检索结果-内蒙古大学图书馆

中国农业科学 2001年第1期34卷 111-114页

作者：季平何家禄农业部家蚕生物技术重点开放实验室!中国农业科学院蚕业研究所镇江212018

将 Ac MNPV的 polh基因克隆到缺失 polh基因的 Bm NPV(API4)基因组中 ,得到被 Ac MNPV多角体蛋白包埋并可表达慈菇蛋白酶抑制剂的重组病毒 Bm NPV(OAc- API4)。发现它的芽生型病毒能感染家蚕细胞和经皮下注射感染家蚕幼虫 ,但包埋型病... 详细信息

将 Ac MNPV的 polh基因克隆到缺失 polh基因的 Bm NPV(API4)基因组中 ,得到被 Ac MNPV多角体蛋白包埋并可表达慈菇蛋白酶抑制剂的重组病毒 Bm NPV(OAc- API4)。发现它的芽生型病毒能感染家蚕细胞和经皮下注射感染家蚕幼虫 ,但包埋型病毒不能经口感染家蚕幼虫。

关键词：家蚕核型多角体病毒异源多角体蛋白基因包埋型病毒经口感染 PCR检测

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家蚕核型多角体病毒BmOrf99的研究

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安徽农业科学 2015年第21期43卷 43-50页

作者：张曦胡小龙薛仁宇曹广力贡成良苏州大学基础医学与生物科学学院江苏苏州215123

[目的]探讨家蚕核型多角体病毒Bm Orf99在杆状病毒生命周期中的功能。[方法]运用Red同源重组技术构建Bm Orf99缺失型重组病毒,研究Bm Orf99对病毒复制、BV产生和病毒形态发生的影响。[结果]病毒转染细胞1.5 h可检测到Bm Orf99表达;通过... 详细信息

[目的]探讨家蚕核型多角体病毒Bm Orf99在杆状病毒生命周期中的功能。[方法]运用Red同源重组技术构建Bm Orf99缺失型重组病毒,研究Bm Orf99对病毒复制、BV产生和病毒形态发生的影响。[结果]病毒转染细胞1.5 h可检测到Bm Orf99表达;通过Red重组系统构建敲除型病毒Bm NPV-Bm Orf99KO-polh-GFP,转染结果显示,敲除Bm Orf99病毒仍能增殖复制,透射电镜观察显示,Bm Orf99敲除对病毒粒子装配和多角体形成无明显影响。病毒DNA转染后24-72 h,敲除型病毒转染细胞培养上清BV水平略高于对照病毒Bm NPV-Bm Orf99WT-polh-GFP;转染后72 h,前者细胞培养上清TCID50略高于后者;转染6-72 h,敲除型病毒转染细胞中病毒DNA水平高于对照病毒转染细胞;敲除型病毒感染72 h后,细胞中Bm Orf98a表达水平比对照组提高2.21倍。[结论]Bm Orf99为病毒早期基因,且复制非必需,缺失可促进病毒DNA复制,略增加BV水平,但对病毒形态发生无影响,Bm Orf-99有可能通过调节病毒其他基因的表达而发挥作用。

关键词：家蚕核型多角体病毒 BmOrf99 敲除 BV ODV

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家蚕核型多角体病毒结构多肽的双向电泳分析

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Virologica Sinica 1988年第1期 87-93页

作者：刘定干李载平中国科学院上海生物化学研究所中国科学院上海生物化学研究所上海

用等电聚焦-聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳的双向电泳法和银染色方法,分析了家蚕核型多角体病毒粒子和核衣壳的结构多肽。该病毒单粒包埋型病毒粒子含约96种多肽,核衣壳含约72种多肽。病毒粒子制剂和核衣壳制剂中含有较多量的分子量为31K的多... 详细信息

用等电聚焦-聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳的双向电泳法和银染色方法,分析了家蚕核型多角体病毒粒子和核衣壳的结构多肽。该病毒单粒包埋型病毒粒子含约96种多肽,核衣壳含约72种多肽。病毒粒子制剂和核衣壳制剂中含有较多量的分子量为31K的多肽,用蔗糖梯度离心、离心洗涤、碱处理甚至蛋白酶酶解和去污剂处理,都不能将其除去。向病毒制剂中加入纯化的多角体蛋白后作双向电泳,发现外加多角体蛋白改变原等电点面与上述31K多肽重合。对31K多肽的来源进行了讨论。

关键词：核衣壳蛋白制剂多肽病毒粒子病毒体家蚕核型多角体病毒双向电泳分析多角体分子量标准 BmNPV

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家蚕核型多角体病毒主要结构组分的血清学关系研究

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蚕业科学 1983年第3期 160-166页

作者：龚镇奎卢文筠武汉大学病毒系

用蔗糖密度梯度离心与琼脂糖凝胶柱层析相结合的方法,分离纯化家蚕核型多角体病毒的多角体蛋白和病毒粒子。用非离子型去污剂NP—40脱除病毒粒囊膜,制备核衣壳。经用多种方法对这三种主要结构组分进行纯度鉴定。制备相应的兔抗血清。用... 详细信息

用蔗糖密度梯度离心与琼脂糖凝胶柱层析相结合的方法,分离纯化家蚕核型多角体病毒的多角体蛋白和病毒粒子。用非离子型去污剂NP—40脱除病毒粒囊膜,制备核衣壳。经用多种方法对这三种主要结构组分进行纯度鉴定。制备相应的兔抗血清。用双向免疫扩散和免疫电泳对三者之间的血清学关系进行了比较。试验结果表明,家蚕核型多角体病毒的多角体蛋白与病毒粒子和核衣壳之间无交叉反应,核衣壳与病毒粒子囊膜之间亦无血清学关系。

关键词：核衣壳囊膜病毒粒子病毒体家蚕核型多角体病毒抗血清多角体血清学关系

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家蚕核型多角体病毒抗性关键基因BmPGRP2及其应用

家蚕核型多角体病毒抗性关键基因BmPGRP2及其应用

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作者：夏庆友蒋亮程廷才陆改金盛凯王根洪徐汉福 400715 重庆市北碚区天生路2号

本发明涉及生物基因工程领域，特别涉及到家蚕的抗性关键基因，家蚕核型多角体病毒抗性关键基因，如SEQIDNO:1所示，及含有家蚕核型多角体病毒抗性基因的重组载体，其可在调控核型多角体病毒抗性中起到关键作用；通过同源比对发现该基... 详细信息

标准号: CN102433340A

本发明涉及生物基因工程领域，特别涉及到家蚕的抗性关键基因，家蚕核型多角体病毒抗性关键基因，如SEQIDNO:1所示，及含有家蚕核型多角体病毒抗性基因的重组载体，其可在调控核型多角体病毒抗性中起到关键作用；通过同源比对发现该基因是一个新基因；通过RT-PCR和定量PCR对该基因的时期组织表达谱进行了检测，检测结果表明该基因的表达量非常低；为了研究该基因的功能，以该基因的特异序列作为干涉靶标，构建了转基因干涉载体；通过转基因显微注射，筛选得到转基因阳性个体；以该基因作为干涉靶标的转基因家蚕对BmNPV病毒的抗性显著提高，说明该基因是一个影响家蚕对病毒抗性的关键基因，因此该基因在家蚕转基因抗病育种的研究和应用中具有重要价值。

关键词：基因关键基因转基因抗性家蚕核型多角体病毒病毒抗性干涉转基因抗病育种生物基因工程基因的表达研究和应用转基因家蚕组织表达谱关键作用抗性基因特异序列重要价值重组载体定量PCR 检测靶标家蚕显微同源注射筛选病毒调控发现研究

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家蚕核型多角体病毒DNA的病毒学评价

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中国公共卫生学报 1999年第6期18卷 345-347页

作者：王苏华何家禄端礼荣季平李卫党肖庆利陆荣柱江苏镇江医学院医学检验系镇江212001 中国农业科学院镇江蚕业研究所

毒理学评价结果揭示，家蚕核型多角体病毒为无毒级；微核试验阴性，致畸试验也未获得阳性结果，同时慢性毒性试验结果表明，受试物可减缓受试动物的体重增长，并具有不同程度的肾和肝脏毒性。

关键词：家蚕核型多角体病毒微核毒性安全性评价

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家蚕核型多角体病毒IE1的多克隆抗体制备及鉴定

家蚕核型多角体病毒IE1的多克隆抗体制备及鉴定

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第十二届家（柞）蚕遗传育种暨良种繁育学术研讨会

作者：董战旗张军胡楠鲁成潘敏慧西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室西南大学农业部蚕桑功能基因组与生物技术重点实验室

家蚕核型多角体病毒(BmNPV)ie1基因是BmNPV DNA复制的必需基因,其编码的IE1蛋白能够反式转录激活杆状病毒早期基因的表达。为了进一步研究IE1蛋白在家蚕核型多角体病毒感染宿主过程中具体的功能,研究通过PCR扩增BmNPV ie1基因片段,亚克... 详细信息

家蚕核型多角体病毒(BmNPV)ie1基因是BmNPV DNA复制的必需基因,其编码的IE1蛋白能够反式转录激活杆状病毒早期基因的表达。为了进一步研究IE1蛋白在家蚕核型多角体病毒感染宿主过程中具体的功能,研究通过PCR扩增BmNPV ie1基因片段,亚克隆到原核表达载体pET32,获得重组质粒pET32-IE1,经测序正确后,转化至大肠杆菌BL21(DE3)表达菌株。通过IPTG诱导融合蛋白原核表达后,初步纯化收集抗原,免疫新西兰大白兔,制备IE1多克隆抗体。应用制备的免疫兔血清进行Western-blot分析,结果显示多克隆抗体能特异识别BmN-PV的IE1和IE0蛋白。免疫荧光结果同样显示IE1蛋白定位于宿主细胞核病毒复制中心。IE1抗体制备的成功为进一步研究IE1在病毒感染家蚕中的作用机理奠定了基础。

关键词：家蚕家蚕核型多角体病毒 IE1 原核表达多克隆抗体

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家蚕核型多角体病毒BV病毒结构蛋白间的互作网络

家蚕核型多角体病毒BV病毒结构蛋白间的互作网络

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中国蚕学会2018年学术年会

作者：张健家冯敏范颖许伟凡郑秦吴小锋浙江大学动物科学学院家蚕病毒与基因工程实验室

杆状病毒的结构蛋白虽有大部分已被鉴定,但它们之间的相互作用关系尚不清楚。为揭示家蚕核型多角体病毒（BmN PV）出芽型病毒结构蛋白及结构相关蛋白间的互作关系,本文利用酵母双杂交（Y2H）系统对病毒27个结构蛋白间的互作关系进行研... 详细信息

杆状病毒的结构蛋白虽有大部分已被鉴定,但它们之间的相互作用关系尚不清楚。为揭示家蚕核型多角体病毒（BmN PV）出芽型病毒结构蛋白及结构相关蛋白间的互作关系,本文利用酵母双杂交（Y2H）系统对病毒27个结构蛋白间的互作关系进行研究。通过酵母双杂交一对一筛选最终确定57对蛋白互作,包括51对不同蛋白间的互作和6对自相互作用。其中有10对互作通过免疫共沉淀实验进一步确认。最终,基于Y2H结果形成5组相互作用网络。其中,VP39,38K和FP是杆状病毒蛋白互作网络中参与互作最多的三个关键蛋白,推测它们可能是病毒结构的主要骨架。另外,每个病毒囊膜蛋白与超过一个衣壳蛋白发生相互作用。这些结果表明病毒结构和结构相关蛋白可能通过彼此相互作用组装形成完整的病毒。

关键词：家蚕核型多角体病毒结构蛋白蛋白互作

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家蚕核型多角体病毒VP39蛋白中存在两个核转运序列(Nuclear Translocation Sequences,NLS)

家蚕核型多角体病毒VP39蛋白中存在两个核转运序列(Nuclear Trans...

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中国蚕学会2021年学术年会

作者：张健家曾小群李杨沈运旺吴小锋浙江大学动物科学学院浙江省蚕蜂资源利用与创新研究重点实验室

杆状病毒衣壳蛋白VP39是病毒的主要结构蛋白,构建成病毒衣壳管状结构的基本骨架。杆状病毒的复制和核衣壳组装均在细胞核内进行,VP39在细胞质合成后如何进入细胞核,目前具体的分子机制并不清楚,尚未发现其核定位信号。本研究表明,家蚕... 详细信息

杆状病毒衣壳蛋白VP39是病毒的主要结构蛋白,构建成病毒衣壳管状结构的基本骨架。杆状病毒的复制和核衣壳组装均在细胞核内进行,VP39在细胞质合成后如何进入细胞核,目前具体的分子机制并不清楚,尚未发现其核定位信号。本研究表明,家蚕核型多角体病毒VP39在感染初期定位于细胞质,在感染后期进入细胞核。

关键词：家蚕核型多角体病毒 Nuclear Translocation Sequences,NLS 核转运

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家蚕核型多角体病毒0rf60的功能研究

家蚕核型多角体病毒0rf60的功能研究

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中国博士后生命科学学术论坛

作者：郭忠建江苏大学生命科学研究院

家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus，BmNPV)orf60及其同源基因只存在于group Ⅰ和部分group Ⅱ核型多角体病毒基因纽中，表明orf60是一较特殊的基因。本研究利用orf60缺失的重组病毒vblm60-Null，探索了orf60在BmNP... 详细信息

家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus，BmNPV)orf60及其同源基因只存在于group Ⅰ和部分group Ⅱ核型多角体病毒基因纽中，表明orf60是一较特殊的基因。本研究利用orf60缺失的重组病毒vblm60-Null，探索了orf60在BmNPV生活周期中的作用。与野生型病毒相比，vblm60-Null芽生型病毒(budded virus，BV)粒子的产量下降了近10倍，对5龄家蚕幼虫的致死时间也延长了28～36 h，基因组复制起始时间也滞后3 h。这些结果表明，orf60是基因组复制非必需的基因，但与BV的产量有关。

关键词：家蚕核型多角体病毒 orf60缺失 BV产量生物测定

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