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第九届中国血液净化论坛暨2017年中国医院协会血液净化中心管理分会年会

作者：李寒封素娟路香雪熊瑞芳王世相首都医科大学附属北京朝阳医院血液净化科北京 100020 首都医科大学肾病学系北京 100020

心血管疾病是慢性肾脏病,尤其是终末期肾脏病患者最主要的并发症及引起其死亡的首位原因.维持性透析患者动脉粥样硬化性心血管疾病的发生率明显高于同龄普通人群,其死亡率亦是普通人群的10-30倍,而且进展快、发病年龄提前,称为尿毒症加... 详细信息

心血管疾病是慢性肾脏病,尤其是终末期肾脏病患者最主要的并发症及引起其死亡的首位原因.维持性透析患者动脉粥样硬化性心血管疾病的发生率明显高于同龄普通人群,其死亡率亦是普通人群的10-30倍,而且进展快、发病年龄提前,称为尿毒症加速性动脉粥样硬化(uremic accelerated atherosclerosis,UAAS).H2S作为一种新型气体信号分子,具有舒张血管平滑肌、抑制平滑肌细胞增殖及调节心肌收缩力等多种心血管效应.本研究拟在已证实血浆H2S水平降低是血液透析患者心血管死亡的独立危险因素，且其可能通过cPKCβII/Akt信号通路激活并调控其下游VCAM-1和ICAM-1而参与并调控UAAS的发生发展过程的基础上，进一步利用Apo E-/-小鼠尿毒症加速性动脉粥样硬化动物模型，探讨CSE/H2S体系在UAAS中作用及其分子机制。

关键词：尿毒症加速性动脉粥样硬化病理机制细胞黏附分子-1 转化生长因子-β 信号通路

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动脉内膜树突状细胞变化在尿毒症加速性动脉粥样硬化小鼠中作用

动脉内膜树突状细胞变化在尿毒症加速性动脉粥样硬化小鼠中作用

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作者：胡爽第三军医大学

学位级别：硕士

与普通人群相比,尿毒症患者动脉粥样硬化导致的心血管事件的发病率与死亡率显著升高,成为尿毒症患者的首位死因。尿毒症加速性动脉粥样硬化病变形成的时间更短,病变更重,其机制尚不完全清楚。目前已有多项研究证实树突状细胞(Dendritic ... 详细信息

与普通人群相比,尿毒症患者动脉粥样硬化导致的心血管事件的发病率与死亡率显著升高,成为尿毒症患者的首位死因。尿毒症加速性动脉粥样硬化病变形成的时间更短,病变更重,其机制尚不完全清楚。目前已有多项研究证实树突状细胞(Dendritic cells,DCs)在普通动脉粥样硬化、系统性红斑狼疮加速性动脉粥样硬化、肺炎衣原体加速性动脉粥样硬化等疾病的病理生理改变中起到关键作用,那么其是否也参与了尿毒症加速性动脉粥样硬化?尚未见相关研究,本文就此进行了初步探讨。目的:研究动脉内膜DCs变化在尿毒症加速性动脉粥样硬化小鼠中作用。方法:分别取30只6周龄雄性Apo E-/-C57小鼠,按随机数字表法随机分为3组:罗格列酮治疗组、尿毒症组、动脉硬化组,每组10只,饲以高脂饮食;另取10只6周龄雄性野生型C57小鼠,饲以普通饮食,为对照组。所有小鼠饲养普通饲料2周后开始建模,ApoE-/-小鼠每天饲以高脂饮食(配方:普通饲料79.8%,猪油20%,胆固醇0.2%),促进动脉斑块形成;C57小鼠饲以普通饮食。治疗组及尿毒症组行肾脏大部分损毁术,即8周龄时行背部右后外侧2cm切口进行皮质电灼术,2周后,行左侧肾脏切除,对照组及动脉硬化组行假手术。术后6周,治疗组予以罗格列酮20 mg/(kg·d)灌胃治疗,其余两组予以等量生理盐水灌胃,共治疗5周后干预治疗结束。检测BUN、TC、TG等生化指标,观察造模是否成功;Western blot检测主动脉内成熟DC数量;流式细胞技术检测脾脏中成熟DCs数量;Elisa检测外周血IL-12p70水平。结果:尿毒症组与动脉硬化组比较,BUN显著升高,动脉内膜斑块面积分数增大(P<0.05),动脉内膜中成熟DCs表达增多(P<0.05),说明尿毒症组加速了动脉粥样硬化病程,造模成功。尿毒症组较动脉硬化组中成熟DCs增多,同时伴随有更为严重的粥样硬化斑块形成(P<0.05),目前大量研究已证实DCs在普通动脉粥样硬化中的重要作用,在疾病进展过程中,其从外周淋巴组织迁移至动脉管壁,加重动脉病变,我们考虑在合并有尿毒症导致的免疫紊乱中,更多的DCs迁移入动脉内膜中,增生活化,加重动脉病变;脾脏中成熟DCs表达减少[CD11c:(3.06±0.07)%vs(5.04±0.13)%,CD83:(6.96±0.06)%vs(11.48±0.14)%,P<0.05],IL-12p70分泌减少[(57.11±3.11 vs 116.00±8.72)ng/L,P<0.05],说明在尿毒症情况下,外周淋巴器官中DCs的数量及活性均降低,这与众所周知的尿毒症相关性免疫缺陷状态相一致;而在动脉硬化的条件下,外周DCs则处于数量增多,明显活化的状态,与目前公认的动脉粥样硬化存在免疫激活相一致。PPARγ(Peroxisome proliferator activated receptorγ,过氧化物酶体增殖物激活受体γ)是一种表达于DCs上的重要功能受体,其在动脉粥样硬化中的作用,目前受到广泛关注。在动脉粥样硬化中,激活该受体,可通过多种途径抑制DCs最终起到抗AS的作用。因此我们设立PPARγ激动剂罗格列酮治疗组以便抑制DCs的成熟和活化,观察DCs的功能状态对尿毒症加速性动脉粥样硬化的影响。我们发现,罗格列酮治疗组与尿毒症组比较,动脉内膜斑块面积分数减少(P<0.05),动脉内膜中成熟DCs数量减少(P<0.05),脾脏中成熟DCs数量减少[CD11c:(1.22±0.02)%vs(3.06±0.07)%,CD83:(3.12±0.10)%vs(6.96±0.06)%,P<0.05],IL-12p70分泌减少[(34.25±11.27 vs57.11±3.11)ng/L,P<0.05],但血脂水平并无明显差异;这就说明PPARγ激动剂罗格列酮改善尿毒症加速性动脉粥样硬化的作用与其抑制DCs相关,而血脂水平可能在尿毒症加速性动脉粥样硬化中并不是主要的加速原因。罗格列酮治疗组的动脉内膜中成熟DCs减少,说明在尿毒症加速性动脉粥样硬化小鼠中,动脉内膜增生程度与内膜中成熟DCs数量成正相关,进一步说明了DCs在局部的功能状态在尿毒症加速性动脉粥样硬化中的重要作用。罗格列酮治疗组较尿毒症组在动脉斑块及脾脏内成熟DCs均减少(P<0.05),说明治疗组通过抑制动脉斑块及脾脏内成熟DCs,能减轻尿毒症加速性动脉粥样硬化。结论:ApoE-/-小鼠尿毒症加速性动脉粥样硬化的形成与动脉内膜中成熟DCs的数量及活性改变相关,尿毒症小鼠的动脉内膜中成熟DCs数量增多,加速了尿毒症小鼠动脉粥样硬化的进程,通过抑制DCs成熟可明显减轻其动脉病变。

关键词：尿毒症加速性动脉粥样硬化 ApoE-/-小鼠树突状细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂

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PKCs特异性亚型激活在尿毒症加速性动脉粥样硬化中的分子机制

PKCs特异性亚型激活在尿毒症加速性动脉粥样硬化中的分子机制

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2016年中国医院协会血液净化中心管理分会年会暨第八届中国血液净化论坛、江苏省医院协会血液净化中心分会年会

作者：李寒封素娟王世相首都医科大学附属北京朝阳医院血液净化科 100020

目的：尿毒症加速性动脉粥样硬化(uremic accelerated atherosclerosis,UAAS)是终末期肾脏病患者最常见的并发症和引起死亡的首位原因。

关键词：尿毒症加速性动脉粥样硬化血液透析蛋白激酶C

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树突状细胞的数量及活性变化在ApoE^(-/-)小鼠尿毒症加速性动脉粥样硬化形成中的作用

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第三军医大学学报 2015年第24期37卷 2432-2437页

作者：胡爽吴雄飞何跃蔡光强彭侃夫第三军医大学西南医院肾科重庆400038

目的研究树突状细胞(dentritic cells,DCs)的数量及活性变化在尿毒症加速性动脉粥样硬化小鼠中的作用。方法分别取30只6周龄雄性Apo E^(-/-)C57小鼠,按随机数字表法分为3组:治疗组、尿毒症组、动脉硬化组,每组10只,饲以高脂饮食;另取10... 详细信息

目的研究树突状细胞(dentritic cells,DCs)的数量及活性变化在尿毒症加速性动脉粥样硬化小鼠中的作用。方法分别取30只6周龄雄性Apo E^(-/-)C57小鼠,按随机数字表法分为3组:治疗组、尿毒症组、动脉硬化组,每组10只,饲以高脂饮食;另取10只6周龄雄性野生型C57小鼠,饲以普通饮食,为对照组。4组小鼠分别给予不同的干预措施12周后,Western blot检测主动脉内成熟DCs数量,流式细胞仪检测脾脏中成熟DCs数量,ELISA检测外周血IL-12p70水平。结果尿毒症组与动脉硬化组比较,动脉内膜斑块面积分数增大(P<0.05),动脉内膜中成熟DCs表达增多(P<0.05),脾脏中成熟DCs细胞表达减少[CD11c:(3.06±0.07)%vs(5.04±0.13)%,CD83:(6.96±0.06)%vs(11.48±0.14)%,P<0.05],IL-12p70分泌减少[(57.11±3.11)vs(116.00±8.72)ng/L,P<0.05];治疗组与尿毒症组比较,动脉内膜斑块面积分数减少(P<0.05),动脉内膜中成熟DCs数量减少(P<0.05),脾脏中成熟DCs数量减少[CD11c:(1.22±0.02)%vs(3.06±0.07)%,CD83:(3.12±0.10)%vs(6.96±0.06)%,P<0.05],IL-12p70分泌减少[(34.25±11.27)vs(57.11±3.11)ng/L,P<0.05]。结论 Apo E-/-小鼠尿毒症加速性动脉粥样硬化的形成与成熟DCs的数量及活性改变相关,通过抑制DCs成熟可明显减轻其动脉病变。

关键词：尿毒症加速性动脉粥样硬化 ApoE^-/-小鼠树突状细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂

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尿毒症加速性动脉粥样硬化状态下Klotho基因的表达变化

尿毒症加速性动脉粥样硬化状态下Klotho基因的表达变化

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第14届中国南方国际心血管病学术会议(南方会)

作者：余洁赵景宏邓梦扬黄岚第三军医大学新桥医院全军心血管病研究所

目的尿毒症状态下动脉粥样硬化的发病率倍增,但其发病机制至今不明。研究发现,一种主要在肾脏表达的基因Klotho,具有显著抗氧化应激和调节血管内皮功能的作用,其表达变化可能与尿毒症加速性动脉粥样硬化的发生、发展密切相关。为此,本... 详细信息

目的尿毒症状态下动脉粥样硬化的发病率倍增,但其发病机制至今不明。研究发现,一种主要在肾脏表达的基因Klotho,具有显著抗氧化应激和调节血管内皮功能的作用,其表达变化可能与尿毒症加速性动脉粥样硬化的发生、发展密切相关。为此,本研究利用apoE-/-小鼠构建尿毒症加速性动脉粥样硬化模型,分析并明确Klotho表达变化与尿毒症加速性动脉粥样硬化形成之间的关系。方法 6周龄雄性apoE-/-小鼠70只,分模型组和假手术组,每组35只;另35只6周龄雄性C57小鼠作为对照,均饲以高脂饲料。模型组、C57组小鼠行两步法行肾大部损毁术(首次行右肾皮质电烙术,2周后行左肾摘除术),建立尿毒症加速性动脉粥样硬化动物模型;假手术组施行肾被膜剥脱术。分别于术后2、4、6周末,检测血尿素(Urea)、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平。取小鼠主动脉弓部进行HE染色及病理检测;测定粥样硬化斑块面积及斑块面积分数。摘取小鼠残余肾组织,通过定量RTPCR和Western blot法检测klotho mRNA和蛋白表达变化。并通过ELISA法检测血清klotho蛋白浓度变化。针对小鼠血管内皮细胞进行体外培养后,施行尿毒症动脉粥样硬化小鼠血清处理和腺相关病毒转染的klotho基因干预,分别观察干预前后细胞状态。结果肾大部损毁术后6周,模型组尿素、TC、TG水平较假手术组分别增高了188.3%、40.8%、29.8%(P<0.01),主动脉粥样斑块面积较对照组增大了1.3倍(P<0.05),斑块面积分数也较对照组显著增高(P<0.01)。术后不同时间点,模型组小鼠肾组织klotho mRNA水平均较对照组明显减弱(P<0.05);klotho蛋白表达也较对照组明显减少(P<0.05)。同时,血清klotho蛋白浓度检测也显示,模型组小鼠较对照组明显减低(P<0.05)。体外培养的血管内皮细胞,klotho基因干预组较单纯尿毒症动脉粥样硬化小鼠血清处理组存活率明显增高(P<0.01)。结论利用apoE-/-模型小鼠,采取手术方式进行尿毒症干预可加速动脉粥样硬化的发展;在此状态下,klotho基因的表达明显减少。klotho基因体外干预可显著提高尿毒症动脉粥样硬化状态下小鼠内皮细胞的存活率。

关键词：尿毒症加速性动脉粥样硬化内皮细胞体外培养 Klotho 模型组

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Klotho基因在尿毒症加速性动脉粥样硬化小鼠模型上的表达变化

Klotho基因在尿毒症加速性动脉粥样硬化小鼠模型上的表达变化

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第十三次全国心血管病学术会议

作者：余洁邓梦扬赵景宏黄岚第三军医大学新桥医院全军心血管病研究所

目的利用apoE小鼠构建尿毒症加速性动脉粥样硬化模型,分析并明确Klotho表达变化与尿毒症加速性动脉粥样硬化形成之间的关系。方法6周龄雄性apoE小鼠70只,分模型组和假手术组,每组35只;另35只6周龄雄性C57小鼠作为对照,均饲以高脂饲料。... 详细信息

目的利用apoE小鼠构建尿毒症加速性动脉粥样硬化模型,分析并明确Klotho表达变化与尿毒症加速性动脉粥样硬化形成之间的关系。方法6周龄雄性apoE小鼠70只,分模型组和假手术组,每组35只;另35只6周龄雄性C57小鼠作为对照,均饲以高脂饲料。模型组、C57组小鼠行两步法行肾大部损毁术(首次行右肾皮质电烙术,2周后行左肾摘除

关键词：尿毒症加速性动脉粥样硬化 Klotho 小鼠模型

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Klotho基因在尿毒症加速性动脉粥样硬化小鼠模型上的表达变化

Klotho基因在尿毒症加速性动脉粥样硬化小鼠模型上的表达变化

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中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议

作者：余洁邓梦扬赵景宏黄岚第三军医大学新桥医院全军心血管病研究所

目的:尿毒症状态下动脉粥样硬化的发病机制至今不明,而klotho基因具有显著抗氧化应激和调节血管内皮功能的作用。本研究分析klotho表达变化与尿毒症加速性动脉粥样硬化形成的关系。方法:6周龄雄性apoE(-/-)小鼠分模型组和假手术组;另6... 详细信息

目的:尿毒症状态下动脉粥样硬化的发病机制至今不明,而klotho基因具有显著抗氧化应激和调节血管内皮功能的作用。本研究分析klotho表达变化与尿毒症加速性动脉粥样硬化形成的关系。方法:6周龄雄性apoE(-/-)小鼠分模型组和假手术组;另6周龄雄性C57小鼠作为对照,均饲以高脂饲料。模型组、C57组小鼠行两步法行肾大部损毁术,建立尿毒症加速性

关键词：尿毒症加速性动脉粥样硬化小鼠模型 Klotho

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尿毒症加速性动脉粥样硬化模型的建立和评价

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第三军医大学学报 2009年第19期31卷 1862-1865页

作者：余洁赵景宏邓梦扬黄岚第三军医大学新桥医院全军心血管病研究所重庆400037 第三军医大学新桥医院全军肾脏病中心重庆市肾病研究所重庆400037

目的探索短时间内建立尿毒症加速性动脉粥样硬化动物模型的方法,并评价其相关指标。方法6周龄雄性apoE-/-小鼠70只,分为模型组和假手术组,每组35只;另35只6周龄雄性C57小鼠作为对照组,均饲以高脂饲料。模型组、C57组小鼠行肾大部损毁术... 详细信息

目的探索短时间内建立尿毒症加速性动脉粥样硬化动物模型的方法,并评价其相关指标。方法6周龄雄性apoE-/-小鼠70只,分为模型组和假手术组,每组35只;另35只6周龄雄性C57小鼠作为对照组,均饲以高脂饲料。模型组、C57组小鼠行肾大部损毁术,建立尿毒症加速性动脉粥样硬化动物模型,假手术组施行假手术。分别于右肾皮质电烙术后0、2、4、6周和8周末,检测血尿素(Urea)、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平。同时取小鼠主动脉弓部进行病理检测;测定粥样硬化斑块面积及斑块面积分数。结果肾大部损毁术后6周,模型组尿素、TC、TG水平较假手术组分别增高188.3%、40.8%、29.8%(P<0.01),且主动脉粥样斑块面积较对照组增大了1.3倍(P<0.05),斑块面积分数显著增高(P<0.01)。结论尿毒症可显著加速动脉粥样硬化进程,利用apoE-/-小鼠行肾脏大部损毁术可以建立尿毒症加速性动脉粥样硬化动物模型。

关键词：尿毒症加速性动脉粥样硬化 apoE^-/-小鼠肾大部损毁术

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