宫内膜肿瘤原位杂交 mRNA差异诊断基因片段

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卫氏并殖吸虫基因片段的克隆与鉴定

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2003年第3期21卷 144-146页

作者：凌家俭侯敏刘剑南章子豪张耀娟南京医科大学病原生物学与免疫学系南京210029

目的从卫氏并殖吸虫成虫cDDA文库中筛选并鉴定可用于免疫诊断和免疫预防的基因克隆。方法采用预吸收成虫抗原免疫兔血清(IRS,多抗)筛选阳性克隆,经PCR扩增后测定其插入片段的大小。序列分析后,对筛选的重组子进行双酶切,亚克隆入表达载... 详细信息

目的从卫氏并殖吸虫成虫cDDA文库中筛选并鉴定可用于免疫诊断和免疫预防的基因克隆。方法采用预吸收成虫抗原免疫兔血清(IRS,多抗)筛选阳性克隆,经PCR扩增后测定其插入片段的大小。序列分析后,对筛选的重组子进行双酶切,亚克隆入表达载体pRESETB,并转化大肠杆菌BL-21细胞,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定。结果所筛选的阳性克隆插入片段约800bp。DNA序列分析显示其为编码半胱氨酸蛋白酶族组织蛋白酶L的基因序列。Pw-2重组子特异性表达产物约为32kDa,可被卫氏并殖吸虫免疫兔血清特异地识别。结论从卫氏并殖吸虫成虫cDNA文库筛选的重组质粒Pw-2编码属于半胱氨酸蛋白酶族组织蛋白酶L。

关键词：卫氏并殖吸虫基因片段克隆鉴定重组蛋白

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病毒性脑炎患者Borna病病毒P24基因片段的检测

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中华神经科杂志 2005年第5期38卷 309-312页

作者：徐平谢鹏邹德智重庆医科大学附属第一医院神经内科

目的探讨Borna病病毒(BDV)感染与人类病毒性脑炎的关系。方法采用荧光定量套式逆转录酶聚合酶链反应(FQ nRT PCR)检测了59例临床诊断的原因未明的病毒性脑炎及112名健康人外周血单个核细胞(PBMC)中BDVP24基因片段。结果59例原因未明的... 详细信息

目的探讨Borna病病毒(BDV)感染与人类病毒性脑炎的关系。方法采用荧光定量套式逆转录酶聚合酶链反应(FQ nRT PCR)检测了59例临床诊断的原因未明的病毒性脑炎及112名健康人外周血单个核细胞(PBMC)中BDVP24基因片段。结果59例原因未明的病毒性脑炎患者中有3例PBMC中检出BDVP24基因片段,而112名健康对照均未检出。病毒性脑炎患者BDV阳性率(5.08%)高于健康对照,差异有统计学意义(P<0.05),且BDVP24基因片段检测阳性病例的脑脊液中其他常见致脑炎病毒(单纯疱疹病毒、带状疱疹病毒、腮腺炎病毒、柯萨奇病毒和巨细胞病毒)检查均为阴性。结论中国的部分病毒性脑炎患者中存在BDV感染,BDV感染与病毒性脑炎的发病可能有关。

关键词：病毒性脑炎基因片段 Borna病病毒患者检测套式逆转录酶聚合酶链反应 P24 人外周血单个核细胞 Boma病病毒单纯疱疹病毒带状疱疹病毒原因未明腮腺炎病毒巨细胞病毒柯萨奇病毒 BDV 临床诊断荧光定量 PBMC 脑炎病毒

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组成新发典型甲型H1N1流感病毒8个基因片段的变异性分析与疫病流行原因初探

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中国兽医科学 2009年第8期39卷 679-684页

作者：姚碧陈海龙刘琨张乐之赵玉军马兴元华东理工大学生物反应器国家重点实验室上海200237 沈阳农业大学畜牧兽医学院辽宁沈阳110161

为探索新近暴发的甲型H1N1流感病毒各基因片段的变异性与本次疫病流行的内在原因,以NCBI GenBank中报道的1株新发的典型H1N1甲型流感病毒A/New York/1669/2009(H1N1)作为研究对象,运用在线BLAST和CLUSTAL X等生物信息学软件对其PA、NP、... 详细信息

为探索新近暴发的甲型H1N1流感病毒各基因片段的变异性与本次疫病流行的内在原因,以NCBI GenBank中报道的1株新发的典型H1N1甲型流感病毒A/New York/1669/2009(H1N1)作为研究对象,运用在线BLAST和CLUSTAL X等生物信息学软件对其PA、NP、M、PB1、PB2、NA、HA和NS基因片段进行了比较分析。结果表明,新发甲型H1N1流感毒株的PB1、NP基因来源于人源谱系流感病毒,HA、NA、NS、M基因来源于猪源谱系流感病毒,PB2和PA基因来源于禽源谱系流感病毒。此外,新发甲型H1N1流感病毒的HA和NA分别在第249和386位新出现1个"-NTT-"、"-NFSI"-的糖基化位点。HA的6个潜在抗原决定簇中有3个发生了氨基酸序列改变,NA则是12个中有5个发生了改变。表明,这些抗原基因的大范围重组与高频率变异可能是造成这次流感暴发与大规模流行的根本原因。

关键词：甲型H1N1流感病毒基因片段变异性流行原因

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黑麦和水稻与脯氨酸合成有关的基因片段的克隆和鉴定

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中国科学（B辑） 1991年第2期 139-145页

作者：陈受宜王阁劳为德中国科学院遗传研究所北京100101 中国科学院生物物理研究所

用大肠杆菌营养缺陷互补法得到了含黑麦和水稻染色体DNA片段能互补于proA2^-的转化体.在渗透胁迫下,黑麦和转化体中这些片段的转录物都有明显增加,转化体中游离脯氨酸量也增加了.转化体的抗旱抗盐能力明显优于对照菌.初步分析,所克隆的... 详细信息

用大肠杆菌营养缺陷互补法得到了含黑麦和水稻染色体DNA片段能互补于proA2^-的转化体.在渗透胁迫下,黑麦和转化体中这些片段的转录物都有明显增加,转化体中游离脯氨酸量也增加了.转化体的抗旱抗盐能力明显优于对照菌.初步分析,所克隆的片段和植物的调渗作用有关.

关键词：黑麦水稻基因片段克隆鉴定

来源：评论

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