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中国糖尿病杂志 2016年第5期24卷 412-415页

作者：况雪梅尹亮孙侃新疆石河子大学医学院第一附属医院内分泌代谢科石河子832000

目的探讨新疆汉族T2DM及糖耐量正常(NGT)人群miR-375启动子区部分CpG位点的甲基化状态。方法采用基质辅助激光解析电离时间飞行质谱仪检测100例T2DM患者(T2DM组)和100名NGT者(NGT组)外周血白细胞中miR-375基因启动子区5个CpG位点的甲基... 详细信息

目的探讨新疆汉族T2DM及糖耐量正常(NGT)人群miR-375启动子区部分CpG位点的甲基化状态。方法采用基质辅助激光解析电离时间飞行质谱仪检测100例T2DM患者(T2DM组)和100名NGT者(NGT组)外周血白细胞中miR-375基因启动子区5个CpG位点的甲基化状态,并对结果进行分析。结果 (1)T2DM组平均甲基化水平高于NGT组(10.27%vs 7.24%,P<0.01);(2)T2DM组miR-375基因5个CpG位点的甲基化率均高于NGT组,如CpG_22、CpG_24.25、CpG_26.27,仅CpG_26.27在两组中比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论汉族T2DM患者外周血白细胞中miR-375基因部分启动子区异常甲基化水平可能与T2DM的发生有一定的关系。

关键词：糖尿病,2型 miR-375 DNA甲基化基质辅助激光解析电离时间飞行质谱仪

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miR-375启动子甲基化在MIN6细胞中存在状况的研究

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安徽医科大学学报 2020年第1期55卷 60-64页

作者：高敏尹亮况雪梅常向云石河子大学医学院石河子832000 石河子大学医学院第一附属医院内分泌代谢科石河子832000 石河子大学医学院第一附属医院呼吸内科石河子832000

目的该文旨在运用MassARRAY平台分析小鼠胰岛β细胞系(MIN6)的DNA甲基化谱,并应用DNA去甲基化药物5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理MIN6细胞以探索甲基化模式的改变。方法运用MassARRAY平台检测MIN6细胞系与小鼠胚胎成纤维细胞株(NIH... 详细信息

目的该文旨在运用MassARRAY平台分析小鼠胰岛β细胞系(MIN6)的DNA甲基化谱,并应用DNA去甲基化药物5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理MIN6细胞以探索甲基化模式的改变。方法运用MassARRAY平台检测MIN6细胞系与小鼠胚胎成纤维细胞株(NIH3T3)中miR-375基因DNA甲基化状态,并检测不同浓度5-Aza-CdR溶液处理MIN6细胞系后miR-375基因甲基化状态,评估其变化。应用噻唑蓝比色法(MTT)检测5-Aza-CdR对MIN6细胞的生长增殖的影响。使用qRT-PCR检测5-Aza-CdR 50μmol/L浓度组miR-375在MIN6细胞中和未处理的NIH3T3细胞中的表达。结果 5-Aza-CdR能抑制MIN6细胞的生长。用5-Aza-CdR处理24、48、72 h后,2μmol/L浓度组与其他各组比较,OD值均不同(P<0.05),且不同时间点之间进行比较差异有统计学意义(P<0.05)。经24、48、72 h,用不同浓度的5-Aza-CdR处理MIN6细胞后,各组mmu-miR-375的DNA均高度甲基化,50μmol/L组miR-375 DNA的平均甲基化率均低于其他组。检测出50μmol/L组5-Aza-CdR处理的MIN6细胞经24、48、72 h后,mmu-miR-375的表达高于0μmol/L组,差异有统计学意义(P<0.05)。MIN6细胞mmu-miR-375基因的DNA表达低于NIH3T3细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。结论该研究首次运用MassARRAY平台分析mmu-miR-375启动子甲基化水平,并发现在MIN6细胞中存在mmu-miR-375 DNA广泛甲基化修饰。

关键词： 2型糖尿病 miR-375 DNA去甲基化基质辅助激光解析电离时间飞行质谱仪

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新疆哈萨克族食管鳞癌miR-203基因甲基化改变及其意义

新疆哈萨克族食管鳞癌miR-203基因甲基化改变及其意义

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作者：王巍伟石河子大学

学位级别：硕士

目的：检测新疆哈萨克族食管鳞癌、癌旁非癌组织和正常食管粘膜中miR-203基因的甲基化状态,探讨miR-203基因甲基化与食管鳞癌之间的关系及其意义。方法：运用基质辅助激光解析电离时间飞行质谱仪（MALDI-TOF MS）检测99例新疆哈萨克族... 详细信息

目的：检测新疆哈萨克族食管鳞癌、癌旁非癌组织和正常食管粘膜中miR-203基因的甲基化状态,探讨miR-203基因甲基化与食管鳞癌之间的关系及其意义。方法：运用基质辅助激光解析电离时间飞行质谱仪（MALDI-TOF MS）检测99例新疆哈萨克族食管鳞癌、46例癌旁非癌组织和46例正常食管粘膜中miR-203基因甲基化状态。运用Cluster 3.0软件、TreeView软件对三组样本miR-203基因甲基化数据进行分层聚类分析。运用GraphPad Prism 5软件对三组样本miR-203基因甲基化数据进行分布状况分析。运用SPSS16.0软件对食管鳞癌/癌旁非癌组织/正常食管粘膜三组样本、ESCC临床病理学特征、HPV16感染间miR-203基因甲基化数据进行非参数秩和检验统计学分析。结果：1、食管鳞癌、癌旁非癌组织和正常食管粘膜三组miR-20315甲基化数据比较结果：新疆哈萨克族鳞癌、癌旁非癌组织中miR-20315呈高甲基化改变,且miR-20315有10个CpG单位（CpG7.8、CpG10、CpG11、CpG12、CpG14、CpG15.16、CpG17.18.19.20、CpG22.23、CpG24、CpG31.32）的高甲基化改变与新疆哈萨克族食管鳞癌的发生相关（p<0.05）；而miR-20315有两个CpG单位（CpG10、CpG11）在食管鳞癌与癌旁非癌组织之间存在甲基化水平的差异（p<0.017）,且这两个CpG单位的甲基化水平在癌旁非癌组织中较高。2、miR-20315甲基化与食管鳞癌临床病理学特征比较结果：与性别比较,miR-20315各CpG单位甲基化水平在两组间无差异性（p>0.05）；与年龄相关性分析显示,CpG22.23甲基化水平与年龄呈止相关（p<0.05）：与肿瘤发生部位比较,CpG 31.32甲基化水平在不同部位间存在差异性（p<0.05）,且甲基化率比较：下段>中段>上段；与肿瘤大体类型比较,CpG24甲基化水平在不同类型间存在差异性（p<0.05）；与肿瘤分化程度比较,CpG17.18.19.20甲基化水平在高、中、低分化程度间存在差异性（p<0.05）且甲基化率比较：中分化组>高分化组>低分化组；与淋巴结转移、TNM分期（Ⅰ期+Ⅱ期和Ⅲ期+Ⅳ期）比较,均无甲基化水平的差异性（p>0.05）。3、miR-20315甲基化与食管鳞癌HPV16感染比较结果：CpG15.16、CpG17.18.19.20在HPV16（+）组与HPV16（-）组之间存在甲基化水平差异性（p<0.05）,且甲基化率比较：感染组>非感染组。结论：1、新疆哈萨克族食管鳞状细胞癌与癌旁非癌组织miR-20315甲基化水平显著高于正常食管粘膜。2、新疆哈萨克族食管鳞状细胞癌miR-20315有10个CpG单位（CpG7.8、CpG10、CpG11、CpG12、CpG14、CpG15.16、CpG17.18.19.20、CpG22.23、CpG24、CpG31.32）呈高甲基化改变,这种改变可能是新疆哈萨克族食管鳞癌发生的一个早期事件。3、新疆哈萨克族食管鳞状细胞癌miR-20315有两个CpG单位（CpG15.16、CpG17.18.19.20）高甲基化改变与HPV16感染相关,两者可能协同作用共同参与新疆哈萨克族食管鳞状细胞癌的发生、发展。

关键词：食管鳞状细胞癌 miR-203基因甲基化基质辅助激光解析电离时间飞行质谱仪

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