检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药理学通报 2010年第7期26卷 948-951页

作者：韦世秀刘成军桑国优李牡艳吴华广西医科大学医学科学实验中心广西壮族自治区江滨医院广西壮族自治区工人医院广西南宁530021

目的探讨黄芪注射液对人鼻咽癌CNE2荷瘤裸鼠的抑瘤作用及其作用机制。方法建立人鼻咽癌CNE2荷瘤裸鼠移植性肿瘤模型,随机分为3组,分别给予生理盐水、顺铂30 mg.m-2、黄芪注射液10.40 mg.(g.d)-1,经腹腔注射给药4 wk后处死CNE2荷瘤裸鼠,... 详细信息

目的探讨黄芪注射液对人鼻咽癌CNE2荷瘤裸鼠的抑瘤作用及其作用机制。方法建立人鼻咽癌CNE2荷瘤裸鼠移植性肿瘤模型,随机分为3组,分别给予生理盐水、顺铂30 mg.m-2、黄芪注射液10.40 mg.(g.d)-1,经腹腔注射给药4 wk后处死CNE2荷瘤裸鼠,测量瘤体积,取瘤体称重,计算抑瘤率和相对肿瘤增值率;采用实时荧光定量pcr法的相对定量法检测黄芪注射液对各组裸鼠移植瘤组织中p53 mRNA表达的影响。结果生理盐水组、顺铂组、黄芪注射液组的移植瘤瘤体积分别为(1.51±0.25)cm3、(0.91±0.35)cm3、(1.04±0.51)cm3,与生理盐水组相比,顺铂组和黄芪注射液组的瘤体积小(P<0.01,P<0.05);顺铂组、黄芪注射液组对人鼻咽癌CNE2荷瘤裸鼠的抑瘤率分别为72.12%、39.90%;相对肿瘤增殖率分别为50%、60%。经实时荧光定量pcr法测定,与生理盐水组相比,各组裸鼠移植瘤组织中p53 mRNA的表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论黄芪注射液对人鼻咽癌CNE2荷瘤裸鼠移植瘤具有抑制作用,但尚不能认为黄芪注射液可影响移植瘤组织中p53 mRNA的表达。

关键词：黄芪注射液抗肿瘤裸鼠 CNE2 p53基因实时荧光定量pcr法

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龙眼胚性愈伤组织ACC氧化酶基因的克隆及其在龙眼体胚发生过程中的表达分析

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中国农业科学 2010年第18期43卷 3798-3808页

作者：李惠华赖钟雄林玉玲苏明华福建农林大学园艺植物生物工程研究所福建省亚热带植物研究所

【目的】分离克隆龙眼(Dimocarpus longan Lour.)胚性愈伤组织乙烯合成关键酶ACO(1-aminocyclopropane-1-carboxylate oxidase)基因,并分析该基因在龙眼体细胞胚胎(以下简称龙眼体胚)发生过程中的表达情况。【方法】采用RT-pcr结合RACE... 详细信息

【目的】分离克隆龙眼(Dimocarpus longan Lour.)胚性愈伤组织乙烯合成关键酶ACO(1-aminocyclopropane-1-carboxylate oxidase)基因,并分析该基因在龙眼体细胞胚胎(以下简称龙眼体胚)发生过程中的表达情况。【方法】采用RT-pcr结合RACE法,获得龙眼胚性愈伤组织ACO基因的cDNA全长序列和DNA序列,运用生物信息学方法对序列进行分析,并通过实时荧光定量pcr(q-pcr)法研究该基因在龙眼体胚发生过程中的表达【。结果】克隆得到龙眼胚性愈伤组织ACO基因1315bp的cDNA全长序列(GenBank登录号为FJ534854),该cDNA的开放阅读框推定的氨基酸序列(含315个氨基酸)与其它植物ACO具有86%-47%同源性,包含了5’非编码区为86bp,3’非编码区为281bp,3’poly(A)尾长13bp;该基因的DNA序列(GenBank登录号为GU123929)长为1660bp,包含3个内含子,内含子的剪切位点均符合真核生物"GT-AG"规则;该基因在龙眼体胚各阶段均有表达,整个变化趋势呈字母"M"状。【结论】确定所获得的序列是龙眼胚性愈伤组织ACO基因的cDNA序列和DNA全长序列;该基因在不完全胚性紧实结构和心形胚的表达量为两个峰值。

关键词：龙眼胚性愈伤组织 ACC氧化酶基因克隆序列分析实时荧光定量pcr法

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厦门市急性腹泻患者诺如病毒感染状况调查

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中国公共卫生 2010年第9期26卷 1190-1192页

作者：周常义黄建炜苏国成郑惠能李莉罗兴汉王张巍苏文金集美大学生物工程学院福建厦门361021 福建省厦门市食品科技研发检测中心福建省厦门市疾病预防控制中心

近年来,由诺如病毒(Norovirus,NoV)感染接连引起数次感染性腹泻大规模流行,引起相关人士重视。为了解福建省厦门市诺如病毒流行状况,探索本地区诺如病毒流行规律和流行因素,为制订防控对策提供依据,本研究于2008年9月-2009年2月在厦门市... 详细信息

近年来,由诺如病毒(Norovirus,NoV)感染接连引起数次感染性腹泻大规模流行,引起相关人士重视。为了解福建省厦门市诺如病毒流行状况,探索本地区诺如病毒流行规律和流行因素,为制订防控对策提供依据,本研究于2008年9月-2009年2月在厦门市3所哨点医院进行监测,收集病毒性腹泻患者粪便标本,采用酶联免疫吸附法(ELISA)和实时荧光定量pcr法检测标本中诺如病毒。现将结果报告如下。[第一段]

关键词：诺如病毒(NoV) 病毒性腹泻酶联免疫吸附实验(ELISA) 实时荧光定量pcr法

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针刺对2型糖尿病大鼠肝组织胰岛素受体底物2基因表达的调节

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中华中医药杂志 2010年第5期25卷 777-780页

作者：袁爱红刘志诚魏群利蔡辉南京军区南京总医院中西医结合科南京210002 南京中医药大学第二临床医学院南京210029

目的:探讨肝组织胰岛素受体底物2(IRS2)基因表达与2型糖尿病(T2DM)发病的关系,以及针刺对T2DM大鼠肝组织IRS2mRNA表达的影响。方法:给食源性肥胖大鼠腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ)(25mg/kg)造模成T2DM大鼠,随机分为针刺组、优降糖组和... 详细信息

目的:探讨肝组织胰岛素受体底物2(IRS2)基因表达与2型糖尿病(T2DM)发病的关系,以及针刺对T2DM大鼠肝组织IRS2mRNA表达的影响。方法:给食源性肥胖大鼠腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ)(25mg/kg)造模成T2DM大鼠,随机分为针刺组、优降糖组和模型组,处理4周后,用快速血糖仪检测空腹血糖(FBS)、用放免法检测空腹胰岛素(FINS)、用实时定量荧光pcr(real-time RT pcr)法检测肝组织IRS2mRNA表达,并与正常组大鼠进行对照。结果:模型组FBS(15.79±1.87)、FINS(37.20±3.92)明显高于正常组(5.16±0.13,23.57±1.63);针刺组FBS(5.46±0.20)、FINS(20.87±1.80)较模型组明显下降;优降糖组FBS(5.26±0.13)明显下降,接近正常组水平,FINS(28.10±1.86)较模型组明显下降;模型组IRS2 mRNA相对含量是正常组的2.19倍,针刺组为正常组的4.04%,优降糖组为正常组的4.59倍。结论:肝组织IRS2mRNA异常表达可能是2型糖尿病的发病机制之一,针刺可以明显抑制T2DM大鼠肝组织IRS2mRNA的异常表达,改善胰岛素抵抗。

关键词： 2型糖尿病胰岛素受体底物2基因实时荧光定量pcr法针刺实验研究

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一起青年学员急性传染性肺炎暴发的病因学探究

一起青年学员急性传染性肺炎暴发的病因学探究

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作者：宋海燕安徽医科大学

学位级别：硕士

背景自2003年我国部分地区相继先后出现严重急性呼吸综合征(Severe Acute Respiratory Syndrome, SARS)和禽流感(influent virus A- H5N1,H5N1)的流行以来[1],国内外不断有新的不明原因的发热或传染性肺炎局部暴发的报告,其中以肺炎支原... 详细信息

背景自2003年我国部分地区相继先后出现严重急性呼吸综合征(Severe Acute Respiratory Syndrome, SARS)和禽流感(influent virus A- H5N1,H5N1)的流行以来[1],国内外不断有新的不明原因的发热或传染性肺炎局部暴发的报告,其中以肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)感染多见[2,3-5]。研究统计表明肺炎支原体感染占社区获得性肺炎(Community-acquired pneumonia,CAP)的50%。各型流感病毒及军团菌(Legionella pneumophila, L. pneumophila)等也是社区获得性肺炎的常见病原体之一[6,7]。冬春季为呼吸道疾病发病的高峰期,并且在一些拥挤的环境中如疗养院、监狱、巡航的舰船以及新兵营等更易暴发感染[7]。肺炎支原体感染不只是表现为呼吸道感染,也可表现为全身多器官损伤综合征,国内外文献频繁报道肺炎支原体感染引起皮肤、神经系统、泌尿系统、血液系统及心血管系统等重要脏器的严重并发症[8-15]。社区获得性肺炎的暴发流行不仅与环境因素有关,更重要的是缺乏有效的早期诊断手段。而在疫情的早期要鉴别病毒抑或支原体感染亦较困难。针对近来我省某些院校多次出现不明原因疫情爆发的现状,本实验中选取其中几种常见和新型病原体建立早期、特异且快速的实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time polymerase chain reaction,实时荧光定量pcr)法,并联合血清学检测法和高通量扩增测序法来明确疫情的病因,同时用于此后疫情的监测。目的建立能特异、快速且有效地检测5种病原体感染的实时荧光定量pcr方法,并从血清学和基因水平探究一起青年学员急性传染性肺炎暴发的病因。研究对象与方法2007年12月-2008年1月期间某学院爆发了一起不明原因发热疫情,其中71例在我科住院治疗,我们在承接疫情诊疗时及时收集到71例患者的急性期和恢复期血清各一份;采用酶联免疫吸附测定(Enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)法检测血清中的抗常见呼吸道病原体抗体;用已知的5种病原体标准株通过克隆后得到标准曲线,即建成可以用于临床标本的相应实时荧光定量pcr法。提取血清样本中的DNA/RNA,采用实时荧光定量pcr法检测病原体核酸;并用普通聚合酶链反应(polymerase chain reaction, pcr)法随机扩增病原体核酸后采用非选择性高通量扩增测序法直接查找病原体核酸,将扩增产物通过Solexa分析系统直接测序分析。结果在71例患者的急性期和恢复期血清中检测到抗肺炎支原体IgM和/或IgG阳性能诊断肺炎支原体感染者16例(22.5%);实时荧光定量pcr检测甲、乙型流感病毒、嗜肺军团菌和支原体核酸均阴性;在非选择性扩增出的582750条带中,未见特征病毒序列出现;与限定物种数据库比对,不存在人流感病毒A型/B型、嗜肺军团菌、肺炎支原体和鼻病毒等呼吸道相关病原体的基因片段。结论本实验得出以下结论:1)血清学检测结果发现肺炎支原体的现症感染者为16例,患病率为22.5%。2)此次分子生物学检测失败可能与以下因素有关:所用检测技术尚不成熟在临床实践中应用有限及收集不当标本。3)呼吸道传染病应在早期及时收集呼吸道分泌物标本。

关键词：传染性肺炎实时荧光定量pcr法暴发高通量扩增测序

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蝙蝠乙脑病毒的检测方法研究和携带状况调查

蝙蝠乙脑病毒的检测方法研究和携带状况调查

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作者：陈志永南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景和目的：　　乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus，JEV，简称乙脑病毒)是流行性乙型脑炎(简称乙脑)的病原体，属于黄病毒属。乙脑是经蚊虫媒介叮咬传播而引起的一种中枢神经系统感染的急性传染病，是对人畜危害较大的... 详细信息

研究背景和目的：　　乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus，JEV，简称乙脑病毒)是流行性乙型脑炎(简称乙脑)的病原体，属于黄病毒属。乙脑是经蚊虫媒介叮咬传播而引起的一种中枢神经系统感染的急性传染病，是对人畜危害较大的一种自然疫源性疾病，并可造成严重的神经系统后遗症。“蚊-动物-蚊”是乙型脑炎病毒在自然循环的基本环节。乙脑在世界许多国家均有流行的报道，我国是高发区，全国除东北北部、青海、新疆、西藏外均有乙脑流行，局部地区有爆发或流行。　　目前乙脑病毒的检测主要有病毒分离法、血清学方法和分子生物学检测方法等。病毒分离法是金标准方法，但敏感性较差，且操作步骤繁琐复杂，耗时较长。血清学方法操作相对简便、快速，但血清学方法的不足是不能获得病原体的详细生物学信息。分子生物学检测方法因为其敏感、特异并能得到病原体的基因做进一步分析，因此得到广泛应用。pcr方法有多种，各有利弊，因此须根据实际情况选择。2000年日本学者Notomi等发明了一种新颖的恒温核酸扩增方法，即环介导等温扩增反应(Loop-mediated isothermal amplification，LAMP)，其特点是针对靶基因的6个区域设计4种特异引物，利用链置换DNA聚合酶(Bst DNA polymerase)在等温条件保温数十分钟，即可完成核酸扩增反应。该方法步骤简单，扩增RNA只要在反应体系中加入逆转录酶，就能完全像DNA基因扩增那样，一步实现RNA扩增;灵敏度高，扩增模板可达几个拷贝;快速、高效扩增，整个扩增反应在不到1h即可完成;高特异性，4条引物对靶序列的6个特异序列区的识别，可根据是否扩增来判断目标基因的存在与否：结果鉴定简便，可以采用肉眼观察反应液的颜色变化来迅速判定，也可以通过琼脂糖凝胶电泳，紫外灯下观察有无特异性梯状条带来判别结果。目前很多实验室已经建立LAMP方法检测病原体，有两个实验室也报道了建立逆转录LAMP(RT-LAMP)方法检测乙脑病毒，表明敏感性和特异性均能达到常规RT-pcr水平，但未见与逆转录实时荧光定量pcr(Real-time RT-pcr)比较的报道，而Real-time pcr是目前公认的敏感性最高的pcr方法。　　蝙蝠是哺乳类中分布最广、数量最多的动物之一，属翼手目，分大蝙蝠亚目和小蝙蝠亚目，全世界约有1107种。除南北极外，蝙蝠在世界各地都有分布，包括在高纬度地区、孤立的岛屿和荒凉的沙漠等，然而大部分种类生活在热带和亚热带地区。迄今为止已在蝙蝠体内分离出80多种病毒，其中一些是人兽共患病病毒，人类一些新病毒传染病的爆发也被证实与蝙蝠有关，如1994年澳大利亚爆发的亨德拉病毒(Hendra virus)感染、1998年马来西亚爆发的尼巴病毒(Nipah virus)感染等。国内外学者也有从蝙蝠体内分离出乙型脑炎病毒的报道，一些种类蝙蝠因栖息地点或觅食等生活习性，如捕食蚊、蝇等，与人类接触密切，因而这些蝙蝠可能在乙脑病毒的保存和扩散中起重要作用。过去两年中，我们已经在我国南方一些省份发现一些种类的蝙蝠可携带乙脑病毒，但研究的内容和范围仍很局限，仍然需要更多的研究和科学证据。　　为深入研究蝙蝠在传播乙脑病毒中的作用，在本研究中，我们建立了乙脑病毒RT-LAMP检测方法，并与RT-pcr及Real-time RT-pcr检测方法进行了比较，以期为蝙蝠乙脑病毒的快速检测提供一种更为简便的方法。同时，我们继续从海南、广东和湖南省部分地区收集蝙蝠标本，调查蝙蝠携带乙脑病毒的状况。　　研究方法　　 1.乙脑病毒RT-LA肝检测方法的建立　　 1.1 LAMP引物设计　　从GeneBank中获得乙脑病毒(strain JaOArS982)E基因区序列，利用在线Primer Explorer version 3.0软件，根据LAMP引物设计的原则，设计RT-LAMP检测方法所用的6条引物，包括内引物(FIP、BIP)，外引物(F3、B3)和环引物(LoopF、Loop B)各1对。　　 1.2乙脑病毒RT-LAMP检测方法反应体系及反应条件　　根据反应体系优化策略，对Bst DNA聚合酶(8U/μL)、SuperScdptⅢ逆转录酶(200U/μL)、dNTP mix(10mM)、Betaine(5M)、MgCl2(50mM)、6条引物等成分进行优化和调整。　　依据Tm值，将温度按60℃、61℃、62℃、63℃、64℃、65℃依次递增，从多次重复试验中确定最佳退火温度。　　 1.3乙脑病毒RT-LAMP检测方法特异性测试　　以登革2型病毒、诺如病毒、EV71病毒、星状病毒、犬五联减毒活疫苗的核酸为阴性对照样品，同时设立提取的乙型脑炎病毒核酸为阳性对照，DEPC-Wat

关键词：环介导等温核酸扩增乙脑病毒蝙蝠实时荧光定量pcr法携带状况

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流式细胞术与定量pcr法检测HLA-B27的比对

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中国实验诊断学 2009年第6期13卷 745-746页

作者：胡晓舟苑腾王小林张捷北京大学第三医院检验科北京100083

目的评价实时荧光定量pcr法和流式细胞术两种方法检测人类白细胞抗原HLA-B27对强直性脊柱炎的临床诊断价值。方法将疑似强直性脊柱炎患者199例全血分别采用实时荧光定量pcr和流式细胞仪法检测HLA-B27,以流式细胞术HLA-B27阳性作为判断标... 详细信息

目的评价实时荧光定量pcr法和流式细胞术两种方法检测人类白细胞抗原HLA-B27对强直性脊柱炎的临床诊断价值。方法将疑似强直性脊柱炎患者199例全血分别采用实时荧光定量pcr和流式细胞仪法检测HLA-B27,以流式细胞术HLA-B27阳性作为判断标准,确定实时荧光定量pcr法检测HLA-B27的敏感度、特异度、阳性预测值及阴性预测值。将流式细胞术HLA-B27阳性的样本44例,按照实时荧光定量pcr检测结果将其分为疑似组、阴性组及阳性组,确定有无表达抗原表达强度的差异。结果91.5%样本分型结果相同,差异不具有统计学意义(P<0.05)。实时荧光定量pcr检测HLA-B27的敏感度为95.1%,特异度达到96.8%,阳性预测值为88.6%,阴性预测值为98.7%。实时荧光定量pcr检测疑似组、阴性组及阳性组,无显著表达抗原表达强度的差异。结论实时荧光定量pcr与流式细胞术检测HLA-B27具有相似敏感度和特异度,是一种较为快速、简单、有效的检测方法。

关键词： HLA-B27 强直性脊柱炎流式细胞术实时荧光定量pcr法

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青岛地区婴儿肝炎综合征患儿CMV和EBV感染的检测与分析

青岛地区婴儿肝炎综合征患儿CMV和EBV感染的检测与分析

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作者：刘薇青岛大学

学位级别：硕士

目的探讨青岛地区婴儿肝炎综合征患儿人巨细胞病毒（Humancytomegalovirus,CMV）和EB病毒（Epstein-Barr virus,EBV）感染情况。方法采用实时荧光定量pcr技术检测80例婴肝患儿外周血EBV-DNA的拷贝数,同时检测尿标本中HCMV-DNA的拷贝数,... 详细信息

目的探讨青岛地区婴儿肝炎综合征患儿人巨细胞病毒（Humancytomegalovirus,CMV）和EB病毒（Epstein-Barr virus,EBV）感染情况。方法采用实时荧光定量pcr技术检测80例婴肝患儿外周血EBV-DNA的拷贝数,同时检测尿标本中HCMV-DNA的拷贝数,并对其中48例CMV肝炎患儿在出院半年和一年后进行尿标本HCMV-DNA含量和肝功的动态监测。采用pcr-Southern方法检测患儿咽分泌物EBV DNA;酶联免疫吸附法（ELISA）检测80例婴肝患儿血清HCMV-IgM和EBV VCA-IgM。结果①80例患儿尿标本HCMV-DNA阳性率为63.8%（51/80）,40例正常对照婴儿尿标本中HCMV-DNA阳性率为10%（4/40）,统计学分析表明:婴肝患儿组HCMV-DNA阳性率明显高于对照组,差异有显著性（x2=31.032,P＜0.01）。80例患儿血清HCMV-IgM阳性率为46.25%（37/80）,40例正常对照儿童HCMV-IgM阳性率为2.5%（1/40）,统计学分析表明婴肝患儿组血HCMV-IgM阳性率明显高于对照组,差异有显著性（x2=23.588,P＜0.01）。②80例患儿血标本EBV DNA阳性率为20%（16/80）,40例正常对照儿童有1例外周血EBV DNA阳性,阳性率为2.5%,统计学分析表明:婴肝患儿组外周血EBV DNA阳性率明显高于对照组,差异有显著性（x2=6.716,P＜0.05）。80例患儿咽分泌物标本EBV DNA阳性率为31.25%（25/80）,40例正常对照儿童有1例咽分泌物EBV DNA阳性,阳性率为2.5%（1/40）,患儿组咽分泌物EBV DNA阳性率也明显高于对照组,差异有显著性（x2=12.987,P＜0.01）。80例患儿血EBV VCA-IgM阳性率为11.25%（9/80）,40例正常对照儿童EBV VCA-IgM检测结果均为阴性,统计学分析表明差异无显著性（校正x2=3.378,P=0.066）。③80例患儿乙肝5项检测仅有2例HBsAg阳性,感染率为1.25%,RPR阳性1例,HSV-IgM、抗-HAV抗体和抗-HCV抗体检测均为阴性。④CMV和EBV合并感染6例,这6例患儿ALT和AST平均值比单独CMV或EBV感染患儿ALT和AST平均值高4～5倍。⑤治疗后出院时80例婴肝患儿中治愈55例,病毒拷贝数仍阳性的有21例,死亡4例。结论HCMV感染是引起婴肝的主要原因;部分患儿肝功恢复正常后,HCMV不能完全转阴,并有复发的可能性,所以出院后要进行动态监测。EBV感染是部分婴儿肝炎综合征的致病因子,临床对年龄较小伴肝功能损害的患儿,在排除巨细胞病毒、乙肝病毒感染后,应考虑EBV感染的可能,CMV和EBV合并感染患儿肝功损害更严重;HBV感染导致的婴肝患儿比例明显下降。

关键词：婴儿肝炎综合征人巨细胞病毒 EB病毒 pcr-Southern杂交实时荧光定量pcr法抗体

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实时荧光pcr法检测正常人脑膜炎奈瑟菌

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预防医学情报杂志 2009年第6期25卷 475-479页

作者：张晓春黄蓉娜朱昆蓉龙海英成都市疾病预防控制中心四川成都610049 成都市温江区疾病预防控制中心

目的建立一种简易快速的实时荧光pcr方法(Q-pcr)并用于检测正常人群中脑膜炎奈瑟菌。方法采集成都市正常人群的咽拭子1 008份,分别采用培养分离法和Q-pcr法检测Nm。结果Q-pcr法方法的灵敏度、特异性分别为100%和100%,阴性预测值(NPV)为1... 详细信息

目的建立一种简易快速的实时荧光pcr方法(Q-pcr)并用于检测正常人群中脑膜炎奈瑟菌。方法采集成都市正常人群的咽拭子1 008份,分别采用培养分离法和Q-pcr法检测Nm。结果Q-pcr法方法的灵敏度、特异性分别为100%和100%,阴性预测值(NPV)为100.00%,阳性预测值13.09%,检出限为250 cfu/ml体系,Q-pcr方法检出时间为3 h,培养法阳性结果需时4 d。Q-pcr技术检测1 008份正常人群的咽拭子中Nm DNA的阳性率为8.33%,培养法为1.09%。结论Q-pcr技术的灵敏度高于培养法,Q-pcr法具有灵敏、特异、经济、快速的特点,可用于疾病的快速诊断,特别适合正常人群的带菌率调查。

关键词：实时荧光定量pcr法脑膜炎奈瑟菌 DNA 正常人群携带率

来源：评论

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实时荧光pcr法检测脑膜炎奈瑟菌核酸的研究

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中国卫生检验杂志 2009年第5期19卷 1007-1009页

作者：张晓春朱昆蓉黄蓉娜龙海英成都市疾病预防控制中心成都610049 成都市温江区疾病预防控制中心成都610000

目的:建立一种简易快速的实时荧光pcr方法(Q-pcr)检测脑膜炎奈瑟菌的核酸(Nm DNA)。方法:在NmDNA的ctrA基因上,设计特异性的脑膜炎奈瑟菌核酸引物,采用SyBR Green I染料嵌合实时荧光pcr法检测健康人群的咽拭子中脑膜炎奈瑟菌核酸(Nm DNA... 详细信息

目的:建立一种简易快速的实时荧光pcr方法(Q-pcr)检测脑膜炎奈瑟菌的核酸(Nm DNA)。方法:在NmDNA的ctrA基因上,设计特异性的脑膜炎奈瑟菌核酸引物,采用SyBR Green I染料嵌合实时荧光pcr法检测健康人群的咽拭子中脑膜炎奈瑟菌核酸(Nm DNA)。结果:实时荧光pcr方法的灵敏度、特异性分别为:100%,100%,阳性预示值(PPV)为13.09%,阴性预示值(NPV)为100.00%,检出限为0.5 CFU/50μl体系,荧光pcr方法检出的时间为3 h,而培养法要4 d。结论:实时荧光定量pcr法具有灵敏、特异、快速的特点,需要有荧光pcr检测系统,可用于疾病的快速诊断,由于方法经济快速,特别适合正常人群的带菌率调查。

关键词：实时荧光定量pcr法脑膜炎奈瑟菌 DNA

来源：评论

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