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丹寿汤对抗磷脂抗体致妊娠丢失动物模型胎盘组织血小板活化因子受体、血管内皮生长因子mRNA表达的影响

时珍国医国药 2019年第9期30卷 2093-2096页

作者：卫爱武宋艳丽肖惠冬子河东杰河南中医药大学河南郑州450000 河南省中医院河南郑州450002 河南中医药大学第一附属医院河南郑州450000

目的探讨中医药对血管细胞因子的重要调节作用。方法选择ACA阳性的反复自然流产患者及系统性红斑狼疮(SLE)患者,对其以及健康人的血清进行提取,制备蛋白液。将10周龄SD孕鼠80只随机分为ACA阳性妊娠丢失动物模型组(40只),LA阳性妊娠丢失... 详细信息

目的探讨中医药对血管细胞因子的重要调节作用。方法选择ACA阳性的反复自然流产患者及系统性红斑狼疮(SLE)患者,对其以及健康人的血清进行提取,制备蛋白液。将10周龄SD孕鼠80只随机分为ACA阳性妊娠丢失动物模型组(40只),LA阳性妊娠丢失动物模型组(40只)。将两组孕鼠分别随机分为模型组、补肾活血组、西药组、空白孕鼠组,每组10只。自孕0天起,补肾活血组、西药组给予丹寿汤浓煎液、肠溶阿司匹林溶液灌胃,空白孕鼠组、模型组予生理盐水灌胃作对照。期间模型组、补肾活血组、西药组分别于孕8天、孕12天背部多部位皮下注射15mg·(ml·d)-1ACA或LA蛋白液,空白孕鼠组予正常人血清蛋白液15mg·(ml·d)-1多部位皮下注射作对照,至孕15日处死取材,采用RT-PCR技术检测PAF-R及VEGFmRNA。结果空白组PAF-RmRNA的PCR产物电泳条带显示几乎无基础水平的PAF-RmRNA表达,模型组电泳条带最亮,PAF-RmRNA表达积分光度明显增加,两组比较,差异无统计学意义(P>0.05);西药组电泳条带亮度较模型组减弱,PAF-RmRNA表达积分光度明显减少,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);补肾活血组与模型组比较,电泳条带减弱,PAF-RmRNA表达积分光度明显减少,差异有统计学意义(P<0.05),补肾活血组与西药组比较,PAF-RmRNA表达积分光度减少,差异无统计学意义(P>0.05)。空白组VEGFmRNA的PCR产物电泳条带较亮,有较多VEGFmRNA的表达,模型组电泳条带最亮,VEGFmRNA表达积分光度明显增加,两组比较,差异无统计学意义(P>0.05),西药组与模型组比较,电泳条带亮度减弱,VEGFmRNA的表达积分光度减少,差异无统计学意义(P>0.05),补肾活血组与模型组比较,电泳条带亮度更弱,VEGFmRNA表达积分光度明显减少,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05),补肾活血组与西药组比较,VEGFmRNA的表达积分光度减少,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论丹寿汤通过降低PAF-RmRNA及VEGFmRNA的表达,发挥血管内皮保护作用,改善胎盘微循环,为应用于临床提供了可靠的实验基础及理论依据。

关键词：丹寿汤抗磷脂抗体妊娠丢失动物模型血小板活化因子受体血管内皮生长因子 mRNA 大鼠

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补肾活血方对抗磷脂抗体致妊娠丢失动物模型的影响

补肾活血方对抗磷脂抗体致妊娠丢失动物模型的影响

引用

作者：宋艳丽河南中医学院

学位级别：硕士

目的:⑴研究制备异种抗磷脂抗体皮下注射致妊娠丢失动物模型的改良方法;⑵探讨补肾活血方——丹寿汤对抗磷脂抗体致妊娠丢失动物模型的影响。方法:⑴10周龄SD孕鼠随机分为A、B、C、D组,分别于孕8天、孕12天背部多部位皮下注射25、50、75... 详细信息

目的:⑴研究制备异种抗磷脂抗体皮下注射致妊娠丢失动物模型的改良方法;⑵探讨补肾活血方——丹寿汤对抗磷脂抗体致妊娠丢失动物模型的影响。方法:⑴10周龄SD孕鼠随机分为A、B、C、D组,分别于孕8天、孕12天背部多部位皮下注射25、50、75、100mg/(kg·d) ACA蛋白液或LA蛋白液,以健康人血清作为空白对照,至孕15天处死取材,计算胚胎吸收率、胚胎质量、酶标仪测ACA的OD值,以活化的部分凝血酶原时间(APTT)来判定LA的活性;⑵10周龄SD孕鼠随机分为补肾活血组、补肾组、活血组、模型组和空白孕鼠组,自孕0天起,补肾活血组、补肾组、活血组分别予丹寿汤、补肾方、活血方灌胃,模型组和空白孕鼠组予生理盐水灌胃作对照,其间分别于孕8天、孕12天多部位皮下注射15mg/ml纯化后ACA蛋白液及LA蛋白液,空白孕鼠组予生理盐水多部位皮下注射作对照,至孕第15天处死取材,计算胚胎吸收率、胚胎质量、酶标仪测ACA的OD值,以APTT判定LA的活性。结果:⑴造模后,孕鼠血清ACA、APTT、胚胎吸收率明显增加(P<0.05);胚胎质量明显降低(P<0.05);胎盘切片镜下见胎盘免疫复合物沉积、组织变性坏死、炎性细胞浸润、血管内纤维素凝结及淤血等病理现象;且均与抗体蛋白液剂量呈正相关,其中75 mg/(kg·d)ACA蛋白液或LA蛋白液为造模所需免疫抗体的稳定有效量;⑵与模型组比较,补肾活血组、补肾组、活血组均能明显降低APA水平,降低胚胎吸收率,增加胚胎质量(P<0.05);与空白孕鼠组比较,补肾活血组APA水平、胚胎吸收率及胚胎质量无显著差异(P>0.05),而补肾组、活血组有显著差异(P<0.05)。结论:⑴系统性红斑狼疮患者血清可做为复制本动物模型所需免疫抗体来源之一;75 mg/(kg·d)ACA蛋白液或LA蛋白液为复制本模型所需免疫抗体的稳定有效量;⑵改良后动物模型符合抗磷脂抗体致妊娠丢失患者的生化、产科特点及病理变化;⑶补肾活血方能明显降低APA水平,抵制胚胎吸收,增加胚胎质量,提高妊娠成功率;⑷本课题为研究本病提供了具有相对稳定性、可重复性和实用性的动物模型,为补肾活血方——丹寿汤应用于临床提供了可靠的实验基础及理论依据。

关键词：抗磷脂抗体妊娠丢失动物模型改良研究补肾活血方实验研究

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