检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物制品学杂志 2012年第8期25卷 963-966页

作者：刘尚允王丽春董承红赵恒杨二霞刘龙丁李琦涵中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118 昆明医学院昆明650031

目的探讨柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CA16)G20分离株在不同培养条件下的增殖动力学。方法常规培养Vero和人二倍体KMB-17细胞,待细胞长至单层,接种G20株病毒,进行病毒蚀斑试验,以0.1 MOI的感染复数分别感染此两种细胞,置不同... 详细信息

目的探讨柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CA16)G20分离株在不同培养条件下的增殖动力学。方法常规培养Vero和人二倍体KMB-17细胞,待细胞长至单层,接种G20株病毒,进行病毒蚀斑试验,以0.1 MOI的感染复数分别感染此两种细胞,置不同温度和pH维持液中进行培养,每2 h收样1次至第24 h,以48 h收样作为对照样,微量滴定法检测病毒滴度,并绘制增殖动力学曲线。结果 G20株病毒在Vero及KMB-17细胞中传代适应后,均可导致细胞病变。G20株病毒在此两种细胞中培养,pH 6.0、pH 6.5时,不同培养温度下,病毒基本不增殖;pH 7.5与pH 7.0的病毒增殖基本一致,增殖速度随温度呈现37℃>35℃>33℃的趋势;在33℃～37℃、pH 7.0～8.0时,病毒均有不同程度的增殖;在41℃、各pH条件下,病毒增殖均明显受到限制。结论病毒在此两种细胞中,37℃,pH 7.5培养条件下,增殖速度及滴度均较理想。

关键词：柯萨奇病毒温度 pH 增殖动力学

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Ⅲ型登革病毒D9964株在人胚肺二倍体细胞KMB17上适应株选育纯化及其增殖动力学研究

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病毒学报 2013年第3期29卷 287-292页

作者：赵玉娇潘玥阎玲梅岳耀斐杨丽娟陈俊英马绍辉施海晶孙强明中国医学科学院、北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

选育出Ⅲ型登革病毒中国株在人胚肺二倍体细胞KMB17上的适应株并对其生物学特性和增殖动力学进行研究,为研究登革病毒减毒活疫苗奠定基础。Ⅲ型登革病毒中国株D9964经RT-PCR鉴定型别正确后,进行毒种扩增和滴度测定;以4.0MOI接种KMB17细... 详细信息

选育出Ⅲ型登革病毒中国株在人胚肺二倍体细胞KMB17上的适应株并对其生物学特性和增殖动力学进行研究,为研究登革病毒减毒活疫苗奠定基础。Ⅲ型登革病毒中国株D9964经RT-PCR鉴定型别正确后,进行毒种扩增和滴度测定;以4.0MOI接种KMB17细胞,反复传代直至病毒能在细胞中适应和增殖;连续传10代,选育出KMB17细胞适应株,经三轮噬斑纯化筛选适应株,微量滴定法检测10代病毒培养液的感染性滴度;免疫荧光法检测纯化病毒株的抗原性;将病毒纯化株接种KMB17细胞,取第3～7d细胞提取RNA,以Real-time PCR检测病毒适应株在细胞中的增殖动态。结果显示,经适应性培养后Ⅲ型登革病毒中国株D9964能在KMB17细胞中稳定增殖,经噬斑纯化获得了高纯度的细胞适应株,病毒保持了原始毒株良好的抗原性;增殖动力学研究显示第5～6d为病毒在细胞内的增殖高峰期。

关键词：登革病毒人胚肺二倍体细胞适应性增殖动力学

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动态观察直肠癌旁移行粘膜P53、P21<'ras>蛋白表达及细胞增殖动力学变化与吻合口复发的关系

动态观察直肠癌旁移行粘膜P53、P21<'ras>蛋白表达及细胞增殖动力...

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作者：胡天明福建医科大学

学位级别：硕士

探讨直肠旁移行粘膜的性质及其与术后吻合口癌肿复发的关系.应用粘液组化、免疫组化技术和图像细胞光度计(ICM)对67例直肠癌手术切除标本及其近、远端肠管粘膜及33例术后1年、31例术后2年以上直肠粘膜病理活检标本(吻合口至其下3cm)同... 详细信息

探讨直肠旁移行粘膜的性质及其与术后吻合口癌肿复发的关系.应用粘液组化、免疫组化技术和图像细胞光度计(ICM)对67例直肠癌手术切除标本及其近、远端肠管粘膜及33例术后1年、31例术后2年以上直肠粘膜病理活检标本(吻合口至其下3cm)同步检测其P21<'ras>、P53蛋白表达率、增殖细胞核抗原(PCNA)指数及DNA含量和倍体变化.直肠癌旁移行粘膜是一种继发的非特异性改变,而不是原发性癌前病变,其存在与否和直肠癌根治术后吻合口癌肿复发无关.

关键词：直肠肿瘤移行粘膜蛋白质P53 蛋白质P21 增殖动力学肿瘤复发

来源：评论

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DMH诱发Sprague-Dawley大鼠大肠癌病因发病学及肠粘膜细胞增殖动力学的实验研究

DMH诱发Sprague-Dawley大鼠大肠癌病因发病学及肠粘膜细胞增殖动...

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作者：黄培林南京铁道医学院

学位级别：硕士

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白血病细胞增殖动力学的动态观察及维甲酸对白血病细胞增殖的影响

白血病细胞增殖动力学的动态观察及维甲酸对白血病细胞增殖的影响

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作者：李精明同济医科大学

学位级别：硕士

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流式细胞光度计在细胞增殖动力学研究中的应用

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北京医科大学学报 1989年第4期21卷 341-343页

作者：陈珊珊刘艳荣李鲲北京医科大学血液病研究所

流式细胞光度计(FLOW CYTOMETER,简称FCM)是近年来用于细胞生物学研究中的一种重要仪器。由于它可在数秒钟内精确定量测定成千上万个细胞,并能对一杂合的细胞群体中逐个测定单细胞多种参数等特点。FCM已成为近十多年来推动细胞生物学、... 详细信息

流式细胞光度计(FLOW CYTOMETER,简称FCM)是近年来用于细胞生物学研究中的一种重要仪器。由于它可在数秒钟内精确定量测定成千上万个细胞,并能对一杂合的细胞群体中逐个测定单细胞多种参数等特点。FCM已成为近十多年来推动细胞生物学、肿瘤学和免疫学在细胞水平上进行研究的不可缺少的仪器。本文仅简要介绍FCM测定单细胞内DNA、RNA与蛋白质,用于细胞增殖动力学的研究。以期在国内推广应用FCM技术解决临床医学和肿瘤学的问题。

关键词：细胞增殖增殖动力学细胞光度计

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生长激素对重症肝炎肝细胞增殖动力学的影响

生长激素对重症肝炎肝细胞增殖动力学的影响

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作者：李振方山东大学

学位级别：硕士

重症肝炎病情凶险,死亡率居各种肝病之首.目前国内外尚无十分有效的治疗措施.生长激素具有显著的促进细胞能量代谢、DNA复制、蛋白质合成、细胞再生和免疫调节等作用.在一些普通肝病中,生长激素的上述作用已得到证实,但在重症肝炎中的作... 详细信息

重症肝炎病情凶险,死亡率居各种肝病之首.目前国内外尚无十分有效的治疗措施.生长激素具有显著的促进细胞能量代谢、DNA复制、蛋白质合成、细胞再生和免疫调节等作用.在一些普通肝病中,生长激素的上述作用已得到证实,但在重症肝炎中的作用,未见文献报道.考虑到重症肝炎亚劣的微环境、低胰岛素样生长因子-1及生长激素抵抗现象等因素,生长激素浓度的提高有望促进肝细胞再生.该研究的目的在于探讨重症肝炎恶劣微环境下,生长激素对重症肝炎肝细胞增殖动力学的影响.[结论]:1.应用四氯化碳来诱导重症肝炎模型亦是一种简单理想的方法.2.生长激素对四氯化碳引起的急性肝损伤有保护作用,具有降酶、退黄作用.3.生长激素能促进蛋白质的表达.4.生长激素能促进重症肝炎肝细胞的增殖.5.重组人生长激素能诱导重症肝炎条件下CyclinD<,1>的高表达,从而促进肝细胞再生.6.重组人生长激素能抑制Fas的表达,从而抑制由四氯化碳引起的肝细胞凋亡.

关键词：生长激素肝炎肝细胞增殖动力学

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泽蛙(Rana limnocharis)活体内骨髓细胞增殖动力学的研究

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动物学报 1990年第2期36卷 205-209页

作者：虞世嘉臧澧芬温州师范学院生物学系

离体培养的动物细胞增殖规律已有不少的报道,但是两栖类活体内细胞增殖过程如何,尚未见报道。本文运用SCD术,对泽蛙活体内骨髓细胞增殖动力学进行了较系统地观察,最后推算出Tc为12—24小时。

关键词：泽硅骨髓细胞增殖动力学

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CA16在不同温度与pH条件下的增殖动力学初探

CA16在不同温度与pH条件下的增殖动力学初探

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作者：刘尚允北京协和医学院

学位级别：硕士

柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16, CA16)属于小核糖核酸病毒科(Picornaviridas)、肠道病毒属(Enterovirus)成员,它与肠道病毒71型(Enterovirus 71, EV71)是儿童手足口病(hand-foot-mouth disease, HFMD)的两大主要病原。相对EV71而言,CA16感染引起的HFMD临床症状较轻,并发症的发生率也较低,所以对其研究也远不及前者。但近年越来越多的报道指出,CA16感染可能与心肌炎、难治性休克等致死性并发症的发生有关,个别地区还有引起成人致死性肺炎的报道。CA16有可能成为长期存在于人类宿主并引发一系列疾病的病原,所以有必要对此病毒加深了解。本文针对前期研究中的CA16分离株G20的生物学特点进行了探讨,并进一步研究了其在不同细胞基质内和不同培养条件下的增殖情况。本研究结果显示,通过蚀斑筛选和细胞适应传代,G20株能够在Vero细胞和KMB-17细胞中获得增殖扩增,并可观察到细胞的显著病变；动物实验表明,经颅内注射病毒的ICR乳鼠腿部出现麻痹。此株病毒在Vero和KMB-17两种细胞中：pH6.0与6.5环境下在实验温度病毒不增殖或增殖非常缓慢；一般pH7.0时病毒增殖速度及24小时内所达到的滴度小于pH7.5的情况；在33℃～37℃环境下,pH7.0～8.5时病毒均有不同程度的增殖；在较低温度33℃、35℃时稍高pH8.0与8.5环境更有利于病毒快速增殖；39℃环境下,pH7.5～8.5时病毒均有不同程度的增殖。在41℃环境下：各pH环境中病毒基本不增殖或增殖很缓慢,达到的滴度很小；Vero细胞中pH8.0与8.5时病毒似有增殖；KMB-17细胞中pH8.0时病毒似有增殖。两种细胞在不同条件下对病毒增殖影响基本相似,但依具体情况稍有不同。整体来看,偏碱性环境一定条件下有利于病毒快速增殖,但有时过碱可观察到细胞破碎严重；实验中两种细胞在37℃、pH7.5培养条件下病毒增殖速度和所达到的滴度都较可观。

关键词：柯萨奇A16 温度 pH 增殖动力学

来源：评论

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EV71不同毒株在不同温度条件下的增殖动力学研究

EV71不同毒株在不同温度条件下的增殖动力学研究

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作者：刘云霞昆明医学院

学位级别：硕士

EV71是小RNA病毒科肠道病毒属的成员。1969年在美国首次被分离后,在世界各地都不断有报道。EV71在世界范围内广泛分布,没有地域性。多流行于夏秋季节,但全年均可发生。人是EV71唯一的自然宿主,通过人群间的密切接触,经呼吸道、消化道和... 详细信息

EV71是小RNA病毒科肠道病毒属的成员。1969年在美国首次被分离后,在世界各地都不断有报道。EV71在世界范围内广泛分布,没有地域性。多流行于夏秋季节,但全年均可发生。人是EV71唯一的自然宿主,通过人群间的密切接触,经呼吸道、消化道和接触病毒分泌物的途径传播。EV71感染在多数情况为隐性感染,也可表现为手足口病和疱疹性咽峡炎,患者以小儿居多。由于EV71亦具有嗜神经系统特性,因此其感染还可导致中枢神经系统疾病,并留下较严重的后遗症或导致死亡。因此,EV71所导致的感染流行,具有很重要的公共卫生意义。由于目前尚无针对EV71感染的特异性治疗药物,开发相关的疫苗对于手足口病的防治具有重要意义。 EV71可以分A、B、C三种基因型,共有十种以上的基因亚型。EV71的基因型与病毒的分离时间和流行地区有一定的关系,但和感染导致的临床症状没有必然联系。中国大陆自1999年起,流行的EV71均为C4亚型。 EV71复制周期大约12个小时,复制周期与温度、pH、宿主细胞、感染的多样性等因素相关；EV71的复制周期包括吸附、脱壳、进入、RNA合成和复制、蛋白合成、颗粒组装和释放等步骤。病毒首先组装成没有感染性的原病毒颗粒,在VP0被裂解为VP2、VP4后形成具有感染性的成熟病毒颗粒。 EV71病毒的治病过程可分为3个阶段,初期：病毒在咽粘膜和扁桃体中繁殖扩增；中期：病毒进入血液循环,形成病毒血症,进一步在网状内皮细胞中扩增；后期：通过血液侵犯包括皮肤黏膜和中枢神经系统在内的多种器官和组织,引起疱疹性咽峡炎、无菌性脑膜炎等一些病理性变化。本研究的目的是认识温度对EV71在组织培养细胞(Vero)中的增殖动力的影响。选取分离于中国大陆不同地区的三个EV71流行毒株,分别在32℃、35℃、37℃和40℃四个温度培养,微量滴定法测定子代感染性滴度,绘制病毒生长曲线；分别在32℃、35℃、37℃和40℃四个温度进行病毒噬斑形成实验；及收集分别在32℃、35℃、37℃、40℃四个温度培养收获的子代病毒在37℃进行噬斑实验；动物致病性实验,在新生ICR乳鼠颅内注射接种分别于32℃、35℃、37℃和40℃四个温度培养收集的病毒。实验结果表明：EV71在35℃和37℃时致相同数量Vero细胞完全病变所需时间最短,在35℃时致相同数量Vero细胞完全病变收获的子代病毒感染性滴度最高。37℃时病毒在感染24小时后获得了感染性滴度最高的子代病毒,感染24小时37℃培养的病毒表现出最高的增殖速率,35℃时次之,40℃时病毒的增殖速率最低。35℃时由于病毒增殖的指数期时间的延长,病毒的增殖在达到了较37℃时更高水平的增殖平衡后才进入平台期,决定了病毒增殖进入平台期后,35℃条件下收获的病毒滴度最高。在病毒噬斑培养和新生乳鼠的颅内注射病毒感染的实验中,各温度培养的病毒没有表现出明显差异的实验结果。这提示了在不同温度下,EV71在Vero细胞中增殖一代并不会对病毒侵蚀细胞的噬斑形态,及对实验动物(ICR乳鼠)的致死率产生有意义的影响。

关键词： EV71温度增殖动力学

来源：评论

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