检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：詹杨吉林大学

学位级别：硕士

复制缺陷型腺病毒是一种很好的基因治疗载体,但其传递特异治疗基因到靶细胞时仍存在不足。我们研究的重点是构建一套完整的腺病毒载体平台系统,使一些对肿瘤细胞具有特异识别作用的碱基序列可任意加入到腺病毒载体中,增强病毒载体对肿... 详细信息

复制缺陷型腺病毒是一种很好的基因治疗载体,但其传递特异治疗基因到靶细胞时仍存在不足。我们研究的重点是构建一套完整的腺病毒载体平台系统,使一些对肿瘤细胞具有特异识别作用的碱基序列可任意加入到腺病毒载体中,增强病毒载体对肿瘤细胞的特异识别,提高病毒载体的转导效率。针对腺病毒载体纤维蛋白中HI-环(HI-loop)可加入外源片段这一特点,本实验利用市售的腺病毒载体系统构建一个完整的腺病毒载体平台及一系列易于操作的穿梭载体。通过此载体系统可以将编码任意不大于100个氨基酸残基的碱基序列放入腺病毒载体的HI-loop中,以此增加病毒载体的靶向性。同时,利用此载体平台还可将本实验的检测基因(luciferase)换为任意的功能基因,以便使增加了靶向性的腺病毒载体能更好的应用于肿瘤的基因治疗。利用构建好的载体平台将碱基编码的RGD(Arg-Gly-Asp)小肽放入腺病毒载体的HI-loop中。扩增、纯化后的重组腺病毒Ad-luc和Ad-luc-RGD分别感染咽部鳞状上皮癌细胞FaDu,发现后者的感染效率是前者的20倍。证明我们构建的腺病毒载体平台系统正确有效,为腺病毒对特定细胞,尤其是对肿瘤细胞的特异识别开辟了一条新的技术路线,为基因治疗载体的设计和改进提供了有力的帮助和更广阔的应用前景。

关键词：复制缺陷型腺病毒载体平台 HI-环(HI-loop) RGD小肽基因治疗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

抗TNFα单链抗体复制缺陷型腺病毒载体的构建及表达

引用

世界华人消化杂志 2013年第22期21卷 2192-2197页

作者：卓萌唐余燕余永胜周丽芹潘庆春王鹏臧国庆汤正好上海交通大学附属第六人民医院感染病科上海市200233

目的:构建pAd/CMV/V5-DEST-TNFα-scFv重组腺病毒载体,通过病毒包装、纯化及滴定,获得高纯度高感染性的病毒液,并对TNFα-scFv进行表达、鉴定.方法:以携带TNFα-scFv基因的载体PUC57-Amp为模板,扩增TNFα-scFv目的基因,构建穿梭质粒pDON... 详细信息

目的:构建pAd/CMV/V5-DEST-TNFα-scFv重组腺病毒载体,通过病毒包装、纯化及滴定,获得高纯度高感染性的病毒液,并对TNFα-scFv进行表达、鉴定.方法:以携带TNFα-scFv基因的载体PUC57-Amp为模板,扩增TNFα-scFv目的基因,构建穿梭质粒pDONR221-TNFα-scFv,测序证实质粒含有目的基因.与骨架质粒pAd-CMV-V5-DEST腺病毒骨架载体进行同源重组,形成表达克隆pAd/CMV/V5-DEST-TNFα-scFv.表达克隆转染293细胞,包装重组腺病毒,并鉴定和病毒滴定.结果:TNFα-scFv基因成功克隆到腺病毒载体中,转染293细胞后成功包装出重组腺病毒,病毒滴度为2.5×1011TCID50/mL,Western blot检测到TNFα-scFv基因在293细胞中高水平表达.结论:成功构建了带有TNFα-scFv基因的重组腺病毒载体,为进一步研究提供实验基础.

关键词：肿瘤坏死因子α 抗TNFα单链抗体复制缺陷型腺病毒载体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

一种共表达呼吸道合胞病毒融合前蛋白和黏附糖蛋白的复制缺陷型腺病毒载体疫苗

一种共表达呼吸道合胞病毒融合前蛋白和黏附糖蛋白的复制缺陷型腺...

引用

作者：何金生付远辉彭向雷郑妍鹏 100044 北京市海淀区西直门外上园村3号

本发明提供了一种共表达呼吸道合胞病毒融合前蛋白和黏附糖蛋白的复制缺陷型腺病毒载体疫苗，该序列包括preF和G130‑230的核酸序列，其由T2A序列连接在一起，编码preF的核苷酸序列位于preF2A3G序列5’端，编码G130‑230的核苷酸序列位于p... 详细信息

标准号: CN112226450B

本发明提供了一种共表达呼吸道合胞病毒融合前蛋白和黏附糖蛋白的复制缺陷型腺病毒载体疫苗，该序列包括preF和G_130‑230的核酸序列，其由T2A序列连接在一起，编码preF的核苷酸序列位于preF2A3G序列5’端，编码G_130‑230的核苷酸序列位于preF2A3G序列3’端。通过猩猩63型复制缺陷型重组腺病毒载体表达所述核苷酸序列，重组腺病毒为rChAd63/preF2A3G，该重组腺病毒免疫动物后可同时诱导产生针对融合糖蛋白和黏附糖蛋白的血清抗体,且诱导产生的血清抗体主要是针对preF的抗体，可以应用在预防呼吸道合胞病毒疫苗中。所述重组腺病毒疫苗可以大规模制备，用于预防RSV感染。

关键词：核苷酸序列重组腺病毒血清抗体糖蛋白黏附诱导复制缺陷型腺病毒载体复制缺陷型重组腺病毒呼吸道合胞病毒疫苗呼吸道合胞病毒重组腺病毒疫苗融合糖蛋白核酸序列免疫动物序列连接载体表达共表达抗体预防制备蛋白疫苗融合应用

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

一种重组复制缺陷型腺病毒载体马流感基因工程疫苗及其应用

一种重组复制缺陷型腺病毒载体马流感基因工程疫苗及其应用

引用

作者：刘明刘春国相文华 150001 黑龙江省哈尔滨市南岗区马端街427号

本发明涉及一种重组复制缺陷型腺病毒载体马流感基因工程疫苗及其应用。本发明将所分离的马流感病毒的HA基因插入到复制缺陷型腺病毒载体中，构建了H3N8亚型马流感HA基因重组腺病毒活载体疫苗rAd-XJ3-HA。小鼠和马免疫试验结果表明，本... 详细信息

标准号: CN103757054A

本发明涉及一种重组复制缺陷型腺病毒载体马流感基因工程疫苗及其应用。本发明将所分离的马流感病毒的HA基因插入到复制缺陷型腺病毒载体中，构建了H3N8亚型马流感HA基因重组腺病毒活载体疫苗rAd-XJ3-HA。小鼠和马免疫试验结果表明，本发明rAd-XJ3-HA疫苗能够诱导所有马产生中和抗体，具有良好的免疫原性，可作为预防或治疗EI的候选疫苗。

关键词：流感复制缺陷型腺病毒载体重组复制缺陷型腺病毒疫苗基因重组腺病毒基因工程疫苗流感病毒活载体疫苗免疫试验免疫原性中和抗体亚型诱导基因预防

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

幽门螺杆菌多表位疫苗的设计及其表达分析

引用

医学理论与实践 2025年第5期38卷 740-743页

作者：贾志达于雪莹尚慧敏李旭阳斯日古楞王晓玲赤峰学院基础医学院内蒙古自治区赤峰市024000

目的:针对幽门螺杆菌与定植和致病相关的6种蛋白设计作用位点较为全面的多表位疫苗,将其构建到复制缺陷型腺病毒穿梭载体中并分析其表达情况,为后续包装腺病毒并通过动物实验验证疫苗的有效性奠定实验基础。方法:使用IEDB数据库查找和... 详细信息

目的:针对幽门螺杆菌与定植和致病相关的6种蛋白设计作用位点较为全面的多表位疫苗,将其构建到复制缺陷型腺病毒穿梭载体中并分析其表达情况,为后续包装腺病毒并通过动物实验验证疫苗的有效性奠定实验基础。方法:使用IEDB数据库查找和预测幽门螺杆菌UreB、OipA、HomB、HopQ、VacA和CagA的B细胞表位,采用在线工具VaxiJen v2.0、AllerTOP v2.0和AllergenFP v1.0对6种表位与接头KK随机串联得到的720组合进行抗原性和过敏原性分析,选出优势表位组合,将优势表位组合与具有黏膜佐剂活性的NSP4C融合并加Flag标签便于后续检测,综合考虑融合蛋白的抗原性、可溶性和理化性质,评选出最优疫苗蛋白,将其构建到复制缺陷型腺病毒穿梭载体中,通过转染HEK-293T细胞和Western blot实验分析其表达情况。结果:通过对表位组合的抗原性分析找到3个评分>1.0的表位组合,即优势表位组合,三者均无过敏原性。将优势表位组合、NSP4C和Flag随机组合后,选出最优疫苗蛋白NSP4C-Dec663。将NSP4C-Dec663编码序列连入pShuttle-CMV载体中,重组质粒转染HEK-293T细胞进行目的蛋白表达,Western blot结果表明NSP4C-Dec663成功表达。结论:本研究针对幽门螺杆菌设计了多表位疫苗NSP4C-Dec663,其能在HEK-293T细胞中表达,这为后续包装复制缺陷型腺病毒和进行动物实验奠定了基础。

关键词：幽门螺杆菌生物信息学多表位疫苗复制缺陷型腺病毒载体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

腺病毒载体纤突结的改造及改造后的特性研究

引用

中国生物工程杂志 2011年第6期31卷 86-92页

作者：乔伟何金生付远辉洪涛安徽医科大学免疫学教研室合肥230032 北京交通大学生命科学与生物工程研究院北京100044 中国疾病预防与控制中心病毒病预防控制所北京100052

目的:采用一种简便方法在复制缺陷型腺病毒载体纤突结(fibre knob)的HI loop插入精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(arginine-glycine-aspartate,RGD)肽,构建纤突结修饰的腺病毒载体,观察其对RD和T24肿瘤细胞的感染效率以及机体针对外源基因的抗... 详细信息

目的:采用一种简便方法在复制缺陷型腺病毒载体纤突结(fibre knob)的HI loop插入精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(arginine-glycine-aspartate,RGD)肽,构建纤突结修饰的腺病毒载体,观察其对RD和T24肿瘤细胞的感染效率以及机体针对外源基因的抗体反应。方法:以PCR方法将RGD插入到pAdEasy-1后,通过常规方法构建可表达EGFP和人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytialviruse,RSV)密码子优化型融合蛋白(fusion protein,Fsyn)的腺病毒载体FGAd-RGD-EGFP和FGAd-RGD-Fsyn。用FGAd-RGD-EGFP感染RD和T24肿瘤细胞,通过荧光显微镜和流式细胞仪检测感染效率,用FGAd-RGD-Fsyn免疫BALB/c小鼠,通过ELISA检测针对外源基因的抗体反应。结果:与FGAd-EGFP相比,FGAd-RGD-EGFP对RD和T24肿瘤细胞的感染效率都有显著提高,EGFP表达效率也明显增强。与FGAd-Fsyn相比,FGAd-RGD-Fsyn所引起的机体针对外源基因的抗体反应并无差异。结论:改造后的腺病毒载体能显著提高对RD和T24肿瘤细胞的感染效率,但并不引起机体产生针对外源基因的增强的抗体反应,该载体能用于肿瘤等疾病的基因治疗研究。

关键词：复制缺陷型腺病毒载体 RGD 荧光抗体反应

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

辅助病毒依赖型腺病毒载体转基因的体外表达效率

辅助病毒依赖型腺病毒载体转基因的体外表达效率

引用

作者：郑娴娴安徽医科大学

学位级别：硕士

目的辅助病毒依赖型腺病毒载体(Helper-dependent adenoviral vector, HDAd)主要用于基因治疗的研究,目前仅有两篇关于HDAd作为系统疫苗载体的研究报道,与第一代腺病毒载体或复制缺陷型腺病毒载体(First generation adenoviral vector, ... 详细信息

目的辅助病毒依赖型腺病毒载体(Helper-dependent adenoviral vector, HDAd)主要用于基因治疗的研究,目前仅有两篇关于HDAd作为系统疫苗载体的研究报道,与第一代腺病毒载体或复制缺陷型腺病毒载体(First generation adenoviral vector, FGAd)相比,发现HDAd可引起机体产生针对转基因的更强的细胞免疫和体液免疫反应。一般认为这种增强的免疫应答主要与HDAd能在体内高表达转基因及减弱的载体反应有关,关于这两种载体体外转基因表达情况的研究较少。绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)因其可在异源组织中稳定发出荧光、所产生的荧光不需要任何物质的辅助、不影响宿主等特性得到了广泛应用,增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)是经过密码子优化及氨基酸突变等一些列基因改造后获得的GFP突变体,发出的荧光比GFP更强、更易观察,成为比GFP应用更广泛的报告基因。为比较这两种载体的体外表达效率,我们构建了可表达EGFP的HDAd(HDAd/EGFP)并完成大量制备、纯化和体外表达鉴定;同时与可表达EGFP的FGAd(FGAd/EGFP)进行了体外感染和转基因表达效率的比较研究,为进一步的体内免疫效果和免疫保护作用研究奠定基础。方法通过PCR获得带有CMV启动子、EGFP开放读码框(Open reading frame, ORF)和SV40多聚腺甘酸序列的EGFP表达盒,先后克隆至HDAd穿梭质粒pSC11及HDAd骨架质粒pSC15B,构建pSC15B/EGFP重组质粒。PmeⅠ消化pSC15B/EGFP获得线性化片段,经磷酸钙共沉淀法转染293Cre4细胞,16 h后感染辅助病毒H14,收获HDAd/EGFP粗提液,随后以HDAd/EGFP粗提液及辅助病毒连续共感染293Cre4细胞直至HDAd/EGFP达到复制极限。大量制备HDAd/EGFP , CsCl超速离心纯化,荧光显微镜和电镜下观察纯化后的HDAd/EGFP。使用分光光度计法测定纯化的病毒颗粒数(virus particle, vp),分别用约2000 vp/细胞的HDAd/EGFP和FGAd/EGFP感染A549细胞,通过相同时间点流式细胞仪分析EGFP的表达情况。结果成功构建可表达EGFP的HDAd/EGFP载体,通过与辅助病毒共感染293Cre4细胞及CsCl梯度法超速离心制备了大量纯化的HDAd/EGFP。纯化后体外感染293Cre4细胞,荧光显微镜下观察到EGFP的表达;电镜观察可见典型的腺病毒颗粒。以相同量的FGAd/EGFP和HDAd/EGFP分别体外感染A549细胞,流式细胞仪检测EGFP的表达情况,结果显示HDAd/EGFP感染早期的A549细胞较FGAd/EGFP有更高的荧光表达率及更高的表达强度。结论成功构建、纯化了可表达EGFP的HDAd/EGFP载体,体外实验显示HDAd载体具有转基因瞬时高表达的特性,与FGAd相比,我们认为HDAd是一种更有价值的疫苗载体。

关键词：辅助病毒依赖型腺病毒载体复制缺陷型腺病毒载体增强型绿色荧光蛋白转基因表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

一种猪圆环病毒2型和猪支原体肺炎二联腺病毒活载体疫苗及其制备方法

一种猪圆环病毒2型和猪支原体肺炎二联腺病毒活载体疫苗及其制备...

引用

作者：何玉龙王晨宇舒建洪冯华朋王英博查银河 312000 浙江省绍兴市上虞区滨海新城沥海镇马欢路398号科技创业中心C号楼5楼508室

本发明公开的是一种猪圆环病毒2型和猪支原体肺炎二联腺病毒活载体疫苗及其制备方法，将具有免疫原性的Mhp的P97R1、P46、P42蛋白与PCV2的Cap蛋白分别克隆到人5型复制缺陷型腺病毒载体上，包装出的重组腺病毒rAdv‑P97R1、rAdv‑P46、rAdv... 详细信息

标准号: CN115645522A

本发明公开的是一种猪圆环病毒2型和猪支原体肺炎二联腺病毒活载体疫苗及其制备方法，将具有免疫原性的Mhp的P97R1、P46、P42蛋白与PCV2的Cap蛋白分别克隆到人5型复制缺陷型腺病毒载体上，包装出的重组腺病毒rAdv‑P97R1、rAdv‑P46、rAdv‑P42、rAdv‑Cap，按照比例混合后作为活载体疫苗，该活载体疫苗能够免疫实验对象，并且通过分析其诱导机体产生免疫应答的效应，具有能够诱导产生特异性的体液免疫和细胞免疫效应以及能够实现基于腺病毒载体的Mhp和PCV2二联基因工程亚单位疫苗制备等技术特点。

关键词：活载体疫苗制备诱导复制缺陷型腺病毒载体基因工程亚单位疫苗体液免疫和细胞免疫猪支原体肺炎腺病毒载体重组腺病毒技术特点免疫实验免疫应答免疫原性圆环病毒腺病毒种猪克隆分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

一种包含猪德尔塔冠状病毒免疫蛋白的重组腺病毒载体和毒株、疫苗和应用

一种包含猪德尔塔冠状病毒免疫蛋白的重组腺病毒载体和毒株、疫苗...

引用

作者：刘新生苗鑫张莉萍于瑞明潘丽周鹏张中旺吕建亮王永录郭慧琛张永光 730070 甘肃省兰州市盐场堡徐家坪1号

本发明提供了一种包含猪德尔塔冠状病毒免疫蛋白的重组腺病毒载体和毒株、疫苗和应用，属于生物制品技术领域。本发明提供的包含猪德尔塔冠状病毒免疫蛋白的重组腺病毒载体是以人复制缺陷型腺病毒载体为骨架载体，包括S蛋白或S1蛋白的... 详细信息

标准号: CN116676341A

本发明提供了一种包含猪德尔塔冠状病毒免疫蛋白的重组腺病毒载体和毒株、疫苗和应用，属于生物制品技术领域。本发明提供的包含猪德尔塔冠状病毒免疫蛋白的重组腺病毒载体是以人复制缺陷型腺病毒载体为骨架载体，包括S蛋白或S1蛋白的编码基因；所述S蛋白或S1蛋白的编码基因来自CH/XJYN/2016毒株。将所述重组腺病毒载体包装成重组腺病毒后肌肉注射免疫动物，两种重组腺病毒均能诱导强烈的体液和细胞免疫应答，尤其是Ad‑PD‑tPA‑Sopt引起的免疫应答最强烈。可见，本发明为防控猪德尔塔冠状病毒感染提供了新手段。

关键词：重组腺病毒载体重组腺病毒编码基因冠状病毒免疫蛋白毒株复制缺陷型腺病毒载体体液和细胞免疫冠状病毒感染骨架载体肌肉注射免疫动物免疫应答新手段生物制品应答诱导疫苗应用

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

一种包含猪流行性腹泻病毒免疫蛋白的重组腺病毒载体及其毒株、疫苗和应用

一种包含猪流行性腹泻病毒免疫蛋白的重组腺病毒载体及其毒株、疫...

引用

作者：刘新生苗鑫张莉萍潘丽周鹏张中旺吕建亮王永录郭慧琛张永光 730070 甘肃省兰州市盐场堡徐家坪1号

本发明提供了一种包含猪流行性腹泻病毒(PEDV)免疫蛋白的重组腺病毒载体和毒株、疫苗和应用，属于生物制品技术领域。本发明提供了一种包含猪流行性腹泻病毒免疫蛋白的重组腺病毒载体，以人复制缺陷型腺病毒载体为骨架载体，包含S蛋白... 详细信息

标准号: CN116676340A

本发明提供了一种包含猪流行性腹泻病毒(PEDV)免疫蛋白的重组腺病毒载体和毒株、疫苗和应用，属于生物制品技术领域。本发明提供了一种包含猪流行性腹泻病毒免疫蛋白的重组腺病毒载体，以人复制缺陷型腺病毒载体为骨架载体，包含S蛋白或S1蛋白的编码基因；所述S蛋白或S1蛋白来自PEDVGIIa毒株CH/HBXT/2018或GIIb毒株CH/HNPJ/2017。本发明构建了4种防控PEDV的疫苗，经BALB/c小鼠体内评价表明4种疫苗均能够引起强烈的细胞免疫和体液免疫，为预防当前流行的高毒力的PEDV毒株的感染提供了有效手段。

关键词：毒株猪流行性腹泻病毒重组腺病毒载体免疫蛋白疫苗复制缺陷型腺病毒载体编码基因骨架载体体液免疫细胞免疫有效手段高毒力生物制品构建体内感染预防应用

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：