检索结果-内蒙古大学图书馆

β-arrestin1过表达抑制Molt-4细胞异种移植小鼠急性T淋巴细胞白血病进展

南方医科大学学报 2020年第5期40卷 654-660页

作者：张佳舒逸张虹洋蒋婷婷宫茂源朱丹王皓飚邹琳重庆医科大学附属儿童医院临床分子医学中心//儿童发育疾病研究教育部重点实验室//国家儿童健康与疾病临床医学研究中心//儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地//重庆市干细胞治疗工程技术研究中心重庆400014

目的探讨β-arrestin1对Molt-4细胞异种移植急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)NCG小鼠模型疾病进展的影响。方法建立稳定表达荧光素酶的人Molt-4细胞系,酶标仪检测其荧光素酶强度;构建稳定过表达或敲低β-arrestin1和空载体的Molt-4细胞系,设... 详细信息

目的探讨β-arrestin1对Molt-4细胞异种移植急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)NCG小鼠模型疾病进展的影响。方法建立稳定表达荧光素酶的人Molt-4细胞系,酶标仪检测其荧光素酶强度;构建稳定过表达或敲低β-arrestin1和空载体的Molt-4细胞系,设为β1组、Siβ1组和Scram组并分别接种于亚致死计量辐射后NCG小鼠体内;记录小鼠移植后体质量及生存时间;利用活体荧光成像系统检测移植小鼠模型体内肿瘤进展;移植后16 d处死小鼠,取肝和脾做切片染色,检测肿瘤细胞浸润。结果成功构建稳定表达荧光素酶Molt-4细胞系(Molt4-Fluc)。在Molt4-Fluc基础上成功构建过表达β-arrestin1(β1)、敲低β-arrestin1(Siβ1)或空载体(Scram)的Molt-4细胞系。NCG小鼠T-ALL异种移植模型显示,β1组、Siβ1组及Scram组Molt4-Fluc细胞在受体NCG小鼠中进展,导致NCG小鼠在移植后体质量降低。小鼠生存时间显示,β1组细胞受体小鼠生存时间(43 d)显著长于Scram组细胞受体小鼠(33 d),P<0.001;Siβ1组细胞受体小鼠生存时间(20 d)显著短于Scram组细胞受体小鼠(33 d),P<0.001;活体荧光成像结果显示,β1组细胞受体小鼠体内T-ALL细胞荧光强度显著弱于Scram组细胞受体小鼠,Siβ1组细胞受体小鼠体内T-ALL细胞荧光强度强于Scram组细胞受体小鼠;处死移植后16 d小鼠,组织染色结果显示,β1组细胞受体小鼠肝、脾内肿瘤细胞浸润较Scram组细胞受体小鼠少。结论β-arrestin1过表达可抑制Molt-4细胞异种移植后小鼠T-ALL进展。

关键词： T-ALL β-arrestin1 小鼠异种移植模型活体荧光成像 Molt-4细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

S1PR3促进急性T淋巴细胞白血病体内外进展研究

S1PR3促进急性T淋巴细胞白血病体内外进展研究

引用

作者：张佳重庆医科大学

学位级别：硕士

第一部分构建稳定敲低S1PR3基因的T-ALL细胞系目的:通过鞘氨醇-1-磷酸盐受体3(Sphingosine-1-phosphate receptor 3,S1PR3)siRNA逆转录病毒载体技术,构建稳定敲低S1PR3的多个T淋巴细胞白血病(T cell acute lymphocytic leukemia,T-ALL)细胞系(Jurkat、Cutll1和Molt-4细胞)。方法:通过构建S1PR3 siRNA逆转录病毒载体,包装与浓缩病毒,分别感染多个T-ALL细胞系(Jurkat、Cutll1和Molt-4细胞),利用q-PCR和Western blot检测病毒感染细胞后S1PR3的表达。结果:成功构建S1PR3 siRNA逆转录病毒载体;q-PCR和Western blot结果显示成功建立稳定敲低S1PR3的多个T-ALL细胞系(Jurkat、Cutll1和Molt-4细胞)。结论:成功建立稳定敲低S1PR3基因的多个T-ALL细胞系(Jurkat、Cutll1和Molt-4细胞),为后续的研究提供实验材料。第二部分S1PR3对T-ALL细胞功能的影响目的:明确S1PR3对多个T-ALL细胞系(Jurkat、Cutll1和Molt-4细胞)细胞凋亡和周期的影响。方法:分别通过Annexin V和碘化丙啶(Propidium iodide,PI)染色,检测敲低S1PR3基因对多个T-ALL细胞系(Jurkat、Cutll1和Molt-4细胞)细胞凋亡和周期的影响。结果:Annexin V染色结果显示,敲低S1PR3后,T-ALL细胞系Jurkat、Cutll1和Molt-4细胞凋亡水平分别增加24.7%(p<0.01)、10.49%(p<0.05)和11.61%(p<0.001);PI染色结果显示:敲低S1PR3后,Jurkat细胞G2期比例增加7.22%(p<0.01),S期比例降低23.04%(p<0.01),G0期比例增加11.3%(p<0.05)。PI染色结果显示:敲低S1PR3后,Cutll1细胞S期比例降低12.41%(p<0.05)。结论:敲低S1PR3后促进3个T-ALL细胞系(Jurkat、Cutll1和Molt-4细胞)细胞凋亡,引起Jurkat和Cutll1细胞周期阻滞。第三部分S1PR3表达促进异种移植小鼠T-ALL进展目的:探讨S1PR3对T-ALL细胞(Jurkat、Molt-4细胞)异种移植NCG小鼠模型疾病进展的影响。方法:建立稳定表达荧光素酶的人Jurkat细胞系,酶标仪检测其荧光素酶强度;将Jurkat-Luc、Jurkat-Luc si、Molt-4和Molt-4 si分别接种于亚致死计量辐射后NCG小鼠体内;动态记录小鼠移植后的生存状况与时间;利用活体荧光成像系统检测Jurkat细胞异种移植小鼠模型体内肿瘤进展。结果:成功构建稳定表达荧光素酶Jurkat细胞系(Jurkat-Luc、Jurkat-Luc si)。NCG小鼠T-ALL异种移植模型小鼠生存时间显示,Jurkat-Luc si组细胞受体小鼠生存时间显著长于Jurkat-Luc组细胞受体小鼠(p<0.05);Molt-4 si组细胞受体小鼠生存时间显著长于Molt-4组细胞受体小鼠(p<0.01);活体荧光成像结果显示,肿瘤细胞移植后21天,Jurkat-Luc si组细胞受体小鼠体内T-ALL细胞荧光强度显著弱于Jurkat-Luc组细胞受体小鼠(p<0.05)。结论:敲低S1PR3表达可抑制T-ALL细胞系中的Jurkat、Molt-4细胞异种移植小鼠T-ALL进展。

关键词：急性T淋巴细胞白血病 siRNA逆转录病毒鞘氨醇-1-磷酸盐受体3 鞘氨醇-1-磷酸盐受体3 细胞凋亡细胞周期鞘氨醇-1-磷酸盐受体3 小鼠异种移植模型活体荧光成像

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：