检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：汪婉莹郑州大学

学位级别：硕士

目的探究鱼腥草挥发油和新鱼腥草素钠的体内外抗肺癌活性及其诱导A549细胞凋亡的相关机制。同时改善鱼腥草挥发油易挥发,生物利用度低的不足之处,制备包封率符合要求,长效缓释的PEG修饰鱼腥草挥发油脂质体。方法本研究首先采用MTT法检... 详细信息

目的探究鱼腥草挥发油和新鱼腥草素钠的体内外抗肺癌活性及其诱导A549细胞凋亡的相关机制。同时改善鱼腥草挥发油易挥发,生物利用度低的不足之处,制备包封率符合要求,长效缓释的PEG修饰鱼腥草挥发油脂质体。方法本研究首先采用MTT法检测鱼腥草挥发油和新鱼腥草素钠对A549细胞的增殖抑制率。采用FITC-AnnerxinV/PI双染法检测新鱼腥草素钠对A549细胞凋亡的影响,PI单染检测新鱼腥草素钠对A549细胞周期分布的影响。急性毒性试验初步考察鱼腥草挥发油和新鱼腥草素钠的毒性,确定给药浓度,进行裸鼠皮下荷瘤实验。分别采用鱼腥草挥发油和新鱼腥草素钠干预A549细胞,提取收集总RNA和蛋白质。以GAPDH为内参,采用实时荧光定量pcr法检测相关基因的表达量和蛋白质印迹法检测相关蛋白质的表达量。薄膜分散法制备PEG修饰鱼腥草挥发油脂质体,以蛋黄卵磷脂/挥发油、蛋黄卵磷脂/胆固醇和PEG2000-DSPE质量分数为主要因素,包封率为评价指标,Box-Behnken响应面法优化制备工艺。考察制剂的外观形貌、粒径、电位、PDI大小,并进行稳定性因素试验。建立气相色谱法检测大鼠血浆中鱼腥草挥发油的含量,并进行方法学考察。大鼠眼眶取血,离心收集含药血浆,气相色谱检测药物浓度。绘制药时曲线,用DAS 3.0软件分析相关药动学参数。结果MTT检测结果显示,鱼腥草挥发油和新鱼腥草素钠均可抑制A549细胞的增殖,且具有明显的浓度和时间依赖性。新鱼腥草素钠抑制A549细胞的增殖主要以早期凋亡为主,随着药物浓度的增加,晚期凋亡率稍有增加,总凋亡率呈现上升趋势,各组之间具有统计学意义(P<0.05)。新鱼腥草素钠给药之后,与阴性对照组相比,G0/G1期的细胞数目增加,S期的细胞数目减少,G2/M期的细胞数目基本保持不变(P<0.05)。急性毒性试验得出鱼腥草挥发油和新鱼腥草素钠的LD50值分别为1904 mg/kg和197 mg/kg。荷瘤小鼠体内实验鱼腥草挥发油和新鱼腥草素钠的给药剂量分别为250 mg/kg、200 mg/kg、150 mg/kg;40 mg/kg、30 mg/kg、20 mg/kg。结果显示顺铂的抑瘤率为61.97%,鱼腥草挥发油的抑瘤率最大达到65.41%,新鱼腥草素钠的抑瘤率最大达到62.62%,抑瘤率均呈现浓度依赖性。与生理盐水组相比较,鱼腥草挥发油组和新鱼腥草素钠组均对荷瘤小鼠的抑瘤率具有显著性差异(P<0.05)。病理切片结果显示,鱼腥草挥发油和新鱼腥草素钠对A549小鼠移植瘤的生长有一定的抑制作用,且存在一定的剂量依赖性,对其他脏器的毒副作用不明显。本文使用鱼腥草挥发油干预后,以GAPDH为内参基因,对RAF/MEK/ERK-Bcl-2 信号通路的 6 种基因:RAF-1、MEK-1、MEK-2、ERK-1、ERK-2 和 Bcl-2表达水平的变化进行检测。结果显示,鱼腥草挥发油对RAF-1、MEK-1、ERK-1和Bcl-2四种基因的表达量有影响,对MEK-2和ERK-2无太大影响。随着给药浓度的增加,四种基因的表达量均呈不同程度的下降趋势,并与阴性对照组有显著性差异(P<0.05)。蛋白质印迹法检测结果显示,鱼腥草挥发油对RAF-1、MEK1/2和ERK 1/2的蛋白表达无明显影响,但磷酸化蛋白表达水平显著降低,Bcl-2的相对蛋白表达量也呈下降趋势。随着鱼腥草挥发油浓度的增加,P-RAF1、P-MEK1/2、P-ERK 1/2和Bcl-2的表达量逐渐降低,并与阴性对照组有显著性差异(P<0.05)。使用新鱼腥草素钠干预,以GAPDH为内参基因,对相关通路的TNF-α和NF-κB表达水平的变化进行检测。结果显示,新鱼腥草素钠对TNF-α和NF-κB基因的表达量有影响。随着给药浓度的增加,两种基因的表达量均呈不同程度的下降趋势,并与阴性对照组有显著性差异(P<0.05)。蛋白质印迹法检测结果显示,IKKα的相对蛋白表达量未受到明显影响,但其磷酸化蛋白表达水平显著降低,NF-κB p65蛋白及其磷酸化水平也呈下降趋势。随着新鱼腥草素钠浓度的增加,P-IKKα、P-NF-κB p65和NF-κB p65的表达量逐渐降低,并与阴性对照组有显著性差异(P<0.05)。制备PEG修饰鱼腥草挥发油脂质体的最优处方:蛋黄卵磷脂/挥发油为4.6:1、蛋黄卵磷脂/胆固醇为3.6:1、PEG2000-DSPE的质量分数为2%。制备所得脂质体包封率和载药量分别为80.42±0.12%和8.35±0.01%。平均粒径为114.43±1.39 nm,PDI为0.27±0.01,Zeta电位为-25.8±0.25 mV。释放度实验显示该脂质体具有一定缓释作用。气相色谱法检测大鼠血浆中鱼腥草挥发油的含量,该方法精密度好、误差小,结果稳定可靠。标准曲线为Y

关键词：鱼腥草挥发油新鱼腥草素钠薄膜分散法实时荧光定量pcr法蛋白质印迹法

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实时荧光定量pcr法在检测血浆结核杆菌DNA的应用

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河北医学 2012年第5期18卷 698-700页

作者：谢汉彬郑崇辉黄国盛广东省汕头市第三人民医院检验科广东汕头515073

目的:探讨实时荧光定量pcr法在检测血浆结核杆菌DNA的应用及价值。方法:以我院确诊为结核病且未经治疗的患者392例作为实验组,同时选取健康体检人群100例作为对照组。分别对两组患者取静脉血,并对其血浆中结核分枝杆菌DNA采用实时荧光定... 详细信息

目的:探讨实时荧光定量pcr法在检测血浆结核杆菌DNA的应用及价值。方法:以我院确诊为结核病且未经治疗的患者392例作为实验组,同时选取健康体检人群100例作为对照组。分别对两组患者取静脉血,并对其血浆中结核分枝杆菌DNA采用实时荧光定量pcr法进行检测,同时对实验组患者进行痰涂片检查。结果:对照组患者实时荧光定量pcr法检测全为阴性;实验组患者采用痰涂片检查,结果显示有80例为阴性,其实时荧光定量pcr法检测结果显示,痰涂片阳性的患者全为阳性,其阴性患者中有24例为阳性,在对阳性患者抗痨治疗后有12例患者转为阴性。实验组患者MTB DNA为1.76×109copies/mL。结论:本实验表明结核患者血浆中存在MTB DNA,采用实时荧光定量pcr法可有效的对痰涂片阴性以及无痰患者进行诊断,有较好的利益价值。

关键词：实时荧光定量pcr法结核分支杆菌血浆

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实时荧光定量pcr法在检测3种泌尿生殖道病原微生物中的应用

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中国医药指南 2012年第31期10卷 450-451页

作者：尚慧锋武艳飞山西医学科学院山西太原030032 山西大医院检验科山西太原030032

目的探讨实时荧光定量pcr法在检测3种泌尿生殖道病原微生物(沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(UU)、淋病奈瑟菌(NG))中的应用。方法 512例门诊和住院疑似泌尿生殖道感染女性患者阴道宫颈分泌物标本,采用实时荧光定量pcr法检测CT、NG、UU,同... 详细信息

目的探讨实时荧光定量pcr法在检测3种泌尿生殖道病原微生物(沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(UU)、淋病奈瑟菌(NG))中的应用。方法 512例门诊和住院疑似泌尿生殖道感染女性患者阴道宫颈分泌物标本,采用实时荧光定量pcr法检测CT、NG、UU,同时用胶体金法检测CT,用培养法进行NG、UU检测。结果 512例疑似泌尿生殖道感染女性患者中,实时荧光定量pcr法和胶体金法检测CT的阳性率分别为10.1%和7.4%。实时荧光定量pcr法和培养法检测UU的阳性率分别为33.4%和23.9%。实时荧光定量pcr法和培养法检测NG的阳性率分别为8.7%和6.1%。阳性检出率为UU>CT>NG,阳性率比较,差异均有统计学意义,实时荧光定量pcr法对CT、NG、UU的检出率高于胶体金法和培养法。结论实时荧光定量pcr法在敏感度、特异度及报告周期上均优于胶体金法和培养法,对STD诊断提供了重要依据,但无法提供药敏报告,可与常规检测方法互相补充。

关键词：实时荧光定量pcr法沙眼衣原体解脲支原体淋病奈瑟菌性传播疾病

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优质护理在老年性脑梗死护理中的应用价值

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医学信息 2020年第S2期33卷 232-233页

作者：陈平天津市环湖医院天津 300350

目的研究分析优质护理在老年性脑梗死护理中的应用效果和价值.方法随机选取2018年12月-2019年12月内本院收治的老年性脑梗死患者80例,随机采用入院时间的先后分为两组,40例作为对照组采用常规护理干预,剩余40例作为实验组采用优质护... 详细信息

目的研究分析优质护理在老年性脑梗死护理中的应用效果和价值.方法随机选取2018年12月-2019年12月内本院收治的老年性脑梗死患者80例,随机采用入院时间的先后分为两组,40例作为对照组采用常规护理干预,剩余40例作为实验组采用优质护理干预,行规范护理干预之后,对比两组患者的神经功能评分及运动功能、日常生活能力.结果不同护理工作实施时,患者神经功能、运动功能、日常生活能力均明显改善,对比对照组患者差异明显,具有统计学意义(P＜0.05).结论针对老年性脑梗死护理患者采用优质护理能够显著改善患者的各项功能,改善了脑梗死的预后,对于功能恢复有着较好的效果,值得推广使用.

关键词：流感病毒检测细胞培养法实时荧光定量pcr法

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MicroRNA-145在乳腺癌中的表达及其对乳腺癌侵袭转移的影响研究

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中国医药指南 2020年第12期18卷 125-126页

作者：张志强郑爽马怡王梓瑛王晓舟赫丽杰辽宁省人民医院(中国医科大学人民医院)肿瘤一科辽宁沈阳110016

目的探讨miR-145在乳腺癌中的表达及其对乳腺癌侵袭转移的影响。方法选择2016年7月至2018年7月辽宁省人民医院确诊的乳腺癌患者48例作为研究资料,取术中癌组织及相应癌旁组织作为标本,采用实时荧光定量pcr法检测miR-145的表达,如将pSIF-... 详细信息

目的探讨miR-145在乳腺癌中的表达及其对乳腺癌侵袭转移的影响。方法选择2016年7月至2018年7月辽宁省人民医院确诊的乳腺癌患者48例作为研究资料,取术中癌组织及相应癌旁组织作为标本,采用实时荧光定量pcr法检测miR-145的表达,如将pSIF-miR-145、pSIF空白载体转染人乳腺癌细胞系SK-BR-3,检测对细胞迁移及侵袭能力的影响及对ANGPT2蛋白表达的影响。结果经实时FQ-pcr检测乳腺癌组织和癌旁组织中miR-145的相对表达量分别为(49.85±21.02)、(185.04±42.64);实时FQ-pcr检测对数生长期乳癌细胞系的miR-145表达,MCF-7为(0.50±0.04)、MDA-MB-231(0.06±0.01)、MDA-MB-468(0.35±0.03)、SK-B-3(0.04±0.01),均偏低,呈现为低表达。转染pSIF-miR-145质粒48 h后,SK-BR-3细胞miR-145的表达量与阴性对照相比增高了445.42倍;划痕实验24 h后转染pSIF-miR-145质粒细胞化和愈合速度较低,侵袭实验显示,转染pSIF-miR-145质粒后穿过基质胶的平均细胞数为(132±45)个,对照组穿过基质胶的平均细胞数为(622±76)个。经双荧光报告基因分析,HEK293T细胞转染pSIF-miR-145、pRL-TK-ANGPT2野生质粒后,荧光素酶的活性显著降低;而共转染了pSIF-miR-145、pRL-TK-ANGPT2-mut质粒后,细胞中荧光素酶活性无变化,即miR-145直接靶向ANGPT2。SK-BR-3中转染pSIF-miR-145或空载质粒,检测ANGPT2的表达,ANGPT2蛋白较阴性对照组显著下调,即认为miR-145对ANGPT2蛋白表达有抑制作用。结论miR-145在乳腺癌中的表达为低表达,可通过靶向调控ANGPT2蛋白从而抑制乳腺癌的侵袭转移。

关键词： MiR-145 乳腺癌肿瘤转移实时荧光定量pcr法靶向作用

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PAK6在膀胱癌中表达及其临床意义

PAK6在膀胱癌中表达及其临床意义

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作者：乾孝园中国医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨P21活化激酶6（p21-activated kinase 6,PAK6）在膀胱癌中的表达情况及其临床意义。方法:膀胱癌患者89例为膀胱癌组,取其膀胱癌组织;患者（部切/全切）30例为对照组,取其正常膀胱上皮组织。采用免疫组织化学法检测2组组织中PAK... 详细信息

目的:探讨P21活化激酶6（p21-activated kinase 6,PAK6）在膀胱癌中的表达情况及其临床意义。方法:膀胱癌患者89例为膀胱癌组,取其膀胱癌组织;患者（部切/全切）30例为对照组,取其正常膀胱上皮组织。采用免疫组织化学法检测2组组织中PAK6蛋白阳性表达率。Biu-87、T24膀胱癌细胞、SV-HUC-1正常膀胱细胞分为Biu-87组、T24组和SV-HUC-1组,采用实时荧光定量pcr法检测3组细胞中PAK6 mRNA的表达情况。采用Western blot法检测3组细胞中PAK6蛋白的表达水平。结果:膀胱癌组PAK6阳性表达率（46.07%）明显低于对照组（96.67%）(P<0.05),膀胱癌组复发者PAK6阳性表达率（29.41%）低于原发者（56.36%）(χ2=6.143,P=0.013),膀胱癌组PAK6阳性表达率在肿瘤数量、肿瘤大小、病理分级、是否转移和临床分期上差异无统计学意义（P>0.05）;Biu-87组和T24组细胞PAK6 mRNA和蛋白表达水平（0.0189±0.0037、0.0530±0.0129,0.0993±0.0121、0.1431±0.0081）明显低于SV-HUC-1组（1.0403±0.3755、0.3381±0.0511）(P<0.05)。结论:PAK6在膀胱癌组织及细胞中呈低表达,且与膀胱癌的复发密切相关;可能在膀胱癌的发生、发展中起抑制作用,可作为新的抑癌指标指导临床。

关键词：膀胱癌 P21活化激酶6 免疫组织化学法实时荧光定量pcr法 Western blot法复发

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人体端粒长度分布特点及变化

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中南大学学报（医学版） 2018年第9期43卷 945-949页

作者：叶兴贺子强邓鹏飞魏毓周建明黄河浪南昌大学江西省预防医学重点实验室南昌330006

目的:通过分析比较不同年龄人群的端粒相对长度,探索端粒长度改变与年龄的关系,为老年医学问题的深入研究提供数据和参考。方法:采用随机抽样的方法,从数家医院健康体检人群中抽取20岁以上者作为研究对象,收集其外周血白细胞作为检测标... 详细信息

目的:通过分析比较不同年龄人群的端粒相对长度,探索端粒长度改变与年龄的关系,为老年医学问题的深入研究提供数据和参考。方法:采用随机抽样的方法,从数家医院健康体检人群中抽取20岁以上者作为研究对象,收集其外周血白细胞作为检测标本。采用实时荧光定量pcr法进行端粒相对长度检测,分析年龄与端粒长度改变的关系。结果:共取样本1 022个,不同年龄组的相对端粒长度的差异有统计学意义(F=21.492,P<0.001),端粒长度与年龄呈负相关(r=–0.325,P<0.001),两者之间的回归方程为:y=–0.008x+1.772(P<0.001)。结论:健康人外周血白细胞端粒长度在各年龄段人群间有差异,且端粒长度随年龄增加逐渐缩短。

关键词：端粒年龄性别实时荧光定量pcr法老年医学

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原发性痛风性关节炎患者miR-23a miR-24-2和miR-27a的表达水平及调节机制

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河北医学 2019年第8期25卷 1233-1237页

作者：李宁宁戴冰冰雷蕾张昊刘畅张金涛金香花田丽滕小铭辽宁省大连市中心医院风湿免疫科

目的:分析原发性痛风性关节炎(PGA)患者microRNA-23a(miR-23a)、microRNA-24-2(miR-24-2)和microRNA-27a(miR-27a)的表达水平及调节机制。方法:将本院50例PGA患者为病例组,30例健康体检人员为对照组。比较两组实验室常规指标,通过实时... 详细信息

目的:分析原发性痛风性关节炎(PGA)患者microRNA-23a(miR-23a)、microRNA-24-2(miR-24-2)和microRNA-27a(miR-27a)的表达水平及调节机制。方法:将本院50例PGA患者为病例组,30例健康体检人员为对照组。比较两组实验室常规指标,通过实时荧光定量pcr法对miR-23a、miR-24-2和miR-27a的表达水平进行检测,并采用Pearson相关性分析miR-23a、miR-24-2、miR-27a表达间的关系,将所获数据纳入统计学分析。结果:病例组血浆空腹血糖、尿酸、白细胞计数、中性粒细胞、甘油三酯、载脂蛋白B100较对照组均明显升高(均P<0.05),载脂蛋白A1较对照组均明显下降(P<0.01);而两组总胆固醇的比较,并无明显差异(P>0.05)。相比对照组,病例组miR-23a、miR-24-2和miR-27a的表达水平明显下调(P<0.01)。经Pearson相关性分析结果显示,病例组患者外周血单个核细胞中miR-23a、miR-24-2、miR-27a三者之间的表达水平存在正相关关系(P<0.01)。采用尿酸盐(100μg/mL)对健康体检人员中的外周血单个核细胞进行刺激,结果发现在炎性微环境下,刺激组外周血单个核细胞中的miR-23a、miR-24-2和miR-27a的表达水平显著低于无刺激组(P<0.01)。结论:miR-23a、miR-24-2和miR-27a可能作为炎症负性调控因子而在PGA的炎症免疫反应过程中起到重要作用,并且miR-24-2可能具有调节PGA的脂蛋白的作用。

关键词：原发性痛风性关节炎微小RNAs miR-23a^27a-24-2簇外周血单个核细胞实时荧光定量pcr法

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肺炎支原体检测试剂盒快速培养法与LAMP法用于肺炎支原体检测研究

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中国医疗器械信息 2019年第20期25卷 3-5页

作者：高静阎建侠刘博雅李正罗天侠纪颖天津市武清区人民医院检验科天津301700 天津市武清区人民医院儿科天津301700

目的:分析肺炎支原体检测试剂盒快速培养法与LAMP法用于肺炎支原体检测的价值。方法:选取本院儿科2017年1月~2018年6月收治的疑似肺炎支原体肺炎患儿100例作为研究对象,分别给予肺炎支原体检测试剂盒快速培养法与LAMP法检测肺炎支原体,... 详细信息

目的:分析肺炎支原体检测试剂盒快速培养法与LAMP法用于肺炎支原体检测的价值。方法:选取本院儿科2017年1月~2018年6月收治的疑似肺炎支原体肺炎患儿100例作为研究对象,分别给予肺炎支原体检测试剂盒快速培养法与LAMP法检测肺炎支原体,同时与实时荧光定量pcr法做比对,分析两种检测方法的实验反应时间与阳性率。结果:LAMP法检测肺炎支原体的实验反应时间短于肺炎支原体检测试剂盒快速培养法,阳性率高于快速培养法,P<0.05。结论:LAMP法用于肺炎支原体检测的实验反应时间较短、阳性率较高,有很好的应用前景。未来应加深对LAMP法检测肺炎支原体的研究,克服检测中的困难,扩大LAMP法检测肺炎支原体的应用范围。

关键词：肺炎支原体快速培养法 LAMP法实时荧光定量pcr法实验反应时间阳性率

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三种流感病毒检测方法的对比分析

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河南预防医学杂志 2019年第6期30卷 426-427页

作者：李雨纯天津北辰区疾病预防控制中心微生物检验科天津300400

目的对实时荧光定量pcr法、MDCK细胞培养法、鸡胚培养法进行对比分析,筛选出准确的检测方法,为流感的监测与防控提供及时可靠的病原学依据。方法同时采用实时荧光定量pcr法、MDCK细胞培养法、鸡胚培养方法对2016年10月～2017年3月的602... 详细信息

目的对实时荧光定量pcr法、MDCK细胞培养法、鸡胚培养法进行对比分析,筛选出准确的检测方法,为流感的监测与防控提供及时可靠的病原学依据。方法同时采用实时荧光定量pcr法、MDCK细胞培养法、鸡胚培养方法对2016年10月～2017年3月的602例流感样病例咽拭子进行检测,比较各方法的阳性率以及灵敏度和特异度。结果 602例流感样病例咽拭子中,实时荧光定量pcr法、MDCK细胞培养法、鸡胚培养法检测的阳性率分别为18.27%、13.79%、1.66%;相对于实时荧光定量pcr法,MDCK细胞培养法的灵敏度为75.45%,特异度为100.00%,鸡胚培养法的灵敏度为9.09%,特异度为100.00%;与MDCK细胞培养法相比,鸡胚培养法的灵敏度为12.05%,特异度为100.00%。结论实时荧光定量pcr法与MDCK细胞培养法和鸡胚培养法相比,其检测速度快,阳性率和灵敏度高,适用于流感病毒的快速检测;MDCK细胞培养法和鸡胚培养法是有效的病毒分离法,可用于流感毒株的制备,并且可对其抗原性、基因特性和耐药性进行深入研究。

关键词：实时荧光定量pcr法 MDCK细胞培养法鸡胚培养法流感病毒

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