检索结果-内蒙古大学图书馆

肿瘤 2010年第11期30卷 908-912页

作者：吴静闫亚妮张颖徐丹刘变利潘荣西安交通大学厌学院第二附属医院妇产科西安710004

目的:探讨抗氧化剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)联合卡铂对宫颈癌HeLa细胞增殖及凋亡的影响。方法:体外培养HeLa细胞,药物作用分为空白组、PDTC组、卡铂组和PDTC+卡铂联合组。各组药物处理后,MTT法检测细... 详细信息

目的:探讨抗氧化剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)联合卡铂对宫颈癌HeLa细胞增殖及凋亡的影响。方法:体外培养HeLa细胞,药物作用分为空白组、PDTC组、卡铂组和PDTC+卡铂联合组。各组药物处理后,MTT法检测细胞生长抑制率,FCM法检测细胞凋亡率和细胞周期分布情况,免疫细胞化学方法观察核转录因子κB(nuclearfactor-kappa B,NF-κB)p65在细胞质和细胞核中表达水平的变化。结果:MTT法检测结果显示,PDTC能够有效地抑制宫颈癌HeLa细胞的增殖,呈时间和剂量依赖关系;小剂量(12.5μmol/L)PDTC和卡铂联合应用较单用卡铂,能明显提高细胞生长抑制率(P<0.01)。FCM法检测结果显示,各用药组较对照组以及PDTC+卡铂联用组与单用卡铂组比较,宫颈癌HeLa细胞的凋亡率差异有统计学意义(P<0.01)。HeLa细胞经PDTC作用后,G0/G1期细胞比例较对照组明显增加(P<0.01),S期细胞比例降低(P<0.01);卡铂单用组使细胞周期阻滞于G2/M期;联合用药组使细胞周期进一步阻滞于G2/M期,且与对照组比较,降低了S期细胞比例(P<0.01)。免疫细胞化学法检测结果显示,NF-κBp65在宫颈癌HeLa细胞中主要表达于细胞质,卡铂诱导24 h后细胞质中NF-κBp65转移至细胞核,其活性增强,而PDTC能够抑制此作用。结论:卡铂能够诱导NF-κBp65的活化。小剂量(12.5μmol/L)PDTC和卡铂联合应用较单用卡铂,能明显增加对宫颈癌HeLa细胞的生长抑制率和细胞凋亡率。PDTC可能提高宫颈癌HeLa细胞对卡铂的敏感性。

关键词：抗氧化剂 PDTC 卡铂联合诱导宫颈癌 HeLa细胞增殖和凋亡 HeLa cells cervical cancer 细胞生长抑制率细胞周期阻滞免疫细胞化学法检测结果吡咯烷二硫代氨基甲酸盐细胞凋亡率细胞质对照组联合应用小剂量细胞核

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Sirtinol联合K-ras基因RNA干扰对胰腺癌PANC-1细胞增殖和凋亡的影响

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世界华人消化杂志 2015年第5期23卷 767-771页

作者：许进军甘宁湖北省肿瘤医院中西医结合科湖北省武汉市430034

目的:探讨Sirtinol联合K-ras基因RNA干扰对胰腺癌PANC-1细胞增殖和凋亡的影响.方法:用50μmol/m L的Sirtinol和50 nmol K-ras si RNA处理胰腺癌PANC-1细胞48 h,分为C组(无加药处理),K组(加K-ras si RNA处理),S组(加Sirtinol处理),(K+S)组(加K-ras si RNA和Sirtinol处理);Western blot检测SIRT1蛋白的表达情况,Q-PCR检测K-ras m RNA水平和周期蛋白Cyclin D1 m RNA水平,MTT检测细胞的增殖活力,流式细胞仪检测细胞的凋亡情况.结果:Western blot结果显示相对于C组和K组,S组和(K+S)组中的SIRT1蛋白的表达明显下降;Q-PCR结果显示K组和(K+S)组中的K-ras m RNA水平分别是C组的0.454±0.037、0.413±0.032倍,差异具有统计意义;MTT结果显示C组、K组、S组和(K+S)组的A值分别是0.814±0.025、0.634±0.038、0.613±0.036、0.401±0.019,相对于C组,K组、S组和(K+S)组的A值明显下降,其中(K+S)组最明显;Q-PCR结果显示K组、S组和(K+S)组中的Cyclin D1 m RNA水平分别是C组的0.693倍±0.046倍、0.634倍±0.032倍、0.400倍±0.034倍,差异具有统计学意义,其中(K+S)组下降最明显;流式细胞仪显示C组、K组、S组和(K+S)组的凋亡率分别是4.29%±0.246%、7.4 6 9%±0.4 5 7%、8.2 0 6%±0.4 9 0%、12.272%±0.675%,相对于C组,K组、S组和(K+S)组的凋亡率明显上升,其中(K+S)组最明显.结论:Sirtinol联合K-ras si RNA可以更明显的抑制胰腺癌PANC-1细胞的增殖和促进其凋亡.

关键词：胰腺癌 Sirtinol K-ras基因RNA干扰增殖和凋亡

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宫颈癌细胞中RNA干扰SNX 10基因对细胞增殖和凋亡影响的研究

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石河子大学学报（自然科学版） 2020年第6期38卷 728-733页

作者：张春贺付少伟王芳王露月者湘漪李洪涛李冬妹潘泽民石河子大学医学院生物化学教研室/新疆地方与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子832002 石河子大学医学院人体解剖学与组织胚胎学教研室新疆石河子832002

目的探讨分拣蛋白SNX 10基因在宫颈癌组织及细胞中的表达水平及其与HPV感染的关系,探讨SNX 10基因对宫颈癌细胞增殖及凋亡的影响。方法采用组织芯片法分析SNX10蛋白在正常宫颈及宫颈癌组织中表达情况。设计SNX 10基因的ShRNA干扰片段分... 详细信息

目的探讨分拣蛋白SNX 10基因在宫颈癌组织及细胞中的表达水平及其与HPV感染的关系,探讨SNX 10基因对宫颈癌细胞增殖及凋亡的影响。方法采用组织芯片法分析SNX10蛋白在正常宫颈及宫颈癌组织中表达情况。设计SNX 10基因的ShRNA干扰片段分别转染宫颈癌SiHa细胞和HeLa细胞,实验组包括:转染Sh-SNX10-303和Sh-SNX10-647的细胞组,未转染的细胞和非干扰转染细胞(NC组)为对照组。Western blot及qRT-PCR方法检测SNX 10基因在宫颈癌细胞中蛋白质及mRNA表达水平,通过第二代杂交俘获技术(hybrid capture system-2,HC-2)检测宫颈组织中HPV感染情况,CCK-8实验检测细胞增殖情况,流式细胞术分析干扰SNX 10基因表达后细胞凋亡率的变化。结果组织芯片实验发现宫颈癌组织细胞中,SNX10基因高表达,差异显著(P<0.05);其表达与HPV感染尚未发现明显关联(P>0.05);在干扰SNX10基因的表达之后,宫颈癌SiHa和HeLa细胞的增殖受到抑制,并且其凋亡率也升高(P<0.05)。结论SNX10基因对HPV感染没有影响,但在宫颈癌组织和细胞中高表达,SNX10基因可能作为一个靶标用于宫颈癌的预防和治疗。

关键词：宫颈癌 SNX10基因 HPV,shRNA干扰增殖和凋亡

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莪术醇联合5-氟尿嘧啶对大肠癌细胞增殖和凋亡的影响

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中国实验方剂学杂志 2018年第18期24卷 130-133页

作者：刘皓葳王娟秦建莉李旭梅陈旭桂林医学院

目的：探讨莪术醇（curcumol）联合5-氟尿嘧啶（5-Fu）对大肠癌Lo Vo细胞增殖和凋亡作用的影响,以及药物处理后,Lo Vo细胞中增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）和凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2（B cell lymphoma-2... 详细信息

目的：探讨莪术醇（curcumol）联合5-氟尿嘧啶（5-Fu）对大肠癌Lo Vo细胞增殖和凋亡作用的影响,以及药物处理后,Lo Vo细胞中增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）和凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2（B cell lymphoma-2,Bcl-2）表达量的变化情况。方法：莪术醇（50 mg·L-1）单独或联合5-Fu（2 mg·L-1）作用大肠癌Lo Vo细胞,用噻唑蓝（MTT）比色法检测各组药物对细胞增殖的抑制作用,采用流式细胞术分析各组对细胞凋亡作用的影响,应用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组细胞中,增殖和凋亡相关蛋白PCNA,Bcl-2蛋白表达的变化情况。结果：与空白组比较,莪术醇,5-Fu单独给药以及联合用药,均可以有效抑制大肠癌Lo Vo细胞的增殖,促进细胞凋亡（P〈0.05）,同时可以降低PCNA,Bcl-2蛋白的表达（P〈0.05）;与单独给药组比较,联合用药后,凋亡的促进作用更为明显（P〈0.05）。与空白组比较,各药物组可以更有效的抑制PCNA,Bcl-2蛋白的表达（P〈0.05）。结论：莪术醇联合5-氟尿嘧啶能有效抑制人大肠癌Lo Vo细胞的增殖和凋亡,与单独用药组比较,联合用药可以使癌细胞的敏感性增强,极大程度的促进人大肠癌Lo Vo细胞凋亡,且这些机制可能与下调PCNA,Bcl-2蛋白表达有关。

关键词：莪术醇 5-氟尿嘧啶(5-Fu) 大肠癌细胞增殖和凋亡增殖细胞核抗原(PCNA) B淋巴细胞瘤-2(Bocl-2)

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启动子区甲基化对miRNA-122表达及肝癌细胞增殖和凋亡的影响

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中国急救医学 2017年第A01期37卷 90-91页

作者：刘超江苏护理职业学院江苏淮安223305

目的综合分析启动子区甲基化对miRNA-122表达及肝癌细胞增殖和凋亡的影响.方法选取23例肝癌细胞者作为实验组,选择同期收治的23例肝外肿瘤肝转移手术者作为对照组.采用甲基化测序检测肝癌细胞中miRNA-122的启动子区甲基化状态,采用PC... 详细信息

目的综合分析启动子区甲基化对miRNA-122表达及肝癌细胞增殖和凋亡的影响.方法选取23例肝癌细胞者作为实验组,选择同期收治的23例肝外肿瘤肝转移手术者作为对照组.采用甲基化测序检测肝癌细胞中miRNA-122的启动子区甲基化状态,采用PCR测量肝癌细胞中的miRNA-122,采用流式细胞仪、CCK8检测甲基化对于肝癌细胞的增殖状况和凋亡状况,分析两组miRNA-122启动子区的甲基化程度.结果实验组miRNA-122启动子区甲基化显著高于对照组(P<0.05),5μmol/L5-氮杂-2-脱氧胞苷对Huh7、HepG2、QSG-7701细胞增殖影响显著高于0μmol/L、10μmol/L(P<0.05),实验组患者细胞凋亡数显著高于对照组(P<0.05).结论 miRNA -122的表达受启动子区甲基化的影响,与肝癌细胞的凋亡密切相关, miRNA-122启动子区甲基化可能参与到了肝癌的增殖和凋亡.

关键词： miRNA-122 启动子区甲基化肝癌细胞增殖和凋亡

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乙二醛酶Ⅰ过表达对孕激素调控子宫内膜癌细胞株Ishikawa增殖和凋亡活性的影响

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现代妇产科进展 2015年第5期24卷 347-350页

作者：王倩倩王亮祝亚平张箴波丰有吉浙江省人民医院妇产科杭州310000 上海交通大学附属第一人民医院妇产科上海200080

目的:探讨乙二醛酶I(GLO-I)过表达对孕激素调控子宫内膜癌细胞增殖和凋亡活性的影响。方法:采用脂质体将GLO-I基因真核表达载体pc DNA GLO-I及空白载体pc DNA转染子宫内膜癌细胞株Ishikawa,G418筛选获得抗性亚克隆细胞株。RT-PCR和Weste... 详细信息

目的:探讨乙二醛酶I(GLO-I)过表达对孕激素调控子宫内膜癌细胞增殖和凋亡活性的影响。方法:采用脂质体将GLO-I基因真核表达载体pc DNA GLO-I及空白载体pc DNA转染子宫内膜癌细胞株Ishikawa,G418筛选获得抗性亚克隆细胞株。RT-PCR和Western blot法检测子宫内膜癌细胞中GLO-I表达,Western blot法检测未转染组、转染pc DNA-GLO-I组及转染pc DNA组的caspase 3、cyclin D1凋亡和增殖分子的表达。用DMSO和10μmol/L甲羟孕酮(MPA)分别刺激转染pc DNA-GLO-I组和未转染Ishikawa细胞,Western blot法检测增殖和凋亡分子表达。结果:转染pc DNA-GLO-I组细胞中GLO-I mRNA、蛋白水平均显著高于未转染组(P<0.01)。与未转染组和转染pc DNA组比较,转染pc DNA-GLO-I组细胞的增殖分子cyclin D1表达增加,凋亡分子caspase 3表达相对减少(P<0.05)。经MPA刺激后,未转染组Ishikawa细胞的增殖分子cyclin D1表达量明显降低,而凋亡分子caspase 3表达量明显升高(P<0.05),而转染pc DNA-GLO-I组细胞增殖分子和凋亡分子表达均无明显变化(P>0.05)。结论:GLO-I高表达影响子宫内膜癌细胞的增殖和凋亡,并影响孕激素对肿瘤细胞的增殖和调控。

关键词：子宫内膜癌甲羟孕酮乙二醛酶I 基因表达增殖和凋亡

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基于炎症相关细胞因子探究维生素D3对子宫肌瘤细胞增殖和凋亡的影响

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中国老年学杂志 2024年第13期44卷 3263-3266页

作者：孙立莉张林静李常虹陈惠丽海南省妇女儿童医学中心妇科海南海口571100

目的从炎症相关细胞因子表达情况观察维生素D3对子宫肌瘤细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法选取对数生长期的人子宫肌瘤细胞HUSMC,经培养后分为对照组和观察组,观察组加入终浓度分别为10、20、50 U/g的维生素D3,分别于培... 详细信息

目的从炎症相关细胞因子表达情况观察维生素D3对子宫肌瘤细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法选取对数生长期的人子宫肌瘤细胞HUSMC,经培养后分为对照组和观察组,观察组加入终浓度分别为10、20、50 U/g的维生素D3,分别于培养12、24、48 h后,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)检测HUSMC细胞增殖情况,通过流式细胞术检测HUSMC细胞凋亡情况,通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3和Bcl-2相关X蛋白(Bax)等基因的表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。结果与对照组相比,20、50 U/g维生素D处理组12、24、48 h细胞增殖率及凋亡率、caspase-3、Bcl-2、Bax mRNA表达及IL-1β、IL-6、TNF-α水平差异显著(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。20、50 U/g维生素D处理组48 h细胞增殖率、caspase-3、Bcl-2 mRNA表达及IL-1β、IL-6水平与10 U/g维生素D处理组比较差异显著(P<0.05)。50 U/g维生素D处理组24 h细胞增殖率、48 h细胞凋亡率、Bax mRNA表达及TNF-α水平与10、20 U/g维生素D处理组比较差异显著(P<0.05),12 h细胞凋亡率与10 U/g维生素D处理组比较差异显著(P<0.05)。结论维生素D能够抑制HUSMC细胞增殖并促进细胞凋亡,并且能够降低炎症反应,提示维生素D对子宫肌瘤具有有益作用。

关键词：子宫肌瘤增殖和凋亡炎症因子维生素D

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厄贝沙坦通过抑制IRAK1介导p38MAPK信号通路对高糖诱导的肾小管上皮细胞增殖和凋亡的影响

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中国老年学杂志 2021年第6期41卷 1289-1293页

作者：高兰刘海蔚纪群海南省人民医院内分泌科海南海口570100

目的研究厄贝沙坦是否靶向白细胞介素-1复体激活激酶(IRAK1)基因并通过介导p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路影响高糖诱导的肾小球上皮细胞增殖和凋亡。方法将人近端肾小管上皮细胞HKC随机分为对照组、高糖组和高糖+厄贝沙坦不同浓... 详细信息

目的研究厄贝沙坦是否靶向白细胞介素-1复体激活激酶(IRAK1)基因并通过介导p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路影响高糖诱导的肾小球上皮细胞增殖和凋亡。方法将人近端肾小管上皮细胞HKC随机分为对照组、高糖组和高糖+厄贝沙坦不同浓度(10^(-6)mol/L、10^(-5)mol/L、10^(-4)mol/L)组,噻唑蓝(MTT)实验和流式细胞仪检测各组细胞增殖和凋亡情况,Western印迹检测细胞中IRAK1、p-p38、p38蛋白表达,分析沉默IRAK1对高糖诱导的细胞增殖、凋亡及p-p38、p38蛋白表达的影响及过表达IRAK1对厄贝沙坦作用的影响。结果与高糖组比较,厄贝沙坦各处理组细胞增殖活性明显增加,细胞凋亡率明显降低,细胞中IRAK1、p-p38蛋白表达水平明显降低(P<0.05),10^(-5)mol/L、10^(-4)mol/L浓度组作用更加明显;沉默IRAK1后明显抑制了高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡,增强了细胞增殖活性,并抑制了细胞中p-p38蛋白表达;过表达IRAK1逆转了厄贝沙坦对高糖诱导的肾小管上皮细胞增殖和凋亡的影响作用。结论高糖环境下,厄贝沙坦能够有效增强肾小管上皮细胞增殖活性,降低细胞凋亡率,其作用机制可能与调控IRAK1/p38MAPK信号通路有关。

关键词：肾小管上皮细胞高糖厄贝沙坦 IRAK1 p38MAPK信号通路增殖和凋亡

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二氧化碳作为膨宫介质在不同压力下对子宫内膜癌细胞增殖和凋亡影响的体外研究

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中国内镜杂志 2009年第11期15卷 1121-1125页

作者：李莉谭欣廖治袁琦瞿大成高雪梅四川省成都市第五人民医院妇产科四川成都611130 四川大学华西第二医院妇产科四川成都610041 四川省人民医院妇产科四川成都610041

目的研究膨宫介质二氧化碳在不同作用压力下对子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响。方法实验分为对照组和低(40 mmHg)、中(70 mmHg)、高(100 mmHg)压力3个实验组。实验组将人子宫内膜癌细胞(HEC-1-B)置于压力容器中,向容器内充入100%二氧... 详细信息

目的研究膨宫介质二氧化碳在不同作用压力下对子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响。方法实验分为对照组和低(40 mmHg)、中(70 mmHg)、高(100 mmHg)压力3个实验组。实验组将人子宫内膜癌细胞(HEC-1-B)置于压力容器中,向容器内充入100%二氧化碳气体,使容器内压力分别达到40、70和100mmHg,各维持1 h。1 h后取出子宫内膜癌细胞,作好实验各组的压力标记,放入普通二氧化碳孵育箱继续培养。对照组则将子宫内膜癌细胞置于普通二氧化碳孵育箱环境中1 h。经上述处理后的连续7 d,每隔24 h采用四唑盐比色试验(MTT)测量各实验组和对照组子宫内膜癌细胞的增殖变化情况,采用流式细胞仪碘化丙啶(PI)活细胞染色法测量各实验组和对照组子宫内膜癌细胞凋亡变化的情况。结果①对照组、低压组、中压组、高压组内膜癌细胞MTT比色的OD值均呈逐渐上升趋势,对照组的上升趋势较实验各组明显,差异有显著性(P<0.05),低压组与中压组、低压组与高压组比较,差异有显著性(P<0.05),中压组与高压组的差异无显著性(P>0.05)。②对照组、低压组、中压组、高压组内膜癌细胞PI染色的凋亡细胞百分比均逐渐上升,实验各组的上升趋势较对照组明显,差异有显著性(P<0.05),低压组与高压组、中压组与高压组比较,差异有显著性(P<0.05),低压组与中压组比较,差异无显著性(P>0.05)。结论二氧化碳在40～100mmHg压力范围内,能够抑制子宫内膜癌细胞的增殖,促进子宫内膜癌细胞的凋亡,且随着压力的增加,二氧化碳对子宫内膜癌细胞增殖抑制和促进凋亡作用愈明显。

关键词：二氧化碳宫腔镜膨宫介质子宫内膜癌增殖和凋亡 MTT比色法 PI染色法

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外源性HMGB1对放疗后残存胰腺癌细胞增殖和凋亡研究

外源性HMGB1对放疗后残存胰腺癌细胞增殖和凋亡研究

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作者：宋廉江苏大学

学位级别：硕士

研究目的:本研究通过体外探讨放疗后胰腺癌细胞上清液中的高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)的含量,并进一步探讨其对放疗后残存胰腺癌细胞的增殖和凋亡的影响及其确切机制,从而为胰腺癌的临床精准的诊断、完... 详细信息

研究目的:本研究通过体外探讨放疗后胰腺癌细胞上清液中的高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)的含量,并进一步探讨其对放疗后残存胰腺癌细胞的增殖和凋亡的影响及其确切机制,从而为胰腺癌的临床精准的诊断、完善的治疗提供有效的实验基础及理论依据。研究方法:(1)光学显微镜拍摄经过不同剂量放疗后残存人胰腺癌细胞株(SW1990、Patu8988、PANC-1、Aspc-1)的形态变化。(2)酶联免疫吸附(ELISA)法检测不同剂量放疗后人胰腺癌细胞株(SW1990、Patu8988、PANC-1、Aspc-1)上清液中HMGB1的含量。(3)采用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法评价不同浓度的HMGB1对放疗后残存胰腺癌SW1990细胞的增殖活性影响,筛选出最佳作用浓度。(4)采用CCK-8实验观察放疗后上清液对放疗后残存胰腺癌SW1990细胞增殖活性的影响。(5)采用流式细胞术检测放疗后上清液对放疗后残存胰腺癌SW1990细胞凋亡外源性的影响。(6)Western-Blot检测经上清液干预后,放疗后残存胰腺癌SW1990细胞凋亡相关蛋白Bcl2/Bax及Caspase-3、Cleaved Caspase-3和增殖相关蛋白C-myc和Ki67表达的变化。(7)应用荧光定量PCR和Western-Blot检测4种人胰腺癌细胞株(SW1990、Patu8988、PANC-1、Aspc-1)中TLR2的m RNA、蛋白相对表达水平。(8)采用倒置荧光显微镜观察sh-TLR2在胰腺癌SW1990中的转染效率,荧光定量PCR和Western-Blot检测sh-TLR2在胰腺癌SW1990细胞中的干扰效率。(9)Western-Blot检测经过HMGB1干预后,放疗后残存sh-TLR2 SW1990细胞中Wnt信号通路中相关蛋白以及增殖、凋亡相关蛋白的表达变化。研究结果:(1)光学显微镜观察到放疗后人胰腺癌细胞株(SW1990、Patu8988、PANC-1、Aspc-1)随着放疗剂量的不同,细胞形态发生不同程度的变化。(2)酶联免疫吸附(ELISA)实验结果显示,在10Gy放疗剂量下,胰腺癌SW1990上清液中HMGB1浓度达到最大。(3)CCK-8结果显示随着外源性HMGB1的作用浓度梯度的增加,其对10Gy放疗后残存胰腺癌SW1990细胞增殖活性的促进作用不同,并以HMGB1浓度为100 ng/m L时作用最明显。(4)CCK-8结果显示上液清+EP(Ethyl pyruvate,丙酮酸乙酯,HMGB1释放抑制剂)组、上清液组、HMGB1(100ng/m L)组与PBS组比较,显著促进了10Gy放疗后残存胰腺癌SW1990细胞的增殖活性,并且HMGB1(100ng/m L)组较上清液组的促进细胞增殖能力更加明显。(5)流式细胞术检测结果显示,上清液+EP组、上清液组、HMGB1(100ng/m L)组中早期和晚期凋亡细胞比例明显低于PBS组,同时HMGB1(100ng/m L)组与上清液组比较,前者的早期和晚期凋亡的细胞比例明显减少。(6)Western-Blot结果显示,放疗后残存胰腺癌SW1990细胞经上清液干预后,凋亡相关蛋白Bcl2/Bax及Caspase-3表达下调,而Cleaved Caspase-3表达上调,以及增殖相关蛋白C-myc和Ki67表达上调。(7)荧光定量PCR和Western Blot检测结果显示,SW1990细胞中TLR2表达水平最高。(8)倒置荧光显微镜下结果显示,sh-TLR2组和sh-EGFP组的SW1990细胞均具有高转染效率。荧光定量PCR和Western-Blot检测结果显示sh-TLR2组的SW1990具有高干扰效率,并筛选得到稳定的sh-TLR2 SW1990细胞株。(9)Western-Blot检测经过HMGB1干预后,在放疗后残存sh-TLR2 SW1990细胞中,随着时间的增加,Wnt信号通路中的相关蛋白GSK-3β表达上升,P-GSK-3β(ser9)表达下降,β-catenin表达上升,并且凋亡相关蛋白Caspase-3随着时间的增加而降低,反之Cleaved Caspase-3表达升高,增殖相关蛋白Ki67随着时间的增加而降低。结论:(1)本研究证实在体外胰腺癌SW1990细胞放疗后的上清液中存在HMGB1,与放疗剂量不存在明显的相关性。(2)本研究证实外源性HMGB1和上清液对放疗后残存胰腺癌SW1990细胞具有促进增殖和凋亡抵抗的作用。(3)本研究证实在胰腺癌SW1990中,HMGB1通过TLR2,调控Wnt/β-catenin信号通路,进而调控放疗后残存胰腺癌的增殖和凋亡抵抗。为针对胰腺癌放疗后存在

关键词：胰腺癌 HMGB1 增殖和凋亡 TLR2 Wnt/β-catenin

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