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范例一：(K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 AND Y=1982-2016
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文献类型

1 篇 学位论文

馆藏范围

1 篇 电子文献
0 种 纸本馆藏

日期分布

学科分类号

1 篇 医学
- 1 篇 药学(可授医学、理...

主题

1 篇 多种光谱法
1 篇 斑马鱼
1 篇 4-氨基安替比林
1 篇 微流控单细胞分析
1 篇 氧化应激
1 篇 抗氧化酶
1 篇 分子模拟

机构

1 篇 山东大学

作者

1 篇 滕跃

语言

1 篇 中文

检索条件"主题词=微流控单细胞分析"

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详细简洁

排序：

4-氨基安替比林的氧化应激效应及其作用机理的研究

4-氨基安替比林的氧化应激效应及其作用机理的研究

引用

作者：滕跃山东大学

学位级别：博士

药物及其中间体残留带来的污染问题已经对生态环境安全及人体健康构成威胁。4-氨基安替比林(AAP)作为一种原料或者中间体,大量用于生产镇痛、消炎、抗菌类的新型药物,AAP会引起粒性白血球缺乏症等毒性作用,已经成为一种暴露于环境中的... 详细信息

药物及其中间体残留带来的污染问题已经对生态环境安全及人体健康构成威胁。4-氨基安替比林(AAP)作为一种原料或者中间体,大量用于生产镇痛、消炎、抗菌类的新型药物,AAP会引起粒性白血球缺乏症等毒性作用,已经成为一种暴露于环境中的污染物。研究表明氧化应激与所有的疾病有关,环境污染物对生物体产生的危害与氧化应激密切相关。在氧化应激过程中,活性氧类物质(ROS)在生物体内大量表达,参与并促进多种疾病的发生发展过程,造成DNA/RNA、蛋白质、脂类等生物分子的氧化损伤,从而导致机体代谢紊乱,引发疾病。因此,利用氧化应激这一生物学指标来评价环境污染物的毒性效应,有助于人们了解环境污染物的致病机理,全面评价其毒性,为疾病的早期诊断、预防和治疗提供科学依据。本论文以环境毒理学、现代仪器分析科学为背景,从实验动物、单细胞、蛋白质分子三个层面研究4-氨基安替比林的氧化应激效应及其作用机理。本论文主要包括以下五个部分：第一章介绍了AAP的特性和用途,概述了AAP毒性效应的研究进展；介绍了活性氧物质和抗氧化系统的组成和特点,综述子环境氧化应激的诱发因素；归纳了氧化应激与疾病的相关关系；总结了环境毒理学中氧化应激的评价方法。第二章以斑马鱼作为研究对象,从实验动物层面进行了急性染毒实验,测定了AAP对斑马鱼的半数致死浓度LC50-24h,对斑马鱼肝脏中抗氧化系统以及氧化损伤程度的影响,评价了AAP的氧化应激效应。结果表明,AAP导致ROS清除直接相关的CAT和GPx酶活性增大,间接对抗ROS的GR和GST酶活性减小,SOD酶活性没有显著变化,GSH含量显著下降,GSSG含量上升,GSH/GSSG比率显著下降,肝脏组织中的氧化还原平衡被打破,诱发了氧化应激。MDA的含量逐渐增大,说明体内氧化应激损伤产物LOP增多,造成了脂肪组织的氧化损伤。第三章以人血红细胞作为研究对象,对其进行体外染毒,从单细胞水平研究AAP对人血红细胞中GSH含量的影响,评价其氧化应激效应。结果表明,在低AAP染毒浓度时,虽然GSH含量的平均值没有显著的变化,但是单细胞分析的结果显示低GSH含量的细胞开始出现。当AAP浓度增大,AAP对GSH含量有显著的影响,低GSH含量的细胞增加,GSH减少可达14.53%。GSH的消耗导致红细胞内环境向氧化型转变。第四章选取血液中的传输蛋白(牛血清白蛋白和牛血红蛋白)为研究对象,从蛋白质分子水平上研究AAP与血液中传输蛋白的相互作用。污染物与血液中传输蛋白的结合决定了其在体内的传输和分布。利用多种光谱和分子模拟技术,建立二者间的作用模型,探讨其结合作用机理。 1)利用光谱和分子模拟的方法在模拟生理条件下研究AAP与牛血清白蛋白(BSA)相互作用的结果表明,AAP与BSA之间属于静态猝灭猝灭,AAP与BSA之间具有较强的相互作用,显正电性的AAP可以通过静电作用自发的跟带BSA分子上带负电的区域相结合,结合在BSA的亚域ⅢA处,导致了BSA微环境和空间构象的改变。 2)利用荧光、同步荧光、紫外-可见吸收和圆二色谱技术研究了AAP和牛血红蛋白(BHb)的结合作用。结果表明,AAP和BHb具有较强的相互作用,并且通过范德华力和氢键以1：1的比例结合,AAP导致BHb微环境发生变化,骨架结构变的松散。第五章选取氧化应激直接相关的三种酶(超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、辣根过氧化物酶)作为研究对象,利用光谱和分子模拟技术,从分子水平上研究了AAP对抗氧化酶的毒性作用机理。由于谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)价格昂贵且不易保存,我们选用同类的辣根过氧化物酶(Hrp)来模拟GPx。 1)酶活性评定、光谱和分子模拟的研究结果表明,AAP可以通过氢键和范德华力自发地跟Cu/ZnSOD结合,形成AAP-Cu/ZnSOD结合物,AAP结合在Cu/ZnSOD两个子域的交界面上。AAP诱发了Cu/ZnSOD二级结构发生改变,导致Cu/ZnSOD骨架松散,内部疏水性的多肽链对水的暴露增加,影响了活性位点的微环境,从而对Cu/ZnSOD酶活性产生了抑制作用。 2)光谱实验和分子模拟的研究结果表明,带正电的AAP可以通过静电作用自发的与带负电的过氧化氢酶(CAT)以1：1的比例结合在CAT中心疏水腔内。CAT的微环境和空间结构受到AAP的影响,导致CAT骨架结构松散,从而影响了CAT活性位点的微环境,造成了血红细胞中CAT酶活性的抑制作用。 3)利用荧光、紫外-可见、同步荧光和圆二色谱等技术研究了AAP和辣根过氧化物酶(Hrp)的作用机理,考察了二者的结合参数(结合常数、结合位点数、热力学常数和结合力类型)以及AAP对Hrp空间结构的影响。AAP和Hrp具有较强的相互作用,并且

关键词： 4-氨基安替比林氧化应激斑马鱼抗氧化酶微流控单细胞分析多种光谱法分子模拟

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