检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：曹春水南昌大学

学位级别：博士

第一部分：PGD2-DP1受体途径对急性胰腺炎微血管渗漏的保护作用　　目的：　　探索PGD2-DP1受体途径对急性胰腺炎微血管渗漏的影响及其分子调控机制。　　方法：　　1、建立雨蛙素诱导急性胰腺炎动物模型：分别利用C57BL/6/Sv129背景野... 详细信息

第一部分：PGD2-DP1受体途径对急性胰腺炎微血管渗漏的保护作用　　目的：　　探索PGD2-DP1受体途径对急性胰腺炎微血管渗漏的影响及其分子调控机制。　　方法：　　1、建立雨蛙素诱导急性胰腺炎动物模型：分别利用C57BL/6/Sv129背景野生小鼠与DP1 KO小鼠，腹腔注射高浓度雨蛙素（50μg/kg）建立急性胰腺炎小鼠模型，同时给予腹腔注射PGD2（2mg/kg）/生理盐水治疗，监测血清淀粉酶及IL-6评价模型是否成功。　　2、利用伊文思蓝实验、肺和胰腺组织湿干重比、肺组织损伤评分等评价PGD2对雨蛙素诱导的急性胰腺炎小鼠微血管渗漏的影响。　　3、利用免疫组化染色及RT-PCR方法观察雨蛙素诱导急性胰腺炎小鼠肺组织内炎性细胞的浸润和PGD2-DP1受体途径相关的酶COX-2、L-PGDS、H-PGDS和DP1受体的表达变化。　　4、利用mDP1siRNA脂质体和pcDNA3.1/mDP1质粒对原代培养的野生小鼠与DP1 KO小鼠腹主动脉内皮细胞进行基因重组，利用Trans-well单层细胞通透性实验观察PGD2对血管内皮细胞屏障的影响。　　5、利用Western blot方法及F-actin染色研究PGD2对基因重组血管内皮细VE-Cadherin表达及细胞骨架重构的影响。　　6、利用完全pull-down实验和Western blot方法检测PGD2对基因重组血管内皮细胞Rho-GTPase活性和TRPC1表达的影响。　　结果：　　1、注射雨蛙素后小鼠血清淀粉酶、IL-6较注射前升高，肺组织大量炎性细胞浸润，肺间质水肿较正常对照组明显加剧，腹腔内注射超剂量雨蛙素能成功建立AP小鼠模型。　　2、在急性胰腺炎野生和DP1 KO小鼠的肺组织内可见大量CD68+巨噬细胞浸润，PGD2代谢相关酶COX-2、H-PGDS及L-PGDS表达均升高，外源性PGD2减少急性胰腺炎野生小鼠的肺组织内CD68+巨噬细胞浸润的数量，但不能减少DP1 KO小鼠CD68+巨噬细胞浸润的数量。　　3、急性胰腺炎DP1 KO小鼠表现较野生小鼠恶化的伊文思蓝渗漏、肺和胰腺组织湿干重比值以及肺病理损伤评分，外源性PGD2改善急性胰腺炎野生小鼠上述指标但对DP1 KO小鼠无效。　　4、PGD2能明显抑制野生小鼠腹主动脉内皮细胞LPS诱导的单层血管内皮细胞通透性升高，利用DP1siRNA对WT小鼠血管内皮细胞DP1基因沉默后的和DP1 KO小鼠的血管内皮细胞，PGD2保护作用被抑制，pcDNA/DP1质粒转染恢复DP1 KO小鼠血管内皮细胞DP1表达后，PGD2的作用恢复。　　5、PGD2能明显抑制WT小鼠血管内皮细胞 LPS诱导的TRPC1、VE-Cadherin、F-actin表达减少，但不能抑制DP1 KO血管内皮细胞LPS诱导的TRPC1、VE-Cadherin、F-actin表达减少，恢复DP1 KO血管内皮细胞DP1表达后，PGD2的作用恢复。　　6、PGD2降低野生小鼠血管内皮细胞的GTP-Rac1、GTP-Cdc42活性，提高GTP-RhoA活性，DP1 KO血管内皮细胞PGD2的RhoA-GTP活性影响作用减弱，恢复DP1 KO血管内皮细胞DP1表达后，PGD2的作用恢复。　　结论：　　1、PGD2活化DP1受体改善急性胰腺炎小鼠肺内炎性细胞浸润，降低微血管渗漏。　　2、PGD2活化DP1受体调节血管内皮细胞VE-Cadherin表达及细胞骨架重构,保护血管内皮屏障。　　3、PGD2活化DP1受体可能通过调控Rho-GTPase活性和TRPC1表达从而调节血管内皮细胞VE-Cadherin表达及细胞骨架重构。　　第二部分：PGD2-DP1受体途径在人腹主动脉瘤形成中的作用　　目的：　　了解PGD2-DP1受体途径相关的酶COX-1、COX-2和L-PGDS及DP1受体在人AAA组织中的表达定位，分析其与人AAA直径及破裂的相关性，探讨PGD2-DP1受体途径对人AAA的VSMCs表型变异及炎性细胞趋化的影响。方法：　　1、采用免疫组化及免疫荧光染色方法，检测已破裂、未破裂AAA组织和正常胸内动脉组织COX-1、COX-2、LPGDS及DP1受体表达，同时进行HE、Masson染色明确人AAA的组织结构，利用抗α-actin和CD68抗体进行免疫染色标记VSMCs和巨噬细胞，明确这些相关酶及受体在人AAA组织中的表达部位。　　2、利用RT-PCR方法检测人AAA组织中COX-1、COX-2、LPGDS及DP1受体mRNA表达，使用Western blot方法检测LPGDS及DP1受体蛋白的表达，结合临床资料记录的AAA直径和是否破裂进行相关性分析。　　3、利用hDP1siRNA脂质体和pcDNA3.1/hDP1质粒对人外周血单核细胞和原代培

关键词：前列腺素D2 急性胰腺炎微血管渗漏保护作用动物模型

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银杏叶制剂对模拟高原低氧暴露下脑微血管渗漏的干预作用

引用

中国中医急症 2010年第7期19卷 1175-1177页

作者：刘晓东周波周其全成都医学院成都610083 解放军第二五医院酒泉735000 第三军医大学重庆400038

目的观察银杏叶提取物对模拟高原低氧暴露下大鼠脑微血管渗漏的干预作用。方法大鼠随机分为3组,银杏叶提取物干预组大鼠在缺氧前3d按60mg/(kg·d)给予银杏叶提取物干预处理后,暴露于低压舱(模拟海拔高度7000m)连续减压缺氧3d制备大... 详细信息

目的观察银杏叶提取物对模拟高原低氧暴露下大鼠脑微血管渗漏的干预作用。方法大鼠随机分为3组,银杏叶提取物干预组大鼠在缺氧前3d按60mg/(kg·d)给予银杏叶提取物干预处理后,暴露于低压舱(模拟海拔高度7000m)连续减压缺氧3d制备大鼠实验性脑水肿模型,以湿干重比值法评价其对脑含水量的影响,硝酸镧示踪法观察银杏叶提取物对低氧暴露下血脑屏障通透性的影响。结果银杏叶提取物干预后大鼠脑含水量和硝酸镧颗粒渗出均明显少于高原缺氧组。结论银杏叶提取物对低氧暴露下血脑屏障通透性的增高具有一定保护作用。

关键词：银杏叶提取物低氧暴露血脑屏障微血管渗漏干预作用

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羟乙基淀粉对兔腹部大手术后早期微血管白蛋白渗漏的影响及可能机制

羟乙基淀粉对兔腹部大手术后早期微血管白蛋白渗漏的影响及可能机...

引用

作者：袁震昆明医科大学

学位级别：硕士

目的：兔腹部大手术后早期给予羟乙基淀粉进行干预,并与生理盐水组和空白对照组进行比较,通过观察早期肠系膜微血管白蛋白渗漏,测定肠系膜微血管白蛋白渗漏率;检测手术前后血清白蛋白浓度及血清炎性介质浓度,了解羟乙基淀粉对微血管白... 详细信息

目的：兔腹部大手术后早期给予羟乙基淀粉进行干预,并与生理盐水组和空白对照组进行比较,通过观察早期肠系膜微血管白蛋白渗漏,测定肠系膜微血管白蛋白渗漏率;检测手术前后血清白蛋白浓度及血清炎性介质浓度,了解羟乙基淀粉对微血管白蛋白渗漏的影响及可能的机制。方法：取普通级日本大耳兔重2.5±0.5千克／只,雄性,18只,使用随机数字表法随机分为3组,分别为空白对照组、生理盐水组、羟乙基淀粉组。后两组行胃大部切除加胰体尾、脾切除术,术后采用等热卡、等氮量营养支持,热量150kcal由葡萄糖及脂肪提供,分别提供热量的70%、30%。氮热比为1：130。生理盐水组术后每天给予25ml/Kg的生理盐水;羟乙基淀组术后每天给予6%HES (130,0.4)25ml/kg,空白对照组不给予任何干预,只作为白蛋白渗漏率检测。于术前及术后48h检测血清白蛋白浓度及血清白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6),肿瘤坏死因子-α(Tumour necrosis factor-α, TNF-α),白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2),血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor, VEGF),细胞间粘附分子1(Vntercellular adhesion molecule1,1CAM-1),组胺(Histamine, HIS)浓度;通过静脉注射异硫氰酸罗丹明B (Rhodamine B isothiocyanate, RBITC)标记牛血清白蛋白(Bovine serum albumin, BSA)后,在激光共聚焦显微镜下动态观察兔肠系膜微血管白蛋白渗漏情况,并计算其微血管白蛋白渗透率。结果： 1.血清白蛋白浓度组间比较：生理盐水组与羟乙基淀粉组术前白蛋白浓度无统计学差异(p>0.05)。生理盐水组与羟乙基淀粉组术后白蛋白浓度有统计学差异(p<0.05)。组内比较：生理盐水组手术前后白蛋白浓度有统计学显著差异(p<0.01)。羟乙基淀粉组手术前后白蛋白浓度有统计学差异(p<0.05)。 2.肠系膜微血管白蛋白渗漏的荧光强度：生理盐水组与羟乙基淀粉组术后白蛋白渗漏的荧光强度有统计学差异(p<0.05)。生理盐水组与空白对照组白蛋白渗漏的荧光强度有统计学显著差异(p<0.01)。羟乙基淀粉组与空白对照组白蛋白渗漏的荧光强度有统计学显著差异(p<0.01)。 3.血清IL-6浓度：组间比较：生理盐水组与羟乙基淀粉组术前血清IL-6浓度有统计学差异(p>0.05)。生理盐水组与羟乙基淀粉组术后血清IL-6浓度有统计学差异(p<0.05)。组内比较：生理盐水组手术前后血清IL-6浓度有统计学显著差异(p<0.01)。羟乙基淀粉组手术前后血清IL-6浓度有统计学显著差异(p<0.01)。 4.血清TNF-a浓度：组间比较：生理盐水组与羟乙基淀粉组术前血清TNF-a浓度有统计学差异(p>0.05)。生理盐水组与羟乙基淀粉组术后血清TNF-a浓度有统计学差异(p<0.05)。组内比较：生理盐水组手术前后血清TNF-a浓度有统计学显著差异(p<0.01)。羟乙基淀粉组手术前后血清TNF-a浓度有统计学显著差异(p<0.01)。 5.血清VEGF浓度组间比较：生理盐水组与羟乙基淀粉组术前血清VEGF浓度有统计学差异(p>0.05)。生理盐水组与羟乙基淀粉组术后血清VEGF浓度有统计学差异(p<0.05)。组内比较：生理盐水组手术前后血清VEGF浓度有统计学显著差异(p<0.01)。羟乙基淀粉组手术前后血清VEGF浓度有统计学显著差异(p<0.01)。 6.血清IL-2浓度组间比较：生理盐水组与羟乙基淀粉组术前血清IL-2浓度有统计学差异(p>0.05)。生理盐水组与羟乙基淀粉组术后血清IL-2浓度有统计学差异(p<0.05)。组内比较：生理盐水组手术前后血清IL-2浓度有统计学显著差异(p<0.01)。羟乙基淀粉组手术前后血清IL-2浓度有统计学显著差异(p<0.01)。 7.血清HIS浓度组间比较：生理盐水组与羟乙基淀粉组术前血清HIS浓度有统计学差异(p>0.05)。生理盐水组与羟乙基淀粉组术后血清HIS浓度有统计学差异(p<0.05)。组内比较：生理盐水组手术前后血清HIS浓度有统计学显著差异(p<0.01)。羟乙基淀粉组手术前后血清HIS浓度有统计学显著差异(p<0.0I)。 8.血清ICAM浓度组间比较：生理盐水组与羟乙基淀粉组术前血清ICAM-1浓度有统计学差异(p>0.05)。生理盐水组与羟乙基淀粉组术后血清ICAM-1浓度有统计学差异(p<0.05)。组内比较：生理盐水组手术前后血清ICAM-1浓度有

关键词：兔大手术微血管渗漏白蛋白羟乙基淀粉

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腹部小手术对兔微血管白蛋白渗漏的影响和机制的研究

腹部小手术对兔微血管白蛋白渗漏的影响和机制的研究

引用

作者：李健昆明医科大学

学位级别：硕士

目的：通过观察兔腹部小手术后早期肠系膜微血管白蛋白渗漏现象及微血管内皮细胞间隙变化,测定肠系膜微血管白蛋白渗漏率,血清白蛋白浓度及血清炎性介质浓度,探讨兔腹部小手术后是否存在微血管白蛋白渗漏以及可能机制。方法：将36只日... 详细信息

目的：通过观察兔腹部小手术后早期肠系膜微血管白蛋白渗漏现象及微血管内皮细胞间隙变化,测定肠系膜微血管白蛋白渗漏率,血清白蛋白浓度及血清炎性介质浓度,探讨兔腹部小手术后是否存在微血管白蛋白渗漏以及可能机制。方法：将36只日本大耳兔随机分为对照组(6只)和手术组(6h、12h、24h、48h、72h各6只)。对照组不行手术,手术组均行空肠部分切除吻合术,术后所有兔均采用等热卡、等氮量营养支持,热量150kcal由葡萄糖及脂肪提供,分别提供热量的70%、30%,氮热比为1:130。于术前及术后各检测点(6h、12h、24h、48h、72h)检测血清白蛋白浓度、血清白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α (Tumour necrosis factor-a,TNF-a)、细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、组胺(histamine, HIS)、白细胞介素2(Interleukin-2,IL-2)浓度；通过静脉注射异硫氰酸罗丹明B (Rhodamine B isothiocyanate,RBITC)标记牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)后,在激光共聚焦显微镜下动态观察兔肠系膜微血管白蛋白渗漏情况,并计算其微血管白蛋白渗透率;透射电子显微镜观测肠系膜微血管内皮间隙的变化。结果： 1.白蛋白浓度：术后各时间点白蛋白浓度与对照组及术前相比差异无统计学差异(P>0.05)。 2.肠系膜微血管白蛋白渗漏率：手术组各时间点与对照组比较差异均无统计学差异(P>0.05)。 3.炎性介质浓度：(1)IL-6浓度：手术组术后各时间点IL-6浓度与对照组对比：术后24h与对照组比较有统计学差异(P<0.05),其余各时间点均无统计学差异(P>0.05)；手术组术后各时间点IL-6浓度与术前对比：术后24h、48h与对照组比较有显著统计学差异(P<0.01),其余各时间点均无统计学差异(P>0.05)。(2)TNF-a浓度：手术组术后各时间点TNF-a浓度与对照组对比：术后24h与对照组比较有统计学差异(P'<0.05),其余各时间点均无统计学差异(P>0.05)；手术组术后各时间点TNF-αt浓度与术前对比：术后24h与术前比较有统计学差异(P<0.05),其余各时间点均无统计学差异(P>0.05)。(3) VEGF浓度：手术组术后各时间点VEGF浓度与对照组及相应术前时间点比较均无统计学差异(P>0.05)。(4)ICAM-1浓度：手术组术后各时间点ICAM-1浓度与对照组及相应术前时间点比较均无统计学差异(P>0.05)。(5)HIS浓度：手术组术后各时间点HIS浓度与对照组及相应术前时间点比较均无统计学差异(P>0.05)。(6)IL-2浓度：手术组术后各时间点IL-2浓度与对照组及相应术前时间点比较均无统计学差异(P>0.05)。 4.炎性介质浓度与肠系膜微血管白蛋白渗漏率Pearson相关性分析：术后IL-6浓度与微血管白蛋白渗漏率相关系数为0.490,P<0.01；术后TNF-a浓度与微血管白蛋白渗漏率相关系数为0.392,P<0.05。 5.肠系膜微血管内皮间隙：未发现内皮间隙的开放。结论： 1.兔腹部小手术后早期血清白蛋白浓度无降低。 2.兔腹部小手术后24h炎性介质IL-6、TNF-a升高,其它时间点炎性介质不升高,其它炎性介质(IL-2、ICAM-1、HIS、VEGF)均不升高,说明小手术对炎性介质的影响较小,但小手术仍可引起炎性介质小范围轻度增高,这可能是术后部分病人低热、不适的原因之一。 3.兔腹部小手术后激光共聚焦显微镜下观察术后各组微血管白蛋白渗漏不明显,电镜下未见微血管内皮细胞连接间隙异常改变。提示腹部小手术后,无明显微血管白蛋白渗漏、也无血浆白蛋白浓度降低。 4.兔腹部小手术后所提示的正常范围内微血管白蛋白渗漏率仍与炎性介质的浓度成正相关,也说明炎性介质对微血管白蛋白渗漏确有影响。

关键词：腹部小手术微血管渗漏白蛋白肿瘤坏死因子α 白细胞介素6内皮间隙

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