检索结果-内蒙古大学图书馆

渔业科学进展 2021年第1期42卷 38-46页

作者：姜晓瑜张旭志杨倩倩李阳王晓春谢国驷赵俊曲克明上海海洋大学海洋科学学院上海201306 中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室青岛266071

渔业生态环境监测与保护、水产病害防治等众多领域的活动都需要对病原微生物进行药敏试验(Antimicrobial susceptibility testing,AST)。本研究以副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)为模式微生物,以卡那霉素、四环素、青霉素和恩... 详细信息

渔业生态环境监测与保护、水产病害防治等众多领域的活动都需要对病原微生物进行药敏试验(Antimicrobial susceptibility testing,AST)。本研究以副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)为模式微生物,以卡那霉素、四环素、青霉素和恩诺沙星为代表性抗生素,对比研究了微生物生长传感器AST法和标准微量肉汤稀释(Broth microdilution,BMD)AST法的性能特征。结果显示,无论是标准菌株还是来自养殖环境和对虾的分离菌株,分别测定4种抗生素对它们的剂量效应时,2种方法所得最小抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC)值的基本一致率(Essential agreement,EA)都是100%,因而具有高度吻合性。微生物生长传感器AST法测定的MIC值往往不小于BMD AST法的测定结果,表明自动化仪器法的灵敏度高于肉眼观察。比较而言,微生物生长传感器AST法因为能提供细菌生长实时动力学曲线而呈现更高的效率和更多的抗生素响应信息,而且自动化程度高,操作简便,用户友好,因而具有更好的应用推广前景。

关键词：渔业环境病原微生物药敏试验微生物生长传感器微量肉汤稀释法

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基于微生物生长传感器测定人工纳米材料的生态环境安全效应

基于微生物生长传感器测定人工纳米材料的生态环境安全效应

引用

中国环境科学学会2020科学技术年会

作者：张旭志杨倩倩王晓春曲克明中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛 266071

人工纳米材料(ENMs)的排放给地表水生态系统的健康带来日益严重的威胁.必须对其进行强制性生态风险评价已经成为全球性共识.以微生物为指示物是实用性较好的评估方法之一,然而,囿于检测分析的困难性,目前有关自然环境水体介质中ENMs对... 详细信息

人工纳米材料(ENMs)的排放给地表水生态系统的健康带来日益严重的威胁.必须对其进行强制性生态风险评价已经成为全球性共识.以微生物为指示物是实用性较好的评估方法之一,然而,囿于检测分析的困难性,目前有关自然环境水体介质中ENMs对微生物安全阈值的研究极其匮乏.本研究研制出了具有宽敞工作窗口的八通道非接触电导微生物生长传感器,以大肠杆菌(***)和金黄色葡萄球菌(***)为模式微生物,建立了理想溶液(LB液体培养基)和复杂液体介质(自然河水和海水)中细菌生长动力学过程的自动化在线监测方法.通过考察纳米金球(Au NPs),纳米金棒(Au NRs)、纳米银球(Ag NPs)和纳米银立方(Ag NCs)对微生物生长动力学参数的剂量效应,建立了一种能够直接、准确分析ENMs安全阈值的普适性方法.该成果为高效测定各种自然水体中ENMs的最小抑菌浓度(MIC)提供了可靠的方法,从而为建立生态环境安全评估技术奠定了基础.

关键词：人工纳米材料生态环境风险评价微生物生长传感器安全阈值

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副溶血弧菌抗药性的自动化检测方法研究与应用

副溶血弧菌抗药性的自动化检测方法研究与应用

引用

作者：姜晓瑜上海海洋大学

学位级别：硕士

副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)属于革兰氏阴性菌,嗜盐,广泛存在于渔业环境和鱼类、贝类、虾类等常见海产品中,其致病菌株能够影响生物的生长发育,如导致对虾患急性肝胰腺坏死病(AHPND)。副溶血弧菌还会通过水产品食物链传递对人... 详细信息

副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)属于革兰氏阴性菌,嗜盐,广泛存在于渔业环境和鱼类、贝类、虾类等常见海产品中,其致病菌株能够影响生物的生长发育,如导致对虾患急性肝胰腺坏死病(AHPND)。副溶血弧菌还会通过水产品食物链传递对人类健康造成极大威胁,如造成腹泻、头痛、恶心、呕吐和腹部痉挛等反应。由于副溶血弧菌对人类健康和经济发展都存在潜在威胁,在渔业生产过程中控制其繁殖势在必行。一般情况下,抗生素被用来进行副溶血弧菌的防治工作。近几年来,人们发现分离自水产品、渔业环境等样品中的副溶血弧菌菌株的抗药性呈不断增强的趋势,并且已有菌株显示多重抗药性。此外,源自不同地区的副溶血弧菌所含致病基因和抗药性存在显著差异,对预防和治疗带来了困难。因此,快速查明副溶血弧菌的耐药情况对渔业生产中科学用药具有重要意义。药敏试验(Antimicrobial susceptibility testing,AST)是测定微生物耐药性的最有效工具。其中基于测定目标抗生素对微生物生长活性影响的表现型方法(如稀释法、圆盘扩散法、E-test法、浊度法等)目前依然是金标准,但是现有方法(特别是手动方法),存在效率低、准确性差等问题;虽然基于浊度分析的自动化方法具有相对较高的精确度,但因必需繁琐的前处理步骤而效率较低。因此,高效率、易操作、成本低的AST方法依然是行业的迫切需求。针对测定副溶血弧菌的抗药性需求,本研究建立了一种基于微生物生长传感器的AST新方法。主要内容有两个:一是该自动化、高通量新方法的建立和性能表征,二是该方法在环境分离菌株抗药性测定中的实际应用。(1)以电容耦合非接触电导检测器(Capacitively Coupled Contactless Conductivity Detection)为敏感元件,建立基于八通道微生物生长传感器的AST方法。以副溶血弧菌标准菌株(ATCC 17802)为研究对象,应用该传感器可以无损、在线监测各工作通道中因细胞代谢而引起的电导率变化,从而自动化形成动力学生长曲线。采用八通道微生物生长传感器实时监测抗生素存在情况下5×10～5CFU/m L副溶血弧菌(ATCC 17802)的生长曲线,建立微生物生长传感器AST法。结果表明,在LB液体培养基测定20 h情况下,卡那霉素、四环素、青霉素和恩诺沙星的最小抑菌浓度值(Minimal Inhibitory Concentration,MIC)分别为10.0、2.0、1280.0和0.125μg/m L。该数值与采用经典的微量肉汤稀释法(Broth microdilution,BMD)所得数据的基本一致性(Essential Agreement,EA)为100%,验证了新方法的可靠性。(2)从渔业环境和水产品中分离、鉴定出16株副溶血弧菌,采用微生物生长传感器AST法测定它们在LB液体培养基中的抗药性。结果表明,35℃下培养20h,卡那霉素的MIC值在2.5-20.0μg/m L之间;四环素的MIC值在1.0-32.0μg/m L之间;青霉素的MIC值在40-640μg/m L之间;恩诺沙星的MIC值在31.25-16000.00ng/m L之间。这些数据说明分离菌株对抗生素的抗性/敏感性存在显著差异。比较而言,微量肉汤稀释法对照实验的数据不存在超过3倍浓度梯度的差异,且基本上不高于微生物生长传感器AST法所得数据,说明新研发的自动化方法具有更高的灵敏度。总之,本研究在无损、在线监测微生物生长过程的传感器模式的基础上,建立了测定副溶血弧菌抗药性的新方法。较之于常见方法,新方法具有操作简便、效率高、成本低的优势,为构建更多的AST平台奠定了基础。环境和水产品分离菌株的AST结果为指导渔业生产科学用药提供了可靠数据。

关键词：副溶血弧菌药敏试验微生物生长传感器渔业环境海产品

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