检索结果-内蒙古大学图书馆

实验动物与比较医学 2024年第3期44卷 251-258页

作者：刘芸冯婷婷佟巍郭智李夏孔琪向志光中国医学科学院医学实验动物研究所北京100021

目的通过小鼠肺炎病毒(pneumonia virus of mice,PVM)感染近交系BALB/c小鼠建立病毒感染肺炎动物模型,观察PVM感染过程中促炎症警报素分子高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)的变化,以及HMGB1抑制剂甘草酸(glycyrrhizic... 详细信息

目的通过小鼠肺炎病毒(pneumonia virus of mice,PVM)感染近交系BALB/c小鼠建立病毒感染肺炎动物模型,观察PVM感染过程中促炎症警报素分子高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)的变化,以及HMGB1抑制剂甘草酸(glycyrrhizic acid,GA)对小鼠肺脏感染损伤的在体干预作用。方法将3周龄的雌性BALB/c小鼠随机分为3组,每组6只。一组未经PVM感染,作为对照组(Control);另外两组先以1×10^(4)半数组织培养感染剂量(50%tissue culture infective dose,TCID_(50))/25μL剂量滴鼻接种PVM,然后分别给予GA生理盐水溶液灌胃(GA组)或单纯生理盐水灌胃(normal saline,NS组)处理,连续15 d。其间,观察并记录各组小鼠体重、外观等改变。在实验终点采集各组小鼠的肺脏组织样本,通过苏木精-伊红染色和免疫组织化学法检测小鼠肺脏组织内PVM和HMGB1蛋白的分布情况;通过实时荧光定量PCR法检测小鼠肺脏组织中HMGB1、Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR-4)、晚期糖基化终产物特异性受体(advanced glycosylation end-product-specific receptor,AGER),以及白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-2和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)等炎症因子的表达水平。结果与Control组相比,NS组小鼠6 d后体重显著下降(P<0.05),组织病理学结果显示其肺脏有明显的炎症病变,免疫组织化学结果显示HMGB1从细胞核释放至细胞质,实时荧光定量PCR结果显示HMGB1、IL-1β和IL-2的表达水平均显著上调(P<0.05);GA干预组的临床症状和体重无明显变化。而与NS组相比,GA干预组肺组织的病理损伤明显减轻,且肺组织中HMGB1、IL-1β、IL-2和干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)的表达水平显著下降(P<0.05),但AGER的表达水平显著增高(P<0.05)。结论PVM感染能引起明显的小鼠肺部炎症性病理损伤,而GA能有效减轻其损伤,其作用机制可能与激活HMGB1信号通路相关。

关键词：甘草酸高迁移率族蛋白B1 小鼠肺炎病毒肺损伤 BALB/c小鼠

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

小鼠肺炎病毒RT-PCR方法的建立及在实验动物感染和国际比对样本检测中的应用

引用

实验动物科学 2022年第2期39卷 1-10页

作者：王吉王莎莎王淑菁李威秦骁李晓波付瑞岳秉飞贺争鸣中国食品药品检定研究院国家实验动物微生物遗传检测中心北京102629

目的建立小鼠肺炎病毒RT-PCR检测方法,用于实验动物及实验动物相关样本的检测。方法选择小鼠肺炎病毒(pneumonia virus of mice,PVM)G基因保守序列设计合成引物,建立RT-PCR方法,并进行方法的特异性、敏感性、重复性和稳定性验证。应用... 详细信息

目的建立小鼠肺炎病毒RT-PCR检测方法,用于实验动物及实验动物相关样本的检测。方法选择小鼠肺炎病毒(pneumonia virus of mice,PVM)G基因保守序列设计合成引物,建立RT-PCR方法,并进行方法的特异性、敏感性、重复性和稳定性验证。应用建立的方法对日常送检的27只小鼠、9只大鼠、5只沙鼠肺组织样本和19只PVM感染小鼠肺组织样本,及8份国际实验动物理事会(the International Council for Laboratory Animal Science,ICLAS)国际比对样本进行检测。结果建立的方法与仙台病毒、呼肠孤病毒Ⅲ型、汉坦病毒、淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒无交叉反应。能够检测PVM DNA最小模板浓度为8.77×10拷贝/μL,可检测病毒最小滴度为10/mL。用放置-30℃冰箱保存12个月的引物和PVM质粒进行PCR检测,仍能扩增到约249 bp的目的条带。用建立的方法检测日常送检的27只小鼠、9只大鼠、5只沙鼠肺组织样本,结果均为阴性;检测19只PVM感染小鼠肺组织样本,有7只小鼠肺组织样本结果阳性;检测8份ICLAS国际比对样本,有1份样本小鼠肺炎病毒核酸阳性,均符合预期结果。结论建立的PVM RT-PCR方法特异、敏感,重复性、稳定性好,能够用于小鼠、大鼠、沙鼠等实验动物的监测及其相关样本的检测。

关键词：小鼠肺炎病毒 RT-PCR 实验动物应用

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

口咽拭子样品在小鼠肺炎病毒病原检测中的应用

引用

实验动物科学 2024年第5期41卷 19-22页

作者：佟巍郭智刘芸冯婷婷郭建国苏磊孔琪向志光中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的评价分子病原学及血清学检测方法在小鼠肺炎病毒(PVM)检测中的适用性。方法3周龄BALB/c和C57BL/6J小鼠雌雄各半,滴鼻感染PVM,在感染后1、2、3周,1、2、3月采集各实验鼠口咽拭子及尾尖血,分别应用PCR和ELISA方法进行检测。结果两品... 详细信息

目的评价分子病原学及血清学检测方法在小鼠肺炎病毒(PVM)检测中的适用性。方法3周龄BALB/c和C57BL/6J小鼠雌雄各半,滴鼻感染PVM,在感染后1、2、3周,1、2、3月采集各实验鼠口咽拭子及尾尖血,分别应用PCR和ELISA方法进行检测。结果两品系小鼠感染PVM病毒1周后,口咽拭子PVM核酸检出率为70%~100%,随后2周和3周检出率降低,CT值增高,1个月后无检出;外周血PVM抗体1周无检出,随后2、3周检出率为80%~100%,1至3月全部检出,且PVM抗体ELISA检测吸光度持续增高,2月和3月仍维持较高的抗体水平。结论小鼠口咽拭子样品的PCR检测结合血清学检测技术,可应用于小鼠PVM的质量控制。

关键词：小鼠肺炎病毒口咽拭子消长规律

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

抗呼吸道合胞病毒、人偏肺病毒和小鼠肺炎病毒的抗体和其使用方法

抗呼吸道合胞病毒、人偏肺病毒和小鼠肺炎病毒的抗体和其使用方法

引用

作者： D·科蒂瑞士贝林佐纳

本公开提供了可以与副粘病毒结合并且中和由所述副粘病毒引起的感染的抗体。所述副粘病毒可以是例如呼吸道合胞病毒、偏肺病毒或小鼠肺炎病毒。所述抗体包括Fc区中的修饰，所述修饰改善所述抗体的体内稳定性、所述抗体的一种或多种效应... 详细信息

标准号: CN117136197A

本公开提供了可以与副粘病毒结合并且中和由所述副粘病毒引起的感染的抗体。所述副粘病毒可以是例如呼吸道合胞病毒、偏肺病毒或小鼠肺炎病毒。所述抗体包括Fc区中的修饰，所述修饰改善所述抗体的体内稳定性、所述抗体的一种或多种效应子功能或两者。还提供了抗体组合物、编码所述抗体的多核苷酸、载体、宿主细胞以及使用所述抗体预防和/或治疗副粘病毒感染的方法。

关键词：抗体副粘病毒修饰呼吸道合胞病毒小鼠肺炎病毒抗体组合物体内稳定性效应子功能多核苷酸偏肺病毒宿主细胞感染中和治疗预防

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

小鼠肺炎病毒在严重呼吸道病毒感染中的研究进展

引用

医学综述 2014年第6期20卷 1003-1005页

作者：崔玉秀侯铁永胡菊吴振永马少林曾瑞红保定市第二中心医院检验科河北保定072750 河北医科大学免疫教研室石家庄050017 保定市第二中心医院肿瘤科河北保定072750

小鼠肺炎病毒(PVM)是天然的小鼠病原体,它和人类呼吸道合胞病毒(hRSV)紧密相关。接种最小量的病毒后支气管上皮细胞就会有大量的PVM复制,病毒复制的结果是在局部产生大量的促炎性因子(如巨噬细胞炎性蛋白1α、巨噬细胞炎性蛋白2、单核... 详细信息

小鼠肺炎病毒(PVM)是天然的小鼠病原体,它和人类呼吸道合胞病毒(hRSV)紧密相关。接种最小量的病毒后支气管上皮细胞就会有大量的PVM复制,病毒复制的结果是在局部产生大量的促炎性因子(如巨噬细胞炎性蛋白1α、巨噬细胞炎性蛋白2、单核细胞趋化蛋白1和γ干扰素)以及肺部产生粒细胞,如果病毒复制未得到控制,PVM感染和继发炎性应答最终会导致肺水肿、呼吸衰竭和死亡。许多免疫调节方法已成功用于减少PVM感染率、小鼠的患病率和死亡率,为人的严重呼吸道病毒感染提供现实可行的治疗方案。

关键词：小鼠肺炎病毒中性粒细胞细胞因子淋巴细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

一种快速区分5种小鼠呼吸道病原的多重液相基因芯片检测引物、试剂盒及方法

一种快速区分5种小鼠呼吸道病原的多重液相基因芯片检测引物、试...

引用

作者：王静郭鹏举黄韧张钰 510663 广东省广州市黄埔区广州科学城风信路11号广东省实验动物监测所

本发明公开了一种快速区分5种小鼠呼吸道病原的多重液相基因芯片检测引物、试剂盒及方法。本发明操作简单，通过PCR获得目标扩增片段，然后将扩增产物、荧光编码微球和链霉亲和素‑藻红蛋白进行杂交，然后通过检测仪读取MFI值，分辩不同... 详细信息

标准号: CN107312873B

本发明公开了一种快速区分5种小鼠呼吸道病原的多重液相基因芯片检测引物、试剂盒及方法。本发明操作简单，通过PCR获得目标扩增片段，然后将扩增产物、荧光编码微球和链霉亲和素‑藻红蛋白进行杂交，然后通过检测仪读取MFI值，分辩不同类型的病毒。本发明方法，能够同时对小鼠肺炎病毒、汉坦病毒、仙台病毒、淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒、肺支原体进行检测，而且特异性强，灵敏度高，重复性好。与传统检测方法相比，本发明方法实现了对同一样本中的多种不同目的分子同时进行检测，样本用量少，操作简单、快速，可大大降低检测成本。

关键词：检测样本淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒读取基因芯片检测小鼠肺炎病毒荧光编码微球呼吸道病原链霉亲和素传统检测汉坦病毒扩增产物扩增片段特异性强仙台病毒藻红蛋白灵敏度检测仪试剂盒支原体小鼠引物杂交病毒

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

一种快速区分5种小鼠呼吸道病原的多重液相基因芯片检测引物、试剂盒及方法

一种快速区分5种小鼠呼吸道病原的多重液相基因芯片检测引物、试...

引用

作者：王静郭鹏举黄韧张钰 510663 广东省广州市黄埔区广州科学城风信路11号广东省实验动物监测所

标准号: CN107312873A

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Notch信号在呼吸道病毒灭活疫苗诱导的CD4+Th细胞应答中的作用

Notch信号在呼吸道病毒灭活疫苗诱导的CD4+Th细胞应答中的作用

引用

中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会

作者：曾瑞红崔玉秀魏林河北医科大学免疫教研室

目的:研究Notch信号对FI-PVM激活的MΦ的抗原提呈活性、及MΦ促进CD4+Th细胞分化的影响.方法:用小鼠肺炎病毒(PVM)、福尔马林灭活的PVM (FI-PVM)及FI-PVM+CpG2216刺激RAW264.7细胞,或与Notch信号抑制剂共刺激RAW264.7细胞,于不同时间点... 详细信息

目的:研究Notch信号对FI-PVM激活的MΦ的抗原提呈活性、及MΦ促进CD4+Th细胞分化的影响.方法:用小鼠肺炎病毒(PVM)、福尔马林灭活的PVM (FI-PVM)及FI-PVM+CpG2216刺激RAW264.7细胞,或与Notch信号抑制剂共刺激RAW264.7细胞,于不同时间点收集细胞,用Western-blot、Real Time PCR和流式细胞仪检测Notch信号分子和/或MHC-Ⅱ分子和CD80/CD86蛋白水平和/或mRNA水平的变化;用PVM、FI-PVM+AL(OH)3以及FI-PVM+AL(OH)3+CpG2216免疫BALB/c雌性小鼠,4周后分离小鼠脾脏单个核细胞,并用磁珠分选法分离CD4+T细胞,用DMSO或inhibitors刺激24h后,与PVM+DMSO、FIPVM+DMSO、FI-PVM+CpG2216+DMSO和PVM+inhibitors、FI-PVM+inhibitors、FI-PVM+CpG2216+inhibitors 分别刺激24h后的RAW264.7细胞共培养,2-4天时收集RAW264.7细胞用流式细胞仪检测MHC-H分子和CD80/CD86的表达.同时收集悬浮的CD4+T细胞用Real Time PCR法检测相关细胞因子.

关键词： Notch 小鼠肺炎病毒灭活疫苗鼠巨噬细胞 CD4+Th细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Notch信号在呼吸道病毒灭活疫苗诱导的CD4+Th细胞应答中的作用

Notch信号在呼吸道病毒灭活疫苗诱导的CD4+Th细胞应答中的作用

引用

第九届全国免疫学学术大会

作者：曾瑞红崔玉秀魏林河北医科大学免疫教研室

目的:研究Notch信号对FI-PVM激活的MΦ的抗原提呈活性、及MΦ促进CD4Th细胞分化的影响。方法:用小鼠肺炎病毒（PVM）、福尔马林灭活的PVM（FI-PVM）及FI-PVM+CpG2216刺激RAW264.7细胞,或与Notch信号抑制剂共刺激RAW264.7细胞,于不同时... 详细信息

目的:研究Notch信号对FI-PVM激活的MΦ的抗原提呈活性、及MΦ促进CD4Th细胞分化的影响。方法:用小鼠肺炎病毒（PVM）、福尔马林灭活的PVM（FI-PVM）及FI-PVM+CpG2216刺激RAW264.7细胞,或与Notch信号抑制剂共刺激RAW264.7细胞,于不同时间点收集细胞,用Western-blot、Real Time PCR和流式细胞仪检测Notch信号分子和/或MHC-Ⅱ分子和CD80/CD86蛋白水平和/或mRNA水平的变化;用PVM、FI-PVM+AL（OH）3以及FI-PVM+AL（OH）3CpG2216免疫BALB/c雌性小鼠,4周后分离小鼠脾脏单个核细胞,并用磁珠分选法分离CD4+T细胞,用DMSO或inhibitors刺激24h后,与PVM+DMSO、FIPVM+DMSO、FI-PVM+CpG2216+DMSO和PVM+inhibitors、FI-PVM+inhibitors、FI-PVM+CFpG2216+inhibitors分别刺激24h后的RAW264.7细胞共培养,2-4天时收集RAW264.7细胞用流式细胞仪检测MHC-Ⅱ分子和CD80/CD86的表达。同时收集悬浮的CD4+T细胞用Real Time PCR法检测相关细胞因子。结果:加抑制剂的各组MΦ的Notch1、靶基因HES-1和Deltexl、配体DLL-1以及趋化因子MCP-1、Eotaxin-1和细胞因子IL-6、12、IFN-α、β、TNF-α和TGF-β的mRNA的表达、及细胞表面MHC-Ⅱ分子和CD80分子双阳性的细胞百分率、MHC-Ⅱ分子和CD80分子单阳性细胞百分率均受到明显抑制（P<0.05）;加抑制剂的PVM组、FI-PVM组、FI-PVM+CpG2216组CD4细胞与对照组相比,Th1/Th2/Th17型细胞因子和转录因子IFN-γ、T-bet、IL-4、GATA-3、IL-17和ROR-γt均受到抑制（P<0.05）。结论:抑制Notch信号使FI-PVM刺激的MΦ的抗原提呈活性降低;Notch信号在FI-PVM诱导的CD4Th细胞的应答过程中发挥重要作用,抑制Notch信号将抑制CD4+Th细胞的活化和分化。

关键词： Notch 小鼠肺炎病毒灭活疫苗鼠巨噬细胞 CD4+Th细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

TMEV、Ect、LCMV、POLY和PVM病毒免疫血清制备及ELISA等检测方法的研究

TMEV、Ect、LCMV、POLY和PVM病毒免疫血清制备及ELISA等检测方法...

引用

作者：谢军芳中国协和医科大学

学位级别：硕士

实验动物病毒检测是保证实验动物质量和动物实验结果的重要手段,国家标准中规定的实验动物病毒血清学检测方法主要为IFA,IEA和ELISA。目前,这些方法分散在我国为数不多的实验室中,阳性对照血清主要来自自然感染的动物血清,质量控制不严... 详细信息

实验动物病毒检测是保证实验动物质量和动物实验结果的重要手段,国家标准中规定的实验动物病毒血清学检测方法主要为IFA,IEA和ELISA。目前,这些方法分散在我国为数不多的实验室中,阳性对照血清主要来自自然感染的动物血清,质量控制不严密,检测结果存在较大误差。本实验室成熟的病毒血清学检测方法有IFA、IEA,因此,在原有检测基础上,制备免疫质量控制血清,建立ELISA检测体系,实现一种病毒多种检测方法间的比对研究。同时,建立病原PCR检测方法,加强病毒检测水平,进一步完善实验室检测体系。实验选择5种病毒:小鼠脑脊髓炎病毒(TMEV)、鼠痘病毒(Ect)、淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)、多瘤病毒(POLY)和小鼠肺炎病毒(PVM),均为清洁级和SPF级实验动物必须排除的病原体。本研究通过制备组织毒,免疫BALB/c小鼠,待抗体滴度达到峰值时,采血收集免疫血清,制备了TMEV、Ect、LCMV、POLY、PVM标准化血清。IFA、IEA评价血清的敏感性和特异性。IFA及IEA法检测上述免疫血清效价依次分别为1:640、1:320,1:640、1:320,1:1280、1:640,1:640、1:640,1:640、1:320。本研究制备同批次大量免疫血清,敏感性高、特异性好,均可作为实验动物病毒检测中的标准质控血清使用。本研究建立了TMEV和痘苗病毒ELISA检测方法。用TMEV和痘苗病毒感染BHK-21细胞,制备病毒特异抗原,确定包被抗原和标准阳性血清的最佳工作浓度;并进行敏感性、特异性、重复性和稳定性实验。包被抗原和标准阳性血清的最佳工作浓度分别为2.5μg/mL和1:200,检测灵敏度为1:3200,与小鼠肺炎病毒、小鼠肝炎病毒、仙台病毒、呼肠孤病毒-Ⅲ型均无交叉反应,批内、批间特异抗原和正常抗原的变异系数均小于10%,将TMEV和痘苗病毒抗原包被的酶标板,置37℃进行加速破坏性保存实验,2d相对偏差均小于20%。TMEV和痘苗病毒ELISA检测方法和赠送ELISA试剂盒比较:相对敏感性依次为100%、92.9%,符合率依次为90.48%、93.3%。本研究建立的TMEV和痘苗病毒ELISA检测方法重复性、稳定性好,敏感性和特异性强,可用于TMEV抗体和Ect抗体的检测。同时,进行病原学检测方法的尝试,针对LCMV和POLY分别建立了巢式RT-PCR和PCR检测方法。利用巢式RT-PCR,扩增LCMV病毒RNA GP基因上长度为149bp的片段,克隆测序后,经BLAST在线比对分析证实,其核苷酸序列与Genebank中LCMV GP基因序列的同源性为99.32%;利用PCR扩增POLY病毒DNA基因上602-874之间的长度为272bp的片段。本研究初步解决目前实验动物病毒检测方法单一,缺乏比对,质量控制血清来源混乱、小批次不标准、不规范等问题,为进一步增强我国实验动物病毒检测方法研究,提高检测基础水平提供思路。

关键词：小鼠脑脊髓炎病毒鼠痘病毒淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒小鼠肺炎病毒多瘤病毒痘苗病毒标准化血清 ELISA PCR

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：