检索结果-内蒙古大学图书馆

中草药 2017年第6期48卷 1172-1177页

作者：盛安琪石楠傅惠英石森林浙江中医药大学药学院杭州高级中学

目的基于实时细胞分析技术结合HPLC法,比较不同部位、不同产地雷公藤的生物活性。方法建立x CELLigence实时细胞分析系统实时动态检测细胞活性的方法:接种密度为2×105/m L,给药时间为24 h左右,检测雷公藤对RBL-2H3细胞的活性;通过H... 详细信息

目的基于实时细胞分析技术结合HPLC法,比较不同部位、不同产地雷公藤的生物活性。方法建立x CELLigence实时细胞分析系统实时动态检测细胞活性的方法:接种密度为2×105/m L,给药时间为24 h左右,检测雷公藤对RBL-2H3细胞的活性;通过HPLC法建立不同部位雷公藤的指纹图谱并分析其共有峰。结果浙江产雷公藤同一部位活性相似;根皮和叶具有类似生物学活性,根和茎具有类似的活性,根皮、嫩芽对RBL-2H3细胞的生物活性明显高于根、茎部位,尤以根皮部活性最强;指纹图谱显示不同部位成分相似但量差异较大;氯仿提取液对RBL-2H3细胞的抑制率明显高于水提液。结论在细胞生物学层面上雷公藤根皮及地上部分有研究与药用价值,可对其深入开发和利用。

关键词：雷公藤不同部位实时细胞分析指纹图谱生物活性

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利用实时细胞分析技术检测胰腺癌细胞的药物敏感性

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中国比较医学杂志 2017年第3期27卷 25-30页

作者：靳亚西孙彩显高虹张连峰张丽中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的基于实时细胞分析技术评估胰腺癌细胞的药物敏感性,为胰腺癌个体化诊疗提供参考。方法选取SW1900、Capan-2、PANC-1三株人胰腺癌细胞系,选用盐酸吉西他滨和替吉奥胶囊两种胰腺癌治疗药物,接种24 h后分别梯度浓度给药,实时细胞分析... 详细信息

目的基于实时细胞分析技术评估胰腺癌细胞的药物敏感性,为胰腺癌个体化诊疗提供参考。方法选取SW1900、Capan-2、PANC-1三株人胰腺癌细胞系,选用盐酸吉西他滨和替吉奥胶囊两种胰腺癌治疗药物,接种24 h后分别梯度浓度给药,实时细胞分析技术监测给药前后细胞生长曲线,计算药物对胰腺癌细胞的生长抑制率(IC50)。同时,细胞培养板内给药,进行AO/EB染色和激光共聚焦观察。结果药物作用72 h,同一药物对不同细胞抑制率不同。盐酸吉西他滨对SW1900、Capan-2、PANC-1细胞的IC50分别为1.69、10.05、12.74μmol/L。替吉奥胶囊对SW1900、Capan-2、PANC-1细胞的IC50分别为180.29、765.70、95.57μmol/L。AO/EB染色验证IC50真实可靠。结论 SW1900及Capan-2细胞可作为盐酸吉西他滨及替吉奥的对照,建立细胞模型,对药物进行体外筛选,为临床利用该技术进行病人肿瘤药物筛选提供一个参考,具有一定的借鉴意义。

关键词：胰腺癌化疗药物实时细胞分析药物敏感性

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利用实时细胞分析技术检测前列腺与胰腺癌细胞药物敏感性及Trim46基因低表达对胰腺癌细胞Capan-2的增殖和迁移能力的抑制

利用实时细胞分析技术检测前列腺与胰腺癌细胞药物敏感性及Trim46...

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作者：靳亚西北京协和医学院

学位级别：硕士

目的基于实时细胞分析的技术发展,探索一种更加简便稳定的方法评估不同肿瘤细胞系对药物的敏感性,为前列腺癌和胰腺癌的临床治疗选择药物提供参考。方法选取VCaP、DU145、PC-3、PC-3M-2B4和PC-3M-IE8五株人前列腺癌细胞系,和SW1900、Cap... 详细信息

目的基于实时细胞分析的技术发展,探索一种更加简便稳定的方法评估不同肿瘤细胞系对药物的敏感性,为前列腺癌和胰腺癌的临床治疗选择药物提供参考。方法选取VCaP、DU145、PC-3、PC-3M-2B4和PC-3M-IE8五株人前列腺癌细胞系,和SW1900、Capan-2、PANC-1三株人胰腺癌细胞系,选用多西他赛、卡巴他赛和醋酸阿比特龙三种前列腺癌常用治疗药物,及盐酸吉西他滨和替吉奥胶囊两种胰腺癌常用治疗药物,细胞接种24小时后分别梯度浓度给药,利用RTCA监测给药前后的细胞生长曲线,计算药物对前列腺癌细胞和胰腺癌细胞的半抑制浓度(IC50)。对胰腺癌细胞培养板内给药,利用AO/EB染色和激光共聚焦观察,验证盐酸吉西他滨和替吉奥胶囊所得IC50值。结果多西他赛对 VCaP、DU145、PC-3、PC-3M-2B4、PC-3M-IE8 五种细胞系 24h的 IC50 分别为 8.81 nM、11.61 nM、1.78 nM、1.44 nM、8.69 nM。卡巴他赛对五种细胞系 24 h 的 IC50 分别为 3.73 nM、3.96 nM、10.41 nM、5.43 nM、7.37 nM。醋酸阿比特龙对五种细胞系24小时的IC50分别为8.34μM、8.60 μM、24.20 μM、8.59 μM、13.21 μM。盐酸吉西他滨对SW1900、Cpan-2、PANC-1三种细胞系72h的IC50 分别为 1.69μmol/L、10.05μmol/L、12.74μmol/L。替吉奥胶囊对三种细胞系 72h的 IC50 分别为 180.29μmol/L、765.70μmol/L、95.57μmol/L。AO/EB 染色验证 IC50真实可靠。结论PC-3M-2B4及DU145可作为多西他赛的对照;VCaP及PC-3可作为卡巴他赛与醋酸阿比特龙的对照,SW1990及Capan-2可作为盐酸吉西他滨与替吉奥胶囊的对照,建立细胞模型,进行药物体外敏感性筛选,为临床应用提供参考。目的:为了验证Trim46低表达对胰腺癌细胞Capan-2增殖能力及迁移能力的影响,观察Trim46在Capan-2细胞内表达位置、与肿瘤迁移相关蛋白的定位关系及对其表达水平的影响。方法:利用miRNA沉默建立Trim46低表达Capan-2细胞。使用Western blot及细胞免疫荧光检测Trim46在Capan-2细胞内的表达水平,确认Trim46低表达Capan-2细胞系的建立;利用免疫荧光检测Trim46在Capan-2细胞内与肿瘤转移相关蛋白的共定位情况;利用Western blot检测Trim46低表达对Capan-2细胞中相关肿瘤转移蛋白表达水平的影响;利用RTCA检测Trim46低表达对Capan-2细胞增殖能力的影响;利用愈伤实验检测Trim46低表达对Capan-2细胞迁移能力的影响。结果:建立了 Trim46低表达Capan-2细胞系;Trim46主要在Capan-2的细胞质及细胞膜处表达,呈点状或丝状结构;Trim46与actin、fak、及integrinbeta2、integrin beta6共定位较好;Trim46低表达会影响细胞黏附转移相关蛋白的表达,FAK总蛋白表达下调、phoshph-FAKpTyr861表达上调、Cortactin(皮层肌动蛋白)表达下调、ARP2(肌动蛋白相关蛋白)表达上调、CrKL表达上调;Trim46低表达能抑制Capan-2细胞的增殖及迁移能力。结论:Trim46基因可能与肿瘤增殖与迁移能力有关。

关键词：前列腺癌胰腺癌化疗药物实时细胞分析药物敏感性胰腺癌 Trim46 细胞增殖细胞转移

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基于实时细胞分析技术检测前列腺癌细胞药物敏感性

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中国比较医学杂志 2016年第4期26卷 46-52页

作者：靳亚西孙彩显高虹张连峰张丽中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的基于实时细胞分析技术发展,以更加简便稳定的方法进行药物敏感性评估,为前列腺癌临床治疗提供参考。方法选取VCa P、DU145、PC-3、PC-3M-2B4和PC-3M-IE8五株人前列腺癌细胞,选用多西他赛、卡巴他赛和醋酸阿比特龙三种前列腺癌治疗药... 详细信息

目的基于实时细胞分析技术发展,以更加简便稳定的方法进行药物敏感性评估,为前列腺癌临床治疗提供参考。方法选取VCa P、DU145、PC-3、PC-3M-2B4和PC-3M-IE8五株人前列腺癌细胞,选用多西他赛、卡巴他赛和醋酸阿比特龙三种前列腺癌治疗药物,分别梯度浓度给药,利用RTCA检测给药前后的细胞生长情况,确定药物对前列腺癌细胞的半抑制浓度(IC50)。结果多西他赛对VCa P、DU145、PC-3、PC-3M-2B4、PC-3M-IE8五种细胞系24 h的IC50分别为8.81 nmol/L、11.61 nmol/L、1.78 nmol/L、1.44 nmol/L、8.69 nmol/L。卡巴他赛24 h的IC50依次为3.73 nmol/L、3.96 nmol/L、10.41 nmol/L、5.43 nmol/L、7.37 nmol/L。醋酸阿比特龙24 h的IC50依次为8.34μmol/L、8.60μmol/L、24.20μmol/L、8.59μmol/L、13.21μmol/L。结论 PC-3M-2B4及DU145、VCa P及PC-3可作为多西他赛、卡巴他赛及醋酸阿比特龙的对照,建立体外筛选药物的细胞模型,为临床推广提供参考。

关键词：前列腺癌化疗药物实时细胞分析药物敏感性

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利用实时细胞分析技术检测胰腺癌细胞药物敏感性

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第十二届中国实验动物科学年会

作者：靳亚西孙彩显高虹张连峰张丽中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的基于实时细胞分析技术评估胰腺癌细胞的药物敏感性，为胰腺癌个体化诊疗提供参考.方法选取SW1900、Capan-2、PANC-1三株人胰腺癌细胞系，选用盐酸吉西他宾和替吉奥胶囊两种胰腺癌治疗药物，接种24小时后分别梯度浓度给药，实时细... 详细信息

目的基于实时细胞分析技术评估胰腺癌细胞的药物敏感性，为胰腺癌个体化诊疗提供参考.方法选取SW1900、Capan-2、PANC-1三株人胰腺癌细胞系，选用盐酸吉西他宾和替吉奥胶囊两种胰腺癌治疗药物，接种24小时后分别梯度浓度给药，实时细胞分析技术监测给药前后细胞生长曲线，计算药物对胰腺癌细胞的生长抑制率(IC50).同时，细胞培养板内给药，行AO/EB染色和激光共聚焦观察.结果药物作用72小时，同一药物对不同细胞抑制率不同.盐酸吉西他宾对SW1900、Capan-2、PANC-1的IC50分别为1.69μmol/L、10.05μmol/L、12.74μmol/L.替吉奥胶囊对SW 1900、Capan-2、PANC-1的IC50分别为180.29μmol/L、765.70μmol/L、95.57μmol/***/EB染色验证IC50真实可靠.结论 SW1900及Capan-2可作为盐酸吉西他宾及替吉奥的对照，建立细胞模型，对药物进行体外筛选，为临床推广提供参考.

关键词：胰腺癌化疗药物实时细胞分析药物敏感性

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利用实时细胞分析技术检测胰腺癌细胞药物敏感性

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第十二届中国实验动物科学年会（2016.南宁）

作者：靳亚西孙彩显高虹张连峰张丽中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室

目的基于实时细胞分析技术评估胰腺癌细胞的药物敏感性,为胰腺癌个体化诊疗提供参考。方法选取SW1900、Capan-2、PANC-1三株人胰腺癌细胞系,选用盐酸吉西他宾和替吉奥胶囊两种胰腺癌治疗药物,接种24小时后分别梯度浓度给药,实时细胞分... 详细信息

目的基于实时细胞分析技术评估胰腺癌细胞的药物敏感性,为胰腺癌个体化诊疗提供参考。方法选取SW1900、Capan-2、PANC-1三株人胰腺癌细胞系,选用盐酸吉西他宾和替吉奥胶囊两种胰腺癌治疗药物,接种24小时后分别梯度浓度给药,实时细胞分析技术监测给药前后细胞生长曲线,计算药物对胰腺癌细胞的生长抑制率(IC50)。同时,细胞培养板内给药,行AO/EB染色和激光共聚焦观察。结果药物作用72小时,同一药物对不同细胞抑制率不同。盐酸吉西他宾对SW1900、Capan-2、PANC-1的IC50分别为1.69μmol/L、10.05μmol/L、12.74μmol/L。替吉奥胶囊对SW1900、Capan-2、PANC-1的IC50分别为180.29μmol/L、765.70μmol/L、95.57μmol/L。AO/EB染色验证ICS0真实可靠。结论 SW1900及Capan-2可作为盐酸吉西他宾及替吉奥的对照,建立细胞模型,对药物进行体外筛选,为临床推广提供参考。

关键词：胰腺癌化疗药物实时细胞分析药物敏感性

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基于DASS-RTCA法的经典名方当归补血汤质量一致性评价初步研究

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中国药学杂志 2024年第12期59卷 1110-1119页

作者：高武锋张佳卞海雯江悦亓雅丽石德志毕蕾顾玲严国俊南京中医药大学药学院南京210023 江苏省中医外用药开发与应用工程研究中心南京210023 江苏省经典名方工程研究中心南京210023 南京中医药大学中医学院·中西医结合学院南京210023

目的建立一种反映多批次中药复方制剂整体药效特征的质量一致性评价方法。方法以外翻肠囊模型建立药物吸收仿生系统(drug absorption simulating system,DASS)标准化吸收仿生系统模块,制备不同来源、批次的当归补血汤(Danggui buxue tan... 详细信息

目的建立一种反映多批次中药复方制剂整体药效特征的质量一致性评价方法。方法以外翻肠囊模型建立药物吸收仿生系统(drug absorption simulating system,DASS)标准化吸收仿生系统模块,制备不同来源、批次的当归补血汤(Danggui buxue tang,DBT)肠吸收样品;借鉴生物药一致性评价思路,以实时细胞分析(real-time cell analysis,RTCA)建立细胞生物效应表征模块,监测15批DBT样品细胞反应曲线。结果联合DASS-RTCA法,对15批DBT样品时间剂量依赖性细胞反应曲线(time-dependent cell response patterns,TCRPs)的特征参数进行提取,各特征参数的相对标准偏差(RSD)均<5.1%,表明各批次DBT细胞效应表征差异较小,TCRPs图相似度高。通过相似度分析、聚类分析、雷达图等分析,均反映不同批次DBT的质量具有较高的一致性。结论联合DASS-RTCA法建立的质量一致性评价方法可反映制剂的整体质量,为中药批次间质量一致性评价提供新的思路和方法。

关键词：当归补血汤药物吸收仿生系统实时细胞分析生物评价一致性评价

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利用人诱导多能干细胞分化的心肌细胞评价莫西沙星和左氧氟沙星与抗心律失常药物联用的心脏毒性风险

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中国药物警戒 2020年第9期17卷 553-558页

作者：汪祺颜玉静任璐文海若郭建中国食品药品检定研究院北京100050 首都医科大学附属北京同仁医院急诊科北京100730

目的利用人诱导多能干细胞分化的心肌细胞和实时细胞分析系统评价喹诺酮类抗生素莫西沙星和左氧氟沙星与抗心律失常药物奎尼丁、普鲁卡因胺和胺碘酮联用的心脏毒性风险。方法人诱导多能干细胞分化的心肌细胞接种于实时细胞分析系统Cardi... 详细信息

目的利用人诱导多能干细胞分化的心肌细胞和实时细胞分析系统评价喹诺酮类抗生素莫西沙星和左氧氟沙星与抗心律失常药物奎尼丁、普鲁卡因胺和胺碘酮联用的心脏毒性风险。方法人诱导多能干细胞分化的心肌细胞接种于实时细胞分析系统Cardio E-Plate 96孔板并给予不同浓度的莫西沙星、左氧氟沙星、奎尼丁、普鲁卡因胺和胺碘酮,根据人诱导多能干细胞分化的心肌细胞的标准化细胞指数及标准化搏动频率筛选毒性浓度。以莫西沙星和左氧氟沙星最高无毒性浓度和最低有毒性浓度预处理24 h后,分别给予不同浓度的奎尼丁、普鲁卡因胺和胺碘酮,比较各组间标准化细胞指数的差异。结果莫西沙星、左氧氟沙星、奎尼丁、普鲁卡因胺和胺碘酮均可诱导标准化细胞指数降低(P<0.05)。莫西沙星与奎尼丁或普鲁卡因胺联合给药后可导致标准化细胞指数降低(P<0.05);左氧氟沙星与胺碘酮联合给药后可导致标准化细胞指数降低(P<0.05)。结论莫西沙星和左氧氟沙星与抗心律失常药物联用后可增加心脏毒性风险,基于人诱导多能干细胞分化的心肌细胞和实时细胞分析系统的体外评价模型在药物心脏毒性预测上具有应用前景。

关键词：莫西沙星左氧氟沙星心律失常人诱导多能干细胞心肌细胞实时细胞分析心脏毒性奎尼丁普鲁卡因胺胺碘酮

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RTCA与MTT法用于检测肠道微生物细胞毒性的比较研究

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军事医学 2019年第6期43卷 442-447页

作者：宾蕾邓慧敏李正超毕玉晶邓仲良南华大学公共卫生学院湖南衡阳417000 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所北京100071 衡阳市健康危害因子检验检疫新技术研究重点实验室湖南衡阳421001

目的运用实时细胞分析(RTCA)法和MTT法检测干酪乳杆菌(***)、肠出血性大肠杆菌(EHEC)的细胞毒性,并比较两者优缺点。方法将***及EHEC的菌液、菌体裂解液(MOI=200)以及上清液(25%)感染HT-29和LoVo细胞,经RTCA法和MTT法观察细菌对细胞的... 详细信息

目的运用实时细胞分析(RTCA)法和MTT法检测干酪乳杆菌(***)、肠出血性大肠杆菌(EHEC)的细胞毒性,并比较两者优缺点。方法将***及EHEC的菌液、菌体裂解液(MOI=200)以及上清液(25%)感染HT-29和LoVo细胞,经RTCA法和MTT法观察细菌对细胞的校正细胞指数(NCI)及细胞活力的影响。结果RTCA法与MTT法结果一致,***的活菌、菌体裂解液对HT-29细胞和LoVo细胞无明显毒性。EHEC的活菌对HT-29细胞和LoVo细胞有明显毒性,其菌体裂解液对HT-29细胞有明显毒性、对LoVo细胞无明显毒性。在上清液实验中,RTCA法检测出***和EHEC对HT-29细胞无明显毒性,而LoVo细胞受培养基影响未能正确反映出上清液细胞毒性结果。结论与MTT法相比,RTCA法更适于细菌细胞毒性检测,但应在实验前选择合适的细胞系及种植浓度,建议在选用RTCA法检测细胞毒性时选择两种或两种以上细胞系,多方验证以避免漏检。

关键词：实时细胞分析 MTT 干酪乳杆菌肠出血性大肠杆菌细胞毒性

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利用hiPSC-CM评价莫西沙星和左氧氟沙星与抗心律失常药物联用的心脏毒性风险

利用hiPSC-CM评价莫西沙星和左氧氟沙星与抗心律失常药物联用的心...

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中国毒理学会药物毒理与安全性评价学术大会（2019年）暨粤港澳大湾区生物医药产业第一届高峰论坛

作者：颜玉静文海若任璐黄芝瑛王雪中国食品药品检定研究院国家药物安全评价监测中心药物非临床安全评价研究北京市重点实验室中山大学药学院

目的:利用诱导多能干细胞分化的心肌细胞(Human Induced pluripotent stem cell derived cardiacmyocytes,hiPSC-CM)和阻抗分析平台实时细胞分析系统(xCELLigence Real-Time Cell Analyze Cardio system,RTCA)建立体外药物心脏毒性评价模型,评价喹诺酮类抗生素莫西沙星和左氧氟沙星与抗心律失常药物奎尼丁、普鲁卡因胺和胺碘酮联用的心脏毒性风险。方法:hiPSC-CM复苏后接种于RTCA Cardio E-Plate 96孔板,细胞搏动72h后,分别给予不同浓度的莫西沙星和左氧氟沙星,观察并根据hiPSC-CM的细胞指数(Cell Index,CI)、搏动频率(Beating Rate,BR)等指标对两者毒性浓度进行筛选。分别选择莫西沙星和左氧氟沙星无毒性浓度和有毒性浓度对hiPSC-CM预处理48h,以0.1%DMSO为阴性对照。之后分别给予不同浓度的奎尼丁、普鲁卡因胺和胺碘酮,观察莫西沙星和左氧氟沙星预处理组与对照组CI、BR等指标的差异。结果:莫西沙星32μM给药后CI和BR值均无明显变化,64μM和128μM给药后CI值明显降低(P<0.05),且均出现了较长时间的搏动信号消失。左氧氟沙星70μM给药后CI值先降低后升高,但未监测到BR值的明显变化,80μM和100μM给药后CI值明显降低(P<0.05),给药后均出现了搏动信号的减弱甚至消失。选择莫西沙星32μM、64μM,左氧氟沙星70μM、80μM对hiPSC预处理48h后给予奎尼丁、普鲁卡因胺和胺碘酮。与对照组相比,给予奎尼丁后,莫西沙星32μM和64μM预处理组的CI值均明显降低(P<0.05),左氧氟沙星预处理组则未监测到CI和BR值的明显变化;给予普鲁卡因胺和胺碘酮后,左氧氟沙星70μM和80μM预处理组的CI值均明显降低(P<0.05),莫西沙星预处理组则未监测到CI和BR值的明显变化。结论:莫西沙星和左氧氟沙星均具有一定的心脏毒性,且莫西沙星可增强心肌细胞对奎尼丁的敏感性,左氧氟沙星可增强心肌细胞对普鲁卡因胺和胺碘酮的敏感性,增加其心脏毒性风险。该结论部分与临床数据相符,提示基于hiPSC-CM和RTCA的体外药物心脏毒性评价模型对药物心脏毒性风险预测的准确性。该模型可以综合评价药物处理后细胞的收缩力、细胞活性、搏动频率、搏动幅度等指标,即时反映药物处理对细胞生物学功能的影响,能够更为准确、灵敏地用于药物的心脏毒性筛选。

关键词：莫西沙星左氧氟沙星心律失常 hiPSC-CM 实时细胞分析心脏毒性

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