检索结果-内蒙古大学图书馆

临床消化病杂志 2021年第6期33卷 383-388页

作者：黄雪芳郑小岚徐三平武汉科技大学附属天估医院消化内科湖北武汉430064 华中科技大学协和医院消化内科湖北武汉430022

[目的]通过建立小鼠胃癌模型,探讨幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白(Hp-NAP)对免疫细胞Th17/Treg的调节作用,以及是否通过影响其平衡来抑制胃癌的发展。[方法](1)18只6周龄SPF级正常雄性615系小鼠,随机分为健康对照组、胃癌阴性处理组(简... 详细信息

[目的]通过建立小鼠胃癌模型,探讨幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白(Hp-NAP)对免疫细胞Th17/Treg的调节作用,以及是否通过影响其平衡来抑制胃癌的发展。[方法](1)18只6周龄SPF级正常雄性615系小鼠,随机分为健康对照组、胃癌阴性处理组(简称胃癌组)、胃癌干预组(简称干预组)。胃癌组及干预组均于小鼠右下肢根部皮下注射7×10^(6)/μl mfc细胞200μl,干预组分别于第0、3、6、9、12天给予瘤旁注射0.4μg/μlHp-NAP 150μl,胃癌组于同一时间给予瘤旁注射150μl磷酸盐缓冲液,第14天处死小鼠并剥离肿瘤。(2)比较肿瘤的大小及检测瘤体内血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达情况。(3)流式细胞技术检测各组小鼠脾脏组织中Th17、Treg细胞的数量。(4)RT-PCR法检测瘤体组织中IL-17、ROR-γt、foxP3 mRNA表达情况。[结果](1)肿瘤蜡块标本组织切片苏木精-伊红染色可见大量核大深染并有核分裂像的癌细胞;干预组瘤体平均体积(0.291 cm^(3))较胃癌组(0.409 cm^(3))小,而且胃癌组有1例出现腹腔转移和血性腹水形成;干预组瘤体组织中VEGFmRNA表达及血管密度明显低于胃癌组(P<0.01)。(2)胃癌组脾脏组织中Th17、Treg细胞数明显高于健康对照组(P<0.05),干预组Th17细胞数量也明显高于胃癌组(P<0.05);而干预组与胃癌组脾脏组织中Treg细胞数无明显差异(P>0.05)。(3)干预组瘤体组织中IL-17、ROR-γt mRNA表达明显高于胃癌组(P<0.05,P<0.01),而foxP3 mRNA表达无明显差异(P>0.05)。(4)干预组瘤体组织中IL-17蛋白水平较胃癌组明显增高(P<0.05),而TGF-β表达无显著差异。[结论]Hp-NAP可能通过增加外周Th17细胞表达及肿瘤微环境中IL-17的浸润直接或间接抑制了胃癌的进展。

关键词：胃癌幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白 Th17/Treg细胞血管内皮生长因子

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幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白相关疾病预防及治疗研究进展

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实用临床医药杂志 2024年第1期28卷 129-132,144页

作者：冯富娟江晶晶高春邵慧娟于晓辉郑晓凤张久聪甘肃中医药大学第一临床医学院甘肃兰州730000 中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院消化内科甘肃兰州730050 兰州大学第二医院消化内科甘肃兰州730030

幽门螺杆菌(***)中性粒细胞激活蛋白(HP-NAP)是新近发现的***的主要毒力因子之一,几乎所有***菌株都有表达。HP-NAP被激活后,可刺激中性粒细胞、单核细胞、树突状细胞、肥大细胞和淋巴细胞,参与炎症的发展和组织损伤。本文对HP-NAP在相... 详细信息

幽门螺杆菌(***)中性粒细胞激活蛋白(HP-NAP)是新近发现的***的主要毒力因子之一,几乎所有***菌株都有表达。HP-NAP被激活后,可刺激中性粒细胞、单核细胞、树突状细胞、肥大细胞和淋巴细胞,参与炎症的发展和组织损伤。本文对HP-NAP在相关疾病的预防、治疗中的最新研究进展予以综述。

关键词：幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白菌株中性粒细胞疫苗

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重组幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白枯草芽孢抑制小鼠酪蛋白过敏的机制研究

重组幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白枯草芽孢抑制小鼠酪蛋白过敏的...

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作者：梁珠薇广州医科大学

学位级别：硕士

背景:牛奶过敏是最常见的食物过敏之一,酪蛋白(CAS)是牛奶最常见的致敏蛋白组分之一。幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白(HP-NAP)具免疫调节作用,能抑制Th2型免疫反应。霍乱毒素B亚单位(CTB)作为一种黏膜佐剂,能增强免疫耐受。枯草芽孢杆菌... 详细信息

背景:牛奶过敏是最常见的食物过敏之一,酪蛋白(CAS)是牛奶最常见的致敏蛋白组分之一。幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白(HP-NAP)具免疫调节作用,能抑制Th2型免疫反应。霍乱毒素B亚单位(CTB)作为一种黏膜佐剂,能增强免疫耐受。枯草芽孢杆菌常被用作口服输送载体。目的:本研究建立CAS诱导的食物过敏小鼠模型,探索口服重组NAP芽孢抑制CAS过敏的作用和机制。方法:复苏Cot C、Cot C-CTB、Cot C-NAP、Cot C-CTB-NAP/WB600重组枯草菌株,免疫荧光方法鉴定CTB或NAP重组蛋白在枯草芽孢的表面表达。使用1×10个重组芽孢灌胃BALB/c小鼠,在灌胃前和灌胃后的不同时间段收集小鼠粪便,接种于Ka NaLB平板上,用飞行质谱仪鉴定菌落,检测重组枯草芽孢在小鼠肠道的定植时长。小鼠被随机分为6组,分别为Na(?)ve组、PBS组、Cot C组、CTB组、NAP组、CTB-NAP组,每组6只。从第0天开始,除Na(?)ve组小鼠外,其余组小鼠首先通过皮下注射CAS致敏,并给予四次的口服基础激发,造成小鼠致敏状态,然后灌胃重组芽孢或PBS 6周,最后灌胃酪蛋白激发小鼠,评估过敏症状,检测肛温和体重的改变;收集粪便、血清,分别检测CAS特异性抗体s Ig A水平和Ig E、Ig G1、Ig G2a水平;收集血浆检测组胺含量;剪取空肠组织做病理切片和HE染色,观察肠道绒毛结构及嗜酸性粒细胞浸润情况;提取空肠组织蛋白,检测空肠组织Foxp3、TGFβ、TLR2、p-NFκB、NFκB、c-JUN的表达水平;培养脾细胞,检测IL-12、IFN-γ、IL-4、IL-13等细胞因子的分泌水平及CD4CD25Foxp3Tregs细胞的比例。提取小鼠骨髓细胞,并用粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)诱导成巨噬细胞(BMDMs),用灭活NAP重组芽孢刺激BMDMs,收集细胞培养上清检测IL-12、IL-6、IL-1β、IL-10、IFN-γ细胞因子的分泌水平,收集细胞检测F4/80CD86M1细胞的极化水平,提取细胞蛋白检测TLR2、p-NFκB、NFκB、c-JUN蛋白的表达水平。结果:根据免疫荧光实验可以检测到重组Cot C-CTB、Cot C-NAP、Cot C-CTB-NAP枯草芽孢表面荧光标记特异性抗体所发出的绿色荧光,说明融合蛋白NAP及CTB在枯草芽孢表面表达。经飞行质谱鉴定,小鼠粪便在Ka NaLB平板上分离培养出来的菌落为枯草芽孢杆菌,灌胃后96h的粪便在Ka NaLB平板上仍有菌落生长,提示重组芽孢在一次灌胃后于小鼠肠道内的定植时间高达96小时。每隔48小时灌胃芽孢1次,灌胃6周,停止灌胃后重组芽孢于小鼠肠道内能存活21天。经NAP或CTB-NAP重组芽孢治疗后,CAS激发小鼠过敏症状明显减轻(p<0.001),肛温和体重无明显下降现象(p>0.05);CAS特异性s Ig A水平、Ig G2a水平显著升高(p<0.01)而Ig E、Ig G1水平显著降低(p<0.05),血浆组胺水平也明显降低(p<0.01);HE染色切片显示,空肠组织绒毛结构完整、无缺损和糜烂现象,嗜酸性粒细胞浸润情况明显减少(p<0.001);TLR2(p<0.01)、c-JUN(p<0.001)表达水平显著升高,NFκB的磷酸化水平显著增强(p<0.05);脾细胞显著分泌IL-12(p<0.05)和IFN-γ(p<0.05)而减少IL-4(p<0.05)和IL-13(p<0.001)的分泌,且CD4CD25Foxp3Tregs细胞的比例也明显增多(p<0.01)。BMDMs经灭活NAP重组芽孢刺激后,显著向M1型巨噬细胞极化(p<0.01),表达TLR2、c-JUN蛋白水平增多(p<0.01),且NFκB磷酸化水平增强(p<0.05);分泌IL-12(p<0.01)、IL-6(p<0.05)、IL-1β(p<0.05)、IFN-γ(p<0.01)细胞因子显著增多而IL-10水平降低(p<0.05)。结论:NAP能诱导巨噬细胞极化为M1型,并通过激活TLR2信号,诱导NFκB活化,增强c-JUN的转录表达水平,介导Th1型免疫反应。口服NAP或CTB-NAP重组芽孢能有效减轻食物过敏反应和肠道炎症,促进机体分泌高水平Th1型细胞因子,诱导Th1型免疫反应,抑制Th2型免疫反应。

关键词：幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白枯草芽孢杆菌霍乱毒素B亚单位酪蛋白过敏 Toll样受体2 巨噬细胞

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Hp中性粒细胞激活蛋白研究进展

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免疫学杂志 2006年第Z1期22卷 64-67,72页

作者：高原邹全明第三军医大学医学检验系临床微生物学及临床免疫学教研室重庆400038

幽门螺杆菌(Hp)是一种参与多种胃、十二指肠疾病的重要人类病原体,可引起慢性胃炎和消化性溃疡,并与胃癌密切相关。人类幽门螺杆菌感染的特征是胃黏膜炎症部位中性粒细胞持续浸润。幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白(***-lorineutrophil-act... 详细信息

幽门螺杆菌(Hp)是一种参与多种胃、十二指肠疾病的重要人类病原体,可引起慢性胃炎和消化性溃疡,并与胃癌密切相关。人类幽门螺杆菌感染的特征是胃黏膜炎症部位中性粒细胞持续浸润。幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白(***-lorineutrophil-activating protein,HP-NAP)正是由于其能活化中性粒细胞而被如此命名。HP-NAP不仅是重要的毒力因子,而且是主要的候选疫苗抗原。本文综述了HP-NAP的结构、生物学活性和致病机制等的研究进展,并对其应用前景进行了展望。

关键词：幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白中性粒细胞:毒力因子抗原

来源：评论

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HP-NAP对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用

引用

郑州大学学报（医学版） 2016年第5期51卷 595-598页

作者：王晓东康巧珍王小龙李树芳王婷刘鑫汲振余郑州大学生命科学学院分子免疫学实验室郑州450001 河南省医药科学研究院郑州450052

目的:研究幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白(HP-NAP)对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤的生长抑制作用及可能机制。方法:构建p ET28a-NAP重组质粒,转入*** BL21(DE3)菌株,IPTG诱导HP-NAP的表达,Ni柱亲和层析法对其进行分离纯化。取BALB/c小鼠,皮下注射... 详细信息

目的:研究幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白(HP-NAP)对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤的生长抑制作用及可能机制。方法:构建p ET28a-NAP重组质粒,转入*** BL21(DE3)菌株,IPTG诱导HP-NAP的表达,Ni柱亲和层析法对其进行分离纯化。取BALB/c小鼠,皮下注射H22细胞(2×106个/只)构建荷瘤模型,随机分为PBS组和HP-NAP组,以皮下瘤旁注射的方式给予PBS或HP-NAP,监测肿瘤体积和小鼠体重变化。1周后牺牲小鼠,取瘤体及各脏器称重,以ELISA法检测脾细胞IFN-γ分泌水平,实时荧光定量PCR法检测肿瘤组织中IFN-γmRNA的表达水平。结果:利用大肠杆菌原核表达系统成功制备了HP-NAP。HP-NAP可显著抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,对小鼠体重和脏器指数无明显影响。与PBS组相比,HP-NAP组小鼠脾细胞IFN-γ的分泌水平及肿瘤组织中IFN-γmRNA的表达水平均升高(P<0.05)。结论:HP-NAP可能通过上调IFN-γ的表达抑制肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤的生长。

关键词：幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白肝癌 H22细胞 IFN-γ 小鼠

来源：评论

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