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德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R-8脱硫基因启动子的克隆与鉴定

江苏农业学报 2009年第3期25卷 529-533页

作者：余志坚李焕杰王海胜李信中国农业科学院研究生院生物化学与分子生物学实验室北京100081 东华理工大学生物系江西抚州344000

利用PCR方法,从专一性脱硫菌德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R-8中克隆了脱硫基因启动子系列缩短的片段,连接至启动子探测型表达载体pPR9TT,电转原始菌R-8,并测定重组菌R-8-P中的报告基因LacZ表达量。结果表明脱硫基因核心启动... 详细信息

利用PCR方法,从专一性脱硫菌德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R-8中克隆了脱硫基因启动子系列缩短的片段,连接至启动子探测型表达载体pPR9TT,电转原始菌R-8,并测定重组菌R-8-P中的报告基因LacZ表达量。结果表明脱硫基因核心启动子区缩短至300 bp,并对启动子序列进行了预测。

关键词：德氏假单胞菌脱硫基因启动子

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德氏假单胞菌脱除加氢柴油中含硫化合物

德氏假单胞菌脱除加氢柴油中含硫化合物

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第一届全国化学工程与生物化工年会

作者：单国彬邢建民张怀英李望良刘会洲阳承立中国科学院过程工程研究所分离科学与工程实验室生化国家重点实验室中国科学院过程工程研究所分离科学与工程实验室生化国家重点实验室中国科学院过程工程研究所分离科学与工程实验室生化国家重点实验室中国科学院过程工程研究所分离科学与工程实验室生化国家重点实验室中国科学院过程工程研究所分离科学与工程实验室生化国家重点实验室中国科学院过程工程研究所分离科学与工程实验室生化国家重点实验室

＜正＞微生物催化脱硫（BDS）技术因其具有选择性高,反应条件温和,能脱除加氢脱硫（HDS）技术难于脱除的杂环类含硫化合物可以实现柴油深度脱硫,已经成为研究热点。优化微生物脱硫条件是提高其脱硫活性的关键之一。国内外的报道主要是... 详细信息

＜正＞微生物催化脱硫（BDS）技术因其具有选择性高,反应条件温和,能脱除加氢脱硫（HDS）技术难于脱除的杂环类含硫化合物可以实现柴油深度脱硫,已经成为研究热点。优化微生物脱硫条件是提高其脱硫活性的关键之一。国内外的报道主要是在模拟体系中研究微生物催化脱除含硫化合物（二苯并噻吩,DBT）的机理和优化脱硫条件,以及在

关键词：加氢柴油德氏假单胞菌微生物催化脱硫

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磁性固定化德氏假单胞菌R-8脱硫研究

磁性固定化德氏假单胞菌R-8脱硫研究

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代谢工程和工业生物技术研讨会

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德氏假单胞R-8菌脱硫的“硫饥饿”诱导机理

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应用与环境生物学报 2009年第2期15卷 235-239页

作者：余志坚李焕杰王海胜李玉光闫艳春李信中国农业科学院研究生院生物化学与分子生物学实验室北京100081 东华理工大学生物系抚州344000 中国科学院过程工程研究所绿色过程与工程重点实验室北京100080

以专一性脱硫菌德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R-8为出发菌株,构建了含有重组质粒pRT-D的重组菌株R-8-D.在不同硫酸盐浓度条件下,研究了R-8和R-8-D脱硫的"硫饥饿"诱导机理,结果表明,在充足的Na2SO4(>0.023mmolL-1... 详细信息

以专一性脱硫菌德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R-8为出发菌株,构建了含有重组质粒pRT-D的重组菌株R-8-D.在不同硫酸盐浓度条件下,研究了R-8和R-8-D脱硫的"硫饥饿"诱导机理,结果表明,在充足的Na2SO4(>0.023mmolL-1)条件下,R-8菌首先利用硫酸盐生长,脱硫酶的合成受阻遏,DBT不被利用,而R-8菌处于"硫饥饿"状态(Na2SO4浓度≤0.023mmolL-1)时,诱导了脱硫酶的合成,能利用DBT生长;Na2SO4在临界浓度以上时,R-8-D菌阻遏了脱硫基因的报告基因lacZ的表达,低于临界浓度时不抑制lacZ表达.本实验结果从细胞和分子水平上证实了R-8菌脱硫属"硫饥饿"诱导类型,并首次确定了脱硫微生物"硫饥饿"诱导的硫酸盐临界浓度为0.023mmolL-1,为构建高活性的、不受硫酸盐抑制的脱硫工程菌提供了理论依据和技术支持.

关键词：德氏假单胞菌硫酸盐 DBT “硫饥饿”诱导 pPR9TT 脱硫基因

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脱硫菌R-8的生长及其生物降解水中二苯并噻酚

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过程工程学报 2002年第3期2卷 278-282页

作者：罗明芳姜成英邢建民缑仲轩李珊刘会洲陈家镛中国科学院过程工程研究所分离科学与工程青年实验室及生化工程国家重点实验室北京100080

以二苯并噻酚(DBT)为唯一硫源考察了pH、温度、碳源、氮源等对德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R(8生长的影响. 结果表明,该菌的最适生长pH范围为6-9,最适生长温度为30oC,甘油是细胞生长的最好碳源,最佳浓度范围为10-15 g/L,最佳... 详细信息

以二苯并噻酚(DBT)为唯一硫源考察了pH、温度、碳源、氮源等对德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R(8生长的影响. 结果表明,该菌的最适生长pH范围为6-9,最适生长温度为30oC,甘油是细胞生长的最好碳源,最佳浓度范围为10-15 g/L,最佳无机氮源乙酸铵的浓度为 1.6 g/L. 有机氮源能促进细胞的生长,但对从DBT脱硫却产生抑制作用. 硫酸钠、二甲基亚砜、胱氨酸和蛋氨酸等硫化物都可以作为R-8生长的硫源,但对R-8脱硫活性的表达没有诱导作用.

关键词：二苯并噻酚生长生物脱硫德氏假单胞菌石油

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脱硫工程菌的构建及其脱硫性能分析

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生物工程学报 2008年第12期24卷 2034-2040页

作者：李焕杰余志坚熊小超李玉光李信中国农业科学院研究生院生物化学与分子生物学实验室北京100081 中国科学院过程工程研究所绿色过程与工程重点实验室北京100080

以专一性脱硫菌德氏假单胞菌Pseudomonas delafieldii R-8为出发菌株,利用pPR9TT穿梭质粒构建脱硫操纵子表达载体,转化原始菌培养得到1株多拷贝脱硫基因的脱硫工程菌R-8-1,并对其脱硫性能进行了研究。结果表明,在同样的生物催化脱硫反... 详细信息

以专一性脱硫菌德氏假单胞菌Pseudomonas delafieldii R-8为出发菌株,利用pPR9TT穿梭质粒构建脱硫操纵子表达载体,转化原始菌培养得到1株多拷贝脱硫基因的脱硫工程菌R-8-1,并对其脱硫性能进行了研究。结果表明,在同样的生物催化脱硫反应条件下,工程菌的脱硫活性达到6.25μmol DBT/g dry cell/h,是原始菌的2倍;柴油的脱硫试验表明,在12h内工程菌静息细胞能将柴油硫含量从310.8mg/L降至100.1mg/L,脱硫率达到68%,而原始菌为53%。进一步比较了重组质粒pPR-dsz在工程菌株中传代的稳定性,试验表明pPR-dsz在工程菌株R-8-1中具有良好的遗传稳定性。此研究为生物脱硫提供了1株优良的工程菌株,并为该技术的应用提供了参考。

关键词：生物脱硫德氏假单胞菌工程菌脱硫操纵子二苯并噻吩

来源：评论

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组成型脱硫工程菌的构建及其脱硫性能分析

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安徽农业科学 2012年第18期40卷 9862-9865页

作者：余志坚陈传红李江黄德娟东华理工大学核资源与环境教育部重点实验室江西抚州344000

[目的]研究组成型脱硫工程菌的构建及其脱硫性能。[方法]以专一性脱硫菌德氏假单胞菌Pseudomonas delafieldii R-8为出发菌株,将该菌的脱硫质粒中的脱硫基因dszABC和组成型gap基因启动子克隆到表达载体pPR9TT中,获得的组成型重组质粒pR... 详细信息

[目的]研究组成型脱硫工程菌的构建及其脱硫性能。[方法]以专一性脱硫菌德氏假单胞菌Pseudomonas delafieldii R-8为出发菌株,将该菌的脱硫质粒中的脱硫基因dszABC和组成型gap基因启动子克隆到表达载体pPR9TT中,获得的组成型重组质粒pRT-C后电转化R-8-0菌,得到了组成型工程菌R-8-C,并对其脱硫性能进行了比较研究。[结果]R-8-C菌在含0.10 mmol/L Na2SO4的BSM培养基中仍然具有较高脱硫活性,在72 h内,是以二苯并噻吩(DBT)为唯一硫源时R-8脱硫活性的93%;而对照组(即原始菌R-8)几乎不能脱硫。以DBT为唯一硫源时,在不同生长时期内,R-8-C菌生长细胞的脱硫活性均高于R-8菌,且在24 h内,R-8-C菌的脱硫活性约为R-8菌的1.3倍。[结论]该研究为进一步了解脱硫基因调控机制及构建高活性脱硫工程菌奠定了基础。

关键词：生物脱硫德氏假单胞菌组成型工程菌二苯并噻吩

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