检索结果-内蒙古大学图书馆

中华儿科杂志 2004年第8期42卷 600-604页

作者：贾月萍刘桂兰张乐萍北京大学人民医院儿科 100044

目的探讨并研究实时定量聚合酶链反应(RQ—PCR)技术定量检测小儿急性淋巴细胞白血病(ALL)微小残留病(MRD)的临床适用性和临床价值。方法以免疫球蛋白重链(IgH)基因重排作为ALL的肿瘤标志,应用RQ—PCR、胚系探针策略,定量检测了34例B细... 详细信息

目的探讨并研究实时定量聚合酶链反应(RQ—PCR)技术定量检测小儿急性淋巴细胞白血病(ALL)微小残留病(MRD)的临床适用性和临床价值。方法以免疫球蛋白重链(IgH)基因重排作为ALL的肿瘤标志,应用RQ—PCR、胚系探针策略,定量检测了34例B细胞ALL(B—ALL)患儿的MRD,并对其中的16例患儿进行了缓解期MRD的定量动态追踪观察。结果在34例B—ALL患儿的初治标本中IgH基因单克隆重排16例,对16例单克隆IgH重排靶基因进行序列分析发现,V片段使用最频繁的是V3家族,J片段使用最频繁的是J4和J6。在16个靶基因中,RQ—PCR的检测敏感度有9例为10-4,6例为10-5,1例为10-3,非特异性扩增见于6例患儿。16例初治患儿的标准曲线相关系数均为0.99以上,斜率均值为-3.34±0.37,截距均值为24.30±2.95。对16例患儿随访期样本的MRD动态追踪研究发现,复发患儿的MRD水平较高且复发前有动态增加。诱导化疗结束时的MRD水平与ALL高危因素无明显相关性(P>0.05)。结论研究表明,RQ—PCR技术胚系探针策略检测ALL患儿的MRD具有临床适用性,随访期标本MRD的定量检测及动态追踪监测具有临床价值。

关键词：实时定量聚合酶链反应检测微小残留急性淋巴细胞白血病小儿

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实时定量聚合酶链反应与巢式聚合酶链反应在289例白血病融合基因检测中的比较

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中国医科大学学报 2012年第8期41卷 738-741页

作者：王玥李艳金晶纯王亚柱魏鑫中国医科大学附属第一医院血液内科沈阳110001

目的比较实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)与巢式聚合酶链反应(nPCR)在白血病融合基因BCR/ABL、PML/RARa及AML1/ETO检测中的结果。方法分别应用RT-PCR与nPCR对289例急慢性白血病初诊和完全缓解的患者BCR/ABL、PML/RARa及AML1/ETO融合基因... 详细信息

目的比较实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)与巢式聚合酶链反应(nPCR)在白血病融合基因BCR/ABL、PML/RARa及AML1/ETO检测中的结果。方法分别应用RT-PCR与nPCR对289例急慢性白血病初诊和完全缓解的患者BCR/ABL、PML/RARa及AML1/ETO融合基因进行检测,结合患者骨髓细胞形态学及临床转归予以分析。结果 46例初诊慢性粒细胞白血病(CML)患者中,RT-PCR与nPCR检测BCR/ABL融合基因阳性率分别为95.7%和93.5%(P=0.997);69例完全缓解CML患者中,RT-PCR与nPCR检测阳性率分别为78.4%和58.1%(P<0.05)。32例初诊急性早幼粒细胞白血病(APL)患者中,RT-PCR与nPCR检测PML/RARa融合基因阳性率分别为93.8%和90.6%(P=0.996);114例完全缓解APL患者中,RT-PCR与nPCR检测阳性率分别为12.3%和7.0%(P<0.05)。12例初诊急性粒细胞白血病M2(ANLL-M2)患者中,RT-PCR与nPCR检测AML1/ETO融合基因阳性率分别为50.0%和50.0%(P=1.0);16例完全缓解ANLL-M2患者中,RT-PCR与nPCR检测阳性率分别为50.0%和12.5%(P<0.05)。结论 RT-PCR较nPCR更为敏感而准确,应用RT-PCR可以提高微小残留病的检出率,为临床诊断和治疗提供更为有效的分子生物学依据。

关键词：白血病融合基因实时定量聚合酶链反应巢式聚合酶链反应

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实时定量聚合酶链反应在鉴别诊断结节病和结核病中的应用

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中华结核和呼吸杂志 2009年第4期32卷 311-312页

作者：周瑛李惠萍李秋红郑卉张容轩陈岗同济大学附属上海市肺科医院呼吸科 200433 同济大学附属上海市肺科医院病理科 200433

结节病与结核病的组织病理学均属于肉芽肿病变，当结核病标本未见干酪样坏死（即增殖型结核病），且抗酸染色阴性时，两种疾病的鉴别诊断非常困难。为了解决这一难题，上海市肺科医院呼吸科曾建立一种实时定量PCR方法，通过MTBDNA进行... 详细信息

结节病与结核病的组织病理学均属于肉芽肿病变，当结核病标本未见干酪样坏死（即增殖型结核病），且抗酸染色阴性时，两种疾病的鉴别诊断非常困难。为了解决这一难题，上海市肺科医院呼吸科曾建立一种实时定量PCR方法，通过MTBDNA进行定量分析，鉴别结节病和抗酸染色阴性的增殖型结核病。为验证该方法的可靠性，我们在前期研究的基础上扩大样本量，检测104例经病理证实的结节病标本，并设定结节病和结核病鉴别诊断的定量标准。

关键词：实时定量聚合酶链反应鉴别诊断结核病结节病实时定量PCR方法上海市肺科医院抗酸染色肉芽肿病变

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实时定量聚合酶链反应检测巨细胞病毒在同种异基因造血干细胞移植术后监测中的意义

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诊断学理论与实践 2010年第1期9卷 19-24页

作者：王苓唐暐赵维莅陈玉宝沈志祥季育华胡炯上海交通大学医学院附属瑞金医院血液科造血干细胞移植中心上海200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科上海200025

目的:探讨同种异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)中巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)激活情况及激活相关因素。方法:52例接受allo-HSCT的患者为研究对象,所有患者及其供者移植前均为CMV携带者,即为CMV血清型阳性。所有移植术后患者应用... 详细信息

目的:探讨同种异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)中巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)激活情况及激活相关因素。方法:52例接受allo-HSCT的患者为研究对象,所有患者及其供者移植前均为CMV携带者,即为CMV血清型阳性。所有移植术后患者应用实时定量聚合酶链反应(PCR)方法对CMVDNA进行定量检测。结果:移植后100d内,52例患者中28例检测到CMVDNA复制。造血干细胞移植(HSCT)供者类型和移植物抗宿主反应(graft versus host disease,GVHD)的发生与CMV激活明显相关(P值分别为0.018和0.039)。在44例可评估患者中,allo-HSCT100d后仅7例检测到CMVDNA复制,其发生率与移植后发生GVHD且接受激素治疗(P=0.0009)、人类白细胞抗原(HLA)全相合无关供者移植或者HLA部分相合同胞供者移植有关(P=0.037)。应用实时定量PCR检测发现,CMV对更昔洛韦抢先治疗的应答存在2种动力学模式(快速型和缓慢型),其中表现为缓慢型的患者CMV最高负载量较快速型高10倍以上,其病毒衰减时间也要延长3～4周,多数发生在因出现GVHD而接受激素治疗以及接受HLA全相合无关供者和HLA部分相合同胞供者干细胞移植的患者。结论:移植前CMV血清型阳性患者接受allo-HSCT后100d内出现CMV激活是常见并发症。移植100d之后,对于未发生GVHD而未使用激素治疗者或以HLA全相合同胞为供体的患者,CMV激活概率低,无需进行常规频繁监测。

关键词：同种异体造血干细胞移植巨细胞病毒实时定量聚合酶链反应

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实时定量聚合酶链反应检测在恶性血液系统疾病患者侵袭性真菌感染早期诊断中应用价值

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山西医药杂志 2019年第19期48卷 2407-2409页

作者：蒋文艳唐招平西安交通大学附属红会医院检验科 710054 西北妇女儿童医院实验中心

侵袭性真菌感染是指真菌引起的感染,常见为侵袭性肺部真菌感染。真菌对气管支气管和肺部的侵犯,引起气道黏膜炎症和肺部炎症肉芽肿,严重者引起坏死性肺炎,甚至血行播散到其他部位。研究表明,免疫力较弱的患者无法抵挡侵袭性直菌感染(IF... 详细信息

侵袭性真菌感染是指真菌引起的感染,常见为侵袭性肺部真菌感染。真菌对气管支气管和肺部的侵犯,引起气道黏膜炎症和肺部炎症肉芽肿,严重者引起坏死性肺炎,甚至血行播散到其他部位。研究表明,免疫力较弱的患者无法抵挡侵袭性直菌感染(IFIs)的袭击,深受折磨,且该疾病易被原发病掩盖[1],早期诊断在临床医疗上有非凡的意义。既往表明干细胞或器官移植患者IFIs发病率最高,随着各种药物在治疗中的普遍使用,产生了类似优胜劣汰的作用,烟曲霉菌在感染中的致病作用呈上升趋势[2]。实时定量聚合酶链反应(PCR)检测的敏感性及特异性比一般的临床检测要高出很多,并克服了许多现有检测方法的不足。在本次研究中,PCR检测结合半乳糖甘露聚糖检测,对比分析评价其诊断疗效,为快速的诊断试剂提供了理论数据,具有很高的医学价值和应用前景。现报告如下。

关键词：实时定量聚合酶链反应侵袭性真菌感染器官移植患者坏死性肺炎临床医疗肺部炎症气管支气管血行播散

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变性温度和时间对实时定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒的影响

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中国组织工程研究与临床康复 2008年第44期12卷 8677-8680页

作者：程远霞刘宝林华泽钊魏燕陈颖上海理工大学上海市200093 上海市安图医院上海市200093

背景:在实时荧光定量聚合酶链反应检测过程中,由于设计的热循环参数不同,检测结果常会出现假阳性或假阴性。目的:变性温度、变性时间以及聚合酶链反应运行的温度特性对实时荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒的影响。设计、时间及地... 详细信息

背景:在实时荧光定量聚合酶链反应检测过程中,由于设计的热循环参数不同,检测结果常会出现假阳性或假阴性。目的:变性温度、变性时间以及聚合酶链反应运行的温度特性对实时荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒的影响。设计、时间及地点:对比观察实验,于2007-07-06/08在上海市安图医院PCR实验室完成。材料:LightCycler荧光聚合酶链反应检测仪由美国罗氏公司提供,乙型肝炎病毒核酸扩增聚合酶连反应荧光定量检测试剂盒由深圳匹基公司提供。方法:聚合酶链反应运行程序条件:变性温度分别为88～97℃,变性时间分别为5s和40s,退火和延伸60℃,40s,循环数40。主要观察指标:乙肝病毒遗传物质的数量。结果:聚合酶链反应运行温度上冲和下冲比较严重;变性时间对DNA浓度较低的样本影响很大,DNA很难被检测出;变性温度超过95℃,变性时间超过40s时,检测到的DNA的量明显降低;变性时间小于20s时,容易出现假阴性。结论:变性时间太短、变性温度太高且变性时间太长容易造成乙型肝炎病毒检测出假阴性。

关键词：实时定量聚合酶链反应乙型肝炎病毒变性温度变性时间

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实时定量聚合酶链反应动态监测白血病治疗后微小残留病研究

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临床输血与检验 2012年第3期14卷 204-207页

作者：聂玉刘欣孙自敏朱薇波郑昌成沈佐君孙余婕吴竞生蔡晓燕安徽省立医院安徽医科大学附属省立医院血液科合肥230001 安徽医科大学附属省立医院临检中心合肥230001

目的建立急性早幼粒细胞白血病(APL)实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)检测方法,并检测APL治疗后微小残留病(MRD),评价MRD检测的意义。方法应用RQ-PCR对96例APL患者的骨髓标本进行分析,检测PML/RARa融合基因的转录水平。结果 (1)RQ-PCR与传... 详细信息

目的建立急性早幼粒细胞白血病(APL)实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)检测方法,并检测APL治疗后微小残留病(MRD),评价MRD检测的意义。方法应用RQ-PCR对96例APL患者的骨髓标本进行分析,检测PML/RARa融合基因的转录水平。结果 (1)RQ-PCR与传统巢式PCR(RT-PCR)检测结果的差异有统计学意义(P<0.05),提示应用RQ-PCR检测PML/RARa融合基因转录水平的敏感性高于RT-PCR。(2)RQ-PCR可对PML/RARa融合基因进行定量检测,监测患者的PML-RARa融合基因拷贝数水平变化,结果显示初诊时较高,有效治疗后迅速下降,复发时又出现上升,提示若患者在完全缓解(CR)后PML/RARa融合基因拷贝数呈现上升趋势,其复发机率大。结论 RQ-PCR检测作为APL治疗后微小残留病检测的方法,准确可靠,可以判断治疗效果,预测疾病复发,早期给予干预治疗,有重要的临床应用价值。

关键词：急性早幼粒细胞白血病微小残留病实时定量聚合酶链反应

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实时定量聚合酶链反应的研究及应用(综述)

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2002年第5期23卷 116-122页

作者：林灼锋李校坤吴帆暨南大学医药生物技术研究开发中心广东广州510632 中山大学达安基因诊断中心广东广州510089

　实时定量聚合酶链反应(real-timequantitativePCR,RQ-PCR)是综合PCR、分子杂交和酶动力学的一种新技术,它根据荧光共振能量转移(fluorescenceresonanceenergytranslation,FRET)的原理进行.目前已经成功地开发出TaqManTM、molecularbeaconprobe、amplifluortechnologies、LightCycler和single-labeledprobe几种相关的技术,并广泛地应用于病毒学、遗传性疾病和肿瘤等方面的诊断检测.实验研究表明:RQ-PCR作为一种快速、准确的核酸检测方法,在临床及生物学研究方面均具有相当的实用价值.

关键词：基因诊断实时定量聚合酶链反应生物学 PCR 分子杂交酶动力学核酸检测

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实时定量聚合酶链反应在检测儿童手足口病病毒感染中的应用

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山西医药杂志(下半月刊) 2011年第4期40卷 383-384页

作者：王建悦高城闻河北省张家口市妇幼保健院

手足口病是由多种肠道病毒引起的一种传染病。引发手足口病的肠道病毒有20多种,其中以柯萨奇病毒16型(COXA16)和EV71最常见。此病毒分布广泛,无明显的地区性,以5月至7月份为发病高峰,常呈爆发流行后散在发生。具有传染性强,隐性感染比例... 详细信息

手足口病是由多种肠道病毒引起的一种传染病。引发手足口病的肠道病毒有20多种,其中以柯萨奇病毒16型(COXA16)和EV71最常见。此病毒分布广泛,无明显的地区性,以5月至7月份为发病高峰,常呈爆发流行后散在发生。具有传染性强,隐性感染比例大,传播途径复杂,速

关键词：实时定量聚合酶链反应儿童病毒感染手足口病肠道病毒感染病毒分布中枢神经系统

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实时定量聚合酶链反应在肾移植后人巨细胞病毒活动性感染的临床应用研究

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华南国防医学杂志 2003年第4期17卷 4-7页

作者：成俊谢森许贤林史晓峰夏穗生华中科技大学同济医学院器官移植研究所武汉430030 广州军区武汉总医院泌尿外科江苏省常州市第一人民医院泌尿外科

目的:建立血浆、外周血白细胞HCMV DNA实时定量聚合酶链反应检测方法,评价其监测肾移植后人巨细胞病毒活动性感染的临床应用价值。方法:用重组质粒PQHY-1制作标准曲线;分别用实时定量聚合酶链反应和免疫组织化学方法,对28例肾移植术后... 详细信息

目的:建立血浆、外周血白细胞HCMV DNA实时定量聚合酶链反应检测方法,评价其监测肾移植后人巨细胞病毒活动性感染的临床应用价值。方法:用重组质粒PQHY-1制作标准曲线;分别用实时定量聚合酶链反应和免疫组织化学方法,对28例肾移植术后病人采血标本动态检测,并将结果进行比较。结果:实时定量PCR最低可检测出20拷贝/孔的HCMV DNA,且可重复性强(批内及批间误差均<5％),在102～107拷贝/孔的浓度范围时与Q值有很好的线性关系(r=-0.978)。与PP65抗原血症检测结果比较,血浆及外周血白细胞定时定量检测的灵敏度分别为88.5％,94.2％;特异度分别为97.8％,95.4％。HCMV活动性感染时血浆和外周血白细胞HCMV DNA平均含量分别为102.4拷ml和103.2拷贝/106PBL。血浆和外周血白细胞中HCMV DNA阳性检出时间较PP65抗原血症阳性检出时间平均要早1.6和3.8天。结论:实时定量聚合酶链反应检测方法是一种灵敏度高,特异度好的定量检测方法,可用于监测早期HCMV活动性感染。

关键词：人巨细胞病毒实时定量聚合酶链反应 PP 65抗原血症肾移植外周血白细胞

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