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中华医学杂志 2008年第31期88卷 2219-2222页

作者：陈烨陈绍洋王强孙静朱正华侯立朝熊利泽第四军医大学西京医院麻醉科西安710032

目的探讨大麻素（CB）受体激动剂WIN55，212-2预处理对大鼠局灶性脑缺血的保护作用。方法采用大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）致局灶性脑缺血模型，将50只雄性SD大鼠随机分为5组：对照组（Con组），行线栓法致大脑中动脉栓塞（MCAO）前24h... 详细信息

目的探讨大麻素（CB）受体激动剂WIN55，212-2预处理对大鼠局灶性脑缺血的保护作用。方法采用大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）致局灶性脑缺血模型，将50只雄性SD大鼠随机分为5组：对照组（Con组），行线栓法致大脑中动脉栓塞（MCAO）前24h腹腔注射生理盐水（NS）0．3ml；WIN55，212-2预处理组（WIN1～3），分别于MCAO前24h腹腔注射WIN55，212-20．3，1和3mg／kg；DMSO组，于MCAO前24h腹腔注射二甲基亚砜（DMSO，WIN55，212．2的溶剂）0．3ml。观察MCA0120min再灌注24，48和72h后神经功能评分（NFS）和再灌注72h脑梗死容积百分比。结果WIN55，212-2预处理组大鼠NFS明显高于DMSO组和Con组（P〈0．05），脑梗死容积百分比明显小于DMSO组和Con组（P〈0．05）。WIN2组和WIN3组的脑梗死容积百分比明显小于WIN1组，NFS明显高于WIN1组（P〈0．05），WIN2组和WIN3组的NFS和脑梗死容积百分比差异无统计学意义（P=0．928），但3mg／kgWIN55，212-2可引起大鼠明显嗜睡和倦怠。结论CB受体激动剂WIN55，212—2预处理能诱导脑缺血耐受，对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用，并具有一定的剂量相关性。

关键词：缺血预处理局灶性脑缺血大鼠大麻素受体激动剂

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大麻素受体激动剂预处理脑保护作用及机制的研究

大麻素受体激动剂预处理脑保护作用及机制的研究

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作者：陈烨第四军医大学

学位级别：硕士

1990年Kitagawa等用沙土鼠全脑缺血模型,发现短暂性全脑缺血后再灌注能减轻随后较长时间的全脑缺血性损伤,进而提出了脑缺血预处理(ischemic preconditioning, IPC)及脑缺血耐受(ischemic tolerance,IT)的概念。然而缺血预处理固有的局... 详细信息

1990年Kitagawa等用沙土鼠全脑缺血模型,发现短暂性全脑缺血后再灌注能减轻随后较长时间的全脑缺血性损伤,进而提出了脑缺血预处理(ischemic preconditioning, IPC)及脑缺血耐受(ischemic tolerance,IT)的概念。然而缺血预处理固有的局限性,限制了在临床上的广泛应用。为此人们一直尝试寻找非缺血预处理的方法,如药物预处理方法诱导脑缺血耐受,希望为临床提供切实可行的脑保护措施。研究发现大鼠体内存在两种大麻素受体亚型(CB1和CB2)。CB1受体在脑组织中广泛表达,另外发现其也存在于部分外周组织中,包括脉管系统、心脏和肝脏等。既往研究表明CB2受体主要表达在免疫及造血细胞,目前更多的研究证实在脑、心肌、心血管系统及多种组织的内皮细胞均发现CB2受体的存在。大量研究证实并显示给予大麻素受体(CB1/2)激动剂WIN55,212-2,能减轻局灶性脑缺血和全脑缺血造成的脑损伤,对脑缺血损伤产生CB1受体依赖性的治疗和保护作用[1],但WIN55,212-2预处理是否能诱导脑缺血耐受,产生脑保护作用,尚未见文献报道。因此,本研究采用大脑中动脉栓塞(MCAO)致大鼠局灶性脑缺血模型,探讨大麻素受体激动剂WIN55,212-2预处理诱导脑缺血耐受的量效关系和时效关系,研究磷酸化ERK1/2在大麻素受体激动剂WIN55,212-2预处理产生的脑缺血再灌注损伤保护中的作用。实验一不同剂量WIN55,212-2预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用目的:研究不同剂量大麻素受体激动剂WIN55,212-2预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法:雄性SD大鼠50只,随机分为五组(n=10):对照组(Con组)于局灶性脑缺血前24h腹腔注射生理盐水0.3ml;DMSO组在局灶性脑缺血前24h腹腔注射与预处理组相同容量的二甲基亚砜;WIN55,212-2预处理组(WIN1～3组)分别在局灶性脑缺血前24h腹腔注射0.3、1和3mg/kg WIN55,212-2 (各剂量溶解于0.3ml DMSO)。采用大脑中动脉栓塞(MCAO)120min建立短暂局灶性脑缺血模型,所有大鼠在再灌注后24h,48h,72h进行神经功能评分(NFS),随后断头处死,取脑组织切片行TTC染色,确定脑梗死容积并计算梗死容积百分比。结果:(1)神经功能评分:WIN55,212-2预处理组大鼠NFS明显高于DMSO组和Con组(P<0.05);WIN2组和WIN3组的NFS明显高于WIN1组(P<0.05)。(2)脑梗死容积百分比:WIN55,212-2预处理组明显小于DMSO组和Con组(P<0.05);WIN2组和WIN3组的脑梗死容积百分比明显小于WIN1组(P<0.05)。而WIN2组和WIN3组组间比较无明显的统计学差异。结论:大麻素受体激动剂WIN55,212-2预处理对大鼠短暂性脑缺血损伤有保护作用,并具有一定的剂量依赖性,1mg/kg为预处理的适宜剂量。实验二重复WIN55,212-2预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用目的:探讨不同次数大麻素受体激动剂WIN55,212-2预处理对大鼠短暂性局灶性脑缺血损伤的保护作用。方法:雄性SD大鼠50只,随机分为五组:对照组(Con组)和DMSO组分别腹腔注射生理盐水0.3ml和DMSO0.3ml,1次/d,连续5d; WIN55,212-2预处理组(WIN1,WIN 3,WIN 5组),分别腹腔注射WIN55,212-2 1mg/kg(溶解于0.3ml DMSO),1次/d,重复给予1d、3d和5d。各组动物均在最后1次预处理后24 h,行大脑中动脉栓塞(MCAO)建立短暂局灶性脑缺血模型,并分别在MCAO后24h,48h,72h行神经功能评分(NFS),随后断头处死,取脑组织切片行TTC染色,确定脑梗死容积并计算梗死容积百分比。结果:(1)WIN55,212-2预处理组(WIN1,3,5组)大鼠NFS明显高于DMSO组和Con组(P<0.05),脑梗死容积百分比明显小于DMSO组和Con组(P<0.05)。(2)WIN5组大鼠NFS明显高于WIN1组和WIN3组(P<0.05),脑梗死容积百分比较WIN1组和WIN3组明显减小(P<0.05);而WIN1组和WIN3组的NFS和脑梗死容积百分比均无明显的统计学差异。结论:大麻素受体激动剂WIN55,212-2预处理的脑保护作用随着预处理次数增加其保护作用有所增强。实验三WIN55,212-2预处理对大脑内ERK1/2磷酸化水平和神经元凋亡的影响目的:研究大麻素受体激

关键词：脑缺血缺血/再灌注预处理缺血耐受大麻素受体激动剂 WIN55,212-2 细胞外信号调节激酶大鼠

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内生大麻素受体激动剂抑制异动症大鼠纹状体单胺类神经递质的释放

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西安交通大学学报（医学版） 2014年第5期35卷 586-590页

作者：王勇张格娟王涛王会生刘健西安交通大学医学院生理学与病理生理学系陕西西安710061

目的观察内生大麻素受体激动剂WIN 55,212-2对帕金森病左旋多巴相关异动症模型大鼠纹状体内单胺类神经递质释放的影响。方法采用脑内微透析和高效液相色谱在线递质测量法观察WIN 55,212-2腹腔内注射对异动症模型大鼠左旋多巴相关异动症... 详细信息

目的观察内生大麻素受体激动剂WIN 55,212-2对帕金森病左旋多巴相关异动症模型大鼠纹状体内单胺类神经递质释放的影响。方法采用脑内微透析和高效液相色谱在线递质测量法观察WIN 55,212-2腹腔内注射对异动症模型大鼠左旋多巴相关异动症状和纹状体内单胺类神经递质释放的影响。结果与溶剂注射相比,WIN 55,212-2注射显著抑制异动症模型大鼠左旋多巴皮下注射后的异动样症状(F1 263=44.071,P<0.001),同时明显减少纹状体内多巴胺的释放(F1 263=5.091,P<0.05)。结论纹状体内生大麻素受体可能通过抑制性的调节单胺类神经递质的释放来影响异动症模型大鼠的异动样症状。

关键词：帕金森病异动症纹状体多巴胺去甲肾上腺素大鼠大麻素受体激动剂

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抑制自噬和增强内质网应激在大麻素受体激动剂WIN55，212-2引起骨肉瘤细胞毒性作用中的研究

抑制自噬和增强内质网应激在大麻素受体激动剂WIN55，212-2引起骨...

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作者：张国栋山东大学

学位级别：博士

WIN 55,212-2是一种大麻素受体激动剂,可以激活大麻素受体,已经证明它具有抗肿瘤作用。WIN可以抑制肿瘤细胞增殖和诱导肿瘤细胞的凋亡。然而,WIN在骨肉瘤中的作用和机制仍不清楚。自噬是一种细胞溶酶体降解途径,在维持细胞内稳态、调节... 详细信息

WIN 55,212-2是一种大麻素受体激动剂,可以激活大麻素受体,已经证明它具有抗肿瘤作用。WIN可以抑制肿瘤细胞增殖和诱导肿瘤细胞的凋亡。然而,WIN在骨肉瘤中的作用和机制仍不清楚。自噬是一种细胞溶酶体降解途径,在维持细胞内稳态、调节细胞存活和死亡方面起着至关重要的作用。抑制细胞自噬反应的发生可增强化疗药物诱导的肿瘤细胞凋亡。内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)与自噬密切相关,这两个过程的联合作用在保护细胞存活或触发细胞死亡方面均发挥重要作用。因此,围绕内质网应激和自噬的治疗策略为肿瘤治疗提供了新思路。在这项研究中,我们考察了 WIN55,212-2对骨肉瘤细胞系Saos-2在细胞活力和凋亡方面的影响。同时,我们进一步探讨了WIN55,212-2诱导的内质网应激和自噬在细胞凋亡中的作用。本课题包括以下2部分:第一部分:WIN55,212-2对骨肉瘤细胞的生物学作用。第二部分:自噬和内质网应激在WIN55,212-2诱导的骨肉瘤细胞凋亡中的作用。第一部分:WIN5W,252-2对骨肉瘤细胞的生物学作用目的:本部分初步考察WIN55,212-2对骨肉瘤细胞的生物学作用。方法:SAOS-2骨肉瘤细胞经WIN作用后,MTT方法检测细胞存活率,AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率。JC-1染色流式细胞仪检测WIN对SAOS-2骨肉瘤细胞线粒体膜电位。免疫印迹技术检测凋亡通路相关蛋白(Cytochrome C、caspase-3 和 PARP)的表达。结果:MTT结果显示WIN可显著降低SAOS-2细胞生存率,并呈剂量和时间依赖性。Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测结果显示WIN可明显增加SAOS-2细胞凋亡率,JC-1染色显示WIN明显的呈剂量依赖性地降低线粒体膜完整性的比率。western blot结果显示,WIN明显上调了线粒体凋亡相关蛋白cleaved Caspase-3,cleaved PARP 和细胞色素 C 表达。结论:WIN55,212-2可通过线粒体凋亡途径诱导Saos-2细胞凋亡。第二部分:自噬和内质网应激在WIN55,212-2诱导的骨肉瘤细胞凋亡中的作用目的:本部分考察自噬和内质网应激在WIN55,212-2诱导的骨肉瘤细胞凋亡中的作用。方法:SAOS-2骨肉瘤细胞经WIN单独,和或内质网应激激动剂和抑制剂,自噬抑制剂联用后,MTT方法检测细胞存活率,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率。免疫印迹技术检测细胞凋亡通路相关蛋白(caspase-3蛋白和PARP蛋白),内质网应激相关蛋白(GRP78,IRE,TRB3)和细胞自噬相关蛋白(LC3,Beclin1和p62)表达水平。结果:经WIN处理后,GRP78、IRE和TRB3表达随着药物浓度的增加而明显的增加,LC3-Ⅱ和Beclin1随着药物浓度的增加而明显的增加,而p62表达水平明显下降。内质网应激抑制剂4-PBA和TUDC可以缓解由WIN诱导的细胞毒性,相反,内质网应激激活剂TG和TUNI增加了由WIN诱导的细胞毒性。4-PBA对内质网应激的抑制减少了 WIN诱导的凋亡,TG激活内质网应激增加了WIN诱导的凋亡。联合自噬抑制剂3-MA/CQ可以进一步增加细胞凋亡率及凋亡蛋白 cleaved PARP 和 cleaved caspase 3 的表达结论:WIN55,212-2可诱导骨肉瘤细胞凋亡并诱导骨肉瘤细胞发生内质网应激和自噬,增强内质网应激和抑制自噬均可以明显增强WIN55,212-2诱导的骨肉瘤细胞凋亡,因此,WIN55,212-2与自噬抑制剂或内质网应激激活剂结合可以为骨肉瘤治疗提供了新思路。

关键词： WIN55,212-2 大麻素受体激动剂骨肉瘤细胞自噬内质网应激

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非选择性大麻素受体激动剂WIN55,212-2对于心肺复苏后动物模型保护作用的实验研究

非选择性大麻素受体激动剂WIN55,212-2对于心肺复苏后动物模型保...

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作者：马林浩第二军医大学

学位级别：博士

探讨非选择性大麻素受体激动剂WIN55，212-2对于心肺复苏后动物模型的保护作用以及具体的保护机制，为其将来可能的临床应用提供理论依据。建立室颤导致CA/CPR大鼠模型，之后分别选择性阻断大麻素受体1（CB1）与大麻素受体2（CB2），检... 详细信息

探讨非选择性大麻素受体激动剂WIN55，212-2对于心肺复苏后动物模型的保护作用以及具体的保护机制，为其将来可能的临床应用提供理论依据。建立室颤导致CA/CPR大鼠模型，之后分别选择性阻断大麻素受体1（CB1）与大麻素受体2（CB2），检测WIN55，212-2的降温作用以及对复苏后心脑功能的保护作用。外源性阻断WIN55，212-2所致的降温作用后，验证其复苏后心脑功能的保护作用。建立室颤所致CA/CPR猪模型，分别给予体表物理降温、药物降温以及二者联合降温，观察其对复苏心脑功能的保护作用以及其可能的机制，同时研究不同降温方法对于预后的影响。结果表明，WIN55，212-2能够快速稳定地在大鼠心肺复苏模型中诱导亚低温，是通过位于下丘脑体温调节中枢大麻素受体CB1亚型来介导的，而其保护作用是通过该药物自身诱导产生的亚低温而实现的。WIN55，212-2也能够在复苏后猪模型中稳定而快速地诱导产生亚低温且不伴有寒战的发生几率增加，并能够最终保护心脑功能，改善预后。联合体表物理降温与该药物诱导的亚低温，可以加快降温速度，缩短动物到达亚低温目标治疗温度的时间，从而达到心搏骤停/心肺复苏后尽早开始亚低温治疗的目的。

关键词：心搏骤停心肺复苏大麻素受体激动剂临床观察

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大麻素受体激动剂HU210对实验性溃疡性结肠炎的治疗作用及可能的机制

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中国病理生理杂志 2015年第10期 1850-1850页

作者：林思思沈利张瑞琴张一真杨莉芝李敏徐晓娟李琨李永渝同济大学医学院病理生理教研室

目的:探索大麻素受体激动剂HU210在改善溃疡性结肠炎中作用及可能机制。方法:选用TLR4基因敲除型(TLR4-/-)和野生型小鼠(WT),采用4%葡聚糖酸钠(dextran sulfate sodium salt,DSS)诱导溃疡性结肠炎。检测指标包括AP/PAS和HE染色观察组织... 详细信息

目的:探索大麻素受体激动剂HU210在改善溃疡性结肠炎中作用及可能机制。方法:选用TLR4基因敲除型(TLR4-/-)和野生型小鼠(WT),采用4%葡聚糖酸钠(dextran sulfate sodium salt,DSS)诱导溃疡性结肠炎。检测指标包括AP/PAS和HE染色观察组织结构病理变化并评分,细菌培养检测肠道黏膜菌群数量,流式细胞术检测肠道Peyer’s结中T细胞亚群比例,

关键词：大麻素受体激动剂结肠炎小鼠 WT 结肠疾病小家鼠 HU210

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一种用于治疗炎症的大麻素受体激动剂及其合成方法

一种用于治疗炎症的大麻素受体激动剂及其合成方法

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作者：张玉玲宋富华王茂盛申钊袁和平 430000 湖北省武汉市洪山区洪达巷104号

本发明公开了一种用于治疗炎症的大麻素受体激动剂4‑(4‑((1H‑1,2,3‑三唑‑1‑基)甲基)‑1‑萘甲酰胺)烟酸甲酯及其合成工艺。本发明提供的化合物4‑(4‑((1H‑1,2,3‑三唑‑1‑基)甲基)‑1‑萘甲酰胺)烟酸甲酯具有良好的大麻素受体激活活性，同时提... 详细信息

标准号: CN107880024A

本发明公开了一种用于治疗炎症的大麻素受体激动剂4‑(4‑((1H‑1,2,3‑三唑‑1‑基)甲基)‑1‑萘甲酰胺)烟酸甲酯及其合成工艺。本发明提供的化合物4‑(4‑((1H‑1,2,3‑三唑‑1‑基)甲基)‑1‑萘甲酰胺)烟酸甲酯具有良好的大麻素受体激活活性，同时提供了一种操作简便，可以较大规模的制备大麻素受体激动剂4‑(4‑((1H‑1,2,3‑三唑‑1‑基)甲基)‑1‑萘甲酰胺)烟酸甲酯的合成工艺，为后续的药学试验提供足够的4‑(4‑((1H‑1,2,3‑三唑‑1‑基)甲基)‑1‑萘甲酰胺)烟酸甲酯。

关键词：烟酸甲酯萘甲酰胺三唑大麻素受体激动剂合成工艺大麻素受体药学试验制备激活治疗

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作为大麻素受体激动剂的5,6-双取代的吡啶-2-甲酰胺

作为大麻素受体激动剂的5,6-双取代的吡啶-2-甲酰胺

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作者：罗卡·戈比尤伟·格雷瑟马蒂亚斯·内特科文斯蒂芬·勒韦尔马克·罗杰斯-埃文斯罗杰·斯拉维克瑞士巴塞尔

本发明涉及作为大麻素受体激动剂的5，6‑双取代的吡啶‑2‑甲酰胺。具体地，本发明涉及式(I)的化合物，其中R1至R4如说明书中和权利要求中定义。式(I)的化合物是大麻素受体2的激动剂，并且因此可用于治疗各种疾病如疼痛、骨质疏松、炎症等。

标准号: CN111170938A

本发明涉及作为大麻素受体激动剂的5，6‑双取代的吡啶‑2‑甲酰胺。具体地，本发明涉及式(I)的化合物，其中R¹至R⁴如说明书中和权利要求中定义。式(I)的化合物是大麻素受体2的激动剂，并且因此可用于治疗各种疾病如疼痛、骨质疏松、炎症等。

关键词：式( I ) 大麻素受体激动剂大麻素受体骨质疏松激动剂甲酰胺可用疼痛中和疾病治疗

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鞘内注射大麻素受体激动剂与右美托咪定在大鼠骨癌镇痛中的相互作用

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临床和实验医学杂志 2020年第12期19卷 1266-1270页

作者：崔金花周晶张乙隋成大连大学附属新华医院麻醉科辽宁大连116021

目的研究鞘内注射大麻素受体激动剂(WIN 55,212-2)与右美托咪定在大鼠骨癌痛模型中的镇痛作用,并了解其相互作用。方法选取120只6周雌性SD大鼠,在七氟烷麻醉下于胫骨注入大鼠乳腺癌MRMT-1细胞(1×105)建立骨癌痛模型,运用放射线和H... 详细信息

目的研究鞘内注射大麻素受体激动剂(WIN 55,212-2)与右美托咪定在大鼠骨癌痛模型中的镇痛作用,并了解其相互作用。方法选取120只6周雌性SD大鼠,在七氟烷麻醉下于胫骨注入大鼠乳腺癌MRMT-1细胞(1×105)建立骨癌痛模型,运用放射线和HE染色法判断骨癌形成。注入MRMT-1后第10天,将大鼠按随机数字表法分为两组:WIN 55,212-2(W组)和右美托咪定组(D组)。W组(n=40)分为对照组和WIN 55,212-2的1μg、3μg、10μg和30μg组。D组(n=32)分为对照组和右美托咪定的3μg、10μg、30μg组。通过von Frey纤维细丝测定大鼠机械缩爪阈值(MWT),观察鞘内注WIN 55,212-2和右美托咪定的镇痛效果。用等辐射分析法(n=32)分析两种药物的相互作用。结果放射线、病理学结果表明注入MRMT-1肿瘤细胞后成功建立骨癌模型,注入肿瘤细胞后大鼠MWT明显减小,产生骨癌疼痛(机械性痛觉超敏)。与对照组相比,WIN 55,212-2和右美托咪定能剂量依赖性的增加MWT(P<0.05),而等辐射分析法显示两种药物是相加作用。结论鞘内注射大麻素受体激动剂与右美托咪定有效抑制大鼠骨癌痛,两种药物的镇痛效果是相加作用。

关键词：大鼠骨癌痛大麻素受体激动剂右美托咪定

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非选择性大麻素受体激动剂WIN55,212-2对心肺复苏后大鼠体内白细胞介素-6(IL-6)以及肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平的影响

非选择性大麻素受体激动剂WIN55,212-2对心肺复苏后大鼠体内白细...

引用

中华医学会急诊医学分会第17次全国急诊医学学术年会

作者：马林浩林兆奋杨兴易管军陈德昌李文放单怡上海长征医院急救科

目的探讨在大鼠心肺复苏模型中,输注非选择性大麻素受体激动剂WIN55,212-2对心肺复苏后大鼠体内炎性因子的影响。方法在30只大鼠中诱导6分钟无干预的室颤以后开始胸外心脏按压。8分钟持续按压的心肺复苏后进行电除颤。成功复苏后30min,... 详细信息

目的探讨在大鼠心肺复苏模型中,输注非选择性大麻素受体激动剂WIN55,212-2对心肺复苏后大鼠体内炎性因子的影响。方法在30只大鼠中诱导6分钟无干预的室颤以后开始胸外心脏按压。8分钟持续按压的心肺复苏后进行电除颤。成功复苏后30min,动物被随机分为3组:(1)药物处理组(WIN)

关键词：心肺复苏后 WIN55,212-2 大麻素受体激动剂非选择性 TNF 白细胞介素肿瘤坏死因子α

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