检索结果-内蒙古大学图书馆

作物学报 2004年第6期30卷 602-607页

作者：陈颖徐宝梁苏宁葛毅强王曙光中国进出口商品检验技术研究所北京100025 科技部中国农村技术开发中心北京100045

采用实时荧光定量pcr技术 ,通过使用特异的引物和探针 ,对玉米中的内源基因Invertase和转基因玉米Mon810、Event 176中的外源基因进行了定量检测 ,建立了商业化转基因玉米Mon 810 (YieldGard)和Event 176 (Maximizer)的定量pcr检测方法... 详细信息

采用实时荧光定量pcr技术 ,通过使用特异的引物和探针 ,对玉米中的内源基因Invertase和转基因玉米Mon810、Event 176中的外源基因进行了定量检测 ,建立了商业化转基因玉米Mon 810 (YieldGard)和Event 176 (Maximizer)的定量pcr检测方法。该方法的检测灵敏度小于 0 .0 1% ,是国际上设定的转基因最低限量的 10

关键词：实时荧光定量pcr技术转基因玉米定量检测食品安全

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实时荧光定量pcr技术检测转基因大豆方法的建立

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食品与发酵工业 2003年第8期29卷 65-69页

作者：陈颖徐宝梁苏宁王媛王丙武葛毅强中国进出口商品检验技术研究所中国农业大学食品学院北京100049 科技部中国农村技术开发中心北京100045

采用实时荧光定量pcr技术 ,通过使用特异的引物和探针 ,对大豆中的内源基因Lectin和转基因大豆中的外源基因EPSPS进行了定量检测 ,建立了Monsanto公司生产的商业化转基因大豆Roundup Ready○R的定量pcr检测方法。该方法的检测灵敏度 <... 详细信息

采用实时荧光定量pcr技术 ,通过使用特异的引物和探针 ,对大豆中的内源基因Lectin和转基因大豆中的外源基因EPSPS进行了定量检测 ,建立了Monsanto公司生产的商业化转基因大豆Roundup Ready○R的定量pcr检测方法。该方法的检测灵敏度 <0 0 1% ,是国际上设定的转基因最低限量的 10

关键词：实时荧光定量pcr技术检测转基因大豆内源基因Lectin 外源基因NEPSPS

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实时荧光定量pcr技术在侵袭性真菌感染诊断中的应用价值

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中国老年学杂志 2017年第20期37卷 5119-5121页

作者：马晓薇李明李庆伦张慧婷罗彩琴宁夏医科大学总医院心脑血管病院ICU 宁夏银川750012 宁夏医科大学

目的探讨实时荧光定量pcr(RTFQ-pcr)技术在侵袭性真菌感染(IFI)诊断中的应用价值。方法采集IFI高危患者102份血清,收集其相关临床资料。以"重症患者IFI的诊断和治疗指南(2007年)"作为金标准,计算RTFQ-pcr和G试验的敏感度、特... 详细信息

目的探讨实时荧光定量pcr(RTFQ-pcr)技术在侵袭性真菌感染(IFI)诊断中的应用价值。方法采集IFI高危患者102份血清,收集其相关临床资料。以"重症患者IFI的诊断和治疗指南(2007年)"作为金标准,计算RTFQ-pcr和G试验的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值。以血培养为金标准,计算RTFQ-pcr的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值。结果根据"2007年指南"的诊断标准,确诊病例2例,临床诊断病例20例,拟诊病例31例,非IFI病例49例。以确诊和临床诊断病例作为感染组,非IFI病例作为非感染组。两组年龄、慢性肾功能不全、糖尿病、预后差患者的比例比较均有统计学差异(P<0.05)。IFI感染部位主要为呼吸道感染10例(50.0%)、泌尿感染8例(40.0%)、血液感染2例(10.0%)。在24例IFI患者中共分离出17株真菌,分别为9株白色念珠菌(52.9%),1株热带念珠菌(5.9%),3株光滑念珠菌(17.6%),2株念珠菌属(11.8%),2株烟曲霉(11.8%)。以"2007年指南"作为金标准,RTFQ-pcr灵敏度为50.0%,特异度为95.9%,阳性预测值为81.8%,阴性预测值为83.9%;G试验的敏感度为61.1%,特异度为91.8%,阳性预测值为73.3%,阴性预测值为86.5%。以血培养为金标准,RTFQ-pcr的敏感度为100.0%,特异度为88.2%,阳性预测值为15.4%,阴性预测值为100.0%。结论 RTFQ-pcr检测技术可以作为重症患者IFI早期诊断的一种有效手段,在临床上对IFI的早期诊断具有一定的价值。

关键词：侵袭性真菌感染实时荧光定量pcr技术诊断

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实时荧光定量pcr技术在植物检疫中应用的研究进展

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湖北农业科学 2012年第1期51卷 5-8页

作者：黄海泉北仑出入境检验检疫局浙江宁波315800

实时荧光定量pcr技术是在pcr反应体系中加入荧光染料或荧光探针,利用荧光信号积累实时监测整个pcr反应进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析,具有操作简便、快速高效、高通量、高敏感性等特点。近年来,实时荧光定量pcr技术在植... 详细信息

实时荧光定量pcr技术是在pcr反应体系中加入荧光染料或荧光探针,利用荧光信号积累实时监测整个pcr反应进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析,具有操作简便、快速高效、高通量、高敏感性等特点。近年来,实时荧光定量pcr技术在植物检疫研究上不断深入,大大提高了植物疫情的检测效率和监测防治水平。综合论述了实时荧光定量pcr技术在由真菌、细菌、病毒和线虫引发的植物疫情的检测与应用。

关键词：实时荧光定量pcr技术植物检疫植物病害

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实时荧光定量pcr技术的研究进展及应用

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黑龙江畜牧兽医 2011年第11期 24-27页

作者：徐楠楠胡桂学吉林农业大学动物科技学院长春130118

聚合酶链反应（pcr）技术自1985年问世以来,以其灵敏性高、特异性强和速度快在分子生物学等科研领域得到了广泛应用。但是,由于传统的pcr技术不能准确定量,在操作过程中易受污染而使假阳性率偏高;因此,使其应用受到限制。实时荧光定量PC... 详细信息

聚合酶链反应（pcr）技术自1985年问世以来,以其灵敏性高、特异性强和速度快在分子生物学等科研领域得到了广泛应用。但是,由于传统的pcr技术不能准确定量,在操作过程中易受污染而使假阳性率偏高;因此,使其应用受到限制。实时荧光定量pcr技术拥有特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点,已成为了分子生物学研究的重要工具。文章对实时荧光定量pcr技术的原理、检测方法、定量方法及其应用进行了综述。

关键词：实时荧光定量pcr技术应用分子生物学聚合酶链反应假阳性率操作过程封闭反应定量方法

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实时荧光定量pcr技术快速检测细菌及其对抗菌素的敏感性与耐药性表型研究

实时荧光定量PCR技术快速检测细菌及其对抗菌素的敏感性与耐药性...

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作者：向瑶成都中医药大学

学位级别：硕士

目的:1.探索简便、快速、有效、经济的细菌DNA制备方法。2.建立快速检测细菌及初步对细菌革兰分型的实时荧光定量pcr技术。3.以梅里埃VITEK-2 Com-pact细菌鉴定及药敏分析系统所得细菌药敏结果为金标准,利用建立起的实时荧光定量pcr技... 详细信息

目的:1.探索简便、快速、有效、经济的细菌DNA制备方法。2.建立快速检测细菌及初步对细菌革兰分型的实时荧光定量pcr技术。3.以梅里埃VITEK-2 Com-pact细菌鉴定及药敏分析系统所得细菌药敏结果为金标准,利用建立起的实时荧光定量pcr技术快速检测临床常见细菌在含抗菌素的M-H肉汤培养基中的生长情况,找到合适的敏感与耐药分界值来判断细菌对抗菌素的敏感性与耐药性表型。方法:1.对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌用八种简便方法进行DNA制备,比较煮沸时间对所得细菌DNA质与量的影响及各方法所得DNA的完整性、含量、纯度及pcr扩增反应效果。2.以细菌16S rRNA基因为靶基因设计细菌通用引物、通用探针及革兰分型探针。使用通用引物及通用探针的实时荧光定量pcr方法对多种细菌DNA进行检测,使用通用引物和革兰分型探针的实时荧光定量pcr方法对细菌进行初步革兰分型。3.通过对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌及铜绿假单胞菌标准菌株的生长曲线进行分析,找到细菌显著生长的最短培养时间,然后使用本研究建立的实时荧光定量pcr技术检测多种已知药敏结果的临床分离菌株在含有抗菌素的M-H肉汤中的相对生长率,探索该方法区分耐药与敏感的最佳分界值(中介作为耐药),判断细菌对抗菌素的敏感性与耐药性表型。4.用大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌以外的临床分离其它菌株验证本研究所得出的实时荧光定量pcr技术检测细菌对抗菌素的敏感性与耐药性表型的分界值,并计算其符合率。结果:1.煮沸5分钟与煮沸10分钟所得DNA量差异无统计学意义(P>0.05);煮沸5分钟与10分钟所得DNA的pcr扩增反应效果无差异(P>0.05)。煮沸5分钟即可满足pcr实验要求。碱-SDS-煮沸法所得DNA的完整性、量及pcr扩增反应效果均为最佳。2.通用探针能正确区分细菌DNA及非细菌DNA,对三种代表性菌株的检测限分别为大肠埃希菌1×10～2cfu/ml、金黄色葡萄球菌1×10～3cfu/ml、铜绿假单胞菌1×10～2cfu/ml;通过实验条件优化,分型探针能很好地区分革兰阴性与革兰阳性细菌,对大肠埃希菌和铜绿假单胞菌的检测限均可达到1×10～1cfu/ml。3.三种标准菌株显著生长的最短培养时间均为3h,对临床分离的30株大肠埃希菌实验得出,以细菌相对生长率0.4416为分界值(细菌相对生长率≤0.4416时判断为敏感,相对生长率>0.4416时判断为耐药),判断其对抗菌素的敏感性表型的灵敏度为98.4%,特异度为100%;对临床分离的30株金黄色葡萄球菌实验得出,以细菌相对生长率0.4010为分界值,判断其对抗菌素的敏感性表型的灵敏度和特异度均为100%;对临床分离的30株铜绿假单胞菌实验得出,以细菌相对生长率0.4830为分界值,判断其对抗菌素的敏感性表型的灵敏度为60%,特异度为64%。4.对20株革兰阴性杆菌,以0.4416为敏感与耐药的分界值,与梅里埃VITEK-2 Com-pact细菌鉴定及药敏分析系统药敏试验结果的总一致率为92%,出现主要错误(将敏感判断为耐药是主要错误,将耐药判断为敏感是重大错误)的有5个结果,占试验结果总数的8%。对10株革兰阳性球菌,以0.4010作为敏感与耐药的分界值,与梅里埃VITEK-2 Com-pact细菌鉴定及药敏分析系统药敏试验结果的总一致率为93%,出现主要错误的有2个结果,占试验结果总数的7%。结论:1.碱-SDS-煮沸法制备细菌DNA不仅简便快速,所得DNA也适用于实时荧光定量pcr实验。2.建立起的实时荧光定量pcr技术在检测多种细菌时均有较低的检测限,有望应用于临床无菌性体液标本中细菌检测及革兰分型。3.对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌,使用实时荧光定量pcr方法检测细菌相对生长率,以判断细菌对抗菌素的敏感性与耐药性表型可以得到很高的灵敏度和特异度。对铜绿假单胞菌,本方所找到的分界值不理想。4.用代表细菌实验所得敏感与耐药的分界值应用于同种类细菌时,与梅里埃VITEK-2 Com-pact细菌鉴定及药敏分析系统药敏试验结果的总体一致率较高,但受不同细菌所占比例影响较大,故分界值通用性有一定局限性,可能需要增加细分细菌种类来进行实验。

关键词：细菌 DNA制备快速检测实时荧光定量pcr技术快速药敏实验

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实时荧光定量pcr技术在动物遗传育种中的应用

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农业技术与装备 2012年第23期 75-77页

作者：张海富籍丁艳山西省平遥县畜牧中心

聚合酶链式反应技术（polymerasechainreaction简称pcr）是一项体外基因快速扩增技术。该技术的建立，使定性检测的技术得到改善，达到检测单个靶细胞的水平，以其简便易行、灵敏度高等优点被广泛应用于分子生物学及医学等领域。但其易... 详细信息

聚合酶链式反应技术（polymerasechainreaction简称pcr）是一项体外基因快速扩增技术。该技术的建立，使定性检测的技术得到改善，达到检测单个靶细胞的水平，以其简便易行、灵敏度高等优点被广泛应用于分子生物学及医学等领域。但其易污染、假阳性及定量不准确等问题也日益突出。而荧光定量pcr技术（FQ—pcr）的出现解决了以上难题，实现了从定性到定量的飞跃。此方法特异性强和可靠性更强，能实现多重反应，且采用完全闭管检测，不需要pcr后处理，有效解决pcr污染问题以及EB对试验人员的伤害；

关键词：实时荧光定量pcr技术动物遗传育种聚合酶链式反应技术应用定性检测污染问题分子生物学扩增技术

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实时荧光定量pcr技术理论研究及其在医学方面的应用

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南昌大学学报（医学版） 2011年第10期51卷 97-100页

作者：兰静李秋根南昌大学研究生院医学部江西省人民医院呼吸内科南昌330006

实时荧光定量pcr（real—time fluorescence quantitative pcr，FQ-pcr）是在传统pcr定性技术基础上发展起来的核定量技术。它是一种在pcr反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个pcr进程，最后通过标准曲线对未知模板进... 详细信息

实时荧光定量pcr（real—time fluorescence quantitative pcr，FQ-pcr）是在传统pcr定性技术基础上发展起来的核定量技术。它是一种在pcr反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个pcr进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。该技术与传统pcr技术相比，不仅实现了对DNA模板的定量，

关键词：实时荧光定量pcr技术医学原理应用

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实时荧光定量pcr技术快速检测甲型H1N1流感病毒

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中国卫生产业 2018年第31期15卷 35-36页

作者：谷宇佳黑龙江省农垦总局疾病预防控制中心黑龙江哈尔滨150090

目的对疑似甲型H1N1流感病毒携带者的标本进行病毒核酸确诊,进而探讨实时荧光定量pcr技术在甲型H1N1流感病毒检测诊断中的意义。方法选取2017年9—12月某院检验科工作人员采集的330份疑似甲型H1N1流感病毒携带者咽拭子标本,对其进行病... 详细信息

目的对疑似甲型H1N1流感病毒携带者的标本进行病毒核酸确诊,进而探讨实时荧光定量pcr技术在甲型H1N1流感病毒检测诊断中的意义。方法选取2017年9—12月某院检验科工作人员采集的330份疑似甲型H1N1流感病毒携带者咽拭子标本,对其进行病毒核酸确诊检测,根据检测结果对甲型H1N1流感病毒、甲1型流感病毒、甲3型流感病毒以及乙型流感病毒进行临床分型。结果该组标本中检出甲型H1N1流感病毒核酸阳性标本108份,检出率为108/330(32.73%),检出甲1型流感病毒10份(3.03%),检出甲3型流感病毒21份(6.36%),未检出乙型流感病毒。结论临床上诊断甲型H1N1流感病毒时,采用实时荧光定量pcr技术,此种技术操作简单、快速、有着较强的特异性和较高的灵敏度。有着较高的应用价值。

关键词：实时荧光定量pcr技术检测甲型H1N1流感病毒

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实时荧光定量pcr技术在人类细小病毒B19检测中的应用

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河南科技 2012年第12期31卷 64-65页

作者：疏翠安顺上海浩源生物科技有限公司

人类微小病毒B19（Human parvovirusB19，HPVB19）是儿科常见的出疹性疾病——传染性红斑（又称第五病，Erylhemainfection，E1）的病凶。除了这一轻型白限性感染外，B19病毒还可使慢性溶血病病人发生再障危象及急性多关节病。在免疫缺... 详细信息

人类微小病毒B19（Human parvovirusB19，HPVB19）是儿科常见的出疹性疾病——传染性红斑（又称第五病，Erylhemainfection，E1）的病凶。除了这一轻型白限性感染外，B19病毒还可使慢性溶血病病人发生再障危象及急性多关节病。在免疫缺损病人中可造成持续性感染。由于细小病毒B19致病的广泛性和复杂性，目前国际上对该病毒的研究比较活跃。B19可通过呼吸道传播，也可通过输吡和使用血液制品传播，从而引起多种疾病。B19病毒的近期感染主要通过IgM抗体的检测，常用捕获法或放射免疫测定，IgG抗体对诊断急性感染无意义，其存在仅表明曾感染过，主要用于血清流行病学调查。

关键词：细小病毒B19 实时荧光定量pcr技术检测人类持续性感染放射免疫测定 IgM抗体应用

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