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文献类型

1 篇 学位论文

馆藏范围

1 篇 电子文献
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日期分布

学科分类号

1 篇 医学
- 1 篇 药学(可授医学、理...

主题

1 篇 对映贝壳杉烷二萜
1 篇 抗肿瘤
1 篇 微管动力学
1 篇 微管促聚作用

机构

1 篇 西北师范大学

作者

1 篇 宁秀梅

语言

1 篇 中文

检索条件"主题词=微管促聚作用"

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详细简洁

排序：

五种对映-贝壳杉烷二萜促微管稳定效应的研究

五种对映-贝壳杉烷二萜促微管稳定效应的研究

引用

作者：宁秀梅西北师范大学

学位级别：硕士

肿瘤细胞具有快速增殖的能力,通过干扰纺锤体的形成阻断有丝分裂进程,可抑制肿瘤细胞的增殖。由于微管是构成纺锤体的主要组分,一直以来被认为是抗癌药物研究中最具有吸引力的靶点。目前已经发现了很多以微管为靶点的抗癌药物,但它们在... 详细信息

肿瘤细胞具有快速增殖的能力,通过干扰纺锤体的形成阻断有丝分裂进程,可抑制肿瘤细胞的增殖。由于微管是构成纺锤体的主要组分,一直以来被认为是抗癌药物研究中最具有吸引力的靶点。目前已经发现了很多以微管为靶点的抗癌药物,但它们在临床治疗中出现的耐药性给其进一步的应用带来了困扰。weisiensin B是从维西香茶菜中分离得到的,而rabdosin B、rabdosinate、epinodosin和epinodosinol是从甘肃产毛叶香茶菜中提取到的对映-贝壳杉烷二萜,它们分属于三种结构类型的对映-贝壳杉烷型二萜。weisiensin B为C-20未氧化型,rabdosin B和rabdosinate为螺环内酯型,epinodosin和epinodosinol为延命素型。我们之前的研究发现,C-20未氧化型的对映-贝壳杉烷型二萜wangzaozin A等具有与紫衫醇相似的促进微管聚合的能力,显示了其作为研发抗癌药物的潜能,但螺环内酯型和延命素型的对映-贝壳杉烷二萜对微管的稳定或促聚合作用的研究还未见相关报道。本研究以上述五种化合物为受试物,选用人乳腺癌细胞MCF-7和卵巢癌细胞SK-OV-3细胞为受试细胞株,用MTT检测法、AO/EB双染法、流式细胞术、间接免疫荧光技术研究了药物对细胞内微管的影响,以及对体外条件下纯化微管蛋白组装以及结合微管蛋白紫杉醇位点的影响,主要实验结果如下:***法检测weisiensin B、rabdosin B、rabdosinate、epinodosin、epinodosinol对MCF-7、SK-OV-3、H1299细胞增殖的影响。结果显示,在一定的浓度范围内,weisiensin B可以显著抑制上述细胞的增殖,5种化合物中其细胞毒性最强;rabdosin B的细胞毒性强于rabdosinate,而epinodosin的细胞毒性强于epinodosinol。阳性对照紫杉醇（paclitaxel）及莱利霉素（laulimalides）在20nmol/L浓度处理下细胞的抑制率分别为80%,约与2μmol/L的weisiensin B或12μmol/L rabdosin B或epinodosin毒性相当。***/EB双染法检测了5种二萜对MCF-7和SK-OV-3细胞凋亡的影响,结果显示,2-6μmol/L的weisiensin B处理细胞24 h后,细胞凋亡率不高于5.6%;6μmol/L和9μmol/L的rabdosin B或rabdosinate处理细胞24 h后其细胞凋亡率与对照组相比没有显著性差异,同样,6μmol/L和9μmol/L的epinodosin和epinodosinol处理细胞24 h后其细胞凋亡率与对照组相比也不具显著性差异。这些结果表明在上述浓度范围内,对于微管骨架的免疫荧光观察将不受细胞凋亡所导致的细胞骨架解聚的影响。3.利用流式细胞术检测了5种二萜对MCF-7和SK-OV-3细胞的周期的影响,结果显示,3μmol/L和6μmol/L的weisiensin B处理细胞24 h后,细胞发生了G2/M期阻滞,其中6μmol/L的weisiensin B处理组的G2/M期细胞的比率提高了13.3%（MCF-7）或15%（SK-OV-3）;9μmol/L的rabdosin B或rabdosinate处理细胞24 h后,rabdosin B处理组的G2/M期细胞比率升高了10.7%（MCF-7）和10.3%（SK-OV-3）,但rabdosinate在MCF-7和SK-OV-3细胞中并没有发现明显的G2/M期阻滞;9μmol/L的epinodosin和epinodosinol处理细胞24 h后,epinodosin处理组的G2/M期细胞比率提高了6.7%（MCF-7）和6.3%（SK-OV-3）,显示了较低的G2/M期阻滞作用,而epinodosinol处理组的G2/M期阻滞作用不明显。4.使用相差显微镜观察了5种二萜对MCF-7细胞和SK-OV-3细胞形态的影响,3μmol/L的weisiensin B处理两种细胞后,2种细胞均引起细胞形态的变化,2种细胞均出现伪足缩短和细胞胞体变圆的现象;6μmol/L rabdosin B也可以引起相似的细胞形态变化,但是6μmol/L rabdosinate处理下细胞却没有发生明显的形态变化;同样,6μmol/L epinodosin也可使细胞出现伪足变短、细胞宽度变长的现象,而9μmol/L epinodosinol处理下细胞没有发生明显的形态变化。5 nmol/L的阳性对照紫杉醇处理细胞后,其细胞出现了长长的伪足,三角型细胞增多;5nmol/L莱利霉素处理细胞的形态变化与紫杉醇不一致,细胞形态趋于变圆。weisiensin B、rabdos

关键词：对映贝壳杉烷二萜微管促聚作用微管动力学抗肿瘤

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