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作者：范学政王琴宁宜宝王在时赵耘张广川中国兽医药品监察所中国兽医药品监察所中国兽医药品监察所中国兽医药品监察所中国兽医药品监察所中国兽医药品监察所

猪瘟是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的一种高度接触性传染病,OIE国际委员会制定的《国际卫生法典》(2002版)中,猪瘟被列为A类15种法定传染病之一,CSFV给养猪业造成了巨大的经济损失。

关键词：大肠杆菌表达监测值猪瘟兔化弱毒疫苗 ELISA 密码子使用频率猪瘟病毒家畜传染病学目的蛋白重组质粒抗原包被

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中华仓鼠卵巢细胞密码子的研究

中华仓鼠卵巢细胞密码子的研究

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作者：王志云中国协和医科大学

学位级别：博士

哺乳动物细胞是表达具有天然活性蛋白的重要宿主，而中华仓鼠卵巢细胞(CHO)是用于真核基因表达的最成功的哺乳动物细胞。但在该细胞中重组蛋白的产量较低，这一直是影响其更广泛应用的一个问题。人们已在选择合适的表达载体和有效的启... 详细信息

哺乳动物细胞是表达具有天然活性蛋白的重要宿主，而中华仓鼠卵巢细胞(CHO)是用于真核基因表达的最成功的哺乳动物细胞。但在该细胞中重组蛋白的产量较低，这一直是影响其更广泛应用的一个问题。人们已在选择合适的表达载体和有效的启动子和增强子方面做了大量工作，取得很多进展，同时开始关注外源基因与中华仓鼠卵巢细胞密码子的匹配程度对外源基因表达的影响，因为人们注意到在大肠杆菌和酵母表达系统中，很多实验已经证实在不改变外源基因氨基酸顺序的条件下，尽量使用大肠杆菌和酵母的偏爱密码子，可明显提高外源基因的表达水平。因此研究CHO细胞密码子使用特点，将为从偏爱密码子角度来探索不同外源基因在CHO细胞表达水平提供新思路，为外源基因在CHO细胞中的高表达奠定理论基础。中华仓鼠卵巢细胞，是高度特异化细胞，我们目前常用于表达的CHOdhfr细胞株是野型CHO传代细胞经多次诱变的营养缺陷型细胞。而从GenBank中获得的来自中华仓鼠卵巢细胞中cDNA序列数量有限，因此要研究密码子使用特点就需要构建中华仓鼠卵巢细胞cDNA文库以获得更多数量的cDNA序列。本文选取生长旺盛的CHO dhfr细胞，提取高丰度mRNA，合成cDNA连接到pUC18中，建立适用于高丰度mRNA的质粒cDNA文库。根据以前的研究结果，偏爱密码子的选择与基因长短无关，因此随机挑选150个克隆，每个克隆测一个反应平均长度在550bp左右。通过BLAST程序，去除假基因，tRNA和rRNA基因，重复序列基因，非编码区核苷酸序列，重复的cDNA序列等，最后剩下50个合格的编码蛋白质cDNA序列。

关键词：中华仓鼠卵巢细胞密码子使用频率 CHO 终止密码子细胞表达

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对虾白斑杆状病毒基因中的小顺反子及其表达

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海洋学报 2001年第1期23卷 73-78页

作者：章晓波徐洵杨丰中国科学技术大学生命科学学院安徽合肥230026 国家海洋局第三海洋研究所海洋生物工程重点实验室福建厦门361005

通过对虾白斑杆状病毒ＤＮＡ文库和ｃＤＮＡ文库的碱基序列测定和分析，发现对虾白斑杆状病毒的一个开放阅读框的前导序列中含有一个小顺反子，这个小顺反子较多使用对虾基因和白斑杆状病毒基因的稀有密码子．试验表明在该基因的前导... 详细信息

通过对虾白斑杆状病毒ＤＮＡ文库和ｃＤＮＡ文库的碱基序列测定和分析，发现对虾白斑杆状病毒的一个开放阅读框的前导序列中含有一个小顺反子，这个小顺反子较多使用对虾基因和白斑杆状病毒基因的稀有密码子．试验表明在该基因的前导序列中存在或不存在小顺反子时，该基因都可在大肠杆菌中诱导表达，但两者的表达量不同．小顺反子可能对基因的表达具有调控作用．

关键词：对虾白斑杆状病毒小顺反子密码子使用频率基因

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用Markov链模型研究不同物种的氨基酸丰度

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内蒙古大学学报（自然科学版） 2001年第3期32卷 254-257页

作者：吕志清李前忠内蒙古大学物理学系理论生物物理教研室内蒙古呼和浩特010021

:针对不同的物种 ,利用 Markov链模型分别计算了 ***和酿酒酵母 ( S-cerevisiae)的2 0种氨基酸的丰度和变异度 .并与丰度的统计值进行比较 ,二者取得了较好的一致 .

关键词：吸收Markov链密码子使用频率氨基酸丰度遗传密码酿酒酵母

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人骨形成蛋白2A、3和1在大肠杆菌中的表达及其表达产物诱骨活性的研究

人骨形成蛋白2A、3和1在大肠杆菌中的表达及其表达产物诱骨活性的...

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作者：张英起第四军医大学

学位级别：博士

由外伤、肿瘤、炎症和先天性发育障碍等原因造成的骨缺损很难进行自身修复，因此，寻找理想的骨修复材料一直是国内外学者致力研究的重要课题。早在十九世纪末期，Senn等就报导了脱矿骨可作为防腐剂的释放系统用于修复骨腔缺损。本世纪6... 详细信息

由外伤、肿瘤、炎症和先天性发育障碍等原因造成的骨缺损很难进行自身修复，因此，寻找理想的骨修复材料一直是国内外学者致力研究的重要课题。早在十九世纪末期，Senn等就报导了脱矿骨可作为防腐剂的释放系统用于修复骨腔缺损。本世纪60年代初期，Urist等发现控制脱矿温度、时间及盐酸浓度可制备出具有稳定诱骨活性的脱矿骨。Urist等认为，脱矿骨之所以有诱骨活性主要是因为在其中含有一种诱导骨形成的蛋白质，此蛋白质被命名为骨形成蛋白(Bone morphogenetic protein，简称BMP)，此后，Urist等应用一系列的纯化手段从牛、人、兔、猪骨基质、牙齿及骨肉瘤等组织中纯化出了具有诱骨活性的蛋白质，即BMP。现认为，BMP是一类在体内具有诱骨活性的蛋白质，它可使未分化的问充质细胞分化成熟为软骨及骨

关键词：大肠杆菌骨形成蛋白骨基质蛋白骨肉瘤细胞酶切缓冲液氨基酸序列分析前体蛋白分子量标准成熟蛋白骨组织形态学释放系统密码子使用频率限制性酶切位点大肠杆菌表达系统骨缺损区

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克隆基因的表达

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杭州师范大学学报(社会科学版) 1988年第6期 79-88页

作者：曹明富

外源基因在新的遗传背景中要成功地表达,取决于基因在新的宿主细胞内能有效地转录正确地翻译及异源蛋白质不被酶水解。基因转录水平的高低决定于克隆基因使用的启动子和基因拷贝数。基因在新宿主内表达效率的高低取决于mRNA的有效翻译... 详细信息

外源基因在新的遗传背景中要成功地表达,取决于基因在新的宿主细胞内能有效地转录正确地翻译及异源蛋白质不被酶水解。基因转录水平的高低决定于克隆基因使用的启动子和基因拷贝数。基因在新宿主内表达效率的高低取决于mRNA的有效翻译、翻译后的蛋白质在细胞内的稳定性、mRNA的SD顺序与翻译起始密码AUG间的间距及附近的核苷酸结构、顺序和mRNA简并密码子选用频率等因素。因此在基因操作中要精密设计合适的载体DNA顺序,组装入最理想的基因调控元件、保持克隆基因原有的读码框架,以获得所需要的功能蛋白质。

关键词：基因大肠杆菌宿主细胞大肠埃希氏菌埃希氏杆菌属密码子使用频率强启动子

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原核基因表达的调控

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中国生物工程杂志 1986年第1期20卷 4-15页

作者：杨胜利中科院上海药物所

大部份原核基因在其天然宿主的染色体中是单拷贝的,但这些基因的产物在细胞中的分子数可由10到10~6个不等。表1列举了一些大肠杆菌基因产物在细胞中的分子数。每个基因产物的多少是基因表达与各级产物代谢之间平衡的结果,与转录起始频率... 详细信息

大部份原核基因在其天然宿主的染色体中是单拷贝的,但这些基因的产物在细胞中的分子数可由10到10~6个不等。表1列举了一些大肠杆菌基因产物在细胞中的分子数。每个基因产物的多少是基因表达与各级产物代谢之间平衡的结果,与转录起始频率,转录后加工、mRNA代谢、翻译起始频率、肽链延伸速度、翻译后加工、蛋白质的分泌和代谢等有关。这些过程的调控在很大程度上取决于基因本身的结构。

关键词： RNA 核糖体核蛋白体转录终止聚合酶多聚酶基因表达调控操纵子强启动子密码子使用频率转录起始枯草杆菌衰减子

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