检索结果-内蒙古大学图书馆

枳壳甘草汤对椎间盘退变模型大鼠尾椎间盘髓核组织细胞凋亡及Hippo-YAP/TAZ信号通路的影响

中医杂志 2025年第5期66卷 509-517页

作者：朱在师黄泽灵陈俊名徐波陆斌杰陈华段星星李宇卫沈晓峰南京中医药大学附属苏州市中医医院江苏省苏州市215009 苏州市吴门医派研究院骨伤研究所

目的基于河马(Hippo)-Yes相关蛋白(YAP)/带有pdz结合基序的转录共激活因子(TAZ)信号通路探讨吴门枳壳甘草汤延缓椎间盘退变的可能作用机制。方法50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、枳壳甘草汤低剂量组、枳壳甘草汤高剂量组、枳壳甘... 详细信息

目的基于河马(Hippo)-Yes相关蛋白(YAP)/带有pdz结合基序的转录共激活因子(TAZ)信号通路探讨吴门枳壳甘草汤延缓椎间盘退变的可能作用机制。方法50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、枳壳甘草汤低剂量组、枳壳甘草汤高剂量组、枳壳甘草汤高剂量+抑制剂组,每组10只。假手术组大鼠采用21G针头在尾部Co6/7/8节段穿刺皮肤和肌肉(深度约为2 mm),不损伤椎间盘,其余各组大鼠在尾部Co6/7/8节段用21G针头穿刺尾椎间盘5 mm建立椎间盘退变大鼠模型。造模1周后,枳壳甘草汤低、高剂量组分别予6.24、12.24 g/(kg·d)枳壳甘草汤灌胃,枳壳甘草汤高剂量+抑制剂组大鼠给予12.24 g/(kg·d)枳壳甘草汤灌胃后,按10 mg/kg腹腔注射YAP/TAZ抑制剂Verteporfin,假手术组与模型组大鼠予5 ml/(kg·d)生理盐水灌胃。灌胃每日1次,腹腔注射隔日1次。各组均连续干预4周后,采用HE染色、番红O-固绿染色及甲苯胺蓝染色观察大鼠尾椎间盘病理改变;免疫组化法检测椎间盘髓核组织聚集蛋白聚糖(Aggrecan)、基质金属蛋白酶3(MMP3)表达;Tunel荧光染色检测髓核组织细胞凋亡,计算凋亡率;Western blot法检测髓核组织中Hippo-YAP/TAZ信号通路[包括YAP、磷酸化Yes相关蛋白(p-YAP)、磷酸化20样激酶1/2(p-MST1/2)、带有pdz结合基序的磷酸化转录共激活因子(p-TAZ)]及凋亡相关蛋白[包括剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Cleaved Caspase 3)、肿瘤基因P53(P53)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)]水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠椎间盘发生明显退行性改变,椎间盘髓核组织Aggrecan、Bcl-2、YAP蛋白水平降低,p-MST1/2、p-YAP、p-TAZ、P53、Bax、Cleaved Caspase 3、MMP3蛋白水平及细胞凋亡率均上升(P<0.01)。与模型组比较,各药物干预组椎间盘退变均得到一定恢复,Aggrecan、Bcl-2、YAP蛋白水平均升高,p-MST1/2、p-YAP、p-TAZ、P53、Bax、Cleaved Caspase 3、MMP3蛋白水平及细胞凋亡率均降低(P<0.05或P<0.01)。与枳壳甘草汤低剂量组比较,枳壳甘草汤高剂量组大鼠椎间盘退变恢复更显著,p-MST1/2、p-YAP、p-TAZ、P53、Bax、Cleaved Caspase 3、MMP3蛋白水平及细胞凋亡率降低,Aggrecan、Bcl-2、YAP蛋白水平升高(P<0.05或P<0.01)。与枳壳甘草汤高剂量组比较,枳壳甘草汤高剂量+抑制剂组大鼠椎间盘退变恢复程度降低,p-MST1/2、p-YAP、p-TAZ、P53、Bax、Cleaved Caspase 3、MMP3蛋白水平及细胞凋亡率升高,Aggrecan、Bcl-2、YAP蛋白水平降低(P<0.05或P<0.01)。结论枳壳甘草汤可能通过抑制椎间盘髓核组织YAP磷酸化,维持Hippo-YAP/TAZ信号通路功能,降低髓核细胞凋亡,从而延缓椎间盘退变。

关键词：椎间盘退变细胞凋亡 Yes相关蛋白带有pdz结合基序的转录共激活因子枳壳甘草汤

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