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西安交通大学学报（医学版） 2014年第3期35卷 352-356,360页

作者：李强冯华喻安永陈景宇赵喆吴国材阮怀珍第三军医大学基础部神经生物学教研室重庆400038 第三军医大学西南医院神经外科重庆400038

目的通过二乙烯三胺/一氧化氮聚合物(DETA/NO)对雄性SD大鼠线穿法建造的蛛网膜下腔出血(SAH)模型的干预,观察其对微血管痉挛的防治及降低早期脑损伤作用。方法将69只雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham组)、对照组(SAH组)和治疗组(DETA/NO... 详细信息

目的通过二乙烯三胺/一氧化氮聚合物(DETA/NO)对雄性SD大鼠线穿法建造的蛛网膜下腔出血(SAH)模型的干预,观察其对微血管痉挛的防治及降低早期脑损伤作用。方法将69只雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham组)、对照组(SAH组)和治疗组(DETA/NO组)。通过线穿建立SAH模型,观察大体动物Garcia神经功能评分,免疫荧光染色检测微血管肌动蛋白αSMA及PDGFRβ的表达,一氧化氮(NO)试剂盒检测脑组织NO浓度变化,观察血红蛋白刺激离体脑片微血管变化情况。结果手术后3d,DETA/NO组较SAH组神经功能评分明显改善(P<0.05);免疫荧光结果显示,SAH后大脑皮层微血管周围αSMA、PDGFRβ表达上调(P<0.05),DETA/NO能在一定程度上逆转此过程(P<0.05);术后SAH 3h左右NO浓度显著降低(P<0.05),此后逐渐回升,DETA/NO能在早期维持NO浓度(P<0.05);观察到脑片皮层微血管受血红蛋白刺激收缩,DETA/NO能缓解微血管痉挛。结论 DETA/NO能降低大鼠蛛网膜下腔出血后微血管痉挛及早期脑损伤。

关键词：蛛网膜下腔出血早期脑损伤微血管痉挛二乙烯三胺一氧化氮聚合物(DETA NO) 一氧化氮

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周细胞在蛛网膜下腔出血后微血管痉挛及微循环障碍中作用机制研究

周细胞在蛛网膜下腔出血后微血管痉挛及微循环障碍中作用机制研究

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作者：李强第三军医大学

学位级别：硕士

研究背景和目的:蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)是通常由颅内动脉瘤破裂引起的临床常见脑血管意外。由于其发病青睐青壮年人群,加之引起的致死致残率居高不下、临床治疗效果欠佳,给社会经济和家庭生活带来了极为沉重的负... 详细信息

研究背景和目的:蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)是通常由颅内动脉瘤破裂引起的临床常见脑血管意外。由于其发病青睐青壮年人群,加之引起的致死致残率居高不下、临床治疗效果欠佳,给社会经济和家庭生活带来了极为沉重的负担。近十年来的研究表明,蛛网膜下腔出血高死残率的主要归因于SAH后继发的早期脑损伤(Early brain injury,EBI)。故而,针对SAH后EBI病理致损机制展开研究,预期筛选新的有效的治疗靶标,以期提高临床患者的神经功能预后,具有极为现实的社会意义。早期脑损伤是蛛网膜下腔出血后早期(72小时内)发生的一系列复杂的病理生理机制,包括颅内压(Intracranial pressure,ICP)升高、灌注压(Cerebral perfusion pressure,CPP)下降、脑血流(Cerebral blood flow,CBF)下降、脑积水、离子稳态失衡、细胞死亡、血脑屏障破坏、脑水肿等,最终导致脑微循环灌注不足,引起微循环障碍。微循环障碍导致的脑缺血缺氧损伤是蛛网膜下腔出血后最严重的并发症。微血栓形成、微血管痉挛、脑血流自调节下降等促成微循环障碍,其中,微血管痉挛表现为管壁增厚、管腔狭窄、红细胞流动受阻,直接阻碍脑组织血供,导致脑缺血缺氧损伤。因此,缓解蛛网膜下腔出血后微血管痉挛是减轻微循环障碍,降低早期脑损伤,降低死残率的一条有效途径。周细胞是一类多能性细胞,在中枢神经系统内,其主要定植于微血管基膜周边,通过对微循环血管进行调控,进而参与完整血脑屏障的维持或参与生理病理条件下脑组织微血管的再生作用。近年来,周细胞在病理条件下调控微循环的作用得到重视。研究表明,周细胞在缺氧或者电刺激下诱发微血管收缩,阻断红细胞流动,导致微循环障碍。周细胞在高血压、脑缺血、心肌梗塞等疾病的微循环调节中发挥了重要作用,这可能与周细胞表达一些肌动蛋白(如α-SMA)具有收缩功能有关,但是周细胞在蛛网膜下腔出血中的作用仍然缺乏研究。此外,在SAH后脑血管痉挛及微循环调节过程中,内皮型一氧化氮合酶(eNOS)在众多调控因子中发挥重要的作用。e NOS源性的一氧化氮(NO)信号系统是调节脑血流动力学的重要机制。已有研究表明,一氧化氮含量可激活周细胞介导的炎症反应,且能被蛛网膜下腔出血后释放的血红蛋白清除,提示周细胞可能通过响应一氧化氮信号,发生表型转换,调节血管功能。因此我们推测,蛛网膜下腔出血后一氧化氮信号被抑制,激活周细胞的表型转换,周细胞介导微血管痉挛,进而导致微循环障碍,最终引起蛛网膜下腔出血后早期脑损伤。为了验证上述假说,本研究分二部分进行。第一部分采用颈内动脉线栓刺破法建立大鼠蛛网膜下腔出血模型,分别给予enos抑制剂l-nna以及其激动剂scutellarin,活体观察微血管痉挛,免疫荧光检测周细胞表达,在体观测干预后对大鼠死亡率、体重、神经功能缺损、脑组织含水量、血脑屏障通透性损害的影响,并通过he及免疫组化染色检测蛛网膜下腔出血后血红蛋白的分布。通过第一部分的在体实验明确周细胞是否介导了蛛网膜下腔出血后微血管痉挛,进而恶化了微循环,明确scutellarin干预enos源性的no后是否缓解微血管痉挛,减轻蛛网膜下腔出血后早期脑损伤。第二部分通过建立大鼠脑周细胞培养体系和脑片微循环研究模型,用血红蛋白处理脑片和细胞,再用一氧化氮清除剂ptio以及其缓释剂deta/no进行干预,脑片模型观测干预后微血管在周细胞处收缩的情况;在各时相点,采用rt-pcr检测周细胞α-sma核酸转录水平、wb检测其蛋白表达变化。通过第二部分的离体实验进一步明确血红蛋白诱导的一氧化氮信号抑制在周细胞表性转换以及微血管痉挛中的作用。方法:第一部分(在体):采用血管内穿刺法,建立了sd大鼠蛛网膜下腔出血模型;将动物随机分为4组:假手术组(sham)、蛛网膜下腔出血组(sah+vehicle)、l-nna干预组(sah+l-nna)以及scutellarin干预组(sah+scutellarin)。1、活体荧光成像检测大鼠脑表层微血管痉挛及微循环障碍情况;2、分别测定大鼠体重变化、死亡率、出血量、脑组织含水量、神经功能缺损、血脑屏障通透性变化;3、生化检测脑组织enos活性及no含量,wb检测一氧化氮合酶各亚型蛋白表达;4、组织学检测:免疫荧光检测sah后周细胞pdgfrβ及α-sma表达;免疫组化及h&e染色检测sah后血红蛋白的分布;第二部分(离体):为了直接观测血红蛋白对微血管痉挛的作用,建立大鼠脑片模型,并分别用人工脑脊液、血红蛋白、ptio、l-nna以及deta/no灌流脑片;为了观察血红蛋白和no信号对周细胞α-sma表达的影响,建立大鼠脑周细胞离体培养模型,并将细胞分为4组:空白对照组(contr

关键词：蛛网膜下腔出血早期脑损伤微循环微血管痉挛周细胞一氧化氮

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冠状动脉微血管痉挛动物模型的建立及通心络对其防治作用和机理

冠状动脉微血管痉挛动物模型的建立及通心络对其防治作用和机理

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作者：李晓姜萍姜月华吴永健山东中医药大学中国医学科学院阜外心血管病医院

本项目属于医疗卫生领域，心血管病中西医结合学科。冠脉痉挛－斑块破裂－血栓形成－急性冠脉事件，是目前冠心病发病机理的新进展。心肌损伤以及缺血缺氧容易导致血管痉挛，血氧从微血管弥散供血到心肌细胞，需要透过血管基膜和心肌细... 详细信息

标准号: 1300340366

本项目属于医疗卫生领域，心血管病中西医结合学科。冠脉痉挛－斑块破裂－血栓形成－急性冠脉事件，是目前冠心病发病机理的新进展。心肌损伤以及缺血缺氧容易导致血管痉挛，血氧从微血管弥散供血到心肌细胞，需要透过血管基膜和心肌细胞基膜，评价血氧弥散距离有较为重要意义，迄今能够准确评价基膜厚度的方法较少。针对血管痉挛，建立模型非常必要，目前缺乏能够准确评价痉挛状态和程度的动物模型。针对冠脉微血管痉挛的病理机制，目前缺乏中医药理论的阐释，因此难以提出合理的中医治则方药。本项目针对目前的关键问题，建立心肌基膜厚度的评价方法，建立冠脉微血管痉挛动物模型，检测糖尿病心肌微血管损伤的病理特点，提出“风毒伤络、心络绌急”中医病机理论，采用具有益气通络、祛风解痉止痛的通心络胶囊，对上述模型、病理机制进行干预，证明和探索中医治则方药和研究思路。1、首次建立了准确评价心肌基膜及血管基膜厚度的方法：本项目采用六胺银染色，通过计算机图像分析计算基膜阳性面密度比值，建立了一种操作简单、能够准确评价心肌基膜厚度的方法。2、首次建立了冠脉微血管痉挛小型猪动物模型：冠脉痉挛发作突然，与心理应激有关，难以在动物模型上用心电图、血管造影等证实。本项目在冠状动脉前降支中段注射NPY，心肌声学造影定量检测微血管血流量，建立了冠脉微血管痉挛小型猪动物模型。该模型符合临床血管痉挛发病特点，更好地拟合了临床发病实际，并且能够实时观测，定量评价微血管痉挛的状态和程度，为血管痉挛的研究提供了准确、实用的实验模型。3、利用糖尿病心肌微血管损伤特点，明确冠脉痉挛发病机理：目前尚未对微血管痉挛的病理机制作系统探索。利用糖尿病心肌微血管病变特点，探索了血管痉挛的发病机制：冠脉微循环障碍，血氧弥散距离增加，在心肌损伤状态下，炎症因子及心理应激易诱发血管痉挛。4、首次提出“风毒伤络、心络绌急”中医病机理论：对上述现代医学病理机制进行中医理论阐释，首次提出“风毒伤络、心络绌急”中医病机理论。取其治则方药，对上述模型、病理机制进行干预，研究证明通心络胶囊可预防NPY诱发的微血管痉挛，可以降低两种糖尿病大鼠心肌炎症因子表达和含量，防治胶原网络重构，减轻心肌基膜增厚，减轻心肌、微血管病理改变。明确了益气通络祛风解毒治法防治血管痉挛的效果和机制。本项目发表论文5篇，研究成果已经在青岛海慈医院、泰安市中医院、德州市中医院、胜利油田医院得到应用，效果显著，取得了良好的科学意义和社会效益。本项目针对目前心脏病学急需解决的冠脉微血管痉挛问题，利用糖尿病心肌微血管病变特点，建立了微血管痉挛研究的新技术和平台，证明了冠脉微血管痉挛中医治则、方药。在该领域促进了中西医结合学科发展。

关键词：冠状动脉微血管痉挛病理机制通心络胶囊防治机理

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冠脉微血管痉挛参与异丙肾上腺素致大鼠心肌重构

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中华心血管病杂志 2004年第S1期32卷 649-649页

作者：孙桂芳刘凤岐

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一种冠状动脉微血管痉挛猪模型的建立方法

一种冠状动脉微血管痉挛猪模型的建立方法

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作者：李晓姜萍林海青 250011 山东省济南市文化西路42号山东中医药大学附属医院

本发明提供的一种冠状动脉微血管痉挛猪模型的建立方法，属于医疗模型技术领域，实验猪双侧股动脉游离后，穿线结扎该股动脉远端，左侧鞘管送入猪尾导管，测定血流动力学指标；右侧动脉鞘管中，对冠状动脉造影显示前降支中段，冠脉内注... 详细信息

标准号: CN104127860A

本发明提供的一种冠状动脉微血管痉挛猪模型的建立方法，属于医疗模型技术领域，实验猪双侧股动脉游离后，穿线结扎该股动脉远端，左侧鞘管送入猪尾导管，测定血流动力学指标；右侧动脉鞘管中，对冠状动脉造影显示前降支中段，冠脉内注射神经肽Y，得冠状动脉微血管痉挛猪模型。通过本发明方法建立的动物模型，特异性好，更好地拟合了临床发病实际，符合临床心理应激特点，操作简单、科学合理、建模时间短、创伤性小、动物死亡率低，能够实现在载体上评价冠脉微血管的功能，定性定量评价微血管痉挛的状态和程度，并且能够实时观测，为基础临床研究提供了新的研究手段，适合推广应用。

关键词：微血管痉挛冠状动脉股动脉微血管血流动力学指标冠状动脉造影模型技术领域动物死亡率冠脉内注射模型的建立定性定量动脉鞘管动物模型科学合理临床心理临床研究实时观测研究手段神经肽实验猪穿线导管冠脉建模拟合双侧应激猪尾右侧评价左侧创伤医疗

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弥漫性脑损伤后脑缺血的实验研究

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中华创伤杂志 2004年第4期20卷 226-229页

作者：杨治权马建荣王君宇霍雷曹美鸿中南大学湘雅医院神经外科长沙410008

目的　运用大鼠弥漫性脑损伤 (DBI)模型研究脑外伤后脑缺血缺氧的形态学改变。　方法　采用Marmarou的DBI模型 ,光镜下观察微血管改变并测量顶叶皮质内微血管的截面积及微血管周的水肿面积 ;电镜下观察血脑屏障结构的形态学改变并半定... 详细信息

目的　运用大鼠弥漫性脑损伤 (DBI)模型研究脑外伤后脑缺血缺氧的形态学改变。　方法　采用Marmarou的DBI模型 ,光镜下观察微血管改变并测量顶叶皮质内微血管的截面积及微血管周的水肿面积 ;电镜下观察血脑屏障结构的形态学改变并半定量测定毛细血管周围的水肿范围。　结果　光镜下可见外伤后 2 ,6 ,2 4h微血管管径变窄 ,平均微血管截面积分别为 (41.77± 2 7.37) μm2 、(45 .0 9± 2 4 .75 ) μm2 、(49.38± 2 5 .13) μm2 ,均小于对照组 [(6 2 .0 7± 2 8.4 5 ) μm2 ](P <0 .0 5 )。伤后 6 ,2 4h微血管周围存在明显水肿。电镜下 2 ,6 ,2 4h血脑屏障结构有明显损害 ;微血管有痉挛、受压变窄及淤血三种改变。　结论　弥漫性脑损伤后存在明显的脑缺血缺氧的病理形态学改变。

关键词：弥漫性脑损伤脑缺血形态学大鼠脑水肿微血管痉挛

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急性冠脉综合征患者充分抗血小板治疗后行PCI术中慢或无复流现象探讨(附300例报道)

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上海医学 2007年第S1期30卷 124-125页

作者：王临光付强吴强黄宜杰王海波路雯李先进徐州市中心医院徐州市心血管病研究所 221009

目的探讨充分抗凝治疗后急性冠脉综合征(ACS)患者PCI术中慢或无复流现象出现的可能原因。方法选择300例急性冠脉综合征患者,其中不稳定心绞痛(UA)210例,急性心肌梗死(AMI)90例。入院后UA患者给予硫酸氢氯吡格雷(商品名:波立维)75 mg 1次... 详细信息

目的探讨充分抗凝治疗后急性冠脉综合征(ACS)患者PCI术中慢或无复流现象出现的可能原因。方法选择300例急性冠脉综合征患者,其中不稳定心绞痛(UA)210例,急性心肌梗死(AMI)90例。入院后UA患者给予硫酸氢氯吡格雷(商品名:波立维)75 mg 1次／d≥5 d;AMI患者波立维75 mg 1次／d≥7 d,其他治疗等同于常规治疗。两类患者均经上述充分抗血小板治疗后行PCI术,并观察术中慢或无复流现象的发生率。结果300例PCI患者中30例术中出现慢或无复流现象,发生率10％。其中高血压患者20例,糖尿病患者21例,年龄>70岁患者19例,高脂血症患者28例,男性25例,女性5例。前降支病变10例,回旋支病变14例,右冠6例。结论慢或无复流现象公认的原因主要为:PCI时从粥样硬化斑块脱落的活化组织因子,氧自由基介导的内皮损伤,微血管痉挛,红细胞、嗜中细胞、细胞内间质水肿堵塞毛细血管,PCI术中脱落碎片栓塞等因素导致微血管功能障碍。我们认为慢或无复流现象发生可能与①高压扩张后引发造影血管痉挛,②出现未发现的撕裂,③高压扩张后原斑块未脱落的胆固醇结晶受高压后自支架空隙处脱落导致远处微血管栓塞有关。另外我们还发现①弥漫的冠状微血管痉挛,②支架扩张不充分③灌注血管被覆盖③病变血管内血栓机化呈泥沙状也是慢或无复流现象发生的原因。

关键词： PCI术急性冠脉综合征微血管痉挛无复流现象波立维硫酸氢氯吡格雷前降支病变稳定心绞痛病变血管间质水肿

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经皮冠状动脉介入术后TIMI桢数计数的临床相关因素分析

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中华心血管病杂志 2005年第S1期33卷 134-135页

作者：韩雅君王伟民 100044 北京大学人民医院心内科

冠状动脉介入治疗术后靶血管血流减慢TIMI 2级称之为"慢血流现象".靶血管血流为TIMI0～1级称之为无复流现象(no-reflow).目前报道影响介入术后冠状动脉血流减慢可能因素有术后的残余狭窄、微血管痉挛、再灌注损伤、远端微血... 详细信息

冠状动脉介入治疗术后靶血管血流减慢TIMI 2级称之为"慢血流现象".靶血管血流为TIMI0～1级称之为无复流现象(no-reflow).目前报道影响介入术后冠状动脉血流减慢可能因素有术后的残余狭窄、微血管痉挛、再灌注损伤、远端微血栓形成等.TIMI桢数法评价冠状动脉血流的简单、方便、重复性好的方法,经皮冠状动脉介入术后(PCI)冠状动脉血流快慢是评价预后的指标,也是预测再狭窄的指标之一.冠状动脉血流状态不仅与介入治疗后心肌组织灌注相关,同时患者的临床因素也是影响冠状动脉血流的因素之一.

关键词：经皮冠状动脉介入术后计数临床因素动脉血流介入治疗后心肌组织灌注靶血管再灌注损伤预测再狭窄无复流现象微血栓形成微血管痉挛指标血流状态评价预后可能因素残余狭窄重复性患者

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治疗慢性心力衰竭的药物选择

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国际心血管病杂志 1989年第5期32卷 293-294页

作者： Packer M 钱永如

本文提出治疗慢性心力衰竭的第一线药物的标准及应用选择,概括讨论各类药物的临床疗效及安全性,着重肯定利尿剂、洋地黄和转换酶抑制剂联用方案。今后目标在于开发能够阻止病情进展和预防心源性猝死的第一线新药,与现有的第一线药物联... 详细信息

本文提出治疗慢性心力衰竭的第一线药物的标准及应用选择,概括讨论各类药物的临床疗效及安全性,着重肯定利尿剂、洋地黄和转换酶抑制剂联用方案。今后目标在于开发能够阻止病情进展和预防心源性猝死的第一线新药,与现有的第一线药物联用可望改变慢性心力衰竭的自然病程。

关键词：慢性心力衰竭药物治疗心源性猝死洋地黄中毒重度心力衰竭左室功能不全临床疗效心肌收缩力正常窦性心律微血管痉挛

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74例格林-巴利综合征甲皱微循环观察

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安徽医学 1989年第2期10卷 16-17页

作者：王学德陈开地陈立德黄淮蚌埠医学院附属医院急诊科蚌埠市第一人民医院内科

本文观察74例格林-巴利(GBS)综合征患者甲皱微循环改变,与396名正常人对照, 结果如下: 对象 74例GBS是蚌埠医学院附属医院神经科及蚌埠市第一人民医院内科近两年来诊断明确的住院病人,男性44例,女性30例。年龄为3～50岁,其中<10... 详细信息

本文观察74例格林-巴利(GBS)综合征患者甲皱微循环改变,与396名正常人对照, 结果如下: 对象 74例GBS是蚌埠医学院附属医院神经科及蚌埠市第一人民医院内科近两年来诊断明确的住院病人,男性44例,女性30例。年龄为3～50岁,其中<10岁37例,11～20岁15例,21～30岁7例,41～50岁6例。对照组396名正常人,是本院健康职工、实习医生、护校学生。

关键词：甲皱微循环微循环障碍实习医生脱髓鞘病变心血管疾病微血管痉挛组织水肿血缺氧植物神经机械性磨损

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