检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学与生物物理进展 2011年第5期38卷 473-481页

作者：金幼芳徐根明李艳孟丽姜永厚郭江峰丁先锋浙江理工大学生命科学学院杭州310018 杭州联川生物信息技术有限公司杭州310018

数据归一化技术对研究结果的分析具有重要的作用.在定量pcr实验中,通常利用稳定表达的看家基因作为实验数据归一化的内参,但最近的研究表明,这些看家基因的表达量在不同的生理病理过程中也表现出显著的变化,不适合作为数据归一化处理的... 详细信息

数据归一化技术对研究结果的分析具有重要的作用.在定量pcr实验中,通常利用稳定表达的看家基因作为实验数据归一化的内参,但最近的研究表明,这些看家基因的表达量在不同的生理病理过程中也表现出显著的变化,不适合作为数据归一化处理的基准.针对这一问题,提出一种新的数据处理技术,利用单细胞归一化方法(percellome),对定量pcr检测miRNA表达的数据进行处理,显著提高了数据处理的准确性.以8周龄/40周龄小鼠脑为实验材料,选择14种microRNA的表达情况进行了检测.在研究中,将3种不同拷贝数的人工合成的RNA片段(spike RNA)作为内参加入到样品中,用于microRNA表达检测的归一化基准.研究发现,未经处理的microRNA单细胞拷贝数的变化范围为2.0×105～4.3×105,而经单细胞归一处理,上述表达变化范围为2到26倍.该项研究还发现,看家基因U6 ncRNA和5S rRNA的表达水平存在显著的变化,在以基因组DNA为归一化基准时,其表达量变化为1.5和4.8倍,而在以RNA水平为归一化基准时,其表达量变化为5.8和3.8倍,表明这些基因不适合作为数据处理的基准.据此,为microRNA的定量研究提供了一种新的、可靠的归一化方案.

关键词：单细胞归一化定量pcr spike RNA miRNA

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

运用荧光定量pcr技术检测中肋骨条藻的研究

引用

高技术通讯 2006年第3期16卷 313-318页

作者：何闪英程刚苟万里李荣秀米铁柱于志刚中国海洋大学青岛266003 青岛出入境检验检疫局青岛266101 上海交通大学生命科学技术学院上海200030

以rDNA序列为寻找种特异性引物的靶区域，通过分析中肋骨条藻rDNA序列，设计出7套适合用于实时荧光定量pcr方法（RFQ-pcr）的引物与探针，经引物验证，选择Primer6（F／R）进一步分析，对比扩增序列及核酸杂交验证，表明该探针可作为中... 详细信息

以rDNA序列为寻找种特异性引物的靶区域，通过分析中肋骨条藻rDNA序列，设计出7套适合用于实时荧光定量pcr方法（RFQ-pcr）的引物与探针，经引物验证，选择Primer6（F／R）进一步分析，对比扩增序列及核酸杂交验证，表明该探针可作为中肋骨条藻特异性探针。最后以Primer6（F／R）和TaqMan6建立了定量检测中肋骨条藻的RFQ-pcr方法，并绘制出了定量检测中肋骨条藻的标准曲线，测定数据用镜检计数进行了验证，证明该方法是准确可靠的。

关键词：中肋骨条藻定量pcr 分子探针

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

环境水体中肠道病原细菌的定量pcr检测

引用

环境科学 2008年第5期29卷 1175-1180页

作者：刘永军张崇淼王晓昌吕英俊左丽丽西安建筑科技大学西北水资源生态与环境教育部重点实验室西安710055

采用通用引物,通过实时荧光定量pcr方法（Qpcr）,对西安市5处地表水体中肠道病原细菌的细胞密度进行4个月的连续检测,并将Qpcr检测结果与滤膜法测得的大肠菌群CFU值进行比较分析.结果显示,Qpcr法可信度为94%,最小检测值为每管未稀释DNA... 详细信息

采用通用引物,通过实时荧光定量pcr方法（Qpcr）,对西安市5处地表水体中肠道病原细菌的细胞密度进行4个月的连续检测,并将Qpcr检测结果与滤膜法测得的大肠菌群CFU值进行比较分析.结果显示,Qpcr法可信度为94%,最小检测值为每管未稀释DNA提取物含2.7个大肠杆菌细胞.5个水体（N=60）检测结果表明,Qpcr检测结果是大肠菌群CFU的2.2-5倍.病原细菌的几何平均值范围,Qpcr法在25-67000 CCE/100 mL之间,MF法大肠菌群为3-45000 CFU/100 mL之间.2种方法的离散和回归分析表明,Qpcr检测结果与大肠菌群CFU显著正相关,秩相关系数为r=0.983.

关键词：地表水通用引物病原细菌定量pcr 膜过滤

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

定量pcr检测在恶性血液病患者合并侵袭性真菌感染早期诊断中的意义

引用

中国实验血液学杂志 2012年第5期20卷 1225-1230页

作者：刘淑娟王欣王相华周海袁代姜华山东大学附属省立医院血液科山东济南250021

为探讨定量pcr在恶性血液病患者合并侵袭性真菌感染诊断中的应用价值,分别对40例恶性血液病患者血清中的真菌DNA进行定量pcr测定并结合半乳甘露聚糖(GM)试验及相关临床检查进行实验研究。选取烟曲霉菌高度保守的28S rRNA区段序列为目的... 详细信息

为探讨定量pcr在恶性血液病患者合并侵袭性真菌感染诊断中的应用价值,分别对40例恶性血液病患者血清中的真菌DNA进行定量pcr测定并结合半乳甘露聚糖(GM)试验及相关临床检查进行实验研究。选取烟曲霉菌高度保守的28S rRNA区段序列为目的基因设计引物和探针,提取患者血清中真菌DNA进行定量pcr检测。测定结果表明:定量pcr检测敏感性为0.89,特异性为0.85,阳性预测值为0.89,阴性预测值为0.85;GM检测敏感性为0.83,特异性为0.80,阳性预测值为0.88,阴性预测值为0.73;联合应用定量pcr和GM检测,其中1项为阳性或2项均为阳性的敏感性为0.94,特异性为0.85,阳性预测值0.89,阴性预测值0.92。结论:真菌定量pcr试验可应用于恶性血液病患者侵袭性真菌感染的诊断,与GM试验联合应用可提高诊断敏感性。

关键词：侵袭性真菌感染恶性血液系统疾病定量pcr GM检测

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

定量pcr检测HLA-C等位基因表达方法的建立和初步应用

引用

中国免疫学杂志 2016年第8期32卷 1165-1170页

作者：王文君陆森吴士超缪凤琴潘宁张建琼东南大学医学院南京210009 南京医科大学第一附属医院普外科肝脏外科南京210029

目的:建立实时定量pcr方法检测同一个体两条不同的HLA-C等位基因的表达水平。方法:构建HLAⅠ类等位基因外显子2和3数据库,设计等位基因特异性系列引物,建立等位基因定量pcr方法;在数据库和835例汉族人外周血标本中对方法进行理论和实验... 详细信息

目的:建立实时定量pcr方法检测同一个体两条不同的HLA-C等位基因的表达水平。方法:构建HLAⅠ类等位基因外显子2和3数据库,设计等位基因特异性系列引物,建立等位基因定量pcr方法;在数据库和835例汉族人外周血标本中对方法进行理论和实验验证;检测并比较20对肝癌和癌旁组织标本中HLA-C等位基因的表达水平。结果:本实验设计的20对引物能检测23种杂合基因型中不同的HLA-C等位基因,覆盖汉族人群中出现频率大于0.96%的个体;55%(11/20)的肝癌组织中HLA-C位点两条等位基因表达水平变化不一致。结论:成功建立了针对汉族人群的HLA-C等位基因表达水平的检测方法;肝癌组织中普遍存在着两条HLA-C等位基因表达水平变化不一致的现象。

关键词：定量pcr HLA-C 等位基因特异性肝癌

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

定量pcr技术在食源性致病微生物检测中的应用

引用

食品科学 2006年第4期27卷 260-263页

作者：杜巍国家信息中心博士后科研工作站北京100045

食源性致病微生物是影响食品质量和安全的主要因素之一,建立和完善食品中致病微生物快速定量检测技术具有重要的现实意义。定量pcr能快速、敏感、特异而准确定量,深入有效地利用该技术,必将有力促进食源性致病微生物快速检测工作的发展。

关键词：定量pcr 致病微生物快速检测

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

转基因抗除草剂玉米DAS-40278-9品系特异实时荧光定量pcr检测方法的建立

引用

中国食品学报 2016年第5期16卷 147-154页

作者：尹全李忆王东张富丽刘文娟常丽娟宋君四川省农业科学院分析测试中心成都610066 四川民族学院四川康定626001

根据转基因抗除草剂玉米DAS-40278-9外源基因的旁侧序列,采用ABI Primer Express 3.0设计引物和Taq Man探针,建立转基因抗除草剂玉米DAS-40278-9品系特异实时荧光定量pcr检测方法。采用该检测方法对DAS-40278-9玉米含量为1%(质量分数)... 详细信息

根据转基因抗除草剂玉米DAS-40278-9外源基因的旁侧序列,采用ABI Primer Express 3.0设计引物和Taq Man探针,建立转基因抗除草剂玉米DAS-40278-9品系特异实时荧光定量pcr检测方法。采用该检测方法对DAS-40278-9玉米含量为1%(质量分数)的标准样品进行检测,结果显示,采用建立的方法获得的标准曲线,通过斜率、相关系数、扩增效率判断是可靠的,待测样品的定量检测结果为1.024%,非常接近真实值。本试验表明建立的转基因抗除草剂玉米DAS-40278-9品系特异定量pcr检测方法的特异性好,灵敏度和准确度高,值得推广应用。

关键词： DAS-40278-9 z SSIIb 旁侧序列定量pcr 检测

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基于锁核苷酸(LNA)增敏的植烟土壤青枯雷尔氏菌定量pcr检测

引用

烟草科技 2017年第12期50卷 14-21页

作者：胡利伟牟文君郭建华薛超群冯小虎奚家勤张志高张友武李琰琰周汉平尹启生宋纪真中国烟草总公司郑州烟草研究院江西省烟草公司抚州市公司

为了定量检测植烟土壤中青枯雷尔氏菌的数量,有效防控烟草青枯病,构建了一种锁核苷酸(LNA)荧光定量pcr检测方法。以青枯雷尔氏菌细胞色素c基因(Cyt c)(NCBI Genebank序列号:WP_011002214.1)为靶标,采用LNA技术合成覆盖目标片段的引物序... 详细信息

为了定量检测植烟土壤中青枯雷尔氏菌的数量,有效防控烟草青枯病,构建了一种锁核苷酸(LNA)荧光定量pcr检测方法。以青枯雷尔氏菌细胞色素c基因(Cyt c)(NCBI Genebank序列号:WP_011002214.1)为靶标,采用LNA技术合成覆盖目标片段的引物序列,结合荧光定量pcr技术,进行了植烟土壤中烟草青枯雷尔氏菌数量的快速检测。结果表明,所构建的Cyt c基因标准曲线的R^2>0.99,相关性较好。与普通DNA引物相比,采用Cyt c基因LNA引物进行的pcr适用退火温度更高,扩增效率也更高。通过对水稻土发病烟田18个土壤样品的检测,表明青枯雷尔氏菌数量在2.52×10~4~1.88×10~7个/g土壤之间。因此,构建的一种基于Cyt c基因的LNA增敏定量pcr检测体系,适用于水稻土等植烟土壤中青枯雷尔氏菌的定量检测,对烟田土壤的提前检测有助于烟草青枯病发生的预警。

关键词：植烟土壤青枯雷尔氏菌锁核苷酸(LNA) 定量pcr

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

定量pcr技术的研究进展

引用

临床检验杂志 1997年第2期15卷 121-123页

作者：陈建魁军事医学科学院附属医院

定量ＰＣＲ技术的研究进展陈建魁综述牟兆钦审校（军事医学科学院附属医院，北京１０００３９）关键词定量ＰＣＲ核酸检测技术聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术建立以来，定性技术不断改进和完善，可以达到检测单个靶序列的水平。但实际工作... 详细信息

定量ＰＣＲ技术的研究进展陈建魁综述牟兆钦审校（军事医学科学院附属医院，北京１０００３９）关键词定量ＰＣＲ核酸检测技术聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术建立以来，定性技术不断改进和完善，可以达到检测单个靶序列的水平。但实际工作中常需要定量检测标本中核酸，而不是...

关键词：聚合酶链反应定量pcr 核酸

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

定量pcr方法用于恶性血液病患者侵袭性真菌感染的诊断研究

引用

中国实验血液学杂志 2010年第2期18卷 499-504页

作者：邵青高丽王莉莉丁一杨华索继江沈定霞于力中国人民解放军总医院血液科北京100853 中国人民解放军总医院感染科北京100853 中国人民解放军总医院微生物科北京100853

本研究建立恶性血液病合并侵袭性真菌感染患者的外周血真菌定量pcr检测方法并初步评价其诊断价值。选取真菌高度保守的区段序列18Sr DNA-ITS1区设计引物及探针,提取真菌菌株DNA进行定量pcr验证引物及探针的敏感性和特异性,利用pGEM-T质... 详细信息

本研究建立恶性血液病合并侵袭性真菌感染患者的外周血真菌定量pcr检测方法并初步评价其诊断价值。选取真菌高度保守的区段序列18Sr DNA-ITS1区设计引物及探针,提取真菌菌株DNA进行定量pcr验证引物及探针的敏感性和特异性,利用pGEM-T质粒制备真菌DNA标准品并对患者血液中真菌DNA进行定量测定。结果表明:12株曲霉菌和14株念珠菌定量pcr结果均为阳性;真菌在血浆、单个核细胞和全血中分布差异无统计学意义(p>0.05)。真菌定量pcr的ROC曲线分析显示,用于临床诊断侵袭性真菌感染的诊断界值为8copies/ml全血,其敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、Kappa值分别为0.84,0.9,0.955,0.692,0.679。结论:真菌定量pcr检测可作为恶性血液病患者侵袭性真菌感染的早期诊断手段。

关键词：定量pcr 恶性血液病侵袭性真茵感染曲霉菌念珠菌

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：