检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：张孝林蒋安民汪建飞戚邦华贡成良范涛张钦元 233100 安徽省蚌埠市龙子湖区黄山大道(龙湖校区)

本发明属于生物技术制药领域，涉及一种延长家蚕杆状病毒表达系统宿主细胞存活期增加蛋白质表达量的方法。以家蚕细胞为宿主的家蚕杆状病毒表达系统是一个裂解性表达系统，病毒感染后宿主细胞存活期很短，严重影响蛋白质表达量。本发明... 详细信息

标准号: CN106086074A

本发明属于生物技术制药领域，涉及一种延长家蚕杆状病毒表达系统宿主细胞存活期增加蛋白质表达量的方法。以家蚕细胞为宿主的家蚕杆状病毒表达系统是一个裂解性表达系统，病毒感染后宿主细胞存活期很短，严重影响蛋白质表达量。本发明利用抗氧化剂葡萄籽原花青素处理病毒感染前的宿主细胞，使病毒感染后的宿主细胞存活期延长，蛋白质的表达水平提高，表达量增加，同时表达获得的蛋白质能够得到更加充分的修饰和加工，从而具有更好的生物活性，用该方法处理家蚕的幼虫和蚕蛹能够提高其外源蛋白质的表达水平。本发明为家蚕表达系统提高蛋白表达量提供了新的技术方法，其推广应用将在蛋白质表达产业中产生重大的研究和经济价值。

关键词：宿主细胞病毒感染存活期家蚕杆状病毒表达系统蛋白质表达水平表达量葡萄籽原花青素宿主蛋白质表达量家蚕表达系统生物技术制药蛋白表达量蛋白质表达影响蛋白质表达系统家蚕细胞抗氧化剂生物活性蚕蛹幼虫裂解性家蚕修饰加工研究

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一种延长家蚕杆状病毒表达系统宿主细胞存活期增加蛋白质表达量的方法

一种延长家蚕杆状病毒表达系统宿主细胞存活期增加蛋白质表达量的...

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作者：张孝林蒋安民汪建飞戚邦华贡成良范涛张钦元 233100 安徽省蚌埠市龙子湖区黄山大道(龙湖校区)

标准号: CN106086074B

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蜘蛛丝的结构性能及表达策略研究进展

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蚕业科学 2009年第3期35卷 685-691页

作者：郑青亮蒋彩英张耀洲浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所杭州310018

蜘蛛丝是一种天然蛋白质纤维,具有高强度、高弹性、高断裂能等机械性能以及显著的可降解性、组织相容性等生物学特性,在生物医学、材料、纺织和军事装备等领域均有重大潜在应用价值。利用原核或真核表达系统表达蜘蛛丝蛋白可以大量获取... 详细信息

蜘蛛丝是一种天然蛋白质纤维,具有高强度、高弹性、高断裂能等机械性能以及显著的可降解性、组织相容性等生物学特性,在生物医学、材料、纺织和军事装备等领域均有重大潜在应用价值。利用原核或真核表达系统表达蜘蛛丝蛋白可以大量获取蜘蛛丝。综述了蜘蛛丝蛋白序列结构特征以及蜘蛛丝蛋白在大肠杆菌、酵母、植物、动物细胞、家蚕等表达系统中的表达策略研究进展,并重点阐述应用家蚕表达系统表达蜘蛛丝蛋白的策略,可供规模化生产蜘蛛丝蛋白参考。

关键词：蜘蛛丝机械性能表达策略家蚕表达系统

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家蚕表达CTB-APSL融合蛋白及其抗2型糖尿病的研究

家蚕表达CTB-APSL融合蛋白及其抗2型糖尿病的研究

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作者：刘云龙浙江理工大学

学位级别：硕士

糖尿病是一种常见的慢性代谢性疾病，是遗传和环境因素共同作用而导致的慢性全身性代谢性疾病，严重威胁着人类健康。由于现有抗2型糖尿病药物大多存在副作用大，继发性失效等缺陷，因此研制长效低毒的降糖药物迫在眉睫。随着陆地资源... 详细信息

糖尿病是一种常见的慢性代谢性疾病，是遗传和环境因素共同作用而导致的慢性全身性代谢性疾病，严重威胁着人类健康。由于现有抗2型糖尿病药物大多存在副作用大，继发性失效等缺陷，因此研制长效低毒的降糖药物迫在眉睫。随着陆地资源的不断减少，海洋生物资源以其生物多样性和高效低毒的独特功能而备受关注。早期研究表明，鲨肝活性肽（APSL）具有保肝、降糖、免疫调节和修复受损胰岛等功能，但由于药源有限和给药方式不便，使其应用推广受到了极大的限制。通过家蚕生物反应器规模化制备重组蛋白联合受体介导的口服给药体系有效地解决了这一难题。 APSL是从条纹斑竹鲨的肝脏中分离纯化到的一种肝细胞刺激因子，对糖尿病有潜在的治疗作用。本研究将有蛋白口服前景的家蚕表达系统和目前最有效的粘膜载体蛋白霍乱毒素B亚基（CTB）有机结合，通过柔性四肽GPGP连接CTB和APSL，使其在家蚕中高效表达。运用CTB作为肠粘膜转运载体，辅助药用蛋白APSL穿过肠上皮细胞，进入血液循环，到达组织和细胞发挥作用。利用高脂高糖饲料诱导结合小剂量（80mg/kg）STZ腹腔注射建立2型糖尿病ICR小鼠模型，连续5周灌胃给药（i.g.100mg/kg·d），评价CTB-APSL融合蛋白抗2型糖尿病的效果。研究表明：CTB-APSL融合蛋白能够有效降低2型糖尿病模型小鼠的空腹血糖浓度，促进胰岛素分泌，有效改善胰岛素抵抗；对2型糖尿病模型小鼠脂代谢具有显著改善作用，降低TG、TC和LDL含量，升高HDL含量；有效改善2型糖尿病模型小鼠体内的炎症反应，降低细胞炎症因子TNF-α和IL-6含量。组织病理切片显示：CTB-APSL融合蛋白可以显著修复2型糖尿病模型小鼠受损胰腺组织；明显改善2型糖尿病模型小鼠肝细胞脂肪变性及肝细胞浊肿，减少脂滴含量；有效抑制肾间质炎细胞侵润，改善肾小管上皮细胞核固缩现象。另外，CTB-APSL融合蛋白对2型糖尿病模型小鼠的体重下降也有一定改善作用。本研究结果显示：CTB-APSL融合蛋白具有较好的抗2型糖尿病效果，并能有效改善其并发症，为将其开发为新型抗2型糖尿病口服药物提供了实验依据。

关键词：家蚕表达系统 CTB-APSL 2型糖尿病口服给药 STZ糖尿病小鼠模型

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家蚕生物反应器表达A组轮状病毒结构蛋白VP7

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浙江农业科学 2019年第8期60卷 1477-1481页

作者：王蓓蕾孙爱群李司浙江理工大学生命科学与医药学院浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室

A组轮状病毒(rotavirus,RV)是引起某些幼龄动物患急性胃肠炎的主要病原之一,给家畜养殖业造成严重的经济损失。VP7蛋白是RV最外层的糖蛋白,具有强抗原性和免疫原性。本研究构建了重组家蚕杆状病毒BmNPV-VP7,并分别感染家蚕细胞、家蚕5... 详细信息

A组轮状病毒(rotavirus,RV)是引起某些幼龄动物患急性胃肠炎的主要病原之一,给家畜养殖业造成严重的经济损失。VP7蛋白是RV最外层的糖蛋白,具有强抗原性和免疫原性。本研究构建了重组家蚕杆状病毒BmNPV-VP7,并分别感染家蚕细胞、家蚕5龄幼虫以及蚕蛹。SDS-PAGE和Western blotting结果显示,在重组病毒感染的家蚕细胞、5龄幼虫以及蚕蛹中均检测到35 ku的特异性条带,说明成功表达了VP7蛋白。ELISA检测结果显示,VP7蛋白在家蚕细胞和蚕蛹中的表达分别在感染后第5天和第7天达到最高水平;而在家蚕5龄幼虫中,VP7蛋白表达量不高。家蚕具有食用和药用价值,我们构建的重组家蚕杆状病毒BmNPV-VP7在家蚕生物反应器中成功表达了VP7蛋白,为A组轮状病毒疫苗的研制提供了一条新途径。

关键词： VP7蛋白 A组轮状病毒家蚕表达系统

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