检索结果-内蒙古大学图书馆

吉林农业大学学报 2023年第5期45卷 547-552页

作者：刘增才孙婷婷孙健马依莎邹莉东北林业大学林学院哈尔滨150040 哈尔滨学院食品工程学院哈尔滨150086

为研究暴马桑黄(Sanghuangporus baumii)三萜合成途径的调控机制,对该途径中的关键酶——甲羟戊酸激酶(Mevalonate kinase,MVK)基因进行克隆及差异表达分析。以暴马桑黄cDNA为模板,采用同源克隆得到MVK基因cDNA序列全长,命名为SbMVK(登... 详细信息

为研究暴马桑黄(Sanghuangporus baumii)三萜合成途径的调控机制,对该途径中的关键酶——甲羟戊酸激酶(Mevalonate kinase,MVK)基因进行克隆及差异表达分析。以暴马桑黄cDNA为模板,采用同源克隆得到MVK基因cDNA序列全长,命名为SbMVK(登录号为MN793978)。生物信息学分析显示,SbMVK基因cDNA序列长1041 bp,编码346个氨基酸,蛋白分子量为36.6 ku,属于GHMP kinase超家族成员;系统进化树结果表明,暴马桑黄MVK蛋白和紫芝MVK蛋白同源性最高。采用qRT-PCR技术对暴马桑黄不同发育阶段SbMVK基因进行转录水平分析,并对相应阶段的三萜进行提取和含量测定,结果表明:暴马桑黄SbMVK基因转录水平和三萜含量均先升后降,并且二者变化趋势基本一致,推测SbMVK基因在暴马桑黄甲羟戊酸途径中参与三萜调控工作,此研究结果可为深入了解该基因在暴马桑黄三萜合成中的功能及获得高三萜产量的菌株提供理论依据。

关键词：暴马桑黄甲羟戊酸激酶三萜生物信息学分析差异表达分析

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鲤鱼诱导型一氧化氮合成酶全长cDNA克隆及其在外周血白细胞中的差异表达分析

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中国畜牧兽医 2016年第5期43卷 1133-1139页

作者：温振才曹津津卢强吉林大学人兽共患病研究所长春130000

试验旨在获得鲤鱼诱导型一氧化氮合成酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)cDNA全长序列,并以此为基础探讨在丝裂原刺激下外周血白细胞中iNOS的表达变化。以从鲤鱼正常外周血白细胞cDNA文库中获得的iNOS的EST序列为基础,采用基因... 详细信息

试验旨在获得鲤鱼诱导型一氧化氮合成酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)cDNA全长序列,并以此为基础探讨在丝裂原刺激下外周血白细胞中iNOS的表达变化。以从鲤鱼正常外周血白细胞cDNA文库中获得的iNOS的EST序列为基础,采用基因文库筛选和cDNA 5′末端快速扩增技术(5′-RACE)相结合的方法,成功扩增出鲤鱼iNOS cDNA全长序列,然后进行鲤鱼外周血白细胞原代培养,分成对照组和试验组,其中试验组分别为脂多糖(LPS,1.0μg/mL)刺激4、12h,刀豆蛋白A(ConA,1.0μg/mL)刺激4、24h,对照组为相同培养时间无丝裂原刺激的外周血白细胞,根据得到的iNOS cDNA全长序列和鲤鱼β-actin序列分别设计特异性引物,应用实时荧光定量PCR方法检测各组外周血白细胞中iNOS在mRNA水平上的表达情况并进行分析。序列分析结果显示,最后获得的cDNA片段共3 704bp,包含74bp的5′端非编码区,246bp的3′端非编码区,一个3 384bp的完整的开放阅读框(ORF),共编码1 127个氨基酸。序列同源性分析结果显示,该序列与鲫鱼iNOS基因同源性高达100%;实时荧光定量PCR结果显示,经LPS、ConA刺激的试验组外周血白细胞中iNOS表达量均升高,且短时间(4h)刺激的表达量高于长时间(LPS 12h;ConA 24h)刺激的表达量。综上所述,在LPS、ConA刺激过程中,iNOS在外周血白细胞中表达量均有上调,结果提示存在炎症反应的动态变化。

关键词：鲤鱼 iNOS cDNA克隆外周血白细胞差异表达分析

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基于转录组测序的花生籽粒不同发育时期油脂合成相关基因差异表达分析

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河南农业科学 2019年第7期48卷 24-37页

作者：陈玉梅李璐璐陈锦玲徐媛李惠敏秦新民广西师范大学生命科学学院

为研究花生籽粒不同发育时期油脂合成过程中基因的表达调控模式,对花后20、35、50、60d的花生籽粒(分别表示为HS20、HS35、HS50、HS60)进行转录组测序。通过对转录组测序数据进行分析,HS20、HS35、HS50、HS60样品的文库分别获得了109321... 详细信息

为研究花生籽粒不同发育时期油脂合成过程中基因的表达调控模式,对花后20、35、50、60d的花生籽粒(分别表示为HS20、HS35、HS50、HS60)进行转录组测序。通过对转录组测序数据进行分析,HS20、HS35、HS50、HS60样品的文库分别获得了109321068、106867224、109313082、107123540条Cleanreads。将得到的花生籽粒转录组数据按发育时期的先后顺序进行两两比对,HS20-vs-HS35、HS35-vs-HS50和HS50-vs-HS60的差异表达基因总数分别是25769、18403、12308个,其中上调表达基因分别占12.55%、62.92%、26.28%。对差异表达基因进行KEGGPathway分析,得到135条代谢通路,其中与油脂合成相关的有脂肪酸生物合成、不饱和脂肪酸生物合成、脂肪酸延长、脂肪酸代谢、花生四烯酸代谢等代谢通路。

关键词：花生转录组差异表达分析油脂合成相关基因

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基于转录组测序的向日葵对干旱胁迫及复水差异表达分析

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分子植物育种 2022年第1期20卷 38-48页

作者：赵雅杰包海柱胡树平赵轩微田振东石丰源覃一敏高聚林内蒙古农业大学农学院呼和浩特010019

为研究向日葵在不同程度干旱胁迫下基因的表达调控模式,对抗旱自交系(17062)和非抗旱自交系(167072)分别进行干旱胁迫0、4、8、12、16 d以及复水处理,本研究设置干旱胁迫第8天、第16天以及复水处理与各梯度的对照组进行转录组测序分析... 详细信息

为研究向日葵在不同程度干旱胁迫下基因的表达调控模式,对抗旱自交系(17062)和非抗旱自交系(167072)分别进行干旱胁迫0、4、8、12、16 d以及复水处理,本研究设置干旱胁迫第8天、第16天以及复水处理与各梯度的对照组进行转录组测序分析。共设有6个差异分组,经过测序共得到277.31G的Clean data,Q30碱基>91%,平均GC含量为45.37%。样品间进行差异基因筛选,得到的DEG数量分别为2365、2571、3149、2692、4593、4980。对各差异基因进行GO和KEGG功能注释,GO分析表明,6个比较组参与生物过程差异基因较多,参与细胞组分的次之,参与分子功能的较少;KEGG分析表明干旱胁迫对向日葵的植物激素信号转导、蔗糖与淀粉代谢、氨基酸代谢有较大的影响,对生理特性的测定显示可溶性糖和可溶性蛋白与正常供水相比具有上升趋势,表明在逆境胁迫下,植物会通过对基因的表达调控的调节来改变相关生理生化代谢途径。本研究通过对向日葵叶片进行转录组分析,对揭示抗旱分子机制及相关代谢途径具有重要意义。

关键词：向日葵(Helianthus annuus L.) 干旱胁迫转录组差异表达分析

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小尾寒羊溶菌酶基因的克隆与差异表达分析

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中国畜牧兽医 2013年第3期40卷 19-22页

作者：李闯徐云明唐峰邹德颖刘楠楠郭兴杨咏洁周玉柳增善卢士英鲁承任洪林吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病研究教育部重点实验室吉林长春130062 延边大学农学院动物医学系吉林延吉133002 辽宁医学院畜牧兽医学院辽宁锦州121001 延边大学农学院食品科学系吉林延吉133002

本试验从猪种布鲁氏菌S2疫苗株免疫雄性小尾寒羊构建的白细胞层SSH cDNA文库中筛选1段cDNA序列,经测序和BLAST同源性搜索比对发现其为溶菌酶重组片段,该片段大小为770bp,编码148个氨基酸残基,编码的蛋白质是一种天然抗感染物质,已提交Ge... 详细信息

本试验从猪种布鲁氏菌S2疫苗株免疫雄性小尾寒羊构建的白细胞层SSH cDNA文库中筛选1段cDNA序列,经测序和BLAST同源性搜索比对发现其为溶菌酶重组片段,该片段大小为770bp,编码148个氨基酸残基,编码的蛋白质是一种天然抗感染物质,已提交GenBank,登录号为JX263305。经荧光定量PCR分析,与正常组羊相比,在S2免疫14和30d的羊白细胞层中该溶菌酶基因表达轻微上调,但差异不显著(P>0.05);在免疫40d时恢复到正常水平。这也进一步说明溶菌酶是一种存在机体内必不可少的天然免疫因子,为布鲁氏菌病有效防控方面的研究奠定了基础。

关键词：白细胞层布鲁氏菌溶菌酶差异表达分析荧光定量PCR

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鲤鱼白细胞介素-1β全长cDNA的克隆·鉴定及其差异表达分析

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安徽农业科学 2011年第12期39卷 7301-7304页

作者：何江帅卢强李伟赵晓冯祥汝陈义龙吉林大学人兽共患病教育部重点实验室吉林长春130062 黑龙江生物科技职业学院黑龙江哈尔滨150025

[目的]进行鲤鱼白细胞介素-1β(IL-1β)全长cDNA的克隆、鉴定及其差异表达分析。[方法]利用DD-RTPCR方法获得差异表达cDNA片段,对有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库进行筛选,克隆了鲤鱼IL-1β的全长cDNA,并进行了序列分析和差... 详细信息

[目的]进行鲤鱼白细胞介素-1β(IL-1β)全长cDNA的克隆、鉴定及其差异表达分析。[方法]利用DD-RTPCR方法获得差异表达cDNA片段,对有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库进行筛选,克隆了鲤鱼IL-1β的全长cDNA,并进行了序列分析和差异表达分析。[结果]获得的阳性克隆含有1个大小为831 bp编码276个氨基酸的完整开放阅读框。聚类分析表明,鲤鱼IL-1β氨基酸序列与日本鲤鱼紧密聚为一支,氨基酸序列的同源性达95%,之后聚类顺序依次为鲫鱼、斑马鱼、猪、牛、马、人和小鼠。差异表达分析表明,经有丝分裂原刺激后前期(4 h)白细胞中IL-1β的表达量显著增大,但随着时间推移(12,24 h)并非一直较同期大,表达量总体趋势成峰形。[结论]为进一步研究IL-1β在体内的表达方式、功能特点和调控机理以及在炎症反应、应急反应和免疫应答的作用机制奠定了基础。

关键词：鲤鱼白细胞介素-1β cDNA克隆鉴定差异表达分析

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白粉病胁迫下甜瓜叶片Hsp70差异表达分析

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生物技术 2014年第5期24卷 51-54页

作者：巴雪丽刘婷婷钟俐新疆大学生命科学与技术学院新疆乌鲁木齐830046

目的:研究甜瓜叶片Hsp70基因在白粉病胁迫下的表达差异。方法:采用对白粉病抗性不同的2个甜瓜品种,Trizol法提取叶片总RNA,PCR技术克隆Hsp70基因核心片段,采用Semi-Q-RT-PCR技术,以Actin基因为内参基因,对白粉病胁迫下不同处理、不同品... 详细信息

目的:研究甜瓜叶片Hsp70基因在白粉病胁迫下的表达差异。方法:采用对白粉病抗性不同的2个甜瓜品种,Trizol法提取叶片总RNA,PCR技术克隆Hsp70基因核心片段,采用Semi-Q-RT-PCR技术,以Actin基因为内参基因,对白粉病胁迫下不同处理、不同品种的甜瓜叶片Hsp70基因的表达进行差异分析。结果:抗病品种MR-1与感病品种伽师瓜叶片中的Hsp70基因表达量均随着接种时间的延长逐渐减少,但MR-1接种白粉病1d后表达量稍有增加;且伽师瓜中Hsp70基因的表达差异较MR-1明显。结论:两种甜瓜叶片感染白粉病后,Hsp70表达量均减少。

关键词：白粉病甜瓜 Hsp70 基因克隆差异表达分析

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棉花黄萎病菌诱导陆地棉和野生棉差异表达分析及抗病相关基因克隆

棉花黄萎病菌诱导陆地棉和野生棉差异表达分析及抗病相关基因克隆

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作者：赵付安河南大学

学位级别：博士

黄萎病是棉花的主要病害,严重影响棉花产量和品质。抗病育种无疑是防治黄萎病最经济、最环保和最有效的手段,但由于对棉花抗病机理认识不清,加上现有栽培品种中抗源缺乏,棉花抗黄萎病育种一直难以突破。深入研究棉花抗黄萎病机理、克隆... 详细信息

黄萎病是棉花的主要病害,严重影响棉花产量和品质。抗病育种无疑是防治黄萎病最经济、最环保和最有效的手段,但由于对棉花抗病机理认识不清,加上现有栽培品种中抗源缺乏,棉花抗黄萎病育种一直难以突破。深入研究棉花抗黄萎病机理、克隆抗病基因仍是目前努力的方向。本研究从接菌诱导入手,采用SSH技术从转录组水平探讨了陆地棉基因的差异表达；采用2-DE技术从蛋白质组水平探讨了栽培棉近缘野生种瑟伯氏棉的蛋白差异表达,并以此为基础克隆了7个抗病相关基因。 (1)以中等致病性棉花黄萎病菌W菌系接种诱导我国棉花抗黄萎病标准品种豫棉21号,构建了正反两个SSH文库,富集筛选到抗病相关的早期诱导表达Unigene169个,其中上调表达68个,下调表达91个。提交到NCBI的Nr和Nt核酸数据库、Swissprot蛋白数据库比对注释,并通过GO、COG和KEGG数据库进行组份、功能和代谢路径聚类分析,共解析了152个基因；另外16个基因为未能注释,可能代表了新发现基因。结果表明：①这些基因分属18种生物学过程、8种细胞组份和5种分子功能,集中于19种生物学功能和53个代谢路径,说明陆地棉响应黄萎病菌胁迫,是多种类型不同功能基因通过多种代谢和过程,通过上调和下调表达协同作用,以达到抗耐目的；②差异表达基因主要参与代谢、细胞过程、对刺激的反应和生物过程调控,分别占基因总数的26.9%、24.7%、14%和12.9%,最少的是生长和免疫过程,均只有0.37%；从细胞组份看,涉及细胞或细胞结构最多占65.4%,其次是细胞器和细胞器结构占28.0%,然后是大分子复合体及内膜内壁,分别占3.9%和1.9%；从分子功能看,最多的是催化活性和结合活性,分别占50%、42.5%,其它如分子转导、运输和受体活性占7.5%。从生物学功能看,除了通用功能预测占13.2%外,信号转导、翻译和翻译后修饰与蛋白折叠互作最多,各占11.4%。从参与的代谢路径看,这些基因主要参与基础代谢和次生物质代谢,分别占注释基因的33.33%和27.03%；其它代谢均在10%以下。③发现有三个上调基因FH11(calmodulin-related protein), FH42(elongation factor Tu), FH67(heat shock protein90)参与植物与病原菌的互作。这一结果提示钙信号介导诱导结构抗性、乙烯信号介导抗病和未知R介导抗病是陆地棉21号抗黄萎病的三条可能的途径。 (2)接菌诱导,采用双向电泳(2-DE)和串联飞行质谱(MALDI-TOF-MS)联用技术,鉴定到瑟伯氏棉57个上调表达差异蛋白点,代表了51个已知同源蛋白,占总蛋白点的11%。这些蛋白参与抗病抗逆、转录调控、蛋白质加工与降解、光合作用、产能和基础代谢等过程,表明瑟伯氏棉抗病性是多种基因协同作用的综合效应；同时,5个TIR-NBS-LRR抗病蛋白类似物集中上调表达,提示R基因在瑟伯氏棉抗黄萎病中可能起主导作用。 (3)克隆了两个陆地棉结构抗性基因GhDIR和GhSUMO。前者cDNA全长为768bp,开放读框525bp,编码175个氨基酸的蛋白,含有典型的dirigent-like结构域；系统进化分析表明,该基因与海岛棉的同源序列表现了最高的相似性；后者编码区全长为393bp,编码130个氨基酸的小蛋白,蛋白序列分析表明,该蛋白具有保守泛素结构域和C端双Gly的断裂/连接位点,以及保守的疏水表面和Ulp1-Smt3互作位点。系统进化分析表明,该蛋白与蓖麻的同源序列表现了最高的相似性。两基因均无内含子,均受黄萎病菌诱导表达。两个基因的克隆,为进一步研究陆地棉的诱导结构抗性机理奠定了基础。 (4)克隆了瑟伯氏棉根的GPIP基因,全长1165pb,开放阅读框1095pb,编码364个氨基酸残基。分析表明,该蛋白属LRR蛋白超家族,有一个信号肽和跨膜区,应属分泌型受体蛋白。基因组PCR表明,该基因无内含子。系统分析表明,该蛋白与高丽参(Panax ginseng)进化关系近而与陆地棉和海岛棉较远。定量结果显示,该基因在瑟伯氏棉根中接菌20小时,可诱导表达。 (5)克隆了瑟伯氏棉根的四个TIR-NBS-LRR类抗病基因类似物的cDNA全长,分别命名为ThTNLR1、ThTNLR2、ThTNLR3和ThTNLR4,长度分别为3149bp、2011bp、1379bp和4683bp。序列分析表明,均含有抗病相关的TIR、P-loop、Kinase-2和LRR等结构域。与已知同类抗病基因构建系统树,发现四者与烟草抗病毒基因N关系最接近,而与拟南芥的RPP系列基因和CS1基因较远。定量分析表明,四者在瑟伯氏棉根中,均受黄萎病菌诱导表达,其中前两个基因20小时诱导上调表达,而后两个基因

关键词：大丽轮枝菌陆地棉瑟伯氏棉差异表达分析基因克隆

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杀鱼爱德华氏菌侵染小鼠巨噬细胞的转录组差异表达分析

杀鱼爱德华氏菌侵染小鼠巨噬细胞的转录组差异表达分析

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作者：姜衡山东农业大学

学位级别：硕士

杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida)是水产养殖中重要的致病菌,感染宿主范围广泛,能够引发二十多种鱼类感染相关疾病,给水产养殖行业造成巨大的经济损失。此外,还能引发两栖类、爬行类甚至哺乳类动物患病。前期研究发现,岩藻糖信... 详细信息

杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida)是水产养殖中重要的致病菌,感染宿主范围广泛,能够引发二十多种鱼类感染相关疾病,给水产养殖行业造成巨大的经济损失。此外,还能引发两栖类、爬行类甚至哺乳类动物患病。前期研究发现,岩藻糖信号调节FusKR双组分系统,调节Ⅲ型分泌系统(T3SS)等毒力因子的转录、表达,在细菌定植宿主细胞及细菌致病性等方面具有重要作用,但其关键基因fucP在感染过程的作用不明确。因此,本研究通过杀鱼爱德华氏菌野毒株EIB202和缺失株△fucP株侵染小鼠巨噬细胞,通过转录组测序方法并结合相关的生物信息学分析方法,对其转录组差异表达进行分析,明确与免疫相关的信号通路的功能变化和基因fucp在感染过程中的具体作用。转录组分析结果显示:过滤后的reads数(Total Clean Reads),对照组组为24115618,EIB202组为24111407,△fucP组为24114873,一共检测到16085个基因。野毒株EIB202与对照组相比,共筛选出2610个差异表达基因,其中980个上调基因,1630个下调基因;缺失株△fucP与对照组相比,共筛选出2994个差异基因,其中1106个上调基因,1888个下调基因。缺失株△fucP与野毒株EIB202相比,差异表达基因共66个,上调基因有47个,下调基因19个。GO功能分析结果:差异表达基因被注释到三大分类,其中,生物过程类中细胞过程、生物调节、代谢过程、刺激反应等差异表达基因数量占比较大。细胞组分类,在细胞组分、细胞、细胞器、细胞膜等方面差异表达基因数量较多。分子功能类中,在催化活性、结合过程中差异表达基因数量较多。Pathway分析结果:野毒株EIB202组,2610个差异表达基因富集在44条通路上,其中4条细胞过程有关,3条与环境信息处理有关,4条与遗传信息相关,11条与人类疾病相关,12条与代谢过程相关,10条与有机系统相关。其中,信号转导系统(Signal Transduction)通路、癌症通路(Cancers:Overview)、免疫系统(Immune system)通路中差异表达基因数量较多。缺失株△fucP组,2994个差异基因在通路上的富集结果与野毒株EIB202组基本相同。在野毒株EIB202组和缺失株△fucP组中,上调的差异表达基因数量较多的是结节样受体信号通路和细胞因子受体相互作用通路,下调的差异表达基因数量较多的是恶性肿瘤通路。缺失株△fucP与野毒株202对比发现,66个差异表达基因富集在27条通路上,其中3条细胞过程有关,2条与环境信息处理有关,2条与遗传信息相关,11条与人类疾病相关,5条与代谢过程相关,4条与有机系统相关。其中,富集通路上的结节样受体信号通路(NOD-like receptor signaling pathway)差异表达基因数量最多,并且在肿瘤坏死因子通路(TNF singnaling pathway)、碳代谢通路(carbon metabolism)、氨基酸的生物合成(biosynthesis 0f amino acids)、赖氨酸(lysine metabolism)、丙氨酸、天门冬氨酸的新陈代谢(Alanine,aspartete and glutamate metabolism)、三羧酸循环(citrate cycle)、萜类化合物的生物合成(terpenoid backbone biosynthesis)富集通路中差异表达基因上调。

关键词：杀鱼爱德华氏菌 fucP 巨噬细胞转录组测序差异表达分析

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鲤鱼iNOS全长cDNA的获得及在感染条件下的差异表达分析

鲤鱼iNOS全长cDNA的获得及在感染条件下的差异表达分析

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作者：温振才吉林大学

学位级别：硕士

一氧化氮是一种多功能的气态生物信使,由多种细胞或组织产生,它可以降低甚至杀灭感染因子,而过量的一氧化氮又会造成机体组织损伤,加快炎症进程,诱导型一氧化氮合成酶(i NOS)是合成一氧化氮分子的关键限速酶,因此掌握i NOS的作用机制从... 详细信息

一氧化氮是一种多功能的气态生物信使,由多种细胞或组织产生,它可以降低甚至杀灭感染因子,而过量的一氧化氮又会造成机体组织损伤,加快炎症进程,诱导型一氧化氮合成酶(i NOS)是合成一氧化氮分子的关键限速酶,因此掌握i NOS的作用机制从而对其调控显得至关重要。实验旨在获得i NOS的全长c DNA序列,为进一步利用RT-PCR、Northernblot等方法研究i NOS蛋白在鲤鱼中的调节机制奠定基础,并利用荧光定量技术检测i NOS在体内体外受到外来刺激后的表达变化情况,以及其表达是否有组织特异性。实验目的:获得鲤鱼诱导型一氧化氮合成酶c DNA全长序列,并通过体内体外实验探究i NOS在刺激因子刺激下的表达变化及其组织特异性表达规律;实验方法:以鲤鱼外周血白细胞c DNA文库中获得的i NOS的EST序列为基础,采用文库筛选和c DNA 5’末端快速扩增技术(5’-RACE)相结合的方法,获得鲤i NOS c DNA全长序列,体外实验用脂多糖(LPS,1.0μg/m L)刺激原代培养的外周血白细胞4 h、12 h,刀豆蛋白A(Con A,1.0μg/m L)刺激4 h、24 h,提取外周血白细胞总RNA;体内实验分别用嗜水气单胞菌天然鞭毛蛋白、重组鞭毛蛋白fla A和fla B刺激鲤鱼4 h、12 h,提取头肾总RNA;并用嗜水气单胞菌感染鲤鱼4 h后提取心、肝、脾、肌、肾、鳃和脑的总RNA,应用半定量反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测i NOS在各组织(细胞)中m RNA水平上的表达情况并进行分析。结果:i NOS的全长c DNA片段共3 704 bp,包含74 bp的5'端非编码区,246 bp的3'端非编码区,开放阅读框从75 bp到3 458 bp位置,长度为3 384 bp,编码1 127个氨基酸。序列同源性表明,该序列与鲫鱼的i NOS基因同源性高达94%;RT-PCR结果表明,经LPS、Con A刺激4 h的白细胞中i NOS表达量均升高,随着刺激时间延长(12 h、24 h)表达量有所降低,并不随时间的推移持续增加;经天然鞭毛蛋白和重组鞭毛蛋白fla A、fla B刺激4 h和12 h,i NOS表达量变化趋势一致,各组头肾中i NOS表达量均升高,但4 h升高得更明显;用嗜水气单胞菌感染鲤鱼后,发现i NOS在被检测组织中均有表达,其中在头肾中表达量最高,其次依次为鳃、脑、脾脏、肝脏,在心脏和肌肉中表达量最低。对i NOS的表达调控网络的研究,将为进一步探明鱼类对外来病原刺激的免疫应答机制提供实验材料,可以为更彻底地了解鱼类的先天性免疫机制奠定重要的基础。

关键词：鲤鱼诱导型一氧化氮合成酶 cDNA克隆嗜水气单胞菌差异表达分析

来源：评论

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