检索结果-内蒙古大学图书馆

干细胞标记及示踪技术的应用研究

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基础医学与临床 2015年第4期35卷 528-530页

作者：牛艳君李莹白仲添吕青芳严祥兰州大学第一医院老年病科甘肃兰州740000 兰州大学第一医院甘肃省生物治疗与再生医学重点实验室甘肃兰州740000 兰州大学第一医院肿瘤内科甘肃兰州740000

在基础研究及临床应用中,对干细胞迁徙路径的标记及在靶病灶的作用研究已成为重点。采用创新性、突破性的干细胞标记及示踪技术,了解干细胞在机体内的迁徙途径,监测和追踪干细胞移植治疗后的效果,对其在动物实验和临床应用方面都起到良... 详细信息

在基础研究及临床应用中,对干细胞迁徙路径的标记及在靶病灶的作用研究已成为重点。采用创新性、突破性的干细胞标记及示踪技术,了解干细胞在机体内的迁徙途径,监测和追踪干细胞移植治疗后的效果,对其在动物实验和临床应用方面都起到良好的促进作用。

关键词：干细胞标记示踪迁徙途径

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干细胞标记物及上皮细胞间质转化相关因子在肺硬化性血管瘤中的表达及意义

干细胞标记物及上皮细胞间质转化相关因子在肺硬化性血管瘤中的表...

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作者：林旭勇中国医科大学

学位级别：硕士

前言肺硬化性血管瘤(pulmonary sclerosing hemangioma, PSH)是一种迄今未能确定其组织来源及性质的少见肺肿瘤。PSH组织形态多样,由实性区、乳头区、血管瘤样区和硬化区四种结构构成,并有不同程度的相互移行。但肿瘤细胞主要有两种：... 详细信息

前言肺硬化性血管瘤(pulmonary sclerosing hemangioma, PSH)是一种迄今未能确定其组织来源及性质的少见肺肿瘤。PSH组织形态多样,由实性区、乳头区、血管瘤样区和硬化区四种结构构成,并有不同程度的相互移行。但肿瘤细胞主要有两种：一种是呈实性或弥漫成片的多角形间质样瘤细胞,另一种是被覆在乳头表面、血管瘤样区间隙及实变区裂隙内的细胞,多呈矮立方,单层排列。而TTF-1(甲状腺转录因子-1)的共同表达以及通过对两种细胞进行克隆分析,发现两种细胞具有相同的克隆,并且都来源于上皮细胞,且多角形细胞分化不成熟。虽然大多数学者认为该肿瘤有温和的临床经过,是一种“良性肿瘤”,但具有侵袭转移及复发的报道。。另外多角形细胞为什么会形成间质细胞一样的排列方式呢?为什么在正常组织中不存在与其相对应的细胞呢? 上皮细胞间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)指是上皮细胞在与周围间质的相互作用过程中逐渐获得了某些间质细胞所特有的性状的现象。它不仅存在于胚胎发生过程中,同时也存在于多种炎性或肿瘤性病变中。其主要特征为上皮细胞极性的丧失及其间质特性的获得。那么间质中的多角细胞是否也发生这种转变呢? 本研究首先采检测PSH两种细胞中干细胞标记以及与肺发育相关蛋白的表达情况,来进一步证明其来源和性质,然后又检测了EMT相关因子的表达情况,来探讨PSH的形成机制。材料与方法一、材料收集中国医科大学第一临床学院以及天津市肿瘤医院的肺硬化性血管瘤35例。其中女性26例,男性9例,X-线胸片显示均为孤立性肿块,多位于肺的周边,直径0.6-5cm,未发现多发病灶及转移病例。二、免疫组织化学染色鼠抗人单克隆抗体Notch3, Notch4, Stro-1, p75NGFR, Nestin购自美国Abcam公司,鼠抗人单克隆抗体Axin购自美国Santa公司。即用型鼠抗人单克隆C-myc, TTF-1, TGF-β1, E-cadherin,β-catenin, Vimentin, Actin (sm), MMP2以及MMP9,S-P染色试剂盒及DAB显色液均购自福州迈新公司。将蜡块标本制成4μm连续切片,经脱蜡,脱苯,水化后进行HE和链菌素抗生物素蛋白-过氧化物酶(S-P法)免疫组化染色。三、激光捕获目的细胞、RNA提取将18例两种细胞均较明显的PSH蜡块标本制成6μm连续切片,铺在有薄聚乙烯箔片的载玻片上,脱蜡,染色,然后梯度酒精,二甲苯透明10min。切片晾干,放置在LCM(LEICA LMD6000)系统的显微镜的载物台上。定位光束标定被选细胞,发射激光束,选定的目标细胞群即会落入加有细胞溶解缓冲液的EP管管盖中,分别捕获PSH组织中表面立方细胞和多角形细胞。每份标本分别捕获10000以上个目的细胞。然后将捕获的目的细胞进行提取RNA。四、RT-PCR分析将提取到多角形细胞和表面立方细胞的RNA分别进行RT-PCR。RT-PCR产物于1.5%琼脂糖凝胶电泳,用自动电泳凝胶成像分析系统(Biolmaging Systems),测定扩增带灰度值,以β-actin为内参照,得到mRNA的相对表达量。五、统计分析各组资料利用SPSS for Window 13.0进行统计分析。p＜0.05有统计学意义。结果一、免疫组化结果 1、干细胞标物Stro-1,p75NGFR及Nestin未见明显表达,Notch3和Notch4在多角形细胞中存在着较高的阳性表达。所有35例PSH中两种细胞均未见以上标记物的阳性表达,Notch3和Notch4在多角形细胞的表达远高于表面立方细胞的表达(P＜0.05)。 2、Axin及C-myc的表达情况 35例PSH中Axin主要在立方型细胞中呈阳性表达,多角形细胞仅见少数细胞呈阳性表达。而C-myc在多角形细胞中的表达明显强于立方细胞的表达(P＜0.05)。 3、E-cadherin、β-catenin的表达情况 35例PSH的两种细胞均呈TTF-1强阳性表达,表面立方细胞中,E-cadherin、β-catenin均呈胞膜强阳性表达,β-catenin在胞膜阳性表达的同时伴有部分胞浆表达。而在多角形细胞中,E-cadherin胞膜不表达或弱阳性表达;β-catenin胞膜大部分表达缺失伴部分胞浆表达 4、其他标记的表达情况间质细胞标记Vimentin主要在多角形细胞中表达,少量在表

关键词：肺硬化性血管瘤激光捕获显微切割(LCM) 干细胞标记上皮细胞间质转化

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iASPP与Sertad1的相互作用对白血病细胞增殖和凋亡的调控;N--cadherin和Tie2作为白血病干细胞标记的研究

iASPP与Sertad1的相互作用对白血病细胞增殖和凋亡的调控;N--cadh...

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作者：邱少伟北京协和医学院中国医学科学院北京协和医学院清华大学医学部中国医学科学院

学位级别：博士

研究目的:iASPP是P53基因的重要拮抗因子，目前已发现在白血病细胞中高表达，可抑制白血病细胞凋亡。我们通过酵母双杂交技术发现iASPP能够与Sertad1(SEI)结合，因此我们针对iASPP与Sertad1相互作用在急性白血病增殖和凋亡中的作用进行... 详细信息

研究目的:iASPP是P53基因的重要拮抗因子，目前已发现在白血病细胞中高表达，可抑制白血病细胞凋亡。我们通过酵母双杂交技术发现iASPP能够与Sertad1(SEI)结合，因此我们针对iASPP与Sertad1相互作用在急性白血病增殖和凋亡中的作用进行研究。\n 研究方法:采用免疫共沉淀及荧光共聚焦验证iASPP与Sertad1在不同细胞系中的结合，确定结合的结构域及亚细胞定位;在不同白血病细胞中高表达iASPP、Sertad1及两者共同高表达，筛选单克隆细胞，建立稳定高表达上述基因的细胞系;MTT法检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡;Western blot方法检测各单克隆细胞P53靶蛋白的变化。\n 研究结果:***能够和Sertad1结合，定位于细胞浆近核膜的位置。iASPP可与Sertad1中CA、PB、C端三段结构域结合，唯独与S区域不结合。2.在K562细胞中过表达Sertad1，可以引起iASPP蛋白表达上调，且呈时间依赖性，但干扰Sertad1并不影响iASPP的蛋白表达。3.K562细胞中过表达iASPP，致细胞增殖加快，细胞周期被阻滞于G2/M期，抵抗化疗药物引起的凋亡能力明显增强，当iASPP和Sertad1同时高表达后细胞增殖明显减慢，细胞周期阻滞于G2/M期，抗凋亡能力下降，此时iASPP蛋白和Sertad1蛋白共定位发生改变，主要位于胞浆中。4.高表达iASPP的K562(K562-iASPPhi)细胞经过化疗药物处理后Puma蛋白表达量逐渐上升，且呈浓度和时间依赖性。\n 研究结论: K562细胞中P53蛋白虽然为突变型，但仍然具有一定的生物学功能，正常情况下iASPP和Sertad1均能在胞浆和胞核中穿梭，过表达的iASPP可以进入胞核，通过与P53结合，激活Puma蛋白，发挥抗凋亡、促进增殖的功能。但当iASPP和Sertad1同时高表达时，Sertad1能够通过在胞浆近核膜的位置结合iASPP，并将其阻滞在胞核外，最终达到抑制iASPP的功能。

关键词： iASPP过表达 P53基因急性白血病凋亡调控细胞增殖干细胞标记

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MR干细胞标记在替莫唑胺干预脑胶质瘤血管生成及治疗研究中的应用

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中国生化药物杂志 2015年第12期35卷 9-12页

作者：陈伟志杨重恒辽宁医学院附属第一医院放射科辽宁锦州121001 辽宁医学院附属第一医院口腔科辽宁锦州121001

目的探究MR干细胞标记在替莫唑胺干预脑胶质瘤血管生成及治疗中的作用。方法通过C6胶质瘤细胞株静脉注射建立大鼠脑胶质瘤的动物模型,采用MR干细胞标记技术以及免疫组化观测肿瘤生长及新生血管的生成,对比影像学与免疫组化检测结果,进行... 详细信息

目的探究MR干细胞标记在替莫唑胺干预脑胶质瘤血管生成及治疗中的作用。方法通过C6胶质瘤细胞株静脉注射建立大鼠脑胶质瘤的动物模型,采用MR干细胞标记技术以及免疫组化观测肿瘤生长及新生血管的生成,对比影像学与免疫组化检测结果,进行2者间的相关性分析。结果本研究成功运用MR扫描示踪SPIO-PLL共同标记的骨髓干细胞,动态检测了脑胶质瘤模型大鼠脑内肿瘤血管生成情况。影像学与免疫组化相关性分析结果显示,2者呈现良好的负相关性(P<0.05)。结论 SPIO对于骨髓干细胞的磁性标记标记和MR示踪技术是活体动态观察脑胶质瘤血管生成的有效手段。

关键词： MR 干细胞标记脑胶质瘤血管生成

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铁羧葡胺和精蛋白加速干细胞标记

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国际医学放射学杂志 2010年第3期 293-294页

作者：解敬慧 D.M. Golovko T. Henning J.S. Bauer M. Settles T. Frenzel A. Mayerhofer Contrast Agent Research Group Department of Radiology UCSF Medical Center

摘要目的本研究用铁羧葡胺和精蛋白标记干细胞,旨在建立和表征一种临床实用的、快速而有效的干细胞标记方法,并能达

关键词：干细胞标记精蛋白间质干细胞铁羧葡胺对比剂

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近红外荧光成像技术在干细胞标记示踪应用的研究进展

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军医进修学院学报 2012年第11期33卷 1191-1192页

作者：曹鎏胡荣冯华解放军第三军医大学学员旅17队重庆400038 解放军西南医院神经外科重庆400038

干细胞(stem cell,SC)是一类具有自我复制能力的多潜能细胞,在一定条件下可以分化成多种功能细胞,让人们看到了治愈帕金森病、脊髓损伤、心脏病、I型糖尿病以及肿瘤等难治性疾病的希望。在干细胞治疗研究过程中如何对移植后的干细胞进... 详细信息

干细胞(stem cell,SC)是一类具有自我复制能力的多潜能细胞,在一定条件下可以分化成多种功能细胞,让人们看到了治愈帕金森病、脊髓损伤、心脏病、I型糖尿病以及肿瘤等难治性疾病的希望。在干细胞治疗研究过程中如何对移植后的干细胞进行非侵入性的实时观察成为了实验及临床研究中一个棘手的难题。近红外(near infrared,NIR)荧光成像技术以其生物穿透能力强、光子量探测域值低、检测灵敏度高、操作相对简便、利于手术中实时成像等特点,目前已应用于干细胞标记示踪。

关键词：干细胞标记近红外荧光成像示踪

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干细胞的磁性标记研究进展

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科学通报 2017年第20期62卷 2301-2311页

作者：叶德文王琪炜张卫国孙剑飞顾宁东南大学生物科学与医学工程学院南京210096

干细胞在组织修复与再生医学中具有广阔的前景,但是干细胞体内移植后分布、活性、分化方向、作用机制等认知的缺乏成为制约干细胞治疗发展的主要瓶颈,因此,干细胞体内示踪技术的发展对于解决上述问题将起到至关重要的作用.目前利用磁性... 详细信息

干细胞在组织修复与再生医学中具有广阔的前景,但是干细胞体内移植后分布、活性、分化方向、作用机制等认知的缺乏成为制约干细胞治疗发展的主要瓶颈,因此,干细胞体内示踪技术的发展对于解决上述问题将起到至关重要的作用.目前利用磁性物质对干细胞进行标记后,结合磁共振成像技术(magnetic resonance imaging,MRI)可以实现体外无创、安全、持续、动态的示踪观察,示踪的效果取决于细胞内所携带磁性物质的含量、不同的磁性标记方式、细胞活性的维持.本文将对干细胞磁性标记的不同方式、磁性物质的胞内代谢及对干细胞的影响等研究进展进行系统综述,并结合现有的标记技术对如何提高干细胞磁性标记效率进行展望.

关键词：干细胞示踪干细胞标记磁共振成像磁性氧化铁纳米颗粒胞内铁代谢

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一种高灵敏的磁共振纳米探针及其在siRNA输送和干细胞标记的应用

一种高灵敏的磁共振纳米探针及其在siRNA输送和干细胞标记的应用

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作者：王勇张巧云黄偲 510632 广东省广州市天河区黄埔大道西601号

本发明属于高分子化学与生物医学工程领域，公开了一种高灵敏的磁共振纳米探针及其在siRNA输送和干细胞标记的应用。由PEG‑PAsp(DMA‑AEE)负载超顺磁四氧化三铁得到。聚合物具有很好的生物相容性，可高效负载基因药物siRNA，同时能够在微... 详细信息

标准号: CN114887083B

本发明属于高分子化学与生物医学工程领域，公开了一种高灵敏的磁共振纳米探针及其在siRNA输送和干细胞标记的应用。由PEG‑PAsp(DMA‑AEE)负载超顺磁四氧化三铁得到。聚合物具有很好的生物相容性，可高效负载基因药物siRNA，同时能够在微酸(pH 5.5)环境中发生阳离子脱落，一方面快速、高效地释放负载的基因药物，发挥治疗作用；另一方面，引起聚合物与SPIO的分离，疏水的SPIO在胞内二次聚集，引发更强的集群磁共振增强效应，增加MR成像的敏感度。该MR可视化基因输送技术适用于体外干细胞的磁共振造影剂标记，对干细胞体内应用后的转归进行实时监测。

关键词：基因药物聚合物干细胞生物医学工程领域磁共振造影剂磁共振增强干细胞标记高分子化学生物相容性四氧化三铁基因输送纳米探针实时监测超顺磁磁共振可视化敏感度阳离子集群疏水体外应用灵敏体内释放治疗

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一种高灵敏的磁共振纳米探针及其在siRNA输送和干细胞标记的应用

一种高灵敏的磁共振纳米探针及其在siRNA输送和干细胞标记的应用

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作者：王勇张巧云黄偲 510632 广东省广州市天河区黄埔大道西601号

标准号: CN114887083A

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一种用于眼角膜移植的干细胞标记液附着标记装置

一种用于眼角膜移植的干细胞标记液附着标记装置

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作者：杜仪琴张万明王昌博 215200 江苏省苏州市吴江经济技术开发区顺风路两侧云创路1号厂房

本实用新型公开了一种用于眼角膜移植的干细胞标记液附着标记装置，其包括圆柱状的手柄组件及设置于手柄组件下部的标记组件，其特征在于：手柄组件包括有一用于放置标记液的圆柱状环形容器，容器内包括有一通孔，通孔内设置有开关组件... 详细信息

标准号: CN208081383U

本实用新型公开了一种用于眼角膜移植的干细胞标记液附着标记装置，其包括圆柱状的手柄组件及设置于手柄组件下部的标记组件，其特征在于：手柄组件包括有一用于放置标记液的圆柱状环形容器，容器内包括有一通孔，通孔内设置有开关组件，容器的底部包括有环形底座，标记组件包括有连接组件及设置于连接组件下部的标记盘，标记盘内连接有三条标记线且标记线均相交于标记盘的中心，标记盘的中心通过标记线连接有一连接套，连接套的上部设置有一“Y”形软管，软管连接开关组件，标记盘的外侧连接有一保护盘，保护盘呈中部向上凹陷的弧形且保护盘的外侧边缘均设为圆弧形倒角。

关键词：标记盘手柄组件保护盘标记线标记组件开关组件连接组件连接套本实用新型干细胞标记眼角膜移植圆弧形倒角圆柱状环形标记装置环形底座软管连接外侧边缘向上凹陷软管标记液内连接圆柱状附着通孔相交

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