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吉林大学学报（医学版） 2020年第4期46卷 739-744,I0002页

作者：贾答淇孔雯聪苏荣健杜晓媛贺武斌锦州医科大学基础医学院病理学教研室辽宁锦州121000 锦州医科大学基础医学院细胞生物学教研室辽宁锦州121000

目的:探讨巨噬细胞刺激1受体(MST1R)抑制剂BMS777607对肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响,阐明其可能的机制。方法:选择人肺癌A549细胞,不同浓度(1、5、10、15和20μmol·L^-1)BMS777607处理细胞48 h,同时设对照组,采用MTT法检测各组细... 详细信息

目的:探讨巨噬细胞刺激1受体(MST1R)抑制剂BMS777607对肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响,阐明其可能的机制。方法:选择人肺癌A549细胞,不同浓度(1、5、10、15和20μmol·L^-1)BMS777607处理细胞48 h,同时设对照组,采用MTT法检测各组细胞增殖率;不同浓度(1、5、10、15和20μmol·L^-1)BMS777607处理A549细胞14 d,同时设对照组,采用克隆形成实验观察各组细胞克隆形成情况并检测各组细胞增殖率;不同浓度(10和20μmol·L^-1)BMS777607处理A549细胞24 h,同时设对照组,采用EdU掺入法检测各组细胞中EdU阳性细胞率;不同浓度(1、5、10、15和20μmol·L^-1)BMS777607处理A549细胞48 h,同时设对照组,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率;应用Western blotting法检测各组细胞中蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)、聚酰苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)、活化型PARP(Cleaved-PARP)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Caspase 9)和活化型Caspase 9(Cleaved-Caspase 9)蛋白表达水平。结果:MTT实验,与对照组比较,不同浓度BMS777607组细胞增殖率明显降低(P<0.05或P<0.01),且呈浓度和时间依赖性。克隆形成实验,与对照组比较,10μmol·L^-1 BMS777607组细胞克隆形成数量明显减少,20μmol·L^-1 BMS777607组细胞几乎无克隆形成;与对照组比较,不同浓度BMS777607组细胞增殖率明显降低(P<0.05或P<0.01)。EdU掺入法实验,与对照组比较,10和20μmol·L^-1 BMS777607组细胞中EdU阳性细胞率均明显降低(P<0.05或P<0.01)。双染流式细胞术检测,与对照组比较,10、15和20μmol·L^-1 BMS777607组A549细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。Western blotting法检测,与对照组比较,不同浓度BMS777607组细胞中p-AKT和p-ERK蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Cleaved-PARP和Cleaved-Caspase 9蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:MST1R抑制剂BMS777607能够抑制肺癌A549细胞的增殖,并诱导其凋亡,其机制可能与其抑制p-AKT、p-ERK表达和促进PARP、Caspase 9表达有关。

关键词：巨噬细胞刺激1受体 BMS777607 肺肿瘤细胞凋亡磷酸化蛋白激酶B 聚酰苷二磷酸核糖聚合酶

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MST1R抑制剂BMS-777607对乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制和凋亡诱导作用

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吉林大学学报（医学版） 2020年第3期46卷 451-457页

作者：孔雯聪贺武斌苏荣健贾答淇谷艳娇王月杜晓媛锦州医科大学基础医学院病理学教研室辽宁锦州121000 锦州医科大学附属第一医院辽宁锦州121001 锦州医科大学基础医学院细胞生物学教研室辽宁锦州121000

目的:探讨巨噬细胞刺激1受体(MST1R)抑制剂BMS-777607对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响,并阐明其作用机制。方法:采用不同浓度BMS-777607处理乳腺癌MCF-7细胞,将细胞分为对照组(0μmol·L-1 BMS-777607组)和0.5、1.0、2.0、5.0、1... 详细信息

目的:探讨巨噬细胞刺激1受体(MST1R)抑制剂BMS-777607对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响,并阐明其作用机制。方法:采用不同浓度BMS-777607处理乳腺癌MCF-7细胞,将细胞分为对照组(0μmol·L-1 BMS-777607组)和0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、15.0及20.0μmol·L-1 BMS-777607组。采用MTT法检测各组MCF-7细胞增殖率,克隆形成实验检测各组MCF-7细胞存活率,EDU成像和EDU流式细胞术检测各组MCF-7细胞增殖率,Hoechst33342染色法检测各组MCF-7细胞凋亡形态表现,流式细胞术检测各组MCF-7细胞凋亡率,Western blotting法检测各组MCF-7细胞中ERK、p-ERK、Akt、p-Akt、PARP、Cleaved PARP、Bax、Caspase-3、Cleaved Caspase-3、Caspase-9和Cleaved Caspase-9蛋白表达水平。结果:MTT检测,与对照组比较,5和10μmol·L-1BMS-777607组MCF-7细胞增殖率升高(P<0.05或P<0.01)。克隆形成实验,与对照组比较,5和20μmol·L-1BMS-777607组MCF-7细胞存活率升高(P<0.05或P<0.01)。EDU掺入法检测,与对照组比较,10和20μmol·L-1BMS-777607组MCF-7细胞增殖率升高(P<0.05或P<0.01)。Hoechst33342荧光染色,对照组MCF-7细胞核淡染,10μmol·L-1BMS-777607组MCF-7细胞核少部分浓染、明亮,20μmol·L-1BMS-777607组MCF-7细胞核大部分浓染,细胞核染色质固缩、明亮。双染流式细胞术检测,与对照组比较,10和20μmol·L-1BMS-777607组MCF-7细胞凋亡率降低(P<0.05)。Western blotting法检测,与对照组比较,10、15和20μmol·L-1BMS-777607组MCF-7细胞中p-ERK和p-Akt蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01),PARP、Cleaved PARP、Bax、Cleaved Caspase-3及Cleaved Caspase-9蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论:MST1R抑制剂BMS-777607能够抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制与抑制p-ERK和p-Akt表达和促进Cleaved PARP、Bax、Cleaved Caspase-9及Cleaved Caspase-3表达有关。

关键词： BMS-777607 乳腺肿瘤细胞增殖细胞凋亡巨噬细胞刺激1受体

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MST1R抑制剂BMS777607对肺癌A549细胞增殖与凋亡的影响

MST1R抑制剂BMS777607对肺癌A549细胞增殖与凋亡的影响

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作者：贾答淇锦州医科大学

学位级别：硕士

目的本课题研究MST1R抑制剂BMS-777607对肺腺癌细胞A549增殖及凋亡的影响,并探讨MST1R作为临床治疗非小细胞肺癌的潜在靶点的可能性。方法应用不同浓度的BMS-777607(1、5、10、15、20μmol·L-1)处理人肺腺癌A549细胞48h,通过MTT实... 详细信息

目的本课题研究MST1R抑制剂BMS-777607对肺腺癌细胞A549增殖及凋亡的影响,并探讨MST1R作为临床治疗非小细胞肺癌的潜在靶点的可能性。方法应用不同浓度的BMS-777607(1、5、10、15、20μmol·L-1)处理人肺腺癌A549细胞48h,通过MTT实验检测BMS-777607对细胞增殖的影响;应用不同浓度的BMS-777607(1、5、10、15、20μmol·L-1)处理A549细胞14d,通过细胞克隆形成实验检测BMS-777607对细胞增殖的影响;应用不同浓度的BMS-777607(0、10、20μmol·L-1)处理A549细胞48h,通过Ed U掺入实验检测BMS-777607对细胞增殖的影响;应用不同浓度的BMS-777607(0、1、5、10、15、20μmol·L-1)处理A549细胞48h,通过流式细胞术实验检测BMS-777607对细胞凋亡的影响;应用免疫印迹法检测BMS-777607对p-AKT、p-ERK、PARP、casepase9蛋白表达水平的影响。结果本实验从增殖与凋亡两方面研究BMS-777607对A549细胞的影响。1.抑制细胞增殖方面:MTT实验结果显示,随着药物浓度增加和作用时间延长,BMS-777607对A549细胞的增殖抑制率增加。与对照组(0μmol·L-1)相比,药物浓度为10μmol·L-1且作用时间为72h时抑制效果最明显（P<0.01）;细胞克隆形成实验结果表明,BMS-777607明显抑制A549细胞的克隆形成,并且抑制率与药物浓度呈正相关（P<0.01）;Ed U掺入实验结果显示,与对照组(0μmol·L-1)相比,加药组(10μmol·L-1、20μmol·L-1)细胞增殖率均明显下降（P<0.05或P<0.01）。2.促进细胞凋亡方面:双染流式细胞术实验结果表明,加药组(1μmol·L-1、5μmol·L-1、10μmol·L-1、15μmol·L-1、20μmol·L-1)细胞凋亡比例随药物浓度增加而增加（P<0.05）;免疫印迹法结果显示随着BMS-777607药物浓度增加,p-AKT、p-ERK蛋白表达水平逐渐降低（P<0.05）,而PARP、casepase9（P<0.05）蛋白表达水平逐渐升高。结论MST1R抑制剂BMS-777607能够抑制肺腺癌A549细胞增殖并诱导细胞凋亡,可能与抑制p-AKT、p-ERK表达和促进PARP、casepase9表达有关。

关键词：巨噬细胞刺激1受体 BMS-777607 肺癌凋亡增殖

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