检索结果-内蒙古大学图书馆

尿毒清颗粒对腺嘌呤诱导的慢性肾功能衰竭大鼠肾皮质TGF-β_1及其下游基因mRNA表达的影响

南开大学学报（自然科学版） 2012年第3期45卷 29-36页

作者：苗绪红饶冠华郝擘李爱胡宝全宋文芹南开大学生命科学学院天津300071 天津医科大学基础医学院天津300070

为了研究尿毒清颗粒的作用机制,以灌胃腺嘌呤诱导的慢性肾功能衰竭Wistar大鼠为实验材料,用SYBR Green I实时荧光定量pcr(Real-time Fluorescent Quantitative pcr,Real-time FQ-pcr)技术检测了大鼠肾皮质转化生长因子-β1(Transfer Gro... 详细信息

为了研究尿毒清颗粒的作用机制,以灌胃腺嘌呤诱导的慢性肾功能衰竭Wistar大鼠为实验材料,用SYBR Green I实时荧光定量pcr(Real-time Fluorescent Quantitative pcr,Real-time FQ-pcr)技术检测了大鼠肾皮质转化生长因子-β1(Transfer Growth Factor-β1,TGF-β1)及其下游基因mRNA的表达变化,利用免疫组织化学(Immuno Histo Chemistry,IHC)技术检测了CRF大鼠肾皮质TGF-β1蛋白表达的变化.结果发现,尿毒清颗粒可以降低慢性肾功能衰竭大鼠肾皮质TGF-β1及其下游基因mRNA的表达,能够降低大鼠肾皮质TGF-β1蛋白的表达,P<0.05,差异具有显著性.尿毒清颗粒可以通过TGF-β1通路起到缓解慢性肾功能衰竭大鼠病理变化的作用,为尿毒清颗粒治疗慢性肾功能衰竭药理机制研究提供了实验基础.

关键词：实时荧光定量pcr技术尿毒清颗粒慢性肾功能衰竭大鼠 TGF—β1基因表达

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应用基因芯片对人肝纤维化相关基因的筛查

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世界华人消化杂志 2008年第14期16卷 1525-1529页

作者：罗新华杨勤张权程明亮贵阳医学院附属医院感染科贵州省贵阳市550004 贵阳医学院病理生理学教研室贵州省贵阳市550004

目的:筛查肝纤维化组织相关基因,探讨肝纤维化发生机制.方法:抽提肝纤维化组织和正常肝组织总RNA来制备探针,经杂交、洗涤后,通过计算机扫描分析肝纤维化组织和正常肝组织基因表达谱的差异情况,并用实时荧光定量pcr技术对其中部分差异... 详细信息

目的:筛查肝纤维化组织相关基因,探讨肝纤维化发生机制.方法:抽提肝纤维化组织和正常肝组织总RNA来制备探针,经杂交、洗涤后,通过计算机扫描分析肝纤维化组织和正常肝组织基因表达谱的差异情况,并用实时荧光定量pcr技术对其中部分差异基因的表达水平变化进行验证.结果:筛选出差异表达的基因68个,其中肝纤维化组织中表达上调的基因35个,表达下调的基因33个,这些基因按照功能可以分为调控细胞信号转导、DNA损伤与修复、转录调控因子、代谢相关基因以及未知功能基因.与正常肝组织比较,肝纤维化组织中C/EB Pβ mRNA表达下调(22.02±4.82vs59.13±8.21,P<0.01),MMP-14 mRNA表达上调(257.33±26.58vs21.65±4.37,P<0.01),结果与基因芯片一致.结论:多种基因参与肝纤维化的形成过程,肝纤维化组织与正常肝组织之间存在有明显的基因表达差异.

关键词：肝纤维化肝组织基因芯片基因表达实时荧光定量pcr技术

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TNF-αⅠ型受体对小鼠脑血管内皮细胞iNOS和HO-1基因表达的影响

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基础医学与临床 2005年第6期25卷 507-511页

作者：张洁邱劲娄晋宁王小明斯琴吴其夏郭恒怡中国医学科学院中国协和医科大学基础医学院病理生理学系中日友好医院临床医学研究所北京100029

目的探讨TNFαⅠ型受体(TNFR1)对小鼠脑血管内皮细胞iNOS、HO1基因表达水平的影响。方法体外培养TNFR1基因敲除的小鼠脑血管内皮细胞(BVECTNFR1)和野生型小鼠脑血管内皮细胞(BVEC),分别给予5ngmLTNFα刺激24h后,用实时荧光定量pcr技术及... 详细信息

目的探讨TNFαⅠ型受体(TNFR1)对小鼠脑血管内皮细胞iNOS、HO1基因表达水平的影响。方法体外培养TNFR1基因敲除的小鼠脑血管内皮细胞(BVECTNFR1)和野生型小鼠脑血管内皮细胞(BVEC),分别给予5ngmLTNFα刺激24h后,用实时荧光定量pcr技术及Westernblot方法检测两种细胞iNOS基因和HO1mRNA和蛋白表达量。结果给予TNFα刺激后,iNOSmRNA和蛋白表达仅在野生型脑血管内皮细胞内明显增高,而在受体敲除脑血管内皮细胞无明显变化。HO1mRNA和蛋白表达量在野生型小鼠脑血管内皮细胞和受体敲除小鼠脑血管内皮细胞均明显增高。结论TNFα可能作用于脑血管内皮细胞TNFR1,增加iNOS表达,HO1表达增高并非由TNFR1介导,而由TNFα的其他受体介导。

关键词：脑血管内皮细胞 TNF-α HO-1 Ⅰ型受体小鼠实时荧光定量pcr技术 TNFR1 基因表达水平 Westem iNOS基因 mRNA iNOS表达野生型基因敲除体外培养 blot 蛋白表达受体介导表达量 24h 种细胞增高细胞内

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孕妇血浆中胎儿游离mRNA检测在唐氏综合征产前诊断中的应用

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中国实用妇科与产科杂志 2010年第1期26卷 53-55页

作者：程蔚蔚赵欣荣张华陈焱王彦林上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院上海200030 中国科学院上海微系统与信息技术研究所上海200050

目的探讨孕妇血浆中胎儿游离mRNA含量变化作为唐氏综合征产前筛查指标的可行性。方法选择2007年5月至2008年8月在上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院就诊的26例孕中期(15～26周)妇女作为研究对象,其中13例为单胎行常规产科检查... 详细信息

目的探讨孕妇血浆中胎儿游离mRNA含量变化作为唐氏综合征产前筛查指标的可行性。方法选择2007年5月至2008年8月在上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院就诊的26例孕中期(15～26周)妇女作为研究对象,其中13例为单胎行常规产科检查的孕妇(A组),9例为21-三体综合征胎儿的孕妇(B组),4例为其他染色体异常胎儿的孕妇(C组),提取其外周血血浆中游离mRNA,应用QF-pcr技术检测胎盘来源的HPL,β-HCG,TFPI2,DSCR4,LOC90625基因,以此确定母体血浆中的胎儿游离mRNA含量,并同时检测代表母体与胎儿总游离mRNA的18sRNA基因作为内参照。结果除TFPI2基因外,其他4种基因,在21-三体综合征胎儿孕妇组和其他染色体异常胎儿孕妇组血浆中胎儿游离mRNA含量明显高于正常胎儿孕妇组(P<0.01)。结论胎儿游离mRNA可能成为产前筛查唐氏综合征的有效指标。

关键词：胎儿游离mRNA 唐氏综合征实时荧光定量pcr技术

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金针菇异戊烯基焦磷酸异构酶基因的克隆及表达分析

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食用菌学报 2016年第3期23卷 10-14页

作者：刘建雨刘建辉徐珍于海龙宋春艳尚晓冬上海市农业科学院食用菌研究所农业部应用真菌资源与利用重点开放实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室上海201403

pcr扩增了金针菇（Flammulina velutipes）异戊烯基焦磷酸异构酶基因（FvIDI）的DNA全长和开放阅读框序列。该基因的ORF全长753bp,DNA全长923bp,含有3个内含子和4个外显子,编码250个氨基酸,金针菇异戊烯基焦磷酸异构酶相对分子质量为284... 详细信息

pcr扩增了金针菇（Flammulina velutipes）异戊烯基焦磷酸异构酶基因（FvIDI）的DNA全长和开放阅读框序列。该基因的ORF全长753bp,DNA全长923bp,含有3个内含子和4个外显子,编码250个氨基酸,金针菇异戊烯基焦磷酸异构酶相对分子质量为28450,等电点为5.05。采用实时荧光定量pcr技术研究FvIDI基因在不同发育时期和不同温度下的表达量,结果显示,FvIDI基因在采收期菌盖中表达量最高,4℃诱导处理2~4h和37℃诱导处理2~6h的表达量明显高于常规温度21℃处理。

关键词：金针菇异戊烯基焦磷酸异构酶基因实时荧光定量pcr技术温度诱导

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重组9型腺相关病毒基因组滴度测定方法的改进和初步验证

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药物分析杂志 2020年第1期40卷 58-61页

作者：郑红梅李永红胡金盼史新昌于雷饶春明中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的:对重组9型腺相关病毒(rAAV-9)基因组滴度测定方法进行优化和初步验证,提高测定结果的精密度。方法:通过比较SDS和EDTA及不同浓度SDS的裂解效果,对病毒裂解方法进行优化;通过比较质粒和病毒分别做对照品时的测定结果,选择合适的对照... 详细信息

目的:对重组9型腺相关病毒(rAAV-9)基因组滴度测定方法进行优化和初步验证,提高测定结果的精密度。方法:通过比较SDS和EDTA及不同浓度SDS的裂解效果,对病毒裂解方法进行优化;通过比较质粒和病毒分别做对照品时的测定结果,选择合适的对照品;通过比较平行线法和传统单点法的分析结果,选择合适的统计方法。结果:SDS裂解效果显著高于EDTA,终浓度为0.1%的SDS裂解效果最佳;以病毒为对照品,采用平行线法进行统计分析的结果变异度最小(RSD为13.7%),优于质粒做对照品的检测结果(RSD为35.9%)及单点法的分析结果(RSD为23.1%)。结论:本方法优于传统的重组腺相关病毒基因组滴度测定方法,可应用于以rAAV-9为载体的基因治疗药物的质量控制。

关键词：重组9型腺相关病毒基因治疗载体实时荧光定量pcr技术基因组滴度平行线法同质对照品精密度

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Cyr61基因在女性生殖系统原发性弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达及意义

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中华妇产科杂志 2009年第5期44卷 386-388页

作者：唐琼兰李海刚蒋学风杨开选曾韵洁彭芝兰中山大学附属第二医院病理科广州510120 暨南大学附属第一医院妇产科四川大学华西第二医院病理科四川大学华西第二医院妇产科

女性生殖系统原发性非霍奇金淋巴瘤是一种比较少见的妇科恶性肿瘤，近年来其发病率有增加的趋势，且年轻患者增多。淋巴瘤的各种病理类型均可发生于女性生殖系统，但以B细胞为主，其中又以弥漫性大B细胞淋巴瘤（diffuselarge B—cell ly... 详细信息

女性生殖系统原发性非霍奇金淋巴瘤是一种比较少见的妇科恶性肿瘤，近年来其发病率有增加的趋势，且年轻患者增多。淋巴瘤的各种病理类型均可发生于女性生殖系统，但以B细胞为主，其中又以弥漫性大B细胞淋巴瘤（diffuselarge B—cell lymphoma，DLBCL）最多见。Cyt61基因属于CCN家族成员，主要参与调控细胞黏附、迁移与增殖，诱导血管生成。近年来，Cyr61基因在各种恶性肿瘤中的作用已成为国内外研究的热点之一。本研究采用实时荧光定量pcr技术和免疫组检测对36例女性生殖系统原发性DLBCL组织中Cyr61mRNA和蛋白的表达，并探讨其意义。

关键词：弥漫性大B细胞淋巴瘤原发性非霍奇金淋巴瘤女性生殖系统 Cyr61 基因实时荧光定量pcr技术 lymphoma 妇科恶性肿瘤

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微滴式数字pcr用于HCV RNA定量检测的评价

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中华检验医学杂志 2016年第3期39卷 225-227页

作者：魏飞力黄彦翔殷继明李庆王洁琳陈德喜首都医科大学附属北京佑安医院北京市肝病研究所 100069

丙型肝炎病毒（hepatitis Cvirus，HCV）感染是引起慢性肝病的主要原因之一。HCVRNA检测对于HCV诊断、疗效监测以及治疗终点评估具有重要意义。目前，国内外广泛使用的HCVRNA定量检测试剂大多基于实时荧光定量pcr技术。由于标准品的不... 详细信息

丙型肝炎病毒（hepatitis Cvirus，HCV）感染是引起慢性肝病的主要原因之一。HCVRNA检测对于HCV诊断、疗效监测以及治疗终点评估具有重要意义。目前，国内外广泛使用的HCVRNA定量检测试剂大多基于实时荧光定量pcr技术。由于标准品的不同，不同厂家仪器检测结果之间会存在较大差异，即使同一种方法，由于环境以及操作人员不同，反应自身扩增效率也会存在一定变化，造成结果存在差异。

关键词：实时荧光定量pcr技术 HCVRNA RNA定量检测微滴丙型肝炎病毒慢性肝病疗效监测检测试剂

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实时荧光定量聚合酶链反应检测腓骨肌萎缩症1A型基因重复

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中华神经科杂志 2006年第8期39卷 562-564页

作者：笪宇威贾建平蔡彦宁首都医科大学北京宜武医院神经内科 100053 首都医科大学北京宜武医院神经生物实验室 100053

腓骨肌萎缩症（Charcot-Marie-Tooth disease,CMT）,是神经系统常见的遗传性疾病之一,根据电生理和病理学研究将其分成两大组：CMT1（脱髓鞘型）和CMT2（神经元型或称轴索型）.该病是一组遗传异质性疾病,目前已发现30个基因座位与不同... 详细信息

腓骨肌萎缩症（Charcot-Marie-Tooth disease,CMT）,是神经系统常见的遗传性疾病之一,根据电生理和病理学研究将其分成两大组：CMT1（脱髓鞘型）和CMT2（神经元型或称轴索型）.该病是一组遗传异质性疾病,目前已发现30个基因座位与不同类型的CMT相关,其中有11型已明确了致病基因,发病率最高的是常染色体显性遗传的CMT1A.我们已先后建立起短串联重复序列分析（STR）和聚合酶链反应（pcr）酶切法检测特异性融合片段来诊断CMT1A基因重复.STR结合银染的方法因有便宜、省时和所需DNA数量少等优点曾被广泛应用,但主要缺点是受杂合率的限制,如果被检测者为纯合子,则无法得出结论;再者,实验结果不稳定,银染重复性不理想.而pcr酶切法的阳性率则较低.因此,为提高基因重复检测的阳性率,并适于在临床应用,我们应用实时荧光定量pcr技术,以SYBRGreen Ⅰ荧光染料为标记物,采用标准曲线的相对定量方法检测了18例CMT1A患者的基因重复,现报道如下.

关键词：荧光定量聚合酶链反应检测实时荧光定量pcr技术腓骨肌萎缩症1A型基因重复短串联重复序列分析常染色体显性遗传 CMT1A disease

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转基因水稻Bt63的外源基因相对含量分析

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中国粮油学报 2013年第6期28卷 1-4,55页

作者：孙长坡邓婷婷伍松陵路子显国家粮食局科学研究院北京100037 中国检验检疫科学研究院食品安全研究所北京100025

为分析转基因Bt63稻米外源基因含量,利用新型、灵敏和高通量的实时荧光定量pcr技术,以RBE-4作为转基因水稻的内源参照基因,通过梯度稀释法,分别获得了Bt 63和RBE-4基因的Ct值与起始模板相关性的标准曲线,相关系数分别为0.996 6和0.995 ... 详细信息

为分析转基因Bt63稻米外源基因含量,利用新型、灵敏和高通量的实时荧光定量pcr技术,以RBE-4作为转基因水稻的内源参照基因,通过梯度稀释法,分别获得了Bt 63和RBE-4基因的Ct值与起始模板相关性的标准曲线,相关系数分别为0.996 6和0.995 4。通过转基因水稻外源基因(Bt63)和内标基因(RBE-4)起始模板数的比较,测定了外源基因在转基因水稻中的相对含量,这项研究将为建立转基因水稻抗虫能力评价体系和转基因稻谷的流通和监管提供技术支撑。

关键词：转基因水稻外源基因(Bt63) 内标准基因(RBE-4) 实时荧光定量pcr技术

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