检索结果-内蒙古大学图书馆

中国组织工程研究 2025年第29期29卷 6198-6204页

作者：吴小绸王慧颖王婕张彩凤侯雁云金波北京中医药大学深圳医院(龙岗)妇科广东省深圳市518000 北京中医药大学深圳医院(龙岗)病理科广东省深圳市518000

背景:卵巢组织玻璃化冻存是保存生育力的重要方法之一。丹参酮ⅡA具有多种药理活性,包括抗氧化、抑制炎症反应、减少凋亡等,但其作为卵巢组织玻璃化冷冻保护添加剂的作用尚不清楚。目的:探讨丹参酮ⅡA对小鼠卵巢组织冷冻保存的保护作用... 详细信息

背景:卵巢组织玻璃化冻存是保存生育力的重要方法之一。丹参酮ⅡA具有多种药理活性,包括抗氧化、抑制炎症反应、减少凋亡等,但其作为卵巢组织玻璃化冷冻保护添加剂的作用尚不清楚。目的:探讨丹参酮ⅡA对小鼠卵巢组织冷冻保存的保护作用。方法:获取25只6周龄雌性KM小鼠的卵巢组织,随机分为5组,每组10个卵巢:新鲜组不进行冷冻保存,冷冻对照组使用玻璃化冷冻保护剂,0.5,2.5,5μmol/L丹参酮ⅡA组分别使用含0.5,2.5,5μmol/L丹参酮ⅡA的玻璃化冷冻保护剂,置于液氮中冷冻保存。保存3 d后取出冻存管解冻,采用苏木精-伊红染色观察各组卵巢组织及卵泡形态,分析卵泡形态正常率及存活率;通过酶联免疫法检测卵巢内超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、丙二醛、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β及白细胞介素17水平;采用RT-qPCR和Western blot检测小鼠卵巢内核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid derived 2-like 2,Nrf2)和血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)的mRNA及蛋白表达。结果与结论:①与新鲜组比较,冷冻对照组卵巢内各级卵泡形态异常、卵泡存活率下降(P<0.05),超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活性下降(P<0.05),丙二醛、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β及白细胞介素17水平均升高(P<0.05),Nrf2、HO-1的mRNA及蛋白表达均下降(P<0.05);②与冷冻对照组比较,不同浓度丹参酮ⅡA均可改善卵巢内各级卵泡形态、提升卵泡存活率,提升超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活性,降低丙二醛、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β及白细胞介素17水平,提升Nrf2、HO-1的mRNA及蛋白表达,并且呈现浓度依赖性,以5μmol/L丹参酮ⅡA的作用最显著;③结果表明,丹参酮ⅡA可能通过介导Nrf2/HO-1信号通路降低小鼠卵巢组织的氧化应激水平和炎症反应,减轻小鼠卵巢玻璃化冷冻保存而出现的生殖损伤。

关键词：丹参酮ⅡA 小鼠卵巢冷冻保存氧化应激核因子E2相关因子2(Nrf2) 血红素加氧酶1(HO-1) 工程化组织构建

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小鼠卵巢结构的CT建模与数值模拟分析

小鼠卵巢结构的CT建模与数值模拟分析

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作者：马若冰南昌大学

学位级别：硕士

器官力学作为生物力学的一个重要分支,专注于揭示生物器官执行其生理功能的力学原理。卵巢器官的研究,对于女性健康及生育能力的维护至关重要。深入探究卵巢内部卵泡的正常发育、排卵过程中的力学因素及其与卵巢内部力学环境的互动,有... 详细信息

器官力学作为生物力学的一个重要分支,专注于揭示生物器官执行其生理功能的力学原理。卵巢器官的研究,对于女性健康及生育能力的维护至关重要。深入探究卵巢内部卵泡的正常发育、排卵过程中的力学因素及其与卵巢内部力学环境的互动,有助于生育技术的创新与优化。然而,直接对器官组织进行生物实验不仅成本高昂,还可能对组织造成损害。因此,数值计算作为一种替代方法,成为了研究器官力学机制的有效手段。在进行数值模拟时,面临两大挑战:首先,需要准确获取器官的真实形态,并对其进行内部组织的精细分割;其次,构建能够解释和预测器官内应力、应变及其功能变化的力学模型。因此需将力学理论与组织学、生理学或医学等领域紧密结合,从而建立起描述卵巢组织宏观力学属性与微观结构之间的桥梁。本文设计了活体小雌鼠的卵巢解剖实验,获取了卵巢器官样本,并用多聚甲醛固定液进行固定。鉴于小鼠卵巢尺寸较小,本文选用了高分辨率的纳米级显微CT扫描技术,获得了一系列高质量的切片图像,并将其和电镜扫描的染色切片作对比观察,验证实验的可靠性。随后将CT数据导入进Dragonfly软件进行标记分割,采用中值滤波法去除了CT图像中的脉冲噪声,结合大津算法和分水岭算法辅助人工进行三维模型分割处理,确保卵巢整体卵泡分割结果的精确性。针对已分割的卵泡和卵巢模型,采用表面平滑算法和图像处理技术,对表面粗糙的问题进行了精细化的处理,构建了基于卵巢真实外形的三维计算几何模型,该几何模型不仅具备高度的真实感,同时适合进行力学分析。并依据卵泡是否形成明显腔样结构作为区分卵泡发育阶段的关键指标,对卵泡进行了分类统计,研究不同卵泡大小和膜厚之间的关系。通过与其它文献中关于哺乳动物卵泡形态发育的数据进行类比,对比验证了结论的有效性。基于上述建立的几何模型所总结的规律,对单一卵泡的膨胀过程进行了数值模拟,通过卵泡的形态变化探究内部压力和边界应力的变化规律。利用分割好的卵巢三维模型,引入了三种不同的本构模型进行有限元分析,深入探讨了卵巢组织结构的受力分布,并通过对比数值结果,评估了不同本构模型对卵巢三维结构的影响。这些研究有助于更好地了解卵泡和卵巢的生理过程。

关键词：小鼠卵巢微计算机断层扫描技术三维重构数值模拟有限元

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高盐饮食导致小鼠卵巢组织线粒体功能异常

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中国医科大学学报 2024年第2期53卷 108-113页

作者：侯恩太顾晓阳倪士峰李新宇乔杰北京大学第三医院妇产科生殖医学中心北京100191 国家妇产科疾病临床医学研究中心(北京大学第三医院) 北京100191 辅助生殖教育部重点实验室(北京大学) 北京100191 北京市生殖内分泌与辅助生殖技术重点实验室北京100191 西北大学生命科学学院中药系西安710069

目的分析高盐饮食对卵巢线粒体功能的影响。方法将20只雌性ICR小鼠随机分为正常盐饮食(NSD)组和高盐饮食(HSD)组,每组10只。NSD组给予正常盐饮食,HSD组给予8%NaCl高盐饮食,持续4周。通过NaCl诱导体外培养的人卵巢颗粒细胞COV-434建立高... 详细信息

目的分析高盐饮食对卵巢线粒体功能的影响。方法将20只雌性ICR小鼠随机分为正常盐饮食(NSD)组和高盐饮食(HSD)组,每组10只。NSD组给予正常盐饮食,HSD组给予8%NaCl高盐饮食,持续4周。通过NaCl诱导体外培养的人卵巢颗粒细胞COV-434建立高盐处理细胞模型。采用Western blotting检测超氧化物歧化酶(SOD)和电子传递链复合物(Complex)Ⅰ~Ⅴ的表达情况,动力学法检测SOD和琥珀酸脱氢酶(SDH)的活性,化学发光法检测ATP水平。结果与NSD组相比,HSD组小鼠卵巢ComplexⅠ表达水平显著下降(P<0.01),ComplexⅤ表达水平显著升高(P<0.05),SDH活性显著降低(P<0.01),血清和卵巢中ATP含量也显著下降(P<0.01)。高盐处理后COV-434细胞中ComplexⅠ和ComplexⅡ表达水平显著下降(P<0.05),ComplexⅤ表达水平显著升高(P<0.05),SDH活性显著降低(P<0.01),ATP含量不足(P<0.01)。结论高盐可引起小鼠卵巢线粒体的氧化稳态失衡、Complex表达水平变化、三羧酸循受阻以及ATP水平不足等线粒体功能障碍。

关键词：高盐饮食小鼠卵巢线粒体功能障碍电子传递链琥珀酸脱氢酶

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黄芩苷对热应激小鼠卵巢氧化损伤的保护作用

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中国兽医杂志 2018年第1期54卷 21-24,I0002页

作者：周颖璐高琛姜忠玲王新丛霞曹荣峰李华涛田文儒青岛农业大学动物医学学院山东青岛266109

研究旨在探讨黄芩苷对热应激小鼠卵巢抗氧化和细胞凋亡的作用机制。将小鼠分为常温对照组(生理盐水)(C组)、黄芩苷(50 mg/kg体重)组(C+B组)、41℃热应激组(H组)和热应激加黄芩苷(50 mg/kg体重)组(H+B组),连续注射7 d,第8天41℃热应激2 h... 详细信息

研究旨在探讨黄芩苷对热应激小鼠卵巢抗氧化和细胞凋亡的作用机制。将小鼠分为常温对照组(生理盐水)(C组)、黄芩苷(50 mg/kg体重)组(C+B组)、41℃热应激组(H组)和热应激加黄芩苷(50 mg/kg体重)组(H+B组),连续注射7 d,第8天41℃热应激2 h,立即处死,取卵巢组织进行切片观察并检测丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)的含量及总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)的活力。Western Blot检测Nrf2、Keap1、HO-1和NQO1蛋白表达。免疫组化法检测Bcl-2、Bax、Caspase 3蛋白表达。结果显示,热应激引起小鼠卵巢组织氧化损伤。黄芩苷能显著降低组MDA和NO含量,显著或极显著增加SOD、CAT和GSH-Px活力。此外,热应激可显著增加Nrf2、Keap1、HO-1和NQO1蛋白表达,黄芩苷干预后Nrf2等蛋白的表达降低。黄芩苷干预后Bax蛋白表达显著降低,Bcl-2、Caspase 3蛋白表达显著升高。上述表明,黄芩苷能缓解热应激下小鼠卵巢组织的氧化损伤及细胞凋亡,其机制可能与提高抗氧化能力及Nrf2蛋白的表达有关。

关键词：黄芩苷热应激小鼠卵巢氧化损伤细胞凋亡

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青春期暴露双酚A致小鼠卵巢异常发育的转录组分析

青春期暴露双酚A致小鼠卵巢异常发育的转录组分析

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作者：吴晴晴阜阳师范学院

学位级别：硕士

双酚A（BPA）具备雌激素效应能够扰乱内分泌,许多动物模型与人类流行病学已经将BPA与生殖器官和后期胚胎发育的过程联系起来,然而,基于转录组层面的BPA影响青春期小鼠卵巢发育的研究还知之甚少。因此,本研究试图通过灌胃BPA来研究ICR青... 详细信息

双酚A（BPA）具备雌激素效应能够扰乱内分泌,许多动物模型与人类流行病学已经将BPA与生殖器官和后期胚胎发育的过程联系起来,然而,基于转录组层面的BPA影响青春期小鼠卵巢发育的研究还知之甚少。因此,本研究试图通过灌胃BPA来研究ICR青春期雌鼠卵巢发育及其转录组学特征。研究中将60只四周龄ICR雌性小鼠自由分为两组,记为HBPA组和EC组。HBPA组为实验组,EC组为对照组,每组三十只,将两组小鼠分别暴露于BPA（200ng/kg/d）和玉米油中,持续四周,收集发情期小鼠血清用于BPA与17β-雌二醇（E2）激素的测定来探究BPA的暴露是否影响雌激素的分泌,同时收集卵巢进行组织学观察和相关基因mRNA及蛋白的表达水平,并且对卵巢RNA进行转录组测序,运用生物信息学手段对所得到的差异基因进行GO功能与KEGG通路的分析。结果:1.通过观察组织学得出小鼠体重未有明显差异,但是卵巢基质出现增生,子宫充血膨大,卵泡数量减少,闭锁卵泡增多,黄体变得更大且卵细胞数量明显增加。***组血清样本中BPA浓度和E2水平均较高,同时免疫组化和蛋白质免疫印迹结果均显示ERβ蛋白水平的表达有所增加,ERα相反。3.采用转录组测序技术对灌胃后小鼠卵巢进行转录组测序和功能注释,利用生物学方法对基因表达和功能进行研究,结果表明测序质量较好。GO功能富集的结果显示差异基因在MAPK级联、细胞分化、心脏发育和含磷酸盐的化合物代谢过程中显著富集,KEGG代谢通路在内分泌系统类别中显著富集。结论:我们的研究结果表明青春期小鼠经BPA暴露后可造成卵巢组织结构的损伤,并且影响激素分泌的功能和重要基因的表达水平,扰乱小鼠内分泌系统诱导卵巢过早或过快发育同时可导致小鼠卵巢组织的转录组学改变,包括基因功能的改变,这将为今后更深入的探究BPA影响卵巢发育的机理奠定了基础。

关键词：双酚A 青春期小鼠卵巢转录组测序分析

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使用MALDI-MSI技术研究小鼠卵巢中脂质的分布

使用MALDI-MSI技术研究小鼠卵巢中脂质的分布

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作者：孙思敏郑州大学

学位级别：硕士

卵母细胞的发育对环境的变化特别敏感,平衡的代谢对于卵母细胞的成熟至关重要。在初级卵泡向成熟卵泡的发育和成熟卵母细胞的排出的这个过程中伴随着能量变化。脂质代谢是能量的重要来源。基质辅助激光解吸/电离质谱成像(MALDI-MSI)是... 详细信息

卵母细胞的发育对环境的变化特别敏感,平衡的代谢对于卵母细胞的成熟至关重要。在初级卵泡向成熟卵泡的发育和成熟卵母细胞的排出的这个过程中伴随着能量变化。脂质代谢是能量的重要来源。基质辅助激光解吸/电离质谱成像(MALDI-MSI)是一种直接在组织切片中实现分子物种无标记映射的技术,目前应用于多种学科以研究各种小分子及大分子如蛋白质、脂质、糖类等的功能,以达到更加了解这些分子的代谢过程的目的,在临床、生物、药物等领域已有所应用。目的使用MALDI-MSI技术来获得小鼠卵巢中m/z100—900范围内脂质的表达谱,分析小鼠卵巢中卵母细胞的脂质分布,以期对小鼠卵母细胞的发育与脂质的分布关系有一个更加直观的了解。材料与方法1.从小鼠体内取出卵巢制成10μm的冰冻组织切片,在组织表面均匀喷涂2,5-二羟基苯甲酸(DHB)后使用MALDI-FT-ICR质谱仪进行电离,收集电离后的分子获取卵巢表面脂质的表达谱;2.使用H&E染色的切片在显微镜下分析卵巢结构,与质谱图像对比分析出卵巢上脂质的分布差异;3.使用SCILS Lab软件对获取的质谱数据进行聚类分析、组成分分析、接收者操作特征曲线分析及箱式图分析来分析卵巢上脂质的差异。结果1.研究发现在小鼠卵巢上丰度较高的脂质主要是甘油磷脂,包括有磷脂酸(PA)、磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰甘油(PG)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰甘油磷酸(PGP);2.一些脂质如m/z 770.5639(PE 38:3)和m/z 797.5407(PG 38:5)m/z 798.5908(PE 40:3)在小鼠卵母细胞处的丰度强于颗粒细胞,脂质m/z 767.4835(PG 36:6)在颗粒细胞处信号强于卵母细胞;3.脂质m/z 761.4364(PGP 29:0)、m/z 789.5151(PGP 31:0)在小鼠初级卵泡的卵母细胞内含量丰富而在成熟卵泡的卵母细胞含量显著性下降,甚至在颗粒细胞中也无法检到。结论1.研究发现小鼠卵巢上分布着各种脂质,它们在小鼠卵巢上的分布不同,含量也不同,在小鼠卵巢上进行着丰富的脂质代谢以维持卵母细胞的成熟;2.在小鼠卵母细胞和颗粒细胞发现脂质分布及含量存在显著性差异;3.在不同发育阶段的卵母细胞发现不同脂质的分布及含量存在差异。

关键词：卵母细胞小鼠卵巢基质辅助激光解吸/电离质谱成像脂质颗粒细胞

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妊娠期PFOA暴露对小鼠卵巢黄体功能的影响

妊娠期PFOA暴露对小鼠卵巢黄体功能的影响

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作者：周玲南昌大学

学位级别：硕士

目的:全氟辛酸（Perfluorooctanoic acid,PFOA）是一种合成的全氟八碳有机化学物质,自20世纪50年代以来,由于其有很好的稳定性、优良疏水疏脂特性,被大量用于各种疏水性的产品中。PFOA在自然界中能长期存在并在生物体内造成生物积累,研... 详细信息

目的:全氟辛酸（Perfluorooctanoic acid,PFOA）是一种合成的全氟八碳有机化学物质,自20世纪50年代以来,由于其有很好的稳定性、优良疏水疏脂特性,被大量用于各种疏水性的产品中。PFOA在自然界中能长期存在并在生物体内造成生物积累,研究表明,食品包装、室内粉尘、空气、特别是水和膳食摄入是PFOA的潜在重要来源。许多证据表明,PFOA对生物体具有广泛的生物毒性作用,并有文献报道了PFOA的生殖毒性,但其毒性机制尚不明确。从已有的研究表明,PFOA作为一种环境内分泌干扰物,有可能是通过影响机体相关激素的合成,上调或下调相关基因的表达或是改变其合成酶的活性从而影响机体的内分泌功能。而卵巢黄体可在孕早期及中期,经由分泌相关激素,对妊娠的维持与发展起到非常重要的作用的。然而,现有PFOA与妊娠的相关研究主要集中在胎盘水平,而PFOA能否通过影响孕早期、中期卵巢黄体的功能从而影响妊娠的发生,尚未见报道。因此,本研究通过对妊娠小鼠进行不同浓度PFOA灌胃染毒,观察染毒后胚胎植入数量,了解其对胚胎的毒性作用;通过计算黄体的数量、面积及血清中雌激素、孕激素含量的变化,阐明PFOA对妊娠卵巢黄体的影响;并通过检测PFOA染毒后卵巢类固醇激素合成酶表达,卵巢氧化应激损伤的情况及卵巢凋亡情况,从而探寻PFOA对妊娠小鼠早期和中期黄体功能的影响机制,为临床上对PFOA染毒后的处理、新药研发,提供科学研究的基础数据。方法:选用25-30克6-8周龄健康成年雌性昆明小鼠,自妊娠第1天（gestational day 1,GD1）开始给予不同剂量PFOA（2.5、5、10mg/kg/day）灌胃染毒,对照组给予等量的蒸馏水。分别在妊娠第7天（GD7）和第13天（GD13）,处死取血,并取出子宫、胎盘及卵巢组织进行拍摄、称重、统计胚胎着床数。通过放射免疫法测定血清中雌、孕激素的含量;并观察比较卵巢黄体数目和面积的改变;通过荧光定量PCR法检测卵巢类固醇激素合成酶基因StAR、Cyp11a1和Hsd3b1的m RNA的表达情况;通过生化检测法观察卵巢组织中应激反应相关指标丙二醛（Malondialdehyde,MDA）、过氧化氢酶（Catalase,CAT）、超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase,SOD）、过氧化氢（hydrogen peroxide,H2O2）的变化情况;再通过蛋白免疫印迹法观察凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和P53的表达情况。结果:（1）在GD7和GD13,PFOA暴露组未显著影响胚胎植入数量（P>0.05）。然而,在GD13中,10 mg/kg/day PFOA暴露组明显增加胚胎吸收数（P<0.05）。（2）在GD7中,10mg/kg/day PFOA暴露组血清雌二醇水平显著增加（P<0.05）,但不同剂量的PFOA暴露组对血清孕酮水平无明显影响（P>0.05）。在GD13中,5mg/kg/day、10mg/kg/day PFOA暴露组显著抑制血清孕酮水平（P<0.05或P<0.01）。然而,不同剂量的PFOA对血清雌二醇水平无明显影响（P>0.05）。（3）在GD7和GD13中,PFOA暴露对卵巢/体重比没有明显的影响（P>0.05）。然而,与对照组相比,PFOA处理后,明显降低了卵巢黄体的数量和面积（P<0.05或P<0.001）,但在GD7的10mg/kg/day PFOA暴露组和GD13的2.5mg/kg/day PFOA暴露组中黄体的数量没有明显的影响（P>0.05）。（4）在GD7和GD13,与对照组相比,各剂量的PFOA暴露均能显著抑制卵巢StAR、Cyp11a1和Hsd3b1 mRNA表达水平。（5）在GD13中,5mg/kg/day及10mg/kg/day PFOA暴露组卵巢CAT活性显著降低（P<0.05或P<0.001）。在GD7中,不同剂量的PFOA暴露组SOD的活性没有显著影响（P>0.05）。然而,在GD13中,PFOA明显抑制了SOD的活性（P<0.001）。与对照组相比,在卵巢PFOA暴露组的MDA在GD7和GD13中,以及H2O2在GD13中均显著增加（P<0.05或P<0.01）。然而,在GD7中,5mg/kg/day和10mg/kg/day PFOA对H2O2产生没有明显作用（P>0.05）。（6）免疫印迹分析表明,在GD13中,不同剂量组PFOA均能下调Bcl-2表达,同时上调Bax和P53的表达（P<0.05或P<0.001）。但在GD13中2.5mg/kg/day PFOA暴露组对Bax表达没有明显影响（P>0.05）。结论:孕期PFOA暴露可通过氧化应激与细胞凋亡途径抑制妊娠黄体孕酮的分泌。

关键词：不同剂量卵巢黄体小鼠卵巢黄体功能妊娠期胎盘催乳素雌二醇水平胚胎植入

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超速冻存小鼠卵巢组织的可行性研究

超速冻存小鼠卵巢组织的可行性研究

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作者：张佳荣复旦大学

学位级别：硕士

目的:探讨超速冷冻和慢速冷冻技术对小鼠卵巢组织冷冻损伤程度的影响.方法:使用HE染色和TUNEL技术分别定量评估冻存后的始基卵泡及初级卵泡的形态学及DNA片断的变化.用免疫组化方法检测冻存复苏后的小鼠卵巢组织中窦前卵泡中Cx43及Cx37... 详细信息

目的:探讨超速冷冻和慢速冷冻技术对小鼠卵巢组织冷冻损伤程度的影响.方法:使用HE染色和TUNEL技术分别定量评估冻存后的始基卵泡及初级卵泡的形态学及DNA片断的变化.用免疫组化方法检测冻存复苏后的小鼠卵巢组织中窦前卵泡中Cx43及Cx37的表达.结果:超速冷冻组(A组)中始基卵泡及初级卵泡数为61.25±12.88,慢速冷冻组(B组)为56.90±11.12,新鲜对照组(C组)为83.55±12.33.与新鲜对照组比较,冻存组中卵泡数显著下降(P<0.001),两冻存组之间无显著差异(P>0.05).A、B和C三组中,正常形态的始基卵泡及初级卵泡数与计数卵泡数的比值分别为0.689±0.050、0.723±0.075和0.897±0.184.与新鲜对照组比较,冻存组中正常形态的卵泡数显著下降(P<0.001),两冻存组之间无显著差异(P>0.05).始基卵泡及初级卵泡中的卵母细胞标记阳性的比率:新鲜对照组中为23.53﹪(47/231),超速冷冻组为12.50﹪(28/171),慢速冷冻组为9.88﹪(19/143).在二冻存组之间始基卵泡和初级卵泡的凋亡比率无显著差异(P>0.05),但与对照组相比存在明显差异(P<0.05).Cx43表达阳性率分别为47.10﹪(73/155)、54.60﹪(101/185)、98.73﹪(234/237).Cx37表达阳性率分别为42.86﹪(48/112)、52.04﹪(51/98)、80.10﹪(153/191).在二冻存组之间窦前卵泡中Cx43及Cx37的表达无显著差异(P>0.05),但与对照组相比存在明显差异(P<0.001).结论:超速冷冻和慢速冷冻对小鼠卵巢组织损伤程度的影响无明显差异.超速冷冻可能是一种简便可行、较理想的冷冻技术.

关键词：冻存卵泡小鼠卵巢凋亡缝隙连接 Cx43 Cx37

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促性腺激素对小鼠卵巢VEGF、Survivin的表达及玻璃化冻存移植后产子率的影响

促性腺激素对小鼠卵巢VEGF、Survivin的表达及玻璃化冻存移植后产...

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作者：张晓光宁夏医科大学

学位级别：硕士

卵巢的深低温冻存后移植已逐渐成为青年和未成年女性癌症患者保存生育力的一个策略，但冻存及无血管吻合移植后卵泡的大量丢失使移植卵巢功能寿命缩短。因此，寻找有效的途径解决冻存及移植卵泡丢失的问题成为女性生育力体外保存的研究... 详细信息

卵巢的深低温冻存后移植已逐渐成为青年和未成年女性癌症患者保存生育力的一个策略，但冻存及无血管吻合移植后卵泡的大量丢失使移植卵巢功能寿命缩短。因此，寻找有效的途径解决冻存及移植卵泡丢失的问题成为女性生育力体外保存的研究热点。本研究组前期工作显示HMG体外短暂干预可使小鼠移植卵巢血流灌注时间提前、FSH干预下绵羊冻存移植卵巢卵泡存活率提高，这些仅仅是从卵泡存活的角度观察到的Gn作用，尚缺少对相关机制及生育力保存观察的实验依据。故本研究将分别通过FSH、LH对小鼠卵巢进行体外干预，观察其对血管生成和抗凋亡相关因子表达及干预对玻璃化冻存卵巢原位移植后的产子影响，希望能为促性腺激素干预提高卵巢移植后生殖力提供科学依据。第一部分：重组人FSH、LH对培养小鼠卵巢VEGF和Survivin表达的影响目的：探索重组人FSH、LH对小鼠卵巢体外培养后血管内皮生长因子（VEGF）和存活素（Survivin）表达的影响。方法：实验分为新鲜对照组、非干预培养组和Gn干预培养组。Gn干预组又分为FSH和LH两组，各组干预浓度均分为0.15IU/ml、0.3IU/ml、0.6IU/ml三个浓度组。将新鲜取材8周龄小鼠（132只）的每只4个半卵巢置于非干预对照组和三个干预浓度液中，于体外培养3h、6h、12h、24h后通过免疫组织化法、RT-PCR、Elisa观察半卵巢VEGF、Survivin的表达并进行分析。结果：免疫组化和Elisa显示FSH、LH干预组培养6h、12hVEGF表达量均高于非干预培养组，免疫组化、Elisa和RT-PCR均显示FSH、LH干预组培养12小时Survivin表达量均高于非干预培养组。培养24小时0.3IU/ml LH在维持VEGF表达明显高于其他干预组，P＜0.05。FSH、LH干预后，VEGF和Survivin的变化，在0.01水平（双侧）上显著相关，Pearson相关性为0.792，P＜0.001。结论FSH、LH体外干预可上调小鼠VEGF、Survivin表达，且VEGF和Survivin的上调呈正相关，培养液中0.3IU/mL LH在维持高表达VEGF、Survivin上明显优于其它实验组。第二部分LH干预对玻璃化冻存小鼠卵巢异体原位移植后产子率的影响目的：研究LH干预对玻璃化冻存小鼠卵巢异体原位移植后的存活及功能恢复情况。方法：以C57BL/6J小鼠（黑毛色）为卵巢供体，以C57BL/6J-Tyr c-2J-J的白毛鼠（系毛色基因突变鼠）为受体，随机分为正常对照组、新鲜移植组、非干预玻璃化移植组和LH干预玻璃化移植组。每组白毛鼠和黑毛鼠各6只，通过本交实验观察产仔情况。正常对照组为雄性白毛鼠直接与黑毛雌性性小鼠合笼;新鲜移植组为将黑毛小鼠卵巢进行囊内双侧完整剥离后，分别移植于去卵巢白毛小鼠两侧的卵巢囊内;玻璃化移植组分为非LH干预组与0.3IU/ml的LH干预组，用同样的方法剥离黑毛小鼠的卵巢，玻璃化冻存3天后移植。移植后通过观察动情周期和产下黑毛小鼠的情况对生育率的保护效率进行观察。结果在移植后各实验组动情周期均恢复，新鲜移植组为6.5±1.04天，玻璃化移植组时间为9.33±1.21天，LH玻璃化移植组7.16±1.17天，玻璃化移植组动情周期恢复时间较新鲜移植组和LH玻璃化移植组延长，有统计学意义，P＜0.05;合笼后各实验组小鼠均正常妊娠，正常对照组5.83±1.94只/窝，新鲜移植组4.67±1.37只/窝，玻璃化移植组2.83±0.98只/窝，与新鲜组相比有显著性差异，P＜0.05。LH玻璃化移植组4.16±1.72只/窝，与新鲜移植组相同，组间无有显著性差异。结论0.3IU/ml LH干预玻璃化液有助于同基因小鼠卵巢异体原位移植后动情周期的恢复和产仔率。

关键词：小鼠卵巢促性腺激素 VEGF Survivin 卵巢原位移植

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磷酸二酯酶5在小鼠卵巢内的表达

引用

中国实验动物学报 2009年第2期17卷 150-153,I0003页

作者：王松波穆欣艺周波张美佳夏国良中国农业大学生物学院北京100193 华南农业大学动物科学学院广州510642

目的探讨cGMP特异性结合的磷酸二酯酶5(PDE5)在小鼠卵巢内的定位和表达情况。方法应用免疫组织化学对小鼠卵巢切片进行染色,检测PDE5在卵巢内不同部位的表达情况。利用Western blot检测PDE5在小鼠不同组织和细胞内的表达情况。结果PDE5... 详细信息

目的探讨cGMP特异性结合的磷酸二酯酶5(PDE5)在小鼠卵巢内的定位和表达情况。方法应用免疫组织化学对小鼠卵巢切片进行染色,检测PDE5在卵巢内不同部位的表达情况。利用Western blot检测PDE5在小鼠不同组织和细胞内的表达情况。结果PDE5在小鼠卵巢的黄体细胞(CL)和卵泡膜细胞(TC)上有强表达,卵母细胞(Oos)上以及大有腔卵泡的卵丘细胞(CCs)也有表达,而在小卵泡的颗粒细胞上没有表达。结论揭示了PDE5在小鼠卵巢内的表达情况,为进一步研究PDE5对卵巢功能的调节提供了生理学基础。

关键词：磷酸二酯酶5 小鼠卵巢 cGMP 免疫组织化学 Western blot

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